不同酶配方提取富硒木耳多糖工艺优化

目前酶促热水浸提黑木耳多糖的方法多见报道,但酶提法增加提取率的效果、不同酶增加提取率的差异未见报道,本研究对不同酶促进热水浸提黑木耳多糖的效果进行验证,筛选最佳酶品种,为实际生产提供理论依据和基础数据。本法采用酶促热水浸提黑木耳多糖,选取文献中出现的纤维素酶、糖化酶、淀粉酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、果胶酶六种酶进行增加提取率效果验证。以苯酚硫酸法进行多糖含量检测,应用Sevage法除蛋白。经验证,纤维素酶增加热水浸提黑木耳多糖提取率的效果最好,而糖化酶在保证效果的前提下更经济,本文推荐在实际生产过程中应用糖化酶。     

酶解鱿鱼蛋白的制备

探讨了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白、酶菠萝蛋白酶以及复合蛋白酶对鱿鱼蛋白的酶解效果.实验结果表明,在相同水解条件下,复合酶对鱿鱼蛋白的水解效果优于单酶,确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为水解鱿鱼蛋白的适宜水解酶,两种酶量的比例为1:1,正交实验得出最佳水解条件为:温度50℃、pH7、时间8 h、加酶量6 000IU/g.     

小麦秸秆糖化工艺的对比研究

通过比较化学糖化法和酶解糖化法对小麦秸秆的糖化效果,确定了较优的糖化方法和糖化工艺参数。研究结果表明:在化学糖化中,酸解糖化优于碱解糖化,以盐酸糖化的效果最好;当盐酸质量分数为25%、酸固比为25∶1 mL/g、糖化时间为5 d时,还原糖得率为20.76%。在酶解糖化中,木聚糖酶糖化效果优于其他酶类;在初始pH=4.5、酶解温度40℃、w(酶)∶w(秸秆)=0.06、小麦秸秆0.02 g/mL、酶解时间24 h时,还原糖得率为33.55%。说明木聚糖酶糖化效果优于盐酸糖化。     

纤维素酶酶解苹果渣的工艺条件

研究了纤维素酶酶解苹果废干渣转化为还原糖的适宜条件 ,实验讨论了不同的温度、酶解时间、酶解底物初始 p H值、底物质量分数、纤维素酶添加量及碱处理条件下对酶解效果的影响。实验结果表明 ,纤维素酶酶解苹果干渣的最适宜条件是在不经过碱处理 ,50℃ ,p H初始值为 5.0 ,纤维素酶用量为每克底物 2 0× 0 .0 1 667× 1 0 -6mol/s的情况下酶解 1 2 h,而底物质量分数在实验所选时间范围内对酶解效果无明显影响     

盐析法提取羔羊皱胃酶条件的研究

以羔羊皱胃为原料,对盐析法提取羔羊皱胃酶的条件进行研究,系统分析了不同因素对盐析效果的影响.结果表明：用NaCl作为盐析沉淀剂,皱胃酶沉淀效果较好.当100 mL皱胃酶液中加入18.8g NaCl,盐析时间为2h,盐析温度为15℃,pH调至2.5时,盐析羔羊皱胃酶的效果相对最好,提取的皱胃酶总活性最高.     

两种胰蛋白酶酶解羊肌肉总蛋白样品的质谱分析

摘要: 目的比较国产和进口两种胰蛋白酶对蛋白质的酶解效果,为后续蛋白质组学稳定研究提供依据。方法用超声破碎法提取羊肌肉组织总蛋白,经两种胰蛋白酶酶解后液相色谱串联质谱检测酶解肽段,将结果上传蛋白质序列数据库,利用质谱分析鉴定方法分析比较两种胰蛋白酶的酶解效果,并借助生物信息学工具对所得数据进行分析。结果两种胰蛋白酶酶解同种蛋白质样品产生的肽段长度86%以上均为6-18 个氨基酸,适用于质谱检测。酶解后肽段产生的质量国产胰蛋白酶优于进口胰蛋白酶,国产胰蛋白酶比进口胰酶酶解可多鉴定到19% 的蛋白质和34%的肽段。结论进口、国产的胰蛋白酶在酶解蛋白质方面均可用于质谱检测前蛋白质的酶解消化。但国产胰蛋白酶价格明显低于进口胰酶,更具应用优势。本研究为评价胰蛋白酶酶解效果提供了一种有效、全面的研究方法。     

棉织物冷轧堆-汽蒸法前处理的研究

分别用酶和碱通过冷轧堆-汽蒸法对纯棉织物进行前处理,结果表明：织物在轧堆后再经汽蒸工艺处理,效果比只经冷轧堆处理好;从工艺、耗能、环保以及综合处理效果来看,酶处理比碱处理效果好．     

