甘草黄酮的提取及影响活性因素研究

研究了我国3种主要甘草品种的总黄酮提取方法，采用HPTLC法定性检测和分光光度法测定含量，并应用对DPPH清除率研究影响其活性的几个因素．结果表明：在总黄酮的含量方面，光果甘草〉乌拉尔甘草〉胀果甘草；甘草品种、应用微波处理和甘草放置时间等因素对活性都有着较大影响，而提取温度对活性几乎不产生影响．     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

维药异常黑胆质成熟剂的抗肿瘤作用及其对细胞迁移的影响

探讨维药异常黑胆质成熟剂(ASM)抗肿瘤作用及其对肿瘤细胞迁移的影响.体外培养人肝癌Bel-7402细胞株、人乳腺癌BCAP 细胞株、人宫颈癌 Hela 细胞株、人胃癌BGC-823细胞株,采用四甲基偶氮唑蓝(tetrzolium-based colorimetric assay,MTT)法检测不同浓度ASM(1、2.5、5、10、15、20、50mg/mL)对人肝癌Bel-7402细胞株、人乳腺癌BCAP细胞株、人宫颈癌Hela细胞株、人胃癌BGC-823细胞株4种肿瘤细胞增殖的影响;选择人肝癌Bel-7402细胞株为研究对象,采用细胞划痕运动实验和扫描电镜技术,观察不同浓度ASM对肝癌细胞迁移的影响.MTT检测结果显示,ASM对人肝癌Bel-7402细胞株、人乳腺癌BCAP细胞株、人宫颈癌Hela细胞株、人胃癌BGC-823细胞株生长均有一定抑制作用,且在15～20mg/mL作用下最为明显,对不同肿瘤细胞株抑制作用不一;体外细胞划痕运动实验和扫描电镜结果显示,ASM对人肝癌Bel-7402细胞运动有一定抑制作用.由此推论,ASM对肿瘤细胞增殖和肿瘤细胞迁移有一定抑制作用.     

人工栽培胀果甘草中黄酮类化合物的提取与分析

采用冷浸乙醇提取法对兰州人工引种栽培的6年生胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Batal)根中总黄酮和总皂甙类化合物进行了提取分离与含量分析, 并且采用重量法和3种紫外 可见分光光度法对胀果甘草根中总黄酮含量进行了测定和比较分析. 研究表明, 3种分光光度测定方法中, 黄酮含量以直接测定法为最高, 氯化铝显色法次之, 硝酸铝显色法最低; 直接测定法测定样品中的黄酮含量因不受显色剂干扰, 测定结果相对更为准确可靠.     

我国药用甘草产地及原植物的研究

作者将我国历代记载的药用甘草产地进行了考证与澄清,并对甘草药材商品的原植物进行了研究、最后确认我国东北甘草。西北甘草为乌拉尔甘草,新疆甘草为乌拉尔甘草、光果甘草、胀果甘草,黄甘草和少量的石河子甘草和光果甘草的几个变种,西班牙甘草是光果甘草,伊朗和伊拉克甘草是光果甘草的变种蓝花甘草;苏联甘草为乌拉甘草及光果甘草的变腺种毛甘草。中国产的粗毛甘草、刺果甘草、云南甘草,苏联产的刺毛甘草,美国的鳞片甘草都不作药用。最后作者阐叙了甘草资源的枯竭与人工栽培的必要性。     

甘草叶总黄酮提取工艺

为建立一种高效提取甘草叶中总黄酮的方法,对比研究了闪式提取、索氏抽提、搅拌提取、超声波提取4种方法对胀果甘草叶总黄酮的提取效果,并利用正交实验对总黄酮的闪式提取工艺进行了优化。结果表明：闪式提取法所用提取时间短,提取溶剂用量少,各因素对总黄酮提取效果的影响程度依次为固液比〉乙醇浓度〉提取时间,最佳提取工艺为固液比1：40,乙醇浓度70％,提取时间6min．闪式提取法是一种高效、快速提取甘草叶中总黄酮的方法。     

