影响洋葱表皮细胞骨架制片效果的探讨

以洋葱表皮细胞为材料,探究其经卡诺氏液固定后进行细胞骨架制片观察时,1%Triton X-100抽提非骨架蛋白的最佳时间,并研究洋葱不同表皮细胞及经不同理化因素处理的材料,经卡诺氏液固定后进行细胞骨架制片的步骤及制片效果。结果表明:经卡诺氏液固定后,1%Triton X-100抽提非骨架蛋白内表皮30min较佳,外表皮25min较佳;不同成熟度的鳞片叶细胞骨架形态及稳定性有差异;经紫外线、温度、秋水仙素处理后增加固定步骤再制片对制片观察结果基本无影响。     

不同处理条件对细胞骨架形态的影响

从试验材料、抽提剂种类、抽提时间、抽提剂浓度、戊二醛固定时间5个方面对细胞骨架的显微观察结果进行了探讨。结果表明:大葱、小葱、韭菜可替代洋葱作为细胞骨架材料;以韭菜作为细胞骨架材料时,1%Triton X-100在25~30 min抽提杂蛋白的效果较好;Triton X-100浓度在1%~3%时能较清淅观察到细胞骨架;戊二醛固定时间在15~25 min时细胞骨架观察效果比较好。     

植物细胞骨架观察实验的改进与优化

从实验对象及其取材部位、抽提试剂的种类及其浓度、抽提时间、固定液种类等10个方面采用控制变量法对植物细胞骨架的显微观察方法进行了优化改进。结果表明:以蒜苗白色根茎部中段内表皮细胞代替传统的洋葱内表皮细胞为实验材料,使用1%Triton X-100作为抽提试剂抽提25 min去除杂蛋白,选用戊二醛作为固定液固定45 min,最后只需使用考马斯亮蓝R250染色10 min便能够观察到清晰的细胞骨架。此外,实验前将样本置于1 mol/L的甘露糖溶液中预处理浸泡5 min,细胞骨架的观察效果更佳。     

人口腔上皮细胞骨架观察实验的建立

细胞骨架是真核生物细胞的重要结构,研究细胞骨架的形态对进一步研究其功能具有重要意义。以建立一种在光学显微镜下观察到清晰的人口腔上皮细胞的细胞骨架的实验方法为目的,从实验材料的预处理、抽提时间、固定时间三个方面对现有的实验方法进行了改进和优化。结果表明,以人口腔上皮细胞为实验材料,取材后置于1 mol/L的甘露糖中预处理5 min,使用1%Triton X-100作为抽提试剂抽提25 min,使用3%戊二醛作为固定液固定20 min,最后只需使用考马斯亮蓝R250染色10 min便能够观察到清晰的细胞骨架结构。     

KAx-3和AK127细胞发育期间的骨架蛋白组分比较研究

采用生化抽提骨架蛋白和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较盘基网柄菌AK127细胞和KAx-3细胞骨架蛋白的结果显示,各发育时期的KAx-3和AK127细胞骨架蛋白在含量和组分方面存在一定的差异.在整个发育阶段两种类型细胞共有的蛋白组分是103.4 kD、49.6 kD、44.2 kD、30.8 kD、19.8 kD和13.5 kD条带,其中44.2 kD和30.8 kD是最稳定的细胞骨架成分,并不因AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.它们与其他骨架蛋白组分一起为细胞提供有力的支持,保证发育的顺利进行.差别最为明显的蛋白条带是87.2 kD、68.2 kD和40.7 kD蛋白,由于同时期的突变型细胞不能显示这些蛋白条带;说明这些条带是发育所需的蛋白.值得注意的是突变型细胞也出现一条特征性的21.1 kD的蛋白条带.分析认为这些变化一方面与盘基网柄菌发育过程有关,另一方面与突变细胞缺乏gp150分子有密切关系.     

