大鼠多次采血常用的三种方法探讨

目的 探讨大鼠在1天内或者短时间内需要多次采血常用的三种方法,提高大鼠实验的成功率.方法 采用90只雄性Wistar大鼠,分别用眼眶后静脉采血法、颈静脉采血法及心脏穿刺采血法进行采血实验.结果 眼眶后静脉采血法：采血0.2-0.3 mL/次,每只大鼠3-4次/d.颈静脉采血法：采血0.2-0.4 mL/次,每只大鼠6-8次/d.心脏穿刺采血法：采血0.3-0.4 mL,每只大鼠3-5次/d.结论 三种采血方法取血量相对比较大,血液标本质量高,更利于大鼠的动物实验,但各有应注意的事项.     

近五年发表文献中小鼠采血方法的分析研究

目的了解国内小鼠采血方法使用的情况。方法万方数据库中检索2012至2016年间正文中含有检索词"小鼠"和"采血"的文献,对符合条件的文章进行统计分析。结果检索到448篇文献,其中符合条件的文献444篇。使用比例最高的3种采血方法依次是眼眶后静脉丛采血(33.3%)、摘眼球采血(22.6%)和尾静脉采血(15.4%)。心脏采血使用麻醉的占60%,眼眶静脉丛采血使用麻醉的占3.2%。结论摘眼球采血法的使用率很高,但鉴于其会给小鼠带来巨大痛苦,故建议用下颌静脉丛采血等其他方法替代。心脏采血、眼眶后静脉丛采血过程中实施麻醉的比例不高,应加以重视和规范。     

眼眶静脉采血及尾静脉注射给药对大鼠肝细胞内NF-κB的影响

目的研究常规动物实验操作对大鼠肝细胞内核转录因子Kappa B(简称NF-κB)的影响。方法采用雄性SD大鼠,分别进行眼眶静脉采血、尾静脉注射操作,每天记录大鼠体质量和饲料消耗数据,连续处理14 d后,测定各组大鼠肝细胞内NF-κB p65的mRNA表达量和蛋白水平,并与对照组进行比较,分析这些操作的影响。结果与对照组相比,眼眶静脉采血及尾静脉注射实验组大鼠体增重和饲料能耗比均有降低,且差异极显著(P0.01);实验组大鼠肝细胞中NF-κB p65和蛋白的表达水平较对照组都有升高,且差异极显著(P0.01);实验组中眼眶静脉采血组NF-κB p65和蛋白的表达水平高于尾静脉注射组,差异极显著(P0.01)。结论本研究中涉及的常规实验操作均引起大鼠的显著应激反应致福利受损,可导致肝细胞内NF-κB表达水平提高,表明了NF-κB参与了大鼠福利损伤的过程。     

改良的猪眼眶静脉窦采血法

采集猪的静脉血液 ,进行血液生物化学成分和血液细胞学分析越来越显得重要。采用改良的猪眼眶静脉窦采血法不仅能获得较多血液标本 ,而且具有更为安全 ,简便 ,血无污染 ,易操作等优点。实践证明改良的猪眼眶静脉窦采血法是目前较好的猪静脉采血技术之一 ,值得推广应用。     

一种新的大鼠颈部静脉采血固定方法

大鼠在不麻醉的情况下,先将大鼠呈仰卧状态固定其躯干部位,再使用塑胶瓶自制大鼠固定头罩固定其头部,最后进行大鼠颈部静脉采血。自制固定头罩可以有效地固定大鼠,建立一种新的大鼠颈部静脉采血固定方法,使大鼠颈部静脉采血顺利。这种使用固定头罩固定大鼠的新固定方法,能有效避免操作人员被大鼠咬伤,保证安全地重复多次采血。     

