三种小鼠血液生理生化正常值的测定

本文通过对三种小鼠－ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠和昆明远交群小鼠的血液学和血液生化指标进行测定。其结果：⑴血液学指标：ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的嗜中性白细胞、淋巴细胞雌雄间差异显著;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠、昆明小鼠雌雄间差异不显著;昆明小鼠的白细胞比ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠的低;ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的单核细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞记数比Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小     

自然杀伤（NK）细胞在免疫缺陷小鼠体内的研究进展

为了研究自然杀伤细胞对正常人及人类恶性淋巴造血细胞的排斥作用，将严重的联合免疫缺陷突变小鼠或ｂｅｉｇｅ小鼠分别与Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠杂交。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ－ｓｃｉｄ小鼠显示成熟的Ｔ、Ｂ细胞严重丢失并伴随ＮＫ１．１细胞的百分比增加。虽然２月龄内的小鼠血清免疫球蛋白含量甚微，但７．５月龄的小鼠均可检出免疫球蛋白。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ－ｓｃｉｄ／ｓｃｉｄ小鼠与Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ＋／＋对照组小鼠比较，溶血性补体     

淋巴细胞性脉络丛胞膜炎病毒单克隆抗体的研制及初步鉴定

用提纯的ＬＣＭ病毒抗原（主要为ＮＰ６３）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，应用鼠—鼠杂交瘤技术获得了三珠（１Ｅ２、１Ｃ６和２Ｄ２）分泌抗ＬＣＭＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经检测，它们所分泌的抗体亚类分别为ＩｇＧ１（１Ｅ２）和ＩｇＭ（１Ｃ６）。亲和力为７５μｇ（１Ｅ２）和５μｇ（１Ｃ６）。腹水效价为１０５。免疫荧光阻断法和ＥＬＩＳＡ阻断试验测定结果一致，１Ｅ２的标记物能阻断２Ｄ２，但不能阻断１Ｃ６。三株ＭｃＡｂ对７种鼠源性病毒抗原（ＲｅＯ３、Ｓｅｎｄａｉ、ＭＨＶ、ＧＤⅦ、ＥＨＦＰＶＭ和Ｅｃｔｒｏ）均无反应。     

近交系NJS小鼠的生物学特性研究Ⅰ．繁殖性能与生长发育的观察

对作者培育的近交系ＮＪＳ小鼠的繁殖性能与生长发育进行观察，结果表明：ＮＪＳ小鼠的基代虽来源于ＫＭ远交群，但由于高度近交和定向选择，其产仔、泌乳等繁殖性能已大大下降。有关繁殖性能指标为：配产间隔２５．９±４．５／ｄ、胎间隔４７．１±１１．４／ｄ、窝产仔数７．６±２．６／只、离乳仔数６．２±２．３／只、离乳率８０．５±２５．２／％、初生个体重１．５５±０．１２／ｇ、泌乳力４４．６７±１７．１２／ｇ、离乳个体重１０．３５±０．９５／ｇ。３０、６０、９０日龄雄鼠个体重分别为：１７．０±２．１／ｇ、２７．８±１．７／ｇ、３１．８±２．１／ｇ，雌鼠分别为：１５．８±０．９／ｇ、２３．５±１．４／ｇ、２５．５±１．６／ｇ。与其他近交系相比较，ＮＪＳ小鼠的繁殖性能与Ｃ＿（５７）ＢＬ／６近似，比ＢＡＬＢ／ｃ、ＤＢＡ／２显著高（Ｐ＜０．０１）。离乳前后ＮＪＳ小鼠的生长速度与ＢＡＬＢ／ｃ近似，比Ｃ（５７）ＢＬ／６、ＤＢＡ／２显著快（Ｐ＜０．０１）。     

抗人肝癌单克隆抗体JHⅢ的制备及其生物学特性

用肝癌细胞株ＢＥＬ－７４０２脾内直接免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，获得一株分泌肝癌单抗的杂交瘤细胞株ＪＨⅢ，其染色体众数为９０－１１０，单抗ＪＨⅢ系ＩｇＧ２ｂ亚类。杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为１：１０＾２～１０＾３和１：１０＾６以上。ＡＢＣ法证实它对肝癌组织有较好的相关性。ＩＦＡ法也证明它对肝癌细胞ＢＥＬ－７４０２有强的阳性反应，而对其他肿瘤细胞株和肿瘤组     

