杉木杂种群体分子框架遗传连锁图初报

利用随机扩增ＤＮＡ多态性分子遗传标记－ＲＡＰＤ,以杉木Ｊ０和Ｆ１１两个亲本杂交形成的Ｆ１群体为作图群体,从１０４０个随机引物中筛选出７８个引物,对７８个Ｆ１群体及双亲样本进行了ＲＡＰＤ扩增,共获得１２９个ＲＡＰＤ标记,首次构建了杉木分子遗传连锁框架图,其中Ｊ０亲本包含８个连锁群,标记覆盖的基因组总长度约为５９５．２ｃＭ,Ｆ１１亲本包含４个连锁群,标记覆盖的基因组总长度约为３１５．３ｃＭ。１２９个ＲＡＰＤ标记中偏分离标记占１４．７％。本图谱为构建饱和的杉木分子遗传图谱提供了框架结构,为进一步开展杉木分子遗传方面的研究奠定了基础。     

湖北大麦品种资源的RAPD分析

在对１０５份湖北栽培大麦酯酶同工酶研究的基础上,采用ＲＡＰＤ技术对分属于８种酶谱类型的１０份湖北栽培大品种进行了研究,６３个随机引物中有１２个引物产生稳定多态性的带,共扩增出７３条带,其中４６条表现出多态性。讨论了ＲＡＰＤ的稳定性以及ＲＡＰＤ标记与同工酶标记的异同。     

猕猴属种间及亚种间RAPD分析

应用ＲＡＰＤ技术分析了猕猴属（Ｍａｃａｃａ）种间和亚种间６个分类群之间的遗传多态性,共筛选出１６个随机引物每个分类群平均获得７７个遗传标记,根据遗传距离构建了系统发育进化树,结果显示从ＲＡＰＤ数据分析得到的６个分类群的相互关系与形态、同功酶、ｍｔＤＮＡ的研究结果基本一致．表明ＲＡＰＤ技术适用于猕猴属中近缘种间和亚种间的分类分析．     

应用RAPD标记构建马尾松单株树遗传连锁图谱

利用马尾松（Ｐｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａ）崇义群体Ｃ－１６号单株上４０粒种子的胚乳为作图群体材料，用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法构建马尾松单株遗传连锁图谱，从被步筛选的８０个引物中，得到１６个具有多态性产物的引物，对这１６种引物进行Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ１：１分离检测（卡方检验，Ｐ＜０．０５），我们得到符合Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ１：１分离比例的ＲＡＰＤｓ标记４９个．通过对４９个标记的连锁关系进行分析，其中２９个标记分布在１２个连锁群上，总图距为４８３．３ｃＭ，平均图距为２８．４２ｃＭ，２０个标记没有连锁到任何连锁群上，需要继续进行大量标记的连续分析，构建完善的高密度的遗传图谱，使之能够对数量性状位点ＱＴＬｓ进行定位，从而进行分子标记辅助选择育种（ＭＡＳ）．     

利用RAPD技术检测精神病患者基因组DNA

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术检测了１６例精神分裂症,１６例情感性精神障碍患者的基因组ＤＮＡ。结果表明：引物ＯＰＡＹ１７在扩增基因组中,情感性精神障碍４条带（５１５．５,６０６．８,９４７．２和１８２７ｂｐ）,精神分裂症３条带（５１５．５,６０６．８和９４７．２ｂｐ）,而正常人仅扩增出１条４２６．７ｂｐ的条带,５１５．５ｂｐ的条带有可能是精神分裂症和情感性精神障碍的特异性标记,１８２７ｂｐ的条带有可能是情感性精神障碍的特异性标记。     

家兔RAPD图谱及双引物的运用研究

运用单引物获得了较理想的五个家兔个体的ＲＡＰＤ图谱，并探讨了双引物的运用。结果表明：ＲＡＰＤ可用于家兔品种（系）鉴定，具有较大运用潜力。双引物能比单引物扩增出更多的具有多态性的条带，双引物的运用是提高多态性的有效而且很经济的手段。     

疣蝗5个种群间遗传分化的RAPD分析

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在ＤＮＡ分子水平上对疣蝗５个种群间的遗传差异进行了研究。在２３个引物中有６个引物出现稳定的扩增带，扩增总带数为６６条，其中５３条具多态性，占８０．３％，平均每个引物８．９条。利用Ｎｅｉ ＆ Ｌｉ相似系数和ＵＰＧＭＡ聚类法对结果进行分析，发现用该法检测到的遗传差异从南向北是连续性梯度差异，因而建议所研究地区疣蝗是一个单型种。     

利用RAPD标记鉴定芥菜(Brasica juncea Cos.)品种(英文)

