基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计

目的以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计。方法用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20) 28 d,进行脏垫料接触感染。之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析。结果对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20%),第28天阳性检出率达到最高,为80%,第42天阳性检出率为50%,至第56天无阳性检出。血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50%)。对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20%小鼠粪便中检出MHV。而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体。结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠。由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法。     

不同垫料对SPF级KM小鼠学习记忆能力的影响

目的 探讨非专业加工制作的麦秸垫料、玉米芯垫料、刨花垫料和纸质垫料对SPF级昆明小鼠(KM)学习记忆能力的影响差异,以及不同垫料对小鼠行为学的影响。方法 选用SPF级KM小鼠24只,分别使用麦秸垫料、刨花、玉米芯和纸质垫料饲养8周后,开展MORRIS水迷宫行为学实验,考察其行为学的变化和学习记忆能力的差异。结果 麦秸组学习记忆能力增加明显高于刨花组(P<0.05);水迷宫实验期间,各组增重差异不显著。定位航行实验结果显示,麦秸组第5 d的逃避潜伏期显著低于其余三组(P<0.05),其余时间段差异无显著性;空间探索实验结果显示麦秸组小鼠穿过原平台位置的次数、游泳时间均多于其余三组。结论 不同垫料对水迷宫实验中KM小鼠的体质量影响较小,麦秸垫料对KM小鼠学习记忆能力的影响优于刨花垫料和玉米芯垫料,建议将麦秸垫料作为实验动物接触性垫料推广使用。     

IVC笼盒原位实施小鼠二氧化碳安乐死方法的建立

目的 建立一种在原饲养IVC笼盒中实施小鼠二氧化碳安乐死的方法。方法 将4～5周龄BALB/c小鼠、4～5周龄C57BL/6小鼠和2周龄C57BL/6小鼠各10只,按照5只/笼的标准饲养。以28%容器体积/min气体置换率,将二氧化碳通入小鼠饲养笼实施安乐死。结果 4～5周龄BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠均在2～3 min之间失去意识,5～6 min之间死亡,与美国国立卫生研究院指南中要求的一致。2周龄C57BL/6小鼠死亡需要的时间长于4～5周龄C57BL/6小鼠,并有显著性差异。结论 成功建立了小鼠在原饲养IVC笼盒中实施二氧化碳安乐死的方法。该方法有效降低了小鼠应激反应,提高了动物福利;且有利于操作人员身心健康。     

凹土玉米芯垫料对 KM 小鼠安全性影响的研究

摘要: 目的 观察非专业加工制作的普通刨花垫料、玉米秸垫料和凹土玉米芯垫料对 KM 小鼠体质量、血液生化指 标、脏器病理组织学变化等的影响。方法 KM 小鼠 80 只,随机分为 4 组,每组 20 只,雌雄各半,分别使用普通刨 花、玉米秸和凹土玉米芯垫料,对照组不使用垫料,在相同饲养环境下饲养 4 周后,观察相应指标。结果 凹土玉 米芯组、玉米秸组与普通刨花组比较,小鼠体质量无显著性差异,P ＞ 0. 05; 普通刨花组雄性小鼠在第 3 周时体质量 明显减低,与凹土玉米芯组比较有显著性差异,P ＜ 0. 05。与凹土玉米芯组比较,普通刨花垫料组雌性、雄性小鼠的 乳酸脱氢酶含量均有显著性升高,乙醇脱氢酶有显著性降低。普通刨花组小鼠与凹土玉米芯组小鼠比较谷丙转氨 酶含量显著升高,玉米秸垫料组小鼠与凹土玉米芯组小鼠比较谷丙转氨酶升高。各组 KM 小鼠大体观察及解剖观 察均未见异常,镜下观察组织切片,肺、心脏、肝、脾、胰腺、肾、膀胱、睾丸、卵巢均未见有意义的病理改变。结论 凹土玉米芯垫料对小鼠的体质量及生化指标的影响较小,是实验动物接触性长期使用比较理想的垫料。     

