培养基组分对牡丹花粉萌发和花粉管生长的影响

以12个主栽牡丹品种的花粉为试材,采用固体培养基研究了蔗糖、硼酸、赤霉素(GA3)、聚乙二醇(PEG-6000)对花粉萌发和花粉管生长的影响,以确定适合牡丹花粉萌发的培养基。研究结果表明:培养基中各组分质量浓度对花粉萌发影响较显著。较适合牡丹花粉萌发和花粉管生长的适宜质量浓度范围是:蔗糖质量浓度为150 g/L左右;硼酸质量浓度为60～80 mg/L;GA3质量浓度为25～50 mg/L,不同品种适宜的质量浓度有一定差异;PEG-6000质量浓度为150～200 g/L。     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

蔗糖和硼酸对栀子花粉萌发特性的影响

以栀子（Gardenia jasminoides Ellis）花粉为试验材料,采用花粉人工培养法研究了培养基中蔗糖和硼酸不同浓度组合对栀子花粉萌发特性的影响。结果表明：蔗糖、硼酸在一定浓度范围内能促进花粉萌发,但超过一定浓度则起抑制作用。栀子花粉萌发的最适蔗糖和硼酸组合为30 mg.L-1蔗糖和15 mg.L-1硼酸。     

梨花柱头可授性和花粉活力的研究

研究了梨花柱头的可授性和花粉活力、不同培养基组分对梨花花粉萌发的影响.结果表明:梨花柱头的可授期为6 d,开花当天梨花的花粉活力就达100%,持续3 d之后缓慢下降,梨花枯萎时仍有一半以上的花粉具有活力.梨花花粉萌发的最适培养基为: MS 蔗糖150 g·L-1 硼酸0.03 g·L-1 氯化钙0.04 g·L-1 .     

不同培养和贮藏条件对‘凤丹白’牡丹花粉萌发的影响

为了确定不同质量浓度的蔗糖和硼酸组合溶液对‘凤丹白’(Paeonia ostii‘Fengdanbai’)牡丹花粉萌发的影响,探讨在适宜的培养质量浓度条件下不同的培养时间与萌发率之间的关系、不同温度条件贮藏后干花粉萌发率的变化情况,以新鲜的‘凤丹白’牡丹花粉为材料,用花粉离体萌发法进行活力测定并采用液体培养花粉的方法。结果表明:0.06 g·L~(-1)硼酸+100 g·L~(-1)蔗糖培养的‘凤丹白’花粉萌发率为63.22%,最适的离体培养时间为8 h,在5种不同温度条件下贮藏后生活力变化显著,超低温(-80℃)状态下花粉生活力基本保持不变,可以长期贮藏;4℃,低温(-18℃)状态下花粉生活力下降较慢,可以短期贮藏;而在30℃和25℃状态下花粉生活力下降较快,不适合贮藏。湿花粉生活力在30℃条件下比在25℃条件下下降的更快,在温度条件相同时湿花粉生活力均低于干花粉生活力。     

芍药花粉离体萌发培养基组分的优化

以芍药花粉为材料,采用正交设计L^9（34）法研究蔗糖、硝酸钙、硼酸对芍药花粉离体萌发和花粉管生长的影响,筛选芍药花粉离体萌发最适宜的培养基,并研究了不同pH值对芍药花粉萌发的影响。结果表明,蔗糖对芍药花粉萌发率和花粉管生长影响最大,硼酸次之,硝酸钙影响最小;芍药花粉离体萌发最适宜培养基为,蔗糖20g·L^-1＋硼酸20mg·L^-1＋硝酸钙60mg·L^-1;其萌发率和花粉管长度分别为63．12％和183．33μm;适合芍药花粉萌发的pH为6～7。     

哈密瓜花粉离体萌发特性的研究

通过哈密瓜花粉在固体培养基上进行离体培养，对哈密瓜品种金皇后的离体萌发特性进行研究。结果表明，培养基中硼酸的不同浓度对哈密瓜花粉离体萌发具有明显的影响，适宜的硼酸浓度为20mg／L；在不同的温度条件下，哈密瓜花粉的萌发率不同，25℃时哈密瓜花粉的萌发率达到了最大值，花粉萌发的适宜温度范围为10．35℃，随着温度的升高，花粉管的长度也相应的增加；另外，不同的贮藏时间和贮藏温度对哈密瓜花粉的萌发率也有一定的影响，一般在低温条件下贮藏花粉，可以较长时间保持花粉较高的萌发率。     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

