Effect of nocistatin in pain modulation

Using tail-flick latency as the nociceptive index and von Frey hair to measure the mechanical allodynia, the aim of the present study is to determine whether nocistatin, injected intracerebroventricularly (i.c.v.), would reverse the anti-morphine effect of orphanin FQ (OFQ), and, injected i.c.v. or intrathecally (Lt.), would inhibit the mechanical allodynia in a L5 and L6 spinal nerve ligation model of neuropathic pain in rats. The results show that i.c.v. injection of nocistatin produces no significant changes in the TFL, nor does it affect morphine analgesia. In addition, i.c.v. or i.t. nocistatin produces no significant changes in withdrawal threshold of the nerve-lesioned hind paw. However, nocistatin significantly reverses the antagonistic effect of OFQ on morphine analgesia when it was coinjected i.c.v. with OFQ. The results suggest that nocistatin can reverse the anti-morphine effect of OFQ in rat brain, but cannot inhibit the mechanical allodynia of neuropathic pain in rat brain and spinal cord.     

穴位埋线联合东莨菪碱治疗对吗啡依赖大鼠十二指肠表达5-羟色胺的影响

摘要: 目的探讨穴位埋线加东莨菪碱治疗对吗啡依赖大鼠十二指肠5-羟色胺( 5-HT) 免疫反应( IＲ) 细胞的影响。方法本试验将大鼠随机分为正常组、自然戒断组( 简称戒断组) 、东莨菪碱治疗组( 简称西药组) 、穴位埋线治疗组( 简称穴位埋线组) 及穴位埋线加东莨菪碱治疗组( 简称穴位埋线加西药组) 。腹腔注射吗啡建立吗啡依赖大鼠模型,经不同的方法干预后,观察戒断症状,并于干预后7d 和14d 分别取材。观察十二指肠5-HT-IＲ 细胞形态特点,并比较各组十二指肠组织匀浆中5-HT 的含量。结果吗啡依赖大鼠戒断症状明显,其十二指肠黏膜5-HT-IＲ细胞数和组织匀浆中5-HT 含量均明显增加( P ＜ 0. 01) ; 治疗7d,与自然戒断组比较,各治疗组均有明显效果( P ＜0. 05) ,并以穴位埋线加西药组改善最为显著( P ＜ 0. 01) ,几乎恢复到正常水平; 治疗时间延长至14d,除自然戒断组外,各治疗组的检测指标均接近正常组( P ＞ 0. 05) 。结论西药治疗与穴位埋线治疗对吗啡依赖所致大鼠的戒断症状及十二指肠分泌5-HT 的功能均有逆转作用,两种方法结合可缩短治疗时间,治疗效果更佳。     

Structure of the nociceptin/orphanin FQ receptor in complex with a peptide mimetic

Members of the opioid receptor family of G-protein-coupled receptors (GPCRs) are found throughout the peripheral and central nervous system, where they have key roles in nociception and analgesia. Unlike the 'classical' opioid receptors, δ, κ and μ (δ-OR, κ-OR and μ-OR), which were delineated by pharmacological criteria in the 1970s and 1980s, the nociceptin/orphanin FQ (N/OFQ) peptide receptor (NOP, also known as ORL-1) was discovered relatively recently by molecular cloning and characterization of an orphan GPCR. Although it shares high sequence similarity with classical opioid GPCR subtypes (～60%), NOP has a markedly distinct pharmacology, featuring activation by the endogenous peptide N/OFQ, and unique selectivity for exogenous ligands. Here we report the crystal structure of human NOP, solved in complex with the peptide mimetic antagonist compound-24 (C-24) (ref. 4), revealing atomic details of ligand-receptor recognition and selectivity. Compound-24 mimics the first four amino-terminal residues of the NOP-selective peptide antagonist UFP-101, a close derivative of N/OFQ, and provides important clues to the binding of these peptides. The X-ray structure also shows substantial conformational differences in the pocket regions between NOP and the classical opioid receptors κ (ref. 5) and μ (ref. 6), and these are probably due to a small number of residues that vary between these receptors. The NOP-compound-24 structure explains the divergent selectivity profile of NOP and provides a new structural template for the design of NOP ligands.     