从６０种１０ｂｐ随机引物中筛选出７种引物,对８个芥菜变种的１６个品种（每个变种有２个品种）进行了随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）鉴定,能快速、灵敏、较为简便获得了１６个芥菜品种的基因组ＤＮＡ指纹图谱．结果表明,不同引物在１６个品种上都有其特征ＤＮＡ带,一般只有１条,少数有２条．在同１个变种的２个品种之间存在着丰富的ＲＡＰＤ标记,通过比较２个品种各自独具的ＲＡＰＤ标记,就可明确地将２个品种区分．在所用的７种引物中,没有１种能同时将８对芥菜品种全部区分开,但用２种或２种以上的引物就完全可以将８对芥菜品种全部区分开．     

与SMV抗性基因Rsa连锁的一个共显性SCAR标记

将ＲＡＰＤ标记转换为ＳＣＡＲ标记是更到更为可靠而有有标记的有效方法，应用集群分离体分析（ＢＳＡ）方法，筛选了９００个１００个碱基随机引物，得到了２个与单显性大豆花叶病毒抗性基因Ｒｓａ连锁的显性ＲＡＰＤ标记ＯＰＡＳ－０６１８００和ＯＰＷ－０５６００，将与Ｒｓａ连锁距离较近的ＯＰＷ－０５６６０克隆并测定ＤＮＡ序列，根据这个序列的两端设计了１对特异的寡聚核苷酸引物，用这对引物进行扩增，在抗感亲本间观察到     

含笑亚族植物的RAPD分析及其系统学意义

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析了１４种含笑亚族植物。对Ｏｐｅｒｏｎ公司６０个引物进行筛选,发现１３个引物的带型清晰并呈多态性。该１３个引物在每个样本中扩增的片段总数在６０￣８０个之间。采用ＵＰＧＭＡ法对由ＲＡＰＤ数据求出的遗传距离进行聚类分析,得到的结果显示,植物明显地分为２个亚类群,支持将合果木独立成属与含笑属并列的处理方式;不同意把观光木从含笑属中独立出来独成属的观点。     

洞庭青鲫和彭泽鲫DNA提取及其RAPD分析

DNA样品检测结果表明:彭泽鲫基因组DNA的平均产率为735,洞庭青鲫基因组DNA的平均产率为447.1;从80个随机引物中筛选出5个引物对彭泽鲫和洞庭青鲫两个群体进行了RAPD分析.结果发现彭泽鲫群体多态位百分率为57.5%,群体内遗传相似度和遗传距离分别为0.850和0.150;洞庭青鲫群体多态位点百分率为56.65%,遗传相似度和遗传距离分别为0.927和0.073;两群体间相似率和遗传距离分别为0.811和0.189.这表明洞庭青鲫群体具有较低的遗传多样性,彭泽鲫群体内的遗传多样性相对较高,但洞庭青鲫与彭泽鲫两群体间存在遗传差异.     

异育银鲫、鲫和白鲫的肌浆蛋白及同工酶(Est、MDH)的电泳比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶垂直圆盘电泳,研究了异育银鲫、鲫和白鲫的肌浆蛋白,酯酶(Est)同工酶和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶。结果表明,同工酶类不仅具有种间特异性,而且具有器官特异性,为异育银鲫、鲫和白鲫的分类提供了生化依据。还表明异育银鲫和鲫的亲缘关系较近,而白鲫与异育银鲫和鲫的亲缘关系较远。     

饲喂两种中药配方对异育银鲫巨噬细胞免疫机能的影响

配制3种分别含0.03%强普素、0.5%中药组方和1%中药组方的饲料,投喂异育银鲫30 d后分离纯化头肾巨噬细胞,用于测定巨噬细胞吞噬力和巨噬细胞呼吸氧爆发.结果显示,0.5%中药组异育银鲫头肾巨噬细胞吞噬力和呼吸氧爆发最强,其次为1%中药组,与对照组相比差异显著(P＜0.05),而强普素组巨噬细胞吞噬力和呼吸氧爆发与对照组比无显著差异(P＞0.05).研究表明,0.5%和1%中药组方能够显著增强异育银鲫头肾巨噬细胞的吞噬力和呼吸氧爆发强度.对提高异育银鲫的免疫机能有显著作用.     

红鲫与金鱼对洞庭湖外睾吸虫感染的对比实验

目的建立洞庭湖外睾吸虫的宿主动物模型。方法将红鲫与金鱼分别投放於含有洞庭湖外睾吸虫尾蚴钉螺的去氯自来水中自然感染,分阶段解剖观察。结果红鲫与金鱼对洞庭湖外睾吸虫尾蚴的感染率均为100%,并且尾蚴发育成成熟囊蚴。实验过程中,金鱼死亡3尾,而红鲫无一尾死亡。结论红鲫与金鱼均可作为洞庭湖外睾吸虫的宿主动物模型。红鲫作为洞庭湖外睾吸虫宿主动物模型更理想。     

Histopathology and Ultrastructural Pathology of Cyprinid Herpesvirus Ⅱ(CyHV-2) Infection in Gibel Carp,Carassius auratus gibelio