KAx-3细胞和AK127细胞发育期间细胞骨架蛋白组分比较研究

采用生化抽提骨架蛋白和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较盘基网柄菌AK127细胞和KAx-3细胞骨架蛋白的结果显示，发育各时期的KAX-3和AK127细胞骨架蛋白在含量和组分方面存在一定的差异.在整个发育阶段两种类型细胞共有的蛋白组分是103.4kD、49.6kD、44.2kD、30.8kD、19.8kD和13.5kD条带，其中44.2kD和30.8kD是最稳定的细胞骨架成分，并不因AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.它们与其他骨架蛋白组分一起为细胞提供有力的支持，保证发育的顺利进行.差别最为明显的蛋白条带是87.2kD、 68.2kD和40.7kD蛋白，由于同时期的突变型细胞不能显示这些蛋白条带；说明这些条带是发育所需的蛋白.值得注意的是突变型细胞也出现一条特征性的21.1kD的蛋白条带.分析认为这些变化一方面与盘基网柄菌发育过程有关，另一方面与突变细胞缺乏gp150分子有密切关系.     

植物油精炼废白土再生技术的实验研究

植物油精制过程产生大量含油废白土,如果不能有效处理会对环境造成污染,同时也造成资源浪费。采用溶剂抽提法对植物油精炼废白土进行再生研究,选用石油醚(90~120℃)为非极性抽提溶剂,95%乙醇为极性抽提溶剂,首先用石油醚(90~120℃)对废白土进行抽提,得到废白土中的理想组分,然后用石油醚(90~120℃)和95%乙醇的混合溶剂对废白土进行抽提,得到废白土中的非理想组分。确定了废白土再生的最佳工艺条件:溶剂用量为100 m L溶剂/100 g废白土,石油醚和乙醇的体积比为4∶1,抽提温度50℃,抽提时间30~40 min,抽提次数以3~4次为宜。在上述条件下,废白土中总油分得率达到28%以上,再生白土比表面积达到150 m~2·g~(-1),再生白土的脱色率、活性度、游离酸、粒度、水分等质量指标基本符合要求,吸附性能得到恢复。     

TritonX-100裂解流感病毒的研究

 在流感病毒高浓度条件下,寻找TritonX-100裂解流感病毒的适宜条件.在不同条件下用TritonX-100裂解WHO推荐用2007～2008年度流感病毒疫苗毒株制备的3个亚型的流感病毒,用电镜观察裂解程度,通过蔗糖密度梯度离心纯化抗原后免疫动物,以检测疫苗的免疫效果.结果表明当流感病毒的血凝效价是1:16382,裂解时间为24h时,TritonX-100在质量分数为1%可以完全地裂解B型,质量分数达到2%才可以完全裂解流感病毒H1N1和H3N2,这说明TritonX-100对A,B亚型毒株的裂解效果不同.由于每年都要更换毒株工人生产新的流感疫苗,因此应该对使用TritonX-100的裂解不同亚型的流感病毒条件进行研究,以保证裂解疫苗的质量.     

植物油精炼废白土再生技术研究

植物油精制过程产生大量含油废白土,如果不能有效处理会对环境造成污染,同时也造成资源浪费。本论文采用溶剂抽提法对植物油精炼废白土进行再生研究,选用石油醚（沸程90～120℃）为非极性抽提溶剂,95%乙醇为极性抽提溶剂,分别用非极性溶剂和两种溶剂的混合溶剂对废白土进行抽提,得到废白土再生的最佳工艺条件：溶剂用量为100mL溶剂/100g废白土,温度50℃,抽提时间30～40min,石油醚和乙醇的体积比为4:1,抽提次数以3～4次为宜。在上述条件下,废白土中总油分得率达到28%以上,再生白土比表面积达到150m2·g-1,再生白土的脱色率、活性度、游离酸、粒度、水分等质量指标基本符合要求,吸附性能得到恢复。     

从落叶松抽提聚阿拉伯糖——半乳糖条件的选择

落叶松中水溶聚阿拉伯糖—半乳糖的抽提和利用具有重要意义。温度100℃;液比1:100;抽取4小时,是该聚糖的合理抽提条件。为节省时间、药品和能源,温度40℃;液比1:50;抽提1小时也可得到较满意的结果。落叶松的水可抽出聚糖中,主要成份是聚阿拉伯糖—半乳糖(占94.32％),其阿拉伯糖与半乳糖的糖基比是1:8,还有少量水溶性聚木糖(不足3％)。     