骨肽对骨质疏松大鼠的保护作用

研究骨肽对维甲酸所致大鼠骨质疏松的保护作用.采用70 mg/kg维甲酸灌胃给予SD大鼠持续2 w构建骨质疏松模型,分别灌胃给与大鼠40 mg/kg依替膦酸二钠溶液,1.25,2.50和5.00 g/kg骨肽溶液4 w后,取大鼠股骨进行HE染色、骨密度检测、干重与灰重及骨钙磷质量分数测定,取血清和尿液进行生化指标检测.结果显示,模型组大鼠骨密度、骨小梁密度降低,灌胃给予中、高剂量骨肽后显著升高.与模型组比较,3个剂量的骨肽均能显著升高股骨干重与灰重、骨钙磷质量分数;能升高大鼠血清中的骨碱性磷酸酶（BALP）与骨钙素（BGP）的质量分数,降低血清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b （TRACP-5b）水平.模型组大鼠尿液中的羟脯氨酸（HOP）质量分数明显升高,灌胃给予低剂量骨肽后显著降低.阳性药在各指标中均表现出明显的治疗效果,不同剂量的骨肽显示出了一定程度的剂量依赖性保护作用,2.50 g/kg骨肽溶液对维甲酸所致大鼠骨质疏松的治疗效果最明显.      

迷迭香酸对小鼠炎症介质的影响

通过角叉菜胶致小鼠足肿胀法检测炎症渗出液中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)、组胺(Histamine)和5-羟色胺(5-HT)的含量变化,以及血清中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮(NO)含量的变化,研究迷迭香酸抗炎的作用机制.结果表明,连续给小鼠灌胃7 d,迷迭香酸能明显抑制角叉菜胶致小鼠后足肿胀,并且显著降低炎症渗出液中前列腺素E2、丙二醛、组胺和5–羟色胺的含量,显著提高血清中过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性,显著降低血清中一氧化氮含量.说明迷迭香酸能够通过抑制炎症部位炎症因子的合成或释放而起到抗炎作用,为迷迭香酸更好地应用于营养食品、保健药品中提供理论依据.     

5-羟色胺在F344大鼠下丘脑释放及其免疫调节作用

在F344雄性大鼠腹腔注射血蓝蛋白(KLH),研究T 细胞依赖抗原初始免疫反应对中枢神经系统5 羟色胺(5 HT)代谢的影响。当免疫刺激大鼠4天后,其下丘脑匀浆5 羟色胺水平出现降低,同时应用在体脑微透析技术研究发现清醒大鼠腹腔注射血蓝蛋白4天后,其下丘脑前叶细胞外液的5 羟色胺水平增加。为了评价在免疫反应中大鼠下丘脑5 羟色胺释放效应,本文应用氯苯丙胺(PCA)选择性预先耗竭5 羟色胺释放,并测定这些动物在注射血蓝蛋白后抗体产生情况。结果显示在应用氯苯丙胺预处理的血蓝蛋白免疫动物特异抗体IgM和IgG与未用氯苯丙胺预处理的动物比较均有明显增加(P<0.01)。上述资料表明,对于T 细胞依赖抗原,其初始抗体产生的量是由位于下丘脑5 羟色胺神经终端抑制性递质释放所调节。     

不同时间水环境对大鼠脑组织5-羟色胺及其代谢的影响

目的：观察大鼠在不同时间水环境应激过程中下丘脑、纹状体5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HMA）含量的变化，分析5-HT含量变化与水环境之间的关系。方法：分别测定安静组、一次水环境组和长期水环境组大鼠8周后下丘脑、纹状体中5-HT和5-mAA含量。结果：长期水环境组大鼠下丘脑5-HT含量显著高于安静组（P〈0．05），一次水环境组大鼠纹状体5-mAA含量显著高于安静组（P〈O．05），其余各组间无显著性差异，但水环境的影响可使上述指标较安静组有增高的趋势。结论：水环境刺激可使大鼠下丘脑、纹状体中的抑制性神经递质5-HT及其代谢产物的含量增加，使机体处于中枢抑制状态。     