热应激对 ICR 雌性小鼠超数排卵及卵泡发育的影响

摘要:目的 探讨短期热应激对小鼠超数排卵和卵泡发育的影响。 方法 取超数排卵处理后体质量近似的 7 ~ 8 周龄 ICR 雌性小鼠 20 只,随机分为对照组和热应激组,每组 10 只,饲养于屏障环境内。 热应激组小鼠放入 38 ℃ 的生化培养箱中,热应激处理 10 h,期间自由采食和饮水。 热应激结束后,将小鼠放回屏障设施内饲养,持续 6 d,6 d后,进行超数排卵处理并处死小鼠,获取小鼠输卵管内卵子以及卵巢。 结果 热应激组小鼠超排卵数高于对照组( P<0. 05) 。 对卵巢切片进行苏木素-伊红( HE)染色后,观察发现热应激组小鼠的总卵泡数和黄体数均明显高于对照组( P<0. 01) 。 热应激组小鼠的卵泡闭锁率高于对照组,但无明显差异( P> 0. 05) 。 结论 热应激严重影响小鼠的繁殖机能,尤其是卵泡的发育过程。     

小鼠群仙台毒肺炎的根除

<正> 仙台毒是小鼠间质性肺炎的主要原因,有些小鼠品系较易感,而有些则较有抵抗力,耐过急性感染的残留小鼠,这种仙台毒肺炎常对各种生理指标产生长期影响,例如,细胞免疫反应明显地减弱有数月之久;持续感染仙台毒的肿瘤细胞,移植能力减弱。因此,根除小鼠种群中的仙台毒可大大减低死亡率及致病率,而且可除去曾耐受急性感染残留小鼠不稳定的实验结果。作者将小鼠饲养于小鼠笼,上盖有空气过泸罩,垫料经蒸气消毒过,每周换一次笼子,自由采食商售饲料,饮水为酸性水     

三种SPF小鼠垫料的比较

目的对杨木刨花、纸屑、玉米芯的物理性状、微生物含量及毒性等进行比较,寻找适合作为SPF小鼠垫料的材料。方法通过吸水试验、干燥试验、隔热试验、保温试验、适应性观察、微生物检测、粉末率测定、急性毒性试验、饥饿试验,比较小鼠对3种材料的适合性及安全性。结果 3种垫料吸水性和保湿性较好,差异不显著;保温性和隔热性能玉米芯优于杨木刨花和纸屑;小鼠对3种垫料的适应性均较好;3种垫料对小鼠均无毒性;粉末率玉米芯和纸屑为零;玉米芯中无可维持小鼠生命的营养,优于其他两种垫料。结论玉米芯在所有检测项目中均符合垫料标准,是一种较理想的SPF小鼠垫料。     

热应激对ICR雌性小鼠体质量和脏器系数的影响

目的 探讨短期热应激对小鼠体质量和脏器系数的影响.方法 选取92只4周龄ICR雌性小鼠,随机分为对照组和热应激组.对照组26只小鼠饲养于屏障环境内;热应激组66只小鼠,每天分两批将其放入42℃的生化培养箱中热应激3h,热应激期间小鼠自由采食和饮水,热应激结束后将小鼠放回屏障环境.重复4周,期间每隔一周随机取对照组和热应...     

饲养模式对番鸭血清生化指标、抗氧化指标及免疫相关指标的影响

为探究网上平养和网上垫料养殖模式对黑羽番鸭血清生化指标、抗氧化指标及免疫相关指标的影响,选取14日龄黑羽番鸭360只,随机分为网上平养组和网上垫料组,每组180只,常规饲养至70日龄后采血进行检测,比较变化情况.结果表明:1)2种饲养模式各个血清生化指标差异均不显著(P>0.05);2)网上垫料组的T-AOC、CAT以及SOD水平显著高于网上平养组(P<0.05);而网上垫料组的MDA的水平则显著低于网上平养组(P<0.05);3)网上垫料组的IgG和IgM水平均差异高于网上垫料组(P<0.05),而网上垫料组的IL-2和IL-6则显著低于网上平养组(P<0.05).由上可知,网上垫料养殖不会损害番鸭的机体健康,且一定程度有利于番鸭的抗氧化水平及免疫能力的提高,该养殖模式在番鸭健康养殖上是可行的.     

