尼古丁剂量依赖性降低大鼠纹状体内多巴胺的释放

利用碳纤维电极在体(invivo)恒压伏安法检测大鼠纹状体(CPu)内由电刺激前脑内侧束(mfb)所引起的DA释放,探讨急性腹腔注射尼古丁对纹状体内多巴胺(DA)动态释放的影响.结果发现,尼古丁可导致CPu内的DA刺激-释放呈剂量依赖性降低,其中0.6mg/kg的尼古丁可明显降低DA的释放量,与生理盐水组相比差异显著.     

电针对帕金森病模型大鼠纹状体多巴胺及代谢产物的影响

目的:研究电针对帕金森病大鼠纹状体多巴胺及代谢产物的影响并进行对比分析。方法:将6-OHDA注入中脑右侧黑质造成单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型,并随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,检测其损毁侧纹状体区多巴胺及代谢产物的含量。结果:电针组与模型组相比,纹状体区多巴胺、多巴克及高香草酸均有不同程度的升高(P<0.05)。结论:电针能提高帕金森病大鼠纹状体区多巴胺的含量,对帕金森病有一定的治疗作用。     

单侧帕金森病大鼠模型多巴胺系统损害和感觉运动功能改变

为建立完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型，通过影像学和组织学方法观察完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型的多巴胺系统的改变。在中脑内侧束（MFB）两点注射6-羟基多巴（6-OHDA）建立完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型，观察模型大鼠在自然状态下和阿朴吗啡诱导中出现的行为学改变，并通过小动物PET和免疫组织化学的方法观察大鼠脑组织内多巴胺能神经变化。结果帕金森病大鼠模型在行为学上表现了在自发状态下的患肢运动感觉能力降低；在阿朴吗啡作用下患侧肢体的运动感觉能力有所提高，但是协调性较差；组织学和影像学上表现为损毁侧纹状体、黑质、及中脑内侧传导束内多巴胺转运蛋白缺失。说明完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型表现为单侧肢体的运动感觉功能障碍，通过神经学显像技术和组织学方法能探测到损毁侧纹状体内多巴胺能神经末梢的缺失。     

MPTP致C57BL/6小鼠帕金森病模型的复制及常用的行为学分析方法

目的介绍1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱发C57BL/6小鼠的帕金森病(Parkinson disease,PD)模型的复制及常用的行为学分析方法。方法C57BL/6小鼠腹腔注射MPTP(40 mg/kg),每天1次,连续注射7 d;同时每天进行小鼠的爬杆实验、悬挂实验、游泳实验和震颤麻痹评分;最后取材,用HPLC-ECD法测定纹状体内的多巴胺含量,用Lowry法测定纹状体内的蛋白总量,并计算多巴胺(ng)/蛋白总量(mg)的比值。结果爬杆实验结果表明,PD模型组小鼠爬杆所用的时间明显长于对照组,其分值低,对照组和PD模型组间有极显著性差异(P<0.01);悬挂实验表明PD模型组小鼠悬挂能力明显低于对照组(P<0.01);游泳实验表明PD模型组小鼠游泳能力明显低于对照组,小鼠肢体运动协调情况不好,组间有极显著性差异(P<0.01);震颤麻痹评分显示,PD模型组分值很高,震颤麻痹症状非常明显,较对照组有极显著性差异(P<0.01);多巴胺含量分析显示,PD模型组多巴胺(ng)/蛋白总量(mg)的比值明显低于对照组,有极显著性差异(P<0.01)。结论用MPTP诱发C57BL/6小鼠的帕金森病模型的复制方法以及爬杆试验、悬挂实验、游泳实验和震颤麻痹评分简单可靠,是用于帕金森病治疗研究的良好方法。     

脑内移植NGF诱导的PC-12细胞治疗大鼠帕金森病的研究

实验利用SD大鼠复制6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)完全损伤型帕金森动物模型,将神经生长因子(nerve growth factor,NGF)处理后的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(plleoclxromocytoma cells,PC-12)移植人模型大鼠纹状体内,观察模型动物行为改善和移植PC-12细胞的存活情况.经行为学检测,6-OHDA动物模型复制成功率达55.1%.免疫组织化学、蛋白印迹检测结果显示模型动物黑质多巴胺能神经元数目减少,黑质酪氨酸羟化酶含量降低证明模型动物稳定、可靠.PC-12细胞经NGF(50 μg/L)连续诱导7 d,细胞逐渐平展、细胞膜变皱褶等神经元形态学特征出现后,于纹状体内行细胞移植术,经阿普吗啡(apomorphine,APO)诱导旋转行为有明显改善,蛋白印迹检测也发现移植侧具有显著的酪氨酸羟化酶免疫阳性信号.因此,NGF诱导后的PC-12细胞可以作为治疗帕金森的一种细胞供体.     