HMC14单克隆抗体杂交瘤株的建立

以北京鸭红细胞提取的ＨＭＧｓ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取其脏压细胞与Ｓｐ２／０（小鼠骨髓瘤细胞）融合，经选择培养，阳性筛选，克隆化以及冻存复苏，获得了三株稳定分泌抗ＨＭＧ１４的杂交瘤细胞株，经ＷｗｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定，与其它几种ＨＭＧ无反应，抗体为ＩｇＧ１亚型。腹水ＨＭＧ１４单隆抗体经ＳｅｐｈａｄｘＣＬ－４Ｂ亲和柱得到了纯化。     

野生小鼠体外受精技术实验初探

应用实验小鼠体外受精技术对Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ与ＤＢＡ／２杂交的Ｆ１代ＤＢＦ１小鼠进行了体外受精实验研究,就体外受精相关指标与国际常规工作做了比较;同时将这些技术应用于实验动物化中的ＴＷ（Ｔｉａｎｊｉｎ Ｗｉｌｄ）野生小鼠,就小鼠精子质量、野生小鼠体外受精情况及体外受精机理做了初步探讨。     

抗氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备及其初？…

用氧化修饰脂蛋白（ａ）对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠免疫，利用淋巴细胞杂交瘤技术制备了鼠抗人氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｏｘＬＤＬ）单克隆抗体细胞株，以单克隆抗体包被建立了酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）双抗夹心法，用此法对１０列冠心病患者，６例其他心脏病患者，１０例正常健康人血浆中ｏｘＬＤＬ的含量进行了测定。结果表明，冠心病患者血浆中ｏｘＬＤＬ     

导入蓖麻毒蛋白的供体淋巴细胞在小鼠皮肤移植中产生…

以小鼠为研究对象进行皮肤移植，受体为ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，供体为Ｃ５７ＢＬ／６鼠。用氯化钙介导蓖麻毒蛋白进入供体鼠的脾细胞制成毒细胞，适时地注入受体体内。带肝蓖麻毒蛋白的供体脾细胞，一方面可提供特异移植抗原使特异的Ｔ，Ｂ淋巴细胞识别；另一方面，它被识别裂解后，释放蓖麻毒蛋白，又可杀 与其识别听Ｔ，Ｂ淋巴细胞，使受体对供体移植物产生耐受。实验共设两组，在皮肤移植前后分别用包埋蓖麻毒蛋白的供体脾细胞处理，两     

鸭乙肝病毒表面抗原特异性单抗的研制及应用

以纯化的鸭乙型肝炎病毒表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４融合,应用ＥＬＩＳＡ筛选出５Ｂ８和８Ｇ１１ ２株抗体分泌滴度较高的杂交瘤细胞,二者所分泌的单抗仅与ＤＨＢｓＡｇ发生反应,而与其它９种禽类常见的病毒均不发生反应,其亚类鉴定分别属于ＩｇＭ和ＩｇＧ２ａ。用鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）阳性鸭血清中粗提的病毒悬液进行５Ｂ８株单抗介导的ＳＰＡ胶体金     

抗Der p 2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定

目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.采用间接ELISA法、Western blot法确定单克隆抗体的免疫球蛋白的类型和亚类、相对亲和力、特异性,对单克隆抗体进行鉴定.结果:获得3株能稳定分泌高效价Der p 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,1B6为IgG1类,1G11、4B1为IgG2a类.间接ELISA法检测细胞上清效价为104~105,腹水效价为105~106.Westernblot试验证明3株单抗与Der p 2蛋白均有特异性反应.结论:成功制备了3株抗Der p 2的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立Der p 2蛋白检测和纯化的方法奠定了基础.     

抗猪促卵泡激素小鼠源单克隆抗体的研究

用猪促卵泡激素(PESH)作为抗原免疫BALB/C小鼠。通过将免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠骨髓瘤细胞(SP2/O—Ag14)进行融合,建立了九株能稳定分泌抗PFSH单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中三株杂交瘤细胞分泌的抗体被证实是对PFSH特异结合的,它们和另一种非常相近的垂体激素——猪促黄体激素(PLH)不结合。用有限稀释法对全部九株杂交瘤进行了三次亚克隆。有几种单克隆抗体被羟基磷灰石柱层析一步法从小鼠腹水所纯化。以聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测经纯化单克隆抗体制品的纯度。     