泡桐甲素药理作用的实验研究

采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、小鼠醋酸扭体法、小鼠碳末廓清法、葡萄糖引起高血糖小鼠模型,观察泡桐甲素抗炎、镇痛、免疫、降糖的药理作用,并对泡桐甲素进行急性毒性试验。小鼠40只,随机分为正常对照组、阿斯匹林组、泡桐甲素高剂量组和低剂量组。结果显示,泡桐甲素高剂量组能明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀;泡桐甲素高、低剂量能减少醋酸所致小鼠扭体次数,能提高单核巨噬细胞的吞噬功能;泡桐甲素高剂量组能显著降低血糖,低剂量有一定的降糖作用。急性毒性试验的最大给药量为4.5g/kg,小鼠增重正常,未见有异常行为或死亡等情况。泡桐甲素具有抗炎、镇痛、增强免疫、降低血糖作用,而且毒性小。     

五参胶囊镇静催眠作用及其机制的实验研究

目的观察五参胶囊(Wu Shen Capsules,WSh C)对小鼠镇静催眠作用的影响,并探讨其作用机制.方法将ICR小鼠随机分为对照组、五参胶囊高剂量组、中剂量组和低剂量组.五参胶囊高剂量组用药量为200 mg/(kg·d~(-1)),中剂量组用药量为100 mg/(kg·d~(-1)),低剂量组用药量为50 mg/(kg·d~(-1)),给药时间为15 d,于给药结束后进行小鼠自主活动实验和协同戊巴比妥钠阈上剂量睡眠时间实验,测定5 min内各组小鼠的活动次数和站立次数,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠持续时间.采用酶联免疫吸附法检测小鼠下丘脑5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-Hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、谷氨酸(glutamine,Glu)含量,并计算5-HIAA/5-HT比值及Glu/GABA比值.结果与对照组比较,WSh C各给药组小鼠活动次数减少,睡眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长(P0.01),WSh C能升高小鼠下丘脑5-HIAA含量和5-HIAA/5-HT比值,降低Glu含量和Glu/GABA比值.结论 WSh C具有明显镇静催眠作用,其机制可能与调节中枢兴奋性和抑制性神经递质有关.     

脑组织中5-HT及受体与运动的研究现状

运用文献资料法,系统地概括了脑内5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）及其受体的特性,并总结了近年来脑内5-HT及受体与运动的研究现状：1．5-HT作为一种抑制性神经递质可以降低从中枢向外周发放的冲动,导致中枢疲劳。2．5-HT的升高可能首先发生在某一脑区而非全脑。3．耐力运动中大脑5-HT含量升高且在疲劳时加剧。4．力竭运动可同时加快5-HT的合成和降解速度,脑内5-HT在运动即刻几乎没有明显变化。5．5-HT受体各亚型存在较大差异,有的起抑制性作用,有的则发挥兴奋性作用。     

两种不同给药途径对松针提取液抗突变效应的比较研究

采用腹注和灌喂两种给药方式，研究了松针提取液对环磷酰胺诱发小鼠骨髓细胞微核形成率的影响，以观察松针提取液的抗突变效应以及给药途径对抗突变效应的影响。实验结果表明，松针提取液的二种不同给药方式对环磷酰胺的致突变性均有抑制作用，使微核率显著下降，与环磷酰胺组相比，经统计学处理有极显著性差异（Ｐ＜０１），但松针提取液抗突变效应并非剂量越大，效果越佳，只有在一定的剂量范围内，才能显示出最佳抗突变效应。亦即剂量与微核率只有在一定剂量范围内才呈现显著的负相关，相关系数分别为ｒ＝０．９８４２（ｐ＜０．０５）及ｒ＝—０．９７８２（ｐ＜０．０５）。两种不同给药方式对松针提取液的抗突变效应，经ｘ２检验无显著影响（ｘ２＝４．３７０，ｘｈ＝７．８１５，ｘ２＜ｘＺ。。），实验结果还提示，松针提取液在低剂量时不呈现致突变效应，但灌喂或腹注达一定剂量时却有一定的致突变性，因此在利用松针提取液进行肿瘤防治时，选择适当剂量至关重要。     