急性应激对小鼠空间学习记忆功能及海马和前脑皮层c-Fos蛋白表达的影响

采用足底电击急性应激模型,通过旷场实验和Morris水迷宫实验分别测试小鼠的行为和空间学习记忆能力;以免疫组织化学方法检测c—Fos蛋白在海马和前脑皮层的表达．结果显示,与对照组小鼠比较,急性应激组小鼠在新异环境下的自发行为明显降低（P〈0．05,P〈0．01）,而在水迷宫实验中,急性应激组小鼠空间学习记忆能力明显提高（P〈0．05,P〈0．01）;与对照组小鼠比较,急性应激组小鼠海马CA1区、齿状回和前脑皮层c—Fos蛋白的表达在应激后1h明显增强（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01）．结果提示,急性应激所致小鼠空间学习记忆功能的改变可能与c—Fos蛋白表达的上调有关．     

咖啡因对 CUMS 抑郁模型小鼠行为的影响

摘要: 目的 探讨咖啡因对慢性不可预见轻度应激( Chronic unpredictable mild stress,CUMS) 抑郁模型小鼠行为的影响。方法 选用 C57BL/6J 小鼠 48 只,分为正常 + 生理盐水组、正常 + 30 mg / kg 咖啡因组、模型 + 生理盐水组和模型 + 咖啡因组( 分别为 5、15 和30 mg / kg) 6 个处理组。利用制作的 CUMS 抑郁模型,分别给予生理盐水作对照或用不同剂量的咖啡因进行干预,持续造模 22 d,观察小鼠的体质量增长变化,用旷场实验及液体消耗实验测定小鼠行为改变。结果 造模 22 d 后,与正常 + 生理盐水组小鼠相比,模型 + 生理盐水组小鼠的体质量增长、水平垂直运动、液体消耗均未达到显著差异( P ＞ 0. 05) 。与模型 + 生理盐水组小鼠相比,模型 + 咖啡因组( 5 mg / kg 和 30 mg /kg) 小鼠的糖水消耗量和糖水偏爱百分比显著增高( P ＜ 0. 05) 。结论 实验表明 CUMS 抑郁模型用 C57BL/6J 小鼠较难成功建构; 咖啡因对小鼠 CUMS 抑郁模型的行为改变有部分改善作用,并呈剂量相关性; 同时证明咖啡因的行为改善作用不是通过兴奋大脑皮层所致。该实验结果提示咖啡因具有潜在的抗抑郁作用。     

Anhedonia requires MC4R-mediated synaptic adaptations in nucleus accumbens

Chronic stress is a strong diathesis for depression in humans and is used to generate animal models of depression. It commonly leads to several major symptoms of depression, including dysregulated feeding behaviour, anhedonia and behavioural despair. Although hypotheses defining the neural pathophysiology of depression have been proposed, the critical synaptic adaptations in key brain circuits that mediate stress-induced depressive symptoms remain poorly understood. Here we show that chronic stress in mice decreases the strength of excitatory synapses on D1 dopamine receptor-expressing nucleus accumbens medium spiny neurons owing to activation of the melanocortin 4 receptor. Stress-elicited increases in behavioural measurements of anhedonia, but not increases in measurements of behavioural despair, are prevented by blocking these melanocortin 4 receptor-mediated synaptic changes in vivo. These results establish that stress-elicited anhedonia requires a neuropeptide-triggered, cell-type-specific synaptic adaptation in the nucleus accumbens and that distinct circuit adaptations mediate other major symptoms of stress-elicited depression.     