响应面Box-Behnken设计优化超声波辅助法提取甘草总黄酮的工艺研究

以甘草为原料,碱性乙醇溶液为提取剂,采用超声波辅助法提取甘草总黄酮。在单因素试验的基础上,以乙醇浓度、氨水浓度、液固比、超声温度及超声时间为响应变量,甘草总黄酮提取率为响应值,利用Box-Benhnken设计进行响应面分析,确定甘草总黄酮的最佳提取工艺条件。结果表明,甘草总黄酮的最佳提取工艺为：液固比11,氨水体积分数1.0％,乙醇体积分数66％,超声时间20min,超声温度74℃。在该条件下,甘草总黄酮提取率为2.15％。     

甘草查尔酮B体外细胞毒作用研究

为考察甘草查尔酮B(Licochalcone B)对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用,初步探讨其作用机制,本研究采用MTT染色法检测甘草查尔酮B对5种肿瘤细胞人乳腺癌细胞(MCF-7)、人膀胱移行细胞癌细胞(T24)、人宫颈癌细胞(HeLa)、高转移性小鼠黑色素瘤细胞(B16F10)、小鼠黑色素瘤细胞(B16F0)的增殖抑制作用;台盼蓝拒染法测定甘草查尔酮B对B16F0细胞的致死率;相差显微镜观察细胞形态;JC-1染色测定线粒体膜电势(△Ψm)。结果表明:甘草查尔酮B(5、7.5、10、12.5、15μg/mL)可浓度依赖性地抑制5种不同肿瘤细胞的增殖,在最高浓度时,抑制率分别为67.52%、67.24%、65.41%、62.81%、68.13%;随甘草查尔酮B处理浓度的增加,B16F0细胞死亡率升高,细胞皱缩,脱落细胞增多;甘草查尔酮B可明显降低B16F0细胞的线粒体膜电势,且呈现浓度依赖性。以上结果显示:甘草查尔酮B对多种肿瘤细胞体外增殖均有明显的抑制作用,这可能与其所致的线粒体损害有关。     

枸杞叶中总黄酮对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响

研究枸杞叶中总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2增殖抑制及其细胞凋亡的影响.用不同质量浓度的枸杞叶总黄酮作用于体外培养的人肝癌细胞HepG2,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测HepG2细胞存活率,通过Hoechst33258染色法、AV/PI双染流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况,利用免疫细胞化学法、Western blot方法分析枸杞叶中总黄酮对HepG2细胞凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达的影响.结果表明,枸杞叶中总黄酮分别作用于人肝癌细胞HepG2 48,72h均可明显抑制其增殖,并呈现显著的时间、剂量依赖性.高质量浓度枸杞叶总黄酮作用人肝癌细胞HepG2 48h后,HepG2细胞呈现出典型的细胞凋亡特征,凋亡率达67.3%.枸杞叶总黄酮作用于HepG2细胞一定时间后,可引起促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达上调.枸杞叶中总黄酮可明显抑制人肝癌细胞HepG2增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能是通过有效上调促凋亡蛋白Bax,破坏细胞内稳态环境,继而激活凋亡蛋白Caspase-3,最终引发人肝癌细胞HepG2凋亡.     

新疆甘草属(GLYCYRRHIZA L.)生态分布及其利用

新疆分布甘草属(Glycyrrhiza L.)植物五种:甘草(G.uralensis)、光果甘草(G.glabra)、胀果甘草G.inflata)、粗毛甘草(G.aspera)、科氏甘草(G.korshin-skyi)。本文用一元处理方法,首先分析了各种甘草分布区与其邻近地区的分布关系。研究了各种甘草对年均温度、年积温、无霜期、年均相对湿度等主要生态因子的适应幅度,其序列是:甘草>粗毛甘草>光果甘草>胀果甘草>科氏甘草;各种甘草分布区的海拔高度与干燥度的幅度,其序列是;甘草>胀果甘草>粗毛甘草>光果甘草>科氏甘草。分析了各种甘草在各群落中的形态特性与生长发育状况。还绘制了新疆甘草地理分布图,提出三项合理开发利用新疆甘草资源的措施。     

应用过氧化物酶(POD)同工酶对甘草属不同种的亲缘关系的研究

对甘草属植物的长荚果系的8个种和4个变种,采用聚丙烯酸胺凝胶电泳法,分析它们过氧化物酶同工酶的变化,结果表明:甘草属内的每个种具有明显的酶谱差异,有它们自己的特征酶带。从酶带谱的相似度指数来看,12G.glabra,12aG.glabra L.var.Rlandulis,12bG.glabra,5G.xhiheziensis,6G.eurycarpa,6aG.eurycarpa,9G.Korshinskyi,10aG.shiheziuralensis的相似度指数较高,它们的亲缘关系较为密切,而7G.alalensis,10G.uralensis的相似度指数较低,亲缘关系较远。     

中国北部地区药用甘草的生态学特性及群落分类

本文报导我国北部药用甘草的生物学特性和群落学分类系统.目的是为人工驯化栽培提供生态学依据,并为甘草野生资源的利用和保护提供资料.     