铁棒锤氯仿部位的毒-效关系研究

为探讨铁棒锤的毒效关系,提取分离其氯仿部位并采用HPLC分析其主成分,比较了该部位与铁棒锤其他活性部位的急性毒性,以热板法和扭体法考察了不同剂量铁棒锤氯仿部位对小鼠的镇痛作用.结果表明:铁棒锤不同部位对小鼠急性毒性强度差别较大,氯仿部位的毒性最强,正丁醇和石油醚部位次之,三者的LD50分别为37.514,6766.928,5492.337 mg/kg.不同剂量的铁棒锤氯仿部位均能提高小鼠热板痛阈值,呈剂量依赖性关系.20mg/kg铁棒锤60 min时的镇痛百分率为108.7%,远低于阳性对照10 mg/kg吗啡组(261.6%),但高于同剂量的铁棒锤总提物组(75.2%).不同剂量的铁棒锤氯仿部位均能有效抑制冰醋酸对所致小鼠扭体反应,呈剂量依赖性关系.20 mg/kg组的扭体抑制率为76.4%,明显高于200 mg/kg阿司匹林(50.5%)和20 mg/kg总提物组(51.0%).说明铁棒锤氯仿部位具有显著的毒性和镇痛活性呈剂量依赖性,推测其镇痛活性与毒性存在一定的关联.     

部分肝切除大鼠肠腔细菌数量的变化及其对肠道5-HT分泌的影响

采用平板培养计数法检测大鼠肠道细菌,采用高效液相色谱紫外分光法检测大鼠血中5-HT含量,研究了部分肝切除大鼠肠腔细菌数量的变化及其对肠道5-HT分泌的影响.结果表明:与对照组相比,部分肝切除后0h、2h、6h、12h、24h、48h及72h各时间点肠道细菌数和血中5-HT含量显著增多(P<0.05或0.01);部分肝切除并灌服硫酸庆大霉素的大鼠与部分肝切除的大鼠相比,肠道细菌数和血中5-HT含量均显著减少(P<0.05或0.01).部分肝切除后肠道细菌的增多可能是5-HT分泌量增加的机制之一.     

猕猴大肠5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学研究

以免疫组织化学ＳＰ法显示猕猴大肠含５－ ＨＴ的细胞,并用Ｗｅｉｂｅｌ体视学方法对其进行了定量分析．结果表明,猕猴大肠５－ ＨＴ免疫活性内分泌细胞的密度在结肠离心段最高,直肠密度中等,盲肠和结肠向心段最低．５－ ＨＴ免疫反应阳性细胞多分布在肠腺处,其形态多样,大多为锥形、梭形、圆形等．有些细胞的基底部有突起,突起的末端含有５－ ＨＴ阳性物质;有些细胞的５－ ＨＴ阳性物质释放到腺腔或肠腔面．     

A transient placental source of serotonin for the fetal forebrain

Serotonin (5-hydroxytryptamine or 5-HT) is thought to regulate neurodevelopmental processes through maternal-fetal interactions that have long-term mental health implications. It is thought that beyond fetal 5-HT neurons there are significant maternal contributions to fetal 5-HT during pregnancy but this has not been tested empirically. To examine putative central and peripheral sources of embryonic brain 5-HT, we used Pet1(-/-) (also called Fev) mice in which most dorsal raphe neurons lack 5-HT. We detected previously unknown differences in accumulation of 5-HT between the forebrain and hindbrain during early and late fetal stages, through an exogenous source of 5-HT which is not of maternal origin. Using additional genetic strategies, a new technology for studying placental biology ex vivo and direct manipulation of placental neosynthesis, we investigated the nature of this exogenous source. We uncovered a placental 5-HT synthetic pathway from a maternal tryptophan precursor in both mice and humans. This study reveals a new, direct role for placental metabolic pathways in modulating fetal brain development and indicates that maternal-placental-fetal interactions could underlie the pronounced impact of 5-HT on long-lasting mental health outcomes.     

清空分散片对利血平所致小鼠偏头痛模型的影响

目的探讨清空分散片对小鼠偏头痛模型的作用。方法通过观察清空分散片对利血平所致小鼠偏头痛模型的影响了解清空分散片对小鼠偏头痛模型的作用。结果清空分散片有明显对抗利血平所致小鼠偏头痛模型的体重下降、提高模型小鼠鼠尾的光照痛域值,延长模型小鼠凝血时间,调节模型小鼠血清中五羟色胺过度降低的作用。结论清空分散片对利血平所致小鼠偏头痛模型有治疗作用,为清空分散片在临床上治疗偏头痛提供了药效学实验依据。     