慢性不可预知和慢性束缚应激抑郁模型大鼠行为学研究

采用慢性综合应激法配合孤养模型建立的应激模型和慢性束缚应激模型.观察模型组大鼠的行为学改变.实验结果表明,慢性综合应激结合孤养模型与空白组相比,大鼠的水平穿越格数(P<0.01)、竖立次数(P<0.01)、理毛次数均减少,中央格停留时间、粪便粒数均显著增加(P<0.01);大鼠体重明显减少(P<0.01);蔗糖溶液消耗量明显减少(P<0.01).慢性束缚模型大鼠的水平穿越格数、竖立次数、理毛次数和粪便粒数均减少;中央格停留时间显著增加(P<0.01);大鼠体重明显减少(P<0.05);蔗糖溶液消耗量明显减少(P<0.05).由此可见,慢性综合应激结合孤养模型组抑郁动物的各项行为学指标、体重变化及液体消耗量上均显示建模成功,而慢性束缚应激模型在行为学指标上无显著差异,但在体重、糖水消耗及糖水偏爱程度上均有显著差异.     

坚果改善慢性应激致抑郁症大鼠行为学表现及其机制研究

为探讨坚果(核桃与甜杏仁)在抑郁症中的预防作用和机制.采用慢性温和不可预测应激(CMS)大鼠模型模拟抑郁症,对大鼠进行强迫游泳(FST)、糖水消耗的抑郁症行为学测试,并运用ELISA 试剂盒测定大鼠血浆皮质酮(CORT)含量,Western blot 法检测大鼠海马部脑源性营养因子(BDNF)、蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)的蛋白表达.实验结果表明,模型组FST、糖水消耗的行为学成绩明显低于正常对照组(P＜0.05),预先给予坚果各剂量(60 g·kg－1、120 g·kg－1、240 g·kg－1),可改善抑郁症大鼠的行为学成绩,提示,食用坚果可延缓抑郁症症状.血浆CORT水平测定结果显示,模型组血浆CORT含量显著高于正常对照组(P＜0.05),但坚果各剂量组对血浆CORT含量无影响(P＞0.05),提示,坚果产生延缓抑郁发生的机制可能与作用CORT途径无关联.对大鼠海马部的BDNF、PKA和PKC蛋白表达测定显示,模型组BDNF、PKA和PKC的蛋白表达均低于正常对照组(P ＜ 0.05),而经预先给与坚果的各剂量坚果组,则拮抗了模型组BDNF、PKA和PKC蛋白表达水平的下降(P＜0.05).提示,坚果在预防抑郁症作用机制可能与激活PKA、PKC激酶和增强BDNF蛋白水平的信号通路有关.因此,本实验结果初步明确,预先食用坚果可有助于延缓抑郁症的产生.这将为后续食用坚果类食物在预防抑郁症中的研究提供了一定的理论和实验依据.     

跑台运动对抑郁模型大鼠学习记忆及海马CA1区BDNF表达的影响

目的：观察4周跑台运动对慢性应激致抑郁大鼠空间学习记忆能力,血浆皮质醇（Cortisol,cort）含量和海马CA1区脑源性神经营养因子（Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF）表达的影响.方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组、应激模型组及应激运动组,制作慢性不可预见性应激模型,用八臂迷宫实验观察各组大鼠学习记忆等行为学指标的变化,放射免疫法测试大鼠血浆cort含量,免疫组织化学结合图像半定量方法对海马CA1区BDNF神经元的数量及面积进行测量和分析.结果：慢性应激致抑郁大鼠血浆cort含量增加,八臂迷宫实验中应激大鼠完成八臂迷宫时间显著延长,工作记忆错误次数、参考记忆错误次数及总记忆错误次数均显著增加,海马CA1区BDNF表达减弱.而长期跑台运动可以显著改善抑郁模型大鼠的学习记忆能力,血浆cort含量降低,海马CA1区BDNF表达增强.结论：跑台运动可改善抑郁模型大鼠的学习记忆能力,机理可能与长期运动降低抑郁大鼠的血浆cort水平、拮抗HPA轴功能亢进及增强海马CA1区BDNF的表达有关.     