离子交换树脂固定接枝脂肪酶

 酶法是制取生物柴油的一种新型方法,而酶的重复利用率直接影响该法的运行成本.本文采用吸附法将碱性脂肪酶L4固定在4种不同树脂上,对比了利用不同树脂和在不同酶液浓度条件下的固定化效果,然后采用吸附-交联法将脂肪酶固定在树脂DK110上,考查交联方式和交联剂浓度对酶固定化的影响以及固定化酶的重复使用稳定性.结果表明：大孔型离子交换树脂DK110的固定化效果最好,酶液浓度对脂肪酶固定化影响显著.交联方式对固定化效果有显著影响,酶液先与戊二醛混合后加入树脂载体(JL1)所获得的酶活最大(340U/g),酶液、戊二醛与树脂载体同时混合(JL2)重复使用稳定性最好.该研究为固定酶法制取生物柴油奠定了基础.     

过氧化物酶在酚类废水处理中的应用

介绍了过氧化物酶在酚类废水处理中的应用现状以及合酚废水的危害及主要来源,其中包括辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶、氯过氧化物酶及其相应的固定化酶在含酚废水及含难降解的芳香族化合物废水、造纸废水处理中的研究和应用．过氧化物酶不仅可降低有毒含酚污染物的含量,而且使用固定化酶技术必然会降低处理含酚废水的成本,提高酶的使用效果．     

酪蛋白糖巨肽酶解物的二肽基肽酶-4抑制作用

为探讨酪蛋白糖巨肽(GMP)酶解物的二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制作用,选择木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶分别酶解GMP获得糖巨肽酶解物,选择甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺为底物的发色底物法检测DPP-4活性.结果表明,GMP酶解物的DPP-4抑制效果优于GMP本身,并且随酶解时间的延长酶解物DPP-4抑制作用逐渐增加,其中GMP木瓜蛋白酶解物对DPP-4抑制效果最好,GMP木瓜蛋白酶酶解物作为DPP-4抑制剂具有潜在应用价值.     

6-苄基腺嘌呤对长根菇酶活性的影响

6—苄基腺嘌呤(6-BA)在适当浓度下，可促进长根菇的生长，通过测定长根菇相关酶类的活性变化，了解6-BA促进长根菇生长的一些机理．     

烤烟叶面微生物5种水解酶的产生、温度稳定性及其在烟叶人工陈化中的应用

研究了烤烟叶面微生物菌株5种水解酶（β 淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶）的诱导产生及其温度稳定性,结果发现培养基中分别添加0.2%的5种水解酶相应的诱导物,对所研究的烤烟叶面微生物菌株5种水解酶的产生均具有诱导作用.5种水解酶在60?℃时均不稳定,易失活;50?℃时,除果胶酶外,其他4种水解酶的温度稳定性较好.在对5种水解酶60?℃保温2?h过程中所取的样品测定酶活时发现,60?℃反应所得的酶活都高于各自酶活测定常规方法中所用温度反应所得的酶活.用烤烟叶面微生物及其产生的5种水解酶组合成6种不同配方,对2个品种的烤烟进行了为期6个月的人工陈化试验,结果是人工陈化2个月后试验样品评吸总分普遍高于对照样品.本研究为进行烤烟人工陈化以缩短烤烟自然陈化周期、改善烟叶内在品质奠定了基础.     

酶法提取百合多糖及其体外抗氧化活性

研究了热水法及复合酶法提取百合多糖（LBP）的最佳条件, 对两种方法得到的多 糖的生物活性进行了比较分析. 发现复合酶法能显著提高百合多糖的提取率, 可达31.03% , 是热水法的2.85倍. 复合酶法提取的多糖在体外抗氧化活性如对O^－₂ ·及·OH的抑制作用、 对H₂O₂诱导的人血红细胞氧化溶血 的抑制作用及人红细胞膜脂质过氧化的抑制作用均显著高于热水法提取的多糖. 经Sephadex G-75柱层析对粗多糖进行分离, 得到3种组分, 其中活性组分LBP-3主要存在于酶法提取 的多糖中, 测得该活性组分的分子量为13 400.     

A model for interfacial activation in lipases from the structure of a fungal lipase-inhibitor complex

Lipases are hydrolytic enzymes which break down triacylglycerides into free fatty acids and glycerols. They have been classified as serine hydrolases owing to their inhibition by diethyl p-nitrophenyl phosphate. Lipase activity is greatly increased at the lipid-water interface, a phenomenon known as interfacial activation. X-ray analysis has revealed the atomic structures of two triacylglycerol lipases, unrelated in sequence: the human pancreatic lipase (hPL)4, and an enzyme isolated from the fungus Rhizomucor (formerly Mucor) miehei (RmL). In both enzymes the active centres contain structurally analogous Asp-His-Ser triads (characteristic of serine proteinases), which are buried completely beneath a short helical segment, or 'lid'. Here we present the crystal structure (at 3 A resolution) of a complex of R. miehei lipase with n-hexylphosphonate ethyl ester in which the enzyme's active site is exposed by the movement of the helical lid. This movement also increases the nonpolarity of the surface surrounding the catalytic site. We propose that the structure of the enzyme in this complex is equivalent to the activated state generated by the oil-water interface.     