脑室注射6-羟多巴胺对达乌尔黄鼠体温及体温调节能力的影响

观察了脑室注射6-OHDA对达乌尔黄鼠体温及体温调节能力的影响。结果表明:(1)脑室注射200μg 6-OHDA产生一个短暂的急性低体温效应,在室温环境中体温下降幅度为5℃左右,在5℃寒冷环境中体温下降7℃左右。脑室注射第二个剂量6-OHDA所引起的低体温效应比第一次明显减弱;中枢投入α-受体阻滞剂可以取消此低体温效应。(2)脑室注射6-OHDA对体温调节能力仅有暂时性影响,注药20小时后,体温调节能力即可恢复,动物在寒冷环境中和正常动物一样能够维持恒定的体温。这些观察结果为应用6-OHDA于冬眠实验工作提供了一个基本的参考依据。     

高糖诱导ADTIQ的生成和多巴胺的代谢失衡

 2 型糖尿病患者比正常人更容易患帕金森病(PD),而新内源性神经毒素1-乙酰基-6, 7-二羟基-1, 2, 3,4-四氢异喹啉(ADTIQ)可能成为2 型糖尿病并发PD 的一个关键因素,ADTIQ 是由丙酮醛与多巴胺反应合成,但是其在多巴胺能神经元中的生成条件,以及在糖尿病情况下ADTIQ 的生成是否影响多巴胺代谢尚不清楚。本研究以SH-SY5Y 细胞为模型,研究ADTIQ 在细胞模型中的生成条件,发现ADTIQ 是在葡萄糖代谢旺盛的条件下,丙酮醛内源性产生与神经元内的多巴胺反应生成。研究揭示,高糖条件下,SH-SY5Y 细胞和2 型糖尿病的大鼠模型中外周多巴胺的质量浓度减少,而与多巴胺合成和转运相关的酪氨酸羟化酶和多巴胺转运体合成增加。可见,高糖能诱导SH-SY5Y 细胞内ADTIQ 的生成和多巴胺代谢的失衡,ADTIQ 的生成可能成为糖尿病并发PD 的关键因素。     

眶额叶区多巴胺对胃运动的影响及其机制研究

通过大鼠眶额叶微量注射给药,记录胃内压(Intragastric pressure,IGP),观察胃运动变化的方法,研究了眶额叶多巴胺(dopamine,DA)对胃运动调节的神经机制.结果显示,眶额叶注射DA10μg,胃内压显著升高;眶额叶单独注射DA D1受体阻断剂SCH 2μg(SCH23390,SCH),胃内压降低.眶额叶注射SCH 2μg,能阻断DA升高胃内压的作用;眶额叶注射利陪酮(Risperidon)2μg,可升高胃内压,增强胃运动.但利陪酮却不能阻断DA升高胃内压的作用;切断双侧膈下迷走神经,眶额叶注射DA增加胃内压的作用被消除.以上各组中胃收缩频率均无明显变化.实验结果表明,眶额叶内DA能增大胃内压,增强胃运动,DA对胃内压及胃运动的增强作用主要是通过D1受体介导,经过迷走神经传出.     

游泳运动对大鼠纹状体、下丘脑多巴胺的含量及其代谢的影响

目的：探讨游泳运动对大鼠纹状体、下丘脑（DA）内多巴胺的含量及其代谢的影响.方法：选取72只雄性SD大鼠,随机分成6组：安静对照组（A）、一次性力竭游泳运动组（B）、安静＋水环境组（C）、游泳耐力训练组（D）、水环境组（E）、游泳耐力训练后一次性力竭游泳运动组（F）.D组按照耐力训练方案进行负重训练,每周5次,持续7周.所有大鼠一起断头处死,各组交叉进行,迅速取出脑组织（纹状体、下丘脑）进行多巴胺浓度和单胺氧化酶B（MAO-B）活性的测试.结果：一次性力竭运动或游泳训练对下丘脑中DA含量或MAO-B活性的影响无明显影响,而纹状体DA浓度在一次性力竭运动尤其是游泳训练后都明显升高（P〈0.05）,MAO-B也有升高的趋势.结论：一次性力竭运动尤其是游泳耐力训练使DA的浓度和MAO-B活性增加,其合成和分解代谢都增加,提高了DA的转换率,以适应运动的需要,有利于改善脑机能,延缓运动疲劳,是适应运动的表现.     

高效帕金森病大鼠模型建立方法的研究

为了探索高效的帕金森病大鼠模型的建立方法,通过黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)、中脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)双位点注射和内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)单位点注射6-羟基多巴胺2种方法建立帕金森病大鼠模型;术后连续4周运用阿朴吗啡旋转试验鉴定模型是否成功,并用免疫组化方法验证大鼠的SNc多巴胺能神经元的损毁程度。结果表明:SNc-VTA组造模后1周成功率为12%,4周后成功率为72%,MFB组造模后1周成功率即达到84%,2周后的成功率则达到92%;采用2种方法均可成功建立帕金森病大鼠模型,但MFB单位点注射法在短时间内具有更高的成功率。