Cyprinid herpesvirus II(Cy HV-2) infection is identified in cultured gibel carp, Carassius auratus gibelio, with high mortality in China in recent years. Histological pathology includes acute hepatocellular necrosis, splenic necrosis, kidney necrosis, hyperplasia of the secondary lamellae with focal necrosis. Acute necrotic myocarditis and granulocytes are prominent within the cardiac lumen in infected fish. In addition, necrosis is observed in the submucosa and mucosa epithelium of intestinal tract. Edemas are observed in renal glomerulus, submucosa and mucosa epithelium of intestinal tract, myocardial cells and neurons. Transmission electron microscopy indicates the cytoplasmic inclusions in splenocytes, glomerulus cells and hematopoietic tissue cells of kidney, epithelial cells of gills and brain cells. The histopathology and ultrastructural pathology in Cy HV-2 infected gibel carp are characterized with extensive necrosis and cytoplasmic inclusions in spleen, kidney, gill and brain, which suggests that Cy HV-2 may mainly infect the spleen, kidney, gill and brain of fish.     

维生素B2拮抗铜离子对鲫鱼毒性的研究

以鲫鱼为研究对象，以铜离子和维生素B2为实验药物，研究了维生素B2、铜离子、维生素B2和铜离子共同作用于鲫鱼时，对鲫鱼的影响。结果显示：维生素B2对鲫鱼具有一定的保护作用；而铜离子则对鲫鱼有较强的毒害作用。同时发现维生素B2对铜离子具有一定的桔抗作用，但是这种作用较弱；在较高浓度和染毒较长时间时，将不再具有抑制作用。     

壬基酚对鲫鱼(Carassius auratus)巨噬细胞的免疫毒性

从鲫鱼(Carassius auratus)头肾中分离巨噬细胞，体外暴露雌二醇和壬基酚后，用MTT法测定它们对鲫鱼巨噬细胞增殖的影响，用化学发光法测定它们对鲫鱼巨噬细胞呼吸爆发的影响，评价壬基酚的免疫毒性，并与天然激素雌二醇的免疫效应相比较．结果表明，雌二醇对鲫鱼巨噬细胞的增殖有明显的诱导作用，壬基酚对鲫鱼巨噬细胞增殖在低浓度表现为诱导作用，高浓度表现为抑制作用．雌二醇、壬基酚对鲫鱼巨噬细胞呼吸爆发有明显的诱导作用．研究结果表明壬基酚对鲫鱼具有潜在的免疫毒性．与天然激素雌二醇的免疫作用效应比较，进一步证明了壬基酚的弱雌激素活性．     

鲫和金鲫鳃表面亚显微结构特征的扫描电镜比较研究

应用扫描电镜对鲫和金鲫鳃表面亚微结构进行了详细的观察,并对二者鳃表面结构进行了比较.结果表明:鲫和金鲫虽然同属鲤科,但它们的鳃表面结构存在着很大差异.在鳃丝、鳃小片、鳃弓和鳃耙的上皮细胞方面,鲫和金鲫都有各自不同的形态特点;在鳃小片的排列方式及表面形态上,鲫和金鲫也存在较大差异;在鳃耙上,金鲫也没有鲫所具有的较为复杂的滤食结构;并且金鲫鳃耙表面腺体的大小与其附着结构也与鲫的有所不同.这些特征差异可能与鲫和金鲫在不同的生活环境中进行不同的生理功能是相关的.     

Discovery of a male-biased mutant family and identification of a male-specific SCAR marker in gynogenetic gibel carp Carassius auratus gibelio

Gibel carp (Carassius auratus gibelio) is a uniquely gynogenetic species with a minor ratio of males in natural habitats, but its male origin and sex determination mechanisms have been unknown. In this study, a male-biased mutant family was discovered from the gynogenetic gibel carp, and a male-specific SCAR marker was identified from the mutant family. Normal spermatogenesis was observed in the male testes by immunofluorescence histochemistry. Nearly identical AFLP profiles were observed between males and females, but a male-specific 86 bp AFLP fragment was screened by sex-pool bulked segregant analysis and individual screening. Based on the male-specific AFLP fragment, a total of 579 bp sequences were cloned by genome walking. Subsequently, a male-specific SCAR marker was designed, and the male-specific DNA fragment was confirmed to be steadily transmitted to the next generation and consistently detected only in males.     

银鲫肌肉中甲苯咪唑及其代谢物残留检测方法的建立—HPLC法

利用高效液相色谱法(HPLC-UV),建立了银鲫肌肉中甲苯咪唑(MBZ)及其两种代谢产物氨基甲苯咪唑(MBZ-NH2)和羟基甲苯眯唑(MBZ-OH)残留的检测方法.采用氨化乙酸乙酯作为提取溶剂,减压浓缩后去脂,二氯甲烷萃取,氢氧化钠净化,乙酸乙酯二次萃取,N2吹干,定容后使用高效液相色谱分析.方法在0.1～4.0μg/mL之间呈线性相关,相对标准偏差为1.09%～5.12%,MBZ、MBZ-NH2、MBZ-OH平均加标回收率分别为72.17%～77.44%、63.51%～68.07、82.37%～86.83%,检出限分别为10 μg/kg、15 μg/kg和10 μg/kg.