猪的新采血法

猪的采血常规应用颈静脉采血法和耳静脉采血法,但由于猪的采血保定和采血操作麻烦较多,困难较大,故与其它家畜相比,很少进行猪的采血工作。近年来随着疾病的复杂多样化,在猪的疾病诊断、传染病和寄生虫病感染率调查中,对猪进行血液学检查,生理生化测定以及抗体检查的要求大大增多。为解决猪的采血难问题,笔者摸索了一种尾部采血法,效果较为理想。     

肾静脉套管法建立大鼠腹部心脏移植模型

目的建立一种快速、有效的大鼠异位心脏移植模型。方法以雄性SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,将供心的升主动脉与受体的腹主动脉行端侧吻合,切除受体的左肾,将供心的肺动脉与受体的左肾静脉以自制聚乙烯管直接插入法连接。结果35例实验成功32例,成功率91.4%,受体存活时间平均为(25.3±9.8)d。失败的原因:吻合口出血,血栓形成。结论本术式操作简单实用,不需手术显微镜,易于推广。     

不同采血方法对Wistar大鼠血常规的影响

摘要:目的　探讨不同采血方法对Wistar大鼠血常规测定结果的影响。 方法　40只SPF级Wistar大鼠顺序进行断尾采血、眼内眦采血和腹主动脉采血,用光电血细胞分析仪进行检测,3种采血方法的检测结果两两比较,进行配对t 检验。 结果　断尾采血白细胞计数最高,其次为眼内眦采血,腹主动脉采血白细胞最低,约为断尾采血的1/3,3种采血途径相互之间差异都极显著(P 0.05),而雌性大鼠断尾采血和眼内眦采血间差异极显著(P0.05)。血小板计数方面,末梢血(断尾、眼内眦采血)极显著低于腹主动脉(P0.05)。 结论　不同采血方法血常规检测结果具有较大统计学差异,应建立各自的背景数据以进行统一比较。     

临床药理实验中血液标本采集方法的探讨

在新药II期临床试验中,根据实验要求,受试者服药后,需连续监测48-72小时,在不同的时间段多次反复采集血标本,为了探索一种便捷、科学、易于接受的采血方法,我们采用静脉留置针取血的方法,结果显示,静脉留置针采血与普通采血法采集的血标本无明显差异,且受试者易于接受,痛苦少,提高了静脉采血的安全性。从而我们认为静脉留置针采血是一种较好的采血方法,尤其是在采血次数多的试验及药物浓度测定等实验中更为适用。     

大鼠亚急性酒精性肝损伤模型的建立

目的 本研究参照国内学者一些造模方法,结合人体食用方式和饮酒习惯,通过对比饮用不同酒精剂量、不同饮用时间得出建立酒精性肝损伤的最易条件。方法 选用SPF级雌性Wistar大鼠(初始体质量150～180 g)30只,随机分为模型组和对照组。模型组分别给予酒精含量为15%、30%的普通白酒,对照组给予蒸馏水,以15 mL/kg·BW经口灌胃方式给予,试验周期分为8周。实验结束时从大鼠眼眶静脉丛采血,测定血清中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、乙醇脱氢酶(ADH);取肝脏,测定肝脏组织MDA、SOD、GSH、TG及肝脏组织病理学损伤。结果 结果显示, MDA 30%酒精组与空白对照组比较有显著性差异(P0.05)。模型组大鼠血脂代谢紊乱、肝内脂肪蓄积,病理组织学检查可见弥漫性的肝细胞脂肪变性,细胞内可见大小不等的脂肪滴,从肝脏病变得分来看,15%酒精组、30%酒精组肝组织脂肪变性程度与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.01, P<0.01)。结论 大鼠经口灌胃给予30%的普通白酒8周,可致肝损伤,结果可重复,成功建立了大鼠亚急性酒精性肝损伤的动物模型。     