天然调味料对鱿鱼腐败菌的抑菌作用研究

以鱿鱼自然腐败菌为指示菌,研究大葱、生姜、大蒜提取液以及陈醋的抑菌作用。结果表明:大蒜水溶性和醇溶性提取液、陈醋对鱿鱼腐败菌有强抑菌作用,生姜仅醇溶性提取液有抑菌活性,而大葱水溶性和醇溶性提取液抑菌活性不明显。经测定大蒜水溶性提取液对鱿鱼腐败菌的最小杀菌浓度(MBC)和最小抑菌浓度(MIC)分别为原蒜液和原蒜液稀释4倍,陈醋的MBC和MIC分别为原醋液稀释16倍和32倍。在60~100℃下加热10~40 min,大蒜液的抑菌活性随着加热温度升高和加热时间的延长而降低,而陈醋的抑菌活性则在加热温度高于70℃,加热时间超过30 min后显著提高。不同比例的姜液、蒜液和陈醋混合液对鱿鱼腐败菌的抑菌效果不同,当复配液中陈醋相对含量高,而姜、蒜液相对含量低时抑菌效果好。     

白三叶草褐纹斑病病原菌生物学特性研究

从白三叶草褐纹斑病叶片上分离纯化得到病原菌束状匍柄霉[Stemphylium sarcinifoDne（Car．）Wiltsh．],并对该菌生物学特性进行研究。结果表明：病菌菌丝生长以燕麦片培养基（OA）为最适,适宜温度为15—30℃,最适温度为25％,最适pH值为8,菌丝致死温度为51℃（10min）,全光照菌丝生长最快;病菌分生孢子萌发最适温度为25℃,在pH值为7条件下萌发率最高,分生孢子致死温度为42℃（10min）,光照对孢子萌发影响不大。     

HPLC-ELSD法测定清开灵滴丸中胆酸和猪去氧胆酸的含量

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定清开灵滴丸中胆酸和猪去氧胆酸含量的方法.采用汉邦C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸-甲醇-乙腈溶液(25∶60∶15),柱温30℃,漂移管温度为105℃,空气流速2.2 L/min.胆酸和猪去氧胆酸的进样浓度分别在0.598¹.596 mg/mL(r=0.9992)和0.6001.596 mg/mL(r=0.9992)和0.600⁰.1.600 mg/mL(r=0.9995)范围内其线性关系良好,胆酸和猪去氧胆酸平均回收率分别为99.74%和99.21%.该方法准确,简便,分离度高,重现性好,可用于清开灵滴丸中胆酸和猪去氧胆酸含量的测定.     

短时低温对绞股蓝种子萌发的促进作用

为探索提高绞股蓝种子萌发率的方法,分别探讨了不同光温、激素、储存、低温层积和短时低温等处理对其的影响.光温处理结果表明,绞股蓝种子的最佳萌发温度是15~25 ℃,光照可适当提高萌发率,但在最适温度20 ℃时,萌发率最高也仅为（31.54±2.04）%;激素处理结果表明,细胞分裂素（如6-BA和玉米素）对绞股蓝种子的萌发没有促进作用,赤霉素中GA3对其萌发没有显示出促进效果,但GA4对绞股蓝种子的萌发有一定的促进作用,在光照条件下萌发率最高可达（54.00±2.65）%;在18 ℃下,储存时间处理结果表明,一定的存放时间有利于打破其自身休眠机制,但时间过长种子的萌发率迅速下降,甚至不再萌发;低温层积处理结果表明,低温层积对萌发的促进作用不明显,低温层积90 d的种子在光照下的萌发率是最高的,仅能达到（34.26±3.21）%;短时低温处理结果表明,5,10,15 ℃条件下湿藏9 d后,绞股蓝种子的萌率分别可以提高到（73.06±2.12）%,（83.14±3.25）%和（72.13±3.52）%.储存处理与储存后短时低温处理的对比结果表明,随着储藏时间增加,绞股蓝种子的萌发率迅速下降,而短时低温层积对长时间存放的种子也有一定的萌发促进作用.     