黑果枸杞花青素提取物对大鼠急性痛风性关节炎的作用

为研究黑果枸杞花青素提取物(anthocyanin extract of Lycium ruthenicum Murr., AEL)对急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis, AGA)大鼠的作用,将60只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、AEL高剂量组(238.0mg/kg)和AEL低剂量组(59.5mg/kg),每组12只,分为2批,每批6只。第一批动物灌胃2周,第二批动物灌胃4周后,采用50mg/mL微晶型尿酸钠(microcrystalline sodium urate, MSU) 0.2mL注射到大鼠右踝关节诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,评价AEL对AGA大鼠踝关节肿胀和跛行步态的改善效果。所有动物继续灌胃至5周,采用质量分数2.5%的氧嗪酸钾饲料喂食诱导高尿酸血症模型,测定造模2h、3h后大鼠的血清尿酸水平。研究发现,与模型对照组比较,灌胃2周,AEL高剂量能明显缓解大鼠造模6h后踝关节肿胀,改善跛行步态;灌胃4周,AEL高、低剂量均能明显缓解大鼠造模后6h、24h踝关节肿胀和改善造模6h后跛行步态,AEL高剂量还能明显改善造模24h后跛行步态;灌胃5周后,AEL高、低剂量均能明显抑制氧嗪酸钾导致的大鼠血清尿酸升高。结果表明,AEL能从抗炎和降尿酸两个方面对大鼠急性痛风性关节炎表现出明显改善作用。     

厚朴皮、叶、花水提物镇痛作用的比较研究

目的探讨并比较厚朴皮、叶、花的镇痛作用。方法采用热板法、醋酸扭体法致痛,观察高、低剂量厚朴皮、叶、花水提物的镇痛作用。结果厚朴干皮、根皮、枝皮、叶、花水提物高、低剂量对热板法所致小鼠痛阈值无影响,与蒸馏水对照组和自身给药前比较差异无统计学意义(P0.05);厚朴干皮、根皮、枝皮、叶、花水提物高、低剂量对醋酸所致扭体反应数均有明显抑制作用,与蒸馏水对照组比较差异显著(P0.01),厚朴根皮、枝皮、叶、花水提物高、低剂量组与厚朴干皮相对应剂量组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论厚朴干皮、根皮、枝皮、叶、花水提物均具有镇痛作用,且厚朴根皮、枝皮、叶、花可以代替厚朴干皮用于镇痛。     

A single amino-acid difference confers major pharmacological variation between human and rodent 5-HT1B receptors.

Neuropsychiatric disorders such as anxiety, depression, migraine, vasospasm and epilepsy may involve different subtypes of the 5-hydroxytryptamine (5-HT) receptor. The 1B subtype, which has a unique pharmacology, was first identified in rodent brain. But a similar receptor could not be detected in human brain, suggesting the absence in man of a receptor with equivalent function. Recently a human receptor gene was isolated (designated 5-HT1B receptor, 5-HT1D beta receptor, or S12 receptor) which shares 93% identity of the deduced protein sequence with rodent 5-HT1B receptors. Although this receptor is identical to rodent 5-HT1B receptors in binding to 5-HT, it differs profoundly in binding to many drugs. Here we show that replacement of a single amino acid in the human receptor (threonine at residue 355) with a corresponding asparagine found in rodent 5-HT1B receptors renders the pharmacology of the receptors essentially identical. This demonstrates that the human gene does indeed encode a 1B receptor, which is likely to have the same biological functions as the rodent 5-HT1B receptor. In addition, these findings show that minute sequence differences between homologues of the same receptor from different species can cause large pharmacological variation. Thus, drug-receptor interactions should not be extrapolated from animal to human species without verification.     

大豆肽对果蝇睡眠的影响

研究大豆肽(soybean peptides, SBP)对果蝇睡眠的影响。通过大豆分离蛋白酶解,制得SBP,选择20日的雄性果蝇,分为4组,无添加的培养基作为空白组,SBP分为2、4、8mg/mL额外添加到培养基作为3个实验模型组,通过VideoTrack动物行为分析系统监测果蝇睡眠时长,并检测SBP对果蝇脑部生物钟基因(per、tim、clk、cyc)与参与调控睡眠神经递质合成限速酶的基因(gad、tph、gdh、hdc)以及五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的影响。研究发现,在监测睡眠的第2日晚上,SBP对果蝇睡眠延长效果最好,并呈现剂量依赖性,又通过剥离取头,分析其生物钟基因(per、tim、clk、cyc)和神经递质合成限速酶基因(gad、tph、gdh、hdc),得到SBP是通过调节tim和tph的基因表达并提高5-HT在脑部的含量来延长果蝇的睡眠时长的结论。