Glycyrrhizic acid inhibits virus growth and inactivates virus particles.

Screening investigations in antiviral action of plant extracts have revealed that a component of Glycyrrhiza glabra roots, found to be glycyrrhizie acid, is active against viruses. We report here that this drug inhibits growth and cytopathology of several unrelated DNA and RNA viruses, while not affecting cell activity and ability to replicate. In addition, glycyrrhizic acid inactivates herpes simplex virus particles irreversibly.     

胀果甘草愈伤组织生长和多糖合成的调控

为了研究培养基基本成分、碳源以及离子浓度对甘草愈伤组织生长和多糖合成的影响,以MS,6,7-V为基本培养基,改变碳源、PO43-及Ca2+浓度,分析胀果甘草愈伤组织生长及多糖产量.结果表明:MS培养基附加蔗糖最利于甘草愈伤组织生长,6,7-V培养基虽利于甘草多糖的合成但不利于愈伤组织生长从而影响多糖产量.当培养基中PO43-浓度为1.25mmol/L、Ca2+浓度为2.99mmol/L时,甘草愈伤组织生长量积累最高,同时对多糖的生物合成也最为有利.高浓度的PO43-和Ca2+有利于甘草多糖的合成,但不利于愈伤组织的生长.研究结果为利用生物工程手段进行甘草多糖的产业化生产提供参考数据.     

甘草属植物细胞染色体核型分析

本文对国产甘草属11种、1变种进行了染色体核型分析,2n=2x=16,并对其种间关系进行了讨论.     

山楂汁树脂降酸工艺的研究

研究离子交换树脂对山楂浸出汁降酸的效果及其影响因素.通过对比7种离子交换树脂对山楂浸出汁的静态吸附特性,测定山楂汁处理前后的总酸和黄酮含量的变化,筛选出适于山楂汁降酸的最佳离子交换树脂(D311).经实验分析,温度对树脂吸附能力影响不显著;D311树脂吸附优化条件为室温,100 mL/h流速处理;D311优化再生条件为在低流速下100 mL 1 mol/L NaOH洗脱处理.多次再生处理后,总酸吸附能力降低11.5%,黄酮吸附能力降低73.3%,黄酮的保存率可达88.8%.     

新疆野生甘草与栽培甘草的质量特征比较

为比较新疆野生甘草与栽培甘草的质量差异,本文采用粉末X射线衍射(XRD)全谱分析法和紫外分光光度法对二者进行对比分析。结果表明:野生甘草和栽培甘草在2θ值2°～30°低角度范围内指纹图谱无较大特征差异;野生甘草中主要化学成分和Fe、Mg、Ca三种微量元素的含量均高于栽培甘草,且成份比例也不同——野生甘草中三种微量元素的含量比例是1.00:6.67:107.84,而栽培甘草中为1.00:8.70:36.42。     

响应面法优化仙草黄酮提取工艺研究

采用响应面优化法对仙草中黄酮的提取工艺进行研究.将乙醇浓度、提取时间及液料比作为影响因子,在单因素试验的基础上,采用响应面Box-Behnken中心组合法,进行试验设计,将仙草中黄酮的提取率作为响应指标值,进行优化试验.试验结果说明各个因素对仙草中黄酮的提取率影响强弱次序为:乙醇体积分数液料比提取时间;仙草黄酮的最佳提取条件:乙醇体积分数60%,提取时间5 h,液料比30∶1(m L/g),该条件下得到的黄酮提取率最大,实际测定值为14.37%,与预测值(14.79%)没有显著性差异.表明响应面优化法分析的结果可信,所得的最佳提取条件为仙草中黄酮的综合利用奠定了基础.