蒙古长爪沙鼠颌下静脉丛真空采血法探讨

摘要: 目的 探讨蒙古长爪沙鼠( Mongolian gerbil) 颌下静脉丛真空采血的技术与方法,提高蒙古长爪沙鼠实验的成 功率。方法 选取 40 只蒙古长爪沙鼠,麻醉后将静脉输液针刺入颌下静脉丛血管取血。结果 成功获得沙鼠静 脉血,每只沙鼠的采血量可达 0. 3 － 0. 6 mL。结论 此方法可多次重复采血,血液标本质量高,创伤小,是一种简便、安全、采血量多的采血方法。     

实验用Wistar大鼠尾静脉穿刺技术

大鼠是医学科研过程中常用的实验动物,由于其静脉细小,穿刺困难,故在对大鼠进行麻醉或实验性给药时往往采用皮下或肌肉注射等方法。2002年9～10月,根据实验要求,我们对96例Wsitar大鼠进行了尾静脉穿刺,静脉推注药物液量在1．5～3．6mL之间,穿刺成功率100％。一针成功率88％,实践证明,大鼠尾静脉穿刺方法简便,容易掌握。此项技术的开展,解决了大鼠静脉用药的难题,为实验取得可靠性效果提供了保障,现将具体方法介绍如下。     

SPF级Wistar大鼠血液学及血生化指标正常值范围探讨

目的建立本实验室毒理学安全性评价中大鼠血液学及血生化指标的正常值范围;比较断头采血与麻醉后腹主脉采血对生化指标测定结果的影响。方法收集本实验室近三年来2~3月龄的正常SPF级Wistar大鼠血液学和血生化指标的数值,按照正态分布原理推断其95%可信度正常值范围,并比较了雌雄性别和两种不同采血方式的结果差异。结果(1)血液学指标中的WBC、RBC、HGB、PLT计数雌雄间无差异,但白细胞分类雌雄性别有差异;(2)血生化指标检测结果雌雄性别有差异,其中断头处死采血方式中,雌性大鼠血清ALT、AST、TG比雄性大鼠低,雌性大鼠TP、Alb、TCH比雄性大鼠高,有统计学意义(P<0.05);戊巴比妥钠麻醉后腹主脉采血方式中,雌性大鼠ALT、GLU、TG比雄性大鼠低,雌性大鼠AST、TP、Alb、BUN、TCH雄性大鼠高,有统计学意义(P<0.05);(3)两种采血方式对生化指标有一定影响,断头采血的ALT、AST、TP、Alb、BUN、TCH、TG值较戊巴比妥钠麻醉后腹主动脉采血的测定值高,有统计学意义(P<0.01),而断头采血的GLU、CRE值较戊巴比妥钠麻醉后腹主动脉采血的测定值低,有统计学意义(P<0.01)。确立了本实验室雌雄性别Wistar大鼠血常规、血生化正常值范围。     

LC_MS_MS法测定木通皂苷D大鼠灌胃给药的生物利用度

建立高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定大鼠灌胃给药的生物利用度.大鼠随机分为2组,分别尾静脉和灌胃给予100mg·kg-1木通皂苷D,于不同时间点眼眶取血,用LC-MS/MS法检测血浆中药物质量浓度,计算大鼠灌胃给药的生物利用度.结果表明:木通皂苷D线性范围为10~1 000ng·mL-1,最低定量限为10ng·mL-1.准确度与精密度试验结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差为-2.8%~4.6%,低、中、高3个质量浓度提取回收率为95.3%~108.1%.静脉组和口服组的药时曲线下面积AUC0-INF分别为(231 725.98±46 527.21)和(383.63±54.62)ng·h·mL-1,灌胃给药的绝对生物利用度为0.13%.表明木通皂苷D大鼠灌胃给药生物利用度很低.     