高效液相色谱法测定开口箭药材中绿原酸含量

以体积分数50%的甲醇溶液为溶剂,用超声提取法从开口箭药材中提取绿原酸,用高效液相色谱法检测提取液中绿原酸含量。提取条件为:超声功率240 W,超声频率40 kHz,提取温度60℃,超声提取30 min。色谱条件为:色谱柱为Inertsil ODS-3C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液(体积比9∶91)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长327 nm,柱温30℃。绿原酸在0.255³.06μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系,y=31 388x+152.43(R2=0.999 9),平均加样回收率99.4%,RSD为2.12%(n=3)。检测结果表明,不同产地开口箭药材中绿原酸的含量有一定的差异,其变化范围在32.843.06μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系,y=31 388x+152.43(R2=0.999 9),平均加样回收率99.4%,RSD为2.12%(n=3)。检测结果表明,不同产地开口箭药材中绿原酸的含量有一定的差异,其变化范围在32.84⁶.62μg/g。该方法简便、准确、重复性好,可用于开口箭药材的质量控制。     

超声波辅助萃取高粱红色素的研究

从高粱壳中提取高粱红色素,通过超声波预处理,采用单因素试验和L9（34）正交试验,考察固液比,提取温度,提取时间,乙醇浓度对高粱红色素提取率的影响。确定最佳提取工艺为：超声波频率20-25 kHz,功率100 W,每次30 s,间隔10 s,超声波输出总时间20 min,固液比1：8,提取温度60℃,提取时间1 h,乙醇浓度75%,最大提取率为15.36%。较传统的乙醇提取法高6.83%。     

不同温度酒精用于高热患者物理降温的效果分析

目的：比较常温酒精与温热酒精为高热患者擦浴的降温效果.方法：采用38℃-39℃温热酒精与30℃常温酒精对50例住院高热患者进行物理降温，观察比较两种方法在擦浴30min及60min后的降温效果.结果：温热酒精对高热患者的降温效果在30min后明显优于常温酒精（P＜0.05）；在擦浴60min后，两者的降温效果差异无显著性（P＞0.05）.结论：温热酒精擦浴的降温效果在30min后明显优于常温酒精，且快速降温效果显著.     

辅酶Q_(10)酸热破碎法提取工艺条件的研究

为了研究酸热法提取辅酶Q10的最佳工艺条件,系统研究了酸的种类,破壁温度,酸的浓度,酸的添加量,破壁时间等因素对辅酶Q10提取效果的影响.结果表明,酸热法提取辅酶Q10的最佳工艺条件为:盐酸浓度3 mol/L,盐酸的添加量10 ml/g(干菌),破壁温度90℃,破壁时间25 min.     

桑叶多糖的提取工艺研究

研究了水浸提法提取桑叶多糖的工艺条件,比较了超声法、酶法和微波法等不同的前处理方法对桑叶多糖提取效率的影响．结果表明：（1）水浸提法提取桑叶多糖的较优方案为：温度80℃、时间1h、料液比1：40,桑叶多糖的得率约为11．50％．（2）超声法辅助提取桑叶多糖的较优方案为：超声功率300W,超声处理10min,之后水浸提多糖的得率为12．25％．（3）纤维素酶为桑叶多糖的最佳酶提取剂,其酶解的较优方案为：酶用量为桑叶量的1．5％,酶解时间2h,酶解温度50℃,酶处理后水提多糖得率为12．49％．（4）微波辐射时间以8min为宜,微波法辅助提取多糖得率为11．68％．（5）比较4种处理方法提取桑叶多糖的得率,依次为：酶辅助法〉超声辅助法〉微波辅助法〉水浸提法,综合考虑成本、工作效率等因素,以超声法前处理、水浸提桑叶多糖得率较高．