一品红花粉离体萌发影响因子的研究

以一品红7个品种为试材,研究了培养基组分、pH值、培养方法和培养条件对一品红花粉离体萌发的影响.结果表明:一品红花粉较适宜离体萌发培养基为ME3+15％ PEG 4000+10％蔗糖(pH=6.0);培养基中添加适宜浓度的PEG 4000、蔗糖、ME3均可显著促进一品红花粉萌发,其中以添加PEG 4000萌发率最高,蔗糖次之;ME3还可提高花粉管质量,花粉管长度适中、较直且粗.花粉萌发适宜温度为20℃-25℃,固体和液体培养以及黑暗和光照条件对一品红花粉萌发的影响差异均不显著.7个一品红品种花粉离体萌发率存在较大差异.     

不同培养条件和贮藏方法对皱皮木瓜花粉萌发率的影响

采用离体培养法探讨了温度及蔗糖、H3BO3、CaCl2溶液浓度对皱皮木瓜花粉萌发率的影响,以及不同贮藏及解冻方法对花粉活力的影响.结果表明:皱皮木瓜花粉萌发的最适温度为20℃,最适蔗糖、H3BO3、CaCl2溶液浓度分别为150 g/L、20 mg/L和50 mg/L.在上述最佳单因子组合条件下,花粉萌发率高于任一单因子的促进作用.4℃预冷3h,-83℃超低温冷冻保存,37～40℃水浴快速解冻(4～5 min)后立即放于20℃水浴中的方法较有效地保持了花粉的活力.     

中国沙棘花粉生活力检测方法比较研究

比较分析了I-KI染色法、蓝墨水染色法、TTC染色法、过氧化物酶染色法和离体萌发法5种花粉生活力检测方法在测定中国沙棘花粉生活力中的适用性,并探索了花粉适宜的离体萌发条件.结果表明,I-KI染色法、TTC染色法未能将中国沙棘花粉染上色,因此不适合其生活力的检测;蓝墨水染色法和过氧化物酶染色法能够快速地测定中国沙棘花粉生活力,但测定值均偏高,误差相对较大;离体萌发法适合中国沙棘花粉生活力的测定.在筛选中国沙棘花粉适宜的培养基时,发现中国沙棘花粉在蔗糖(0.15～0.20 g·mL-1)+硼酸(0.1×10-4 g·mL-1)的培养基上萌发速度较快,有活力的花粉能够完全萌发且萌发率趋于稳定;附加琼脂的固体培养基对花粉的萌发影响不大.     

青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验.结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素.离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM GA3(10 mg/L) 蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM GA3(5 mg/L) 麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM 6-BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45.     

芒萁组培技术体系的优化

【目的】芒萁(Dicranopteris pedate)是尾矿及酸性边坡修复的优良植物。优化芒萁组培技术,提高组培效率,可为困难立地修复提供大量芒萁孢子体。【方法】以芒萁孢子为外植体,研究外植体收集时间、消毒时间与孢子萌发率的关系;通过改变培养基中无机盐浓度、蔗糖浓度及植物生长调节剂类型及浓度,研究孢子萌发、原叶体增殖、孢子体生成3个过程的最佳培养基配方。【结果】春季2—4月采集的芒萁孢子萌发活性最强;孢子诱导萌发最佳处理为DKW+5%(质量分数) NaClO消毒15 s,萌发率97.15%,20 d原叶体可见;原叶体最佳增殖培养基为1/2 MS+蔗糖5 g/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L,30 d质量增殖倍数为7.28;孢子体诱导生成最佳培养基为1/2 MS+蔗糖30 g/L+NAA 1.0 mg/L,第8天孢子体即可产生,生成率53.33%。【结论】芒萁孢子活性与生长区域、生成月份存在关联性,广州地区3月的孢子活性最强;在幼孢子体的瓶苗生成率较低的情况下,研发原叶体绿色球状体(prothallus green globular body, PGGB)高效增殖...     