Nitric oxide in female reproductive system

Nitric oxide (NO), synthesized from L-arginine and oxygen by a family of enzymes known as nitric oxide synthase (NOS), is an effective and intercellular signal transduction molecule, and is ubiquitously present in vertebrates. To date, there are three distinct isoforms of NOS: neural NOS (nNOS), inducible NOS (iNOS), and endothelial NOS (eNOS). Among them, eNOS and nNOS, also called constitutive isoforms (cNOS), require calcium for activity, and are expressed constitutively in the physiological condition. The third isoforms, iNOS, whose activity is not dependent on calcium, are produced only in response to some stimulus, including cytokines and immune stimulating factors, etc.[1].     

侧耳菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究

对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶能力强且产酶速度较快的侧耳 sp 2 (Pleurotussp 2 )进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析 .结果表明 ,该菌株在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、漆酶和半纤维素酶等 4种酶的活性最高 .其中 ,锰过氧化物酶的活性峰值出现时间仅为 6 d,比其他 3种酶活性峰值期早 6 d. Pleurotus sp 2是目前已知的在液体培养条件下产锰过氧化物酶较高的菌株之一 .当该菌株培养在含有低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中时 ,锰过氧化物酶和漆酶的活性峰值均出现在第 10天 ,而半纤维素酶的活性在 4 0 d时达到峰值 .此外 ,该菌株使麦草生物质失重可达 17.6 % ,可望能成为生物制浆中原料预处理的候选菌株     

青霉PT95菌株渗出液的产生及理化性质的研究

实验观察发现,青霉PT95菌株渗出液的产生是由于菌丝互相挤压,紧密地缠绕在一起形成菌核,导致菌丝细胞液渗出,在菌落表面形成大量的渗出液.渗出液的物理和化学性质研究结果表明：渗出液的颜色随着培养时间的延长而逐渐变黄;渗出液的体积在第10天达到最大,然后迅速减少,第14天完全消失;干重随着培养时间的延长而减少.渗出液的pH值在5-6之间变化.渗出液中含有无机盐离子、氨、蛋白质、葡萄糖以及一些酶类.随着培养时间的延长,渗出液中的总蛋白、氨和无机盐离子（K^＋、Na^＋、Cl^-、P3^＋和Mg^2＋）的浓度都呈现明显下降趋势.只有Fe^2＋浓度和酸性磷酸酶活性表现为逐渐增高的趋势,葡萄糖在渗出液中含量很低,丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶活力变化不大.     

两类脂肪酸合酶中酮酰还原酶的结构、功能和药物开发前景

自然界中脂肪酸合酶（FAS）以FASⅠ和FASⅡ两种形式存在。存在于动物中的FASⅠ是由多活性中心构成的复合酶,存在于植物和细菌中的FASⅡ则是由多个独立蛋白构成的酶体系。FASⅠ和FASⅡ中催化酮酰基团还原的酶有一定同源性,酶催化动力学和酶抑制动力学的性质相似,因分子量过大,目前尚无详细的FASⅠ空间结构信息。通过比较两种类型FAS中酮酰还原酶结构与功能的异同,进一步了解FASⅠ的结构与功能。对两种不同进化程度和存在形式的同源酶进行比较研究,将有得提示复合酶的结构与功能,并得寻找新型特异性蛋白抑制剂,为新药开发提供先导化合物,具有十分重要的理论意义和应用价值。     

荧光法检测根际土壤胞外酶活性的优化

为准确测定土壤胞外酶活性,对β-葡萄糖苷酶(βG)、纤维二糖水解酶(CBH)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和亮氨酸氨基肽酶(LAP)、碱性磷酸酶(AKP)5种有关C、N、P循环的关键酶的荧光法测定进行了优化.结果发现,使用Cytation5等高灵敏度的酶标仪测定时水土比值应高于300∶1(mL∶g).5种胞外酶活性的最佳测定参数为:AKP、βG用超纯水作缓冲溶液,XH-C漩涡混匀器(60 W)混匀土壤5 min,25 ℃培养4 h;CBH用乙酸钠(0.2 mol/L,pH 5.8)作缓冲溶液,XH-C漩涡混匀器(60 W)混匀土壤5 min,25 ℃培养2 h;NAG用乙酸钠(0.2 mol/L,pH 5.8)作缓冲溶液,摇床(150 r/min)混匀60 min,25 ℃培养3 h;LAP用超纯水作缓冲溶液,摇床(150 r/min)混匀60 min,25 ℃培养1 h.本研究结论可为提高荧光法准确测定土壤胞外酶活性提供依据.