半夏厚朴汤抗抑郁作用

对半夏厚朴汤的抗抑郁作用进行初步的研究。采用慢性束缚应激刺激对大鼠进行抑郁造模;并通过大鼠强迫游泳、悬尾、糖水偏好等行为学实验测试,评价半夏厚朴汤的抗抑郁作用。实验结果知,半夏厚朴汤200、500 mg/kg能显著缩短大鼠强迫游泳、悬尾不动时间,同时也显著提高大鼠糖水偏好率。因此,半夏厚朴汤具有显著的抗抑郁作用。     

Adult hippocampal neurogenesis buffers stress responses and depressive behaviour

Glucocorticoids are released in response to stressful experiences and serve many beneficial homeostatic functions. However, dysregulation of glucocorticoids is associated with cognitive impairments and depressive illness. In the hippocampus, a brain region densely populated with receptors for stress hormones, stress and glucocorticoids strongly inhibit adult neurogenesis. Decreased neurogenesis has been implicated in the pathogenesis of anxiety and depression, but direct evidence for this role is lacking. Here we show that adult-born hippocampal neurons are required for normal expression of the endocrine and behavioural components of the stress response. Using either transgenic or radiation methods to inhibit adult neurogenesis specifically, we find that glucocorticoid levels are slower to recover after moderate stress and are less suppressed by dexamethasone in neurogenesis-deficient mice than intact mice, consistent with a role for the hippocampus in regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis. Relative to controls, neurogenesis-deficient mice also showed increased food avoidance in a novel environment after acute stress, increased behavioural despair in the forced swim test, and decreased sucrose preference, a measure of anhedonia. These findings identify a small subset of neurons within the dentate gyrus that are critical for hippocampal negative control of the HPA axis and support a direct role for adult neurogenesis in depressive illness.     

二氧化硅介质对其表面水合笼稳定性的影响

采用量子化学中的密度泛函理论探究了不同笼型结构（CH₄@5¹²6²和CH₄@4³5⁶6³）的不同环面（四元环面、五元环面、六元环面）以不同方式（单面平行和双面插嵌）与介质SiO₂作用对水合笼稳定性的影响，计算了水合笼与SiO₂表面间的相互作用能、水合笼的变形能、水合笼中甲烷分子与笼子之间的相互作用能和水合笼中水分子间的结合能。结果表明：单面平行构型中的SH-6和双面插嵌构型中的SI-（5+6）、SH-（4+6）最有利于水合笼的分解；SiO₂介质与水合笼通过结构匹配的方式形成氢键，降低了水合笼的稳定性，弱化了水合笼对甲烷的束缚。     

不同饲养方式对肉用土鸡生长性能和屠宰性能的影响

研究不同饲养方式对肉用土鸡生长性能和屠宰性能的影响，试验用1800羽1日龄青脚麻鸡随机分为6个处理，每处理3个重复，每重复100只鸡进行90d试验．处理1为笼养（对照组），处理2为放养，处理3先笼养30d再放养60d，处理4先笼养45d再放养45d，处理5先笼养60d再放养30d，处理6先笼养75d再放养15d．结果表明：（1）与对照组（处理1）比，笼养时间长可提高生长速度、成活率，除处理2（全期放养）外，放养时间长可降低饲料成本，提高经济效益．以先笼养30d放养60d的（处理3）经济效益最好．（2）各处理的屠宰率差异不显著（P〉0．05）；笼养时间长可提高全净膛率、半净膛率、腹脂率，放养时间长有利于腿肌率、胸肌率率的增加．     

笼型Li6Si5团簇的结构和储氢性能研究

利用密度泛函M06方法,在6-311+G(d, p)基组水平上对Si_5和Li修饰的Si_5团簇的几何结构和电子性质及储氢性能进行理论计算研究.结果表明, Si_5团簇最低能量构型为笼型结构,纯Si_5团簇不能有效吸附氢分子. Li原子的引入显著改善了Si_5团簇的储氢能力.以六个Li原子穴位修饰Si_5团簇为载体,每个Li原子周围可以有效吸附三个氢分子,其氢分子的平均吸附能为2.395 kcal/mol,储氢密度可达16.617 wt%.合适的吸附能和较高储氢密度表明Li修饰Si_5团簇有望成为理想的储氢材料.