分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用弓形虫可溶性抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,取脾细胞,与Ｓｐ２／０ 细胞融合,获得３ 株能稳定分泌抗弓形虫单克隆抗体的细胞。细胞培养上清液和腹水中的单克隆抗体效价分别为１∶１６ ～２５６ 和１０ － ６ ～１０ － ７ 。单抗类型均为ＩｇＭ。杂交瘤细胞经液氮冻存１２ 个月后,复苏生长良好,分泌活性稳定。在ＭｃＡｂ－ Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 实验中,所能测出可溶性抗原的最小浓度为１０ ｎｇ／ ｍＬ     

抗基因工程人rIFN-γ杂交瘤细胞株的建立

用杂交瘤技术将基因工程人γ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）免疫的Ｂ淋巴细胞与ｓｐ２／０鼠骨髓瘤细胞融合，建立了 ３株抗 ｒＩＦＮ－γ杂交瘤细胞株。这些细胞株经两年多的传代培养仍保持稳定分泌抗体的能力，并与ｒＩＦＮ－γ及新型γ－干扰素呈特异性反应，可用于亲和层析纯化γ－干扰素．     

天花粉蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的制备及鉴定

将小鼠骨髓瘤细胞（SP2／0细胞）与经TCS免疫过的小鼠脾细胞融合,融合后的细胞悬浮于HAT培养液中进行选择性培养,挑选可以分泌TCS单克隆抗体的细胞系,再经克隆化为单克隆细胞系。用间接酶联免疫吸附法检测此细胞系分泌单克隆抗体情况。经细胞融合和2次克隆化后,获得1株可以稳定分泌TCS单克隆抗体杂交瘤细胞系,ELISA检测结果为阳性。获得了可以稳定分泌天花粉蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系,为TCS鉴定、应用奠定良好的基础。     

抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究

利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.     

抗KDR-Fc杂交瘤细胞系的建立

用杂交瘤技术建立抗KDRFc的杂交瘤细胞系,以KDRFc抗原免疫雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA间接法检测和有限稀释法克隆培养,再经稳定性检测、效价检测,筛选出分泌抗KDRFc单克隆抗体的杂交瘤细胞.得到了10株能持续分泌抗KDRFc的单克隆抗体的细胞株,其中3株分泌的单抗具有较高的生物活性、特异性和稳定性.     

BALB／c小鼠选择与腹水产量和抗体效价间关系的研究

目的观察在鼠疫F1单克隆抗体制备过程中,BALB／c小鼠的选择和饲养与所获腹水量和抗体效价的关系,为大量制备该单克隆抗体提供实验室参考依据。方法根据小鼠周龄、性别和饲养条件对BALB／c小鼠进行分组,并采用动物体内诱生法制备腹水,间接ELISA用来检测腹水中F1单克隆抗体效价。结果12～16周龄组、雄性和加强营养组小鼠所获腹水产量和效价均高于其它周龄组和对照组。结论选择适当周龄的雄性小鼠、饲养过程中加强营养和管理可适当提高腹水产量和抗体的效价。     

抗人尿激酶单克隆抗体的制备

采用常规免疫和脾内免疫相结合的方法，利用杂交瘤技术得到两个能分泌抗人尿激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株１０Ｈ１０，１０Ｄ１２。它们分泌的单克隆抗体主要识别Ｍｒ．５４，０００的高分子量尿激酶和Ｍｒ．１８，０００的尿激酶Ａ链。两种单克隆抗体与胰蛋白酶，胰蛋白酶原，胰凝乳蛋白酶和胰凝乳蛋白酶原等丝氨酸蛋白酶和酶原无交叉反应。     

小鼠免疫脾细胞与SP2／0细胞融合的杂交瘤细胞的超微结构研究

对ＳＰ２／０骨髓瘤细胞、免疫脾细胞和由二者融合而分泌抗水貂肠炎病毒（ＭｉｎｋＥｎｔｅｒｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ，ＭＥＶ）单克隆抗体的杂交瘤细胞超微结构进行了研究．经ＭＥＶ免疫的动物的脾细胞糙面内质网发达，细胞质与细胞核的比例增大．贴壁生长的ＳＰ２／０细胞的表面中央为微绒毛集中区，其余部分则遍布皱褶，细胞质中内质网不发达．由ＳＰ２／０细胞和免疫牌细胞融合形成的杂交瘤细胞，表面均匀分布有皱褶，无微绒毛，细胞在贴壁基部周围伸出裙状伪足，扩大了贴壁面积，使细胞贴壁较牢固．本实验还对ＳＰ２／０细胞和杂交瘤细胞的染色体做了计数，二者的平均数分别为６７和９７，在传代培养中染色体有丢失现象．