不同采血方法在新生儿疾病筛查中的应用效果对比

对比不同采血方法在新生儿疾病筛查中的应用效果。将古浪县妇幼保健医院2017年9月～2018年6月产科出生时间≥72h的158例新生儿按照随机数字表法划分成两组,对照组与观察组各79例。对照组采用足跟内或外侧直刺采血法,观察组采取足底定位斜刺采血法。对比两组滤纸血斑合格率、一针采血成功率、瘀斑发生率、采血时疼痛程度及采血完成时间。观察组滤纸血斑合格率、一针采血成功率较对照组高(P0.05);观察组瘀斑发生率1.27%较对照组的10.13%低P0.05);观察组采血时视觉模拟评分法(NIP)评分较对照组低(P0.05),采血完成时间较对照组少(P0.05)。在新生儿疾病筛查中应用足底定位斜刺采血法,可提高一针采血成功率及滤纸血斑合格率,降低瘀斑发生率,减轻采血时的痛苦。     

改良锁骨下静脉穿刺术与传统穿刺法的比较

目的:通过改良的锁骨下静脉穿刺的路径,提高穿刺的成功率,减少并发症发生的几率.方法: 改良穿刺法于锁骨中、内1/3交界处,触摸第一肋外侧缘,定为穿刺点,垂直向下进针,当针尖接触第一肋外上缘时,略上翘,沿着第一肋外上缘继续进针,深约3 cm左右可有突破感,回抽见暗红色血液,即可判断针头已进入锁骨下静脉.为保证导管方向的向心性,置管时针尾略偏向外,并将改良法与传统法的成功率及并发症进行比较.结果: 改良穿刺法明显提高了穿刺的成功率,达100%;而按传统的穿刺方法成功率仅为78%.两种方法的穿刺成功率有显著差异,P<0.05.且穿刺并发症的发生率也明显下降,如改良法与传统法穿刺的并发症发生率分别为4%和39%,P<0.05.结论: 改良锁骨下静脉穿刺法较传统的方法更合理、更安全.     

高效帕金森病大鼠模型建立方法的研究

为了探索高效的帕金森病大鼠模型的建立方法,通过黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)、中脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)双位点注射和内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)单位点注射6-羟基多巴胺2种方法建立帕金森病大鼠模型;术后连续4周运用阿朴吗啡旋转试验鉴定模型是否成功,并用免疫组化方法验证大鼠的SNc多巴胺能神经元的损毁程度。结果表明:SNc-VTA组造模后1周成功率为12%,4周后成功率为72%,MFB组造模后1周成功率即达到84%,2周后的成功率则达到92%;采用2种方法均可成功建立帕金森病大鼠模型,但MFB单位点注射法在短时间内具有更高的成功率。     

两种大鼠心脏移植模型的制作比较

目的两种不同方法建立大鼠心脏移植模型,比较两者优缺点,为器官移植研究提供合适的动物模型。方法SD大鼠144只,分别用缝合法和套管法进行同种腹部异位心脏移植,总结经验并加以比较。结果缝合法42例,成功33例,成功率78.57%;套管法30例,成功27例,成功率90%。两种方法移植成功大鼠,移植心均成活30 d以上。结论两种方法各有优点,都可用于器官移植研究,应根据具体实验要求选择合适的动物模型。     

线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型的实验研究

目的：对大鼠线栓法脑缺血模型进行改进,探讨影响模型成功率的原因及解决方法。方法：参照改良的Zea Longa法,制作大鼠局灶脑缺血模型,根据神经功能缺损症状,组织病理学检查判断模型成功。结果：模型成功率60%,部分大鼠出现颅内出血（蛛网膜下腔出血或脑出血）、大脑中动脉破裂、麻醉意外等问题。结论：改进后的模型成功率相对提高,制作良好的栓线、熟练的操作和体重合适的大鼠是制作模型成功的关键。     

大鼠心脏采血的几点体会

采血是很多动物实验和科研中经常运用的样本采集的方法。采血的部位和采血量,要根据实验要求、动物的种类而定。大型动物一般静脉采血;小型动物一般采用眼球、剪尾采血,但此法采血量有限。若实验动物在采血后即将处死,且采血量又大,采取心脏直接抽血,可满足实验要求。本文主要介绍实验模型大白鼠急性心脏采血的方法和操作体会。