红花罂粟花粉萌发的研究

以新鲜红花罂粟花粉为试材,比较研究了培养基中蔗糖浓度及硼酸和Ca^2＋、赤霉素浓度对红花罂粟花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明：过高过低的蔗糖、硼酸浓度抑制红花罂粟花粉萌发。低浓度Ca^2＋和赤霉素促进了花粉萌发和花粉管的生长,高浓度Ca、赤霉素抑制了花粉萌发和花粉管的生长。红花罂粟花粉萌发的最佳培养基是琼脂20g＋蔗糖110g＋硼酸110mg／L＋200mg／LCa^2＋＋80mg／LGA3。     

荷花胚组织培养的初步研究

以荷花胚为试材,研究不同生长调节剂、基本培养基、外植体消毒时间对离体荷花胚萌发的影响.结果表明,诱导胚萌发较理想的培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+0.1%AC+3%蔗糖;MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+0.1%AC+3%蔗糖,光照14h.d-1.总结了荷花胚组织培养上存在的问题,并对解决某些问题提出了一些建议.     

红头兰(Tuberolabium quisumbingii)胚培养和快速繁殖

以红头兰的胚为材料,研究了红头兰的胚培养和快速繁殖技术.结果表明:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭均有利于胚的萌发;在继代培养中,适宜的培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L;分化和壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+AC2.0g/L+蛋白胨2.0g/L+琼脂7g/L。     

白及组培苗高效繁育技术研究

为建立白及(Bletilla striata)组培苗高效繁育技术体系,以白及蒴果为外植体,通过设置不同培养基及不同移栽基质对白及种子无菌萌发、原球茎及丛生芽诱导、丛生芽生根及结鳞茎培养、移栽驯化以及驯化苗一年两季培育开展研究。结果表明：白及种子萌发、原球茎及丛生芽诱导最适培养基为1/2 MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA) 1.0 mg/L+萘乙酸(NAA) 0.1 mg/L+油菜素内酯(BR) 0.01 mg/L+蔗糖20 g/L液体培养基;丛生芽生根及结鳞茎培养最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+BR 0.02 mg/L+NAA 0.2 mg/L+激动素(KT) 0.5 mg/L+香蕉100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.0 g/L+活性炭1.0 g/L。丛生苗于3-4月移栽,最适宜的移栽基质为泥炭土、珍珠岩和蛭石(2∶2∶1,V∶V∶V)的组合物,移栽成活率为96.33%。一年两季的栽培管理并结合喷施0.02 mg/L BR能明显提高种苗质量。     

油茶花粉液配方初探

【目的】以新鲜油茶(Camellia oleifera)花粉为材料探究油茶液体授粉花粉液的配制方法，为实现无人机的辅助授粉提供可能。【方法】以广西广泛种植的“岑软2号”和“岑软3号”油茶新鲜花粉为材料，通过测定花粉液中花粉浓度与花粉生活力来确定最优的油茶液体授粉花粉液的配方。【结果】当花粉液中的黄原胶、蔗糖和硼酸的质量分数分别为0.04%，10%和0.015%时，“岑软2号”和“岑软3号”油茶花粉的稳定性与生活力可以得到最有效地保持。【结论】最优油茶花粉液配方为油茶无人机辅助授粉提供了可能性，并可一定程度上解决因花粉资源限制而导致的油茶坐果率低下的问题。     

米老排优树组培技术体系优化研究

【目的】建立米老排(Mytilaria laosensis)优良单株组培再生体系,为今后其无性化推广提供技术支撑。【方法】以米老排优树基部半木质化萌芽为外植体,采用丛芽发生途径,通过初代腋芽诱导、继代增殖培养、生根培养等过程,研究筛选最适的外植体采集时间、继代及生根培养的基本培养基以及植物生长调节剂的种类及浓度配比等。【结果】10月采集的外植体诱导效果最好,存活率为32.38%;米老排腋芽诱导最适配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L,诱导率为100%,萌发时间为4.07 d;最适增殖培养基为MX(改良WPM)+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖系数达4.94,芽生长旺盛;最适生根培养基为MX+NAA 0.3 mg/L,生根率100%,平均根数13.18,根生长健壮,移栽成活率可达92.3%。【结论】米老排外植体诱导成活率与取材地点、时间相关,广东地区10月的米老排外植体材料最佳;在使用MS基本培养基增殖系数低的情况下,改用MX(改良WPM)培养基能够显著提高米老排增殖继代倍数;本研究还对米老排诱导培养基、增殖培养基、生根培养基进行...     

沙田柚离体花粉管的培养研究

探讨了沙田柚花粉离体(invitro)萌发的优化条件,结果表明,最适合沙田柚花粉离体萌发的培养基组分为:15%蔗糖,0.02%硫酸镁,0.01%硝酸钾,0.03%硝酸钙,0.01%硼酸,20%PEG-6000,pH5.6.