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相似文献
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1.
以超积累生态型、非超积累生态型东南景天(SedumalfrediiHance)的嫩叶为材料,采用CTAB法、SDS法、尿素法、柠檬酸钠法提取DNA,比较不同方法提取DNA的效率.结果表明,采用4种方法提取超积累生态型东南景天和非超积累生态型东南景天的DNA,其OD260/OD280的比值在1.8~2.0之间;除柠檬酸钠法外,其余3种方法提取的DNAOD26。/OD230的比值均大于2.0;其DNA浓度和得率都是尿素法〉CTAB法〉SDS法〉柠檬酸钠法,从琼脂糖凝胶电泳图来看,也是尿素法效果最好.因此,认为尿素法适合于超积累生态型和非超积累生态型东南景天DNA的提取.  相似文献   

2.
棉花枯萎菌gDNA不同提纯方法的比例研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以棉花枯萎菌菌株为试验材料,在CTAB法,SDS-CTAB法等基础上国以改进,对4种提纯棉花枯萎菌DNA的方法进行了比较研究,结果表明,SDS-CTAB法是适合于棉花枯萎菌DNA提取的方法,该方法提取的DNA纯度高,产率高,无明显降解现象,能很好地被限制性内切酶酶切,并用作PCR模板,同时对DNA提取过程中的细节问题进行了探讨与分析。  相似文献   

3.
新疆主要梨品种ISSR分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
为建立一种简单、快捷的方法以鉴定梨种质资源,对CTAB法、SDS法和高盐法3种DNA提取方法进行了比较.结果表明,改良的CTAB法较为适合梨基因组DNA的提取.通过对TaqE,Mg^+,dNTP“模板DNA”和primer不同浓度的优化实验以及对PCR反应程序的优化筛选,建立了适合梨基因组ISSR分析的技术体系.运用该体系对梨品种进行ISSR分析,结果表明,从100对引物中筛选出的10对引物能扩增清晰带且多态性好,从而达到鉴定梨种质资源的目的,并且应用该体系构建了新疆主要梨的遗传图谱和数字指纹图谱.  相似文献   

4.
核桃DNA的提取及RAPD体系的优化   总被引:12,自引:0,他引:12  
采用CTAB法和改进的CTAB法,从叶片中提取核桃基因组DNA,比较其分离效果,结果表明:改进的CTAB法可有效去除细胞内多糖和多酚等杂质对模板DNA的污染,并以此为模板进行RAPD反应,对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立适合于核桃的RAPD-PCR反应体系,以进行该树种的分子标记研究。  相似文献   

5.
 分别用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法从蒜头果种仁中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的纯度.结果表明:用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法所提取的蒜头果基因组DNA的OD260/OD280值在1.8~2.0之间,带型清晰无拖尾,说明所提取的DNA保持完好.其中改进的CTAB法所提取的基因组DNA质量最好、纯度也最高,为蒜头果分子生物学研究及下游操作奠定了基础.  相似文献   

6.
目的:针对地衣初生、次生代谢产物丰富的特点,提出了一种适于地衣总DNA的提取方法。方法:应用改良的CTAB法,对3种常见地衣进行了总DNA提取,经过琼脂糖电泳、紫外吸收分析DNA质量。结果:3个样本DNA的A260/A280值均在1.8~2.0之间,琼脂糖电泳图像清晰。结论:改良的CTAB法简便、省时、价廉,适合于地衣总DNA的提取,获得的DNA含量高,纯度好。  相似文献   

7.
β-巯基乙醇与PVP在红干椒DNA提取中的比较研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
红干椒叶片中富含的酚类物质较多,为提取适于红干椒RAPD分析的高质量DNA,通过在CTAB提取缓冲液中分别添加β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂,研究β-巯基乙醇和PVP对红干椒叶片DNA提取质量的影响.结果证明,在CTAB提取液中添加适量的β-巯基乙醇所获DNA纯度较高,A260/A280比值在1.800附近,电泳谱带清晰,无明显拖尾现象,辣椒叶片DNA平均产量为505.83ng·μl^-1,DNA的质量和纯度满足于RAPD技术的要求.  相似文献   

8.
黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的质量。结果表明:改良CTAB法提取的DNA电泳条带清晰无RNA等污染,OD260和OD280比值在1.8左右,RAPD扩增条带清晰、无弥散现象、亮度均一。说明改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于PCR扩增反应。  相似文献   

9.
从酸奶样品中分离到2株丝状真菌N 3、N 9,根据其菌落形态和显微特征初步鉴定为担子菌.用氯化苄法提取了这2株担子菌和6株已知担子菌的DNA.为了鉴定N 3、N 9菌株的分类地位,利用RAPD技术对这8株担子菌进行了聚类分析,初步归类N 3、N 9菌株为侧耳属(P leurotus)的菌株.  相似文献   

10.
为从翅果油树(Elaeagnus mollis Diels)叶中提取高质量的基因组DNA,用PVP和TNE洗液预处理样品并筛选出合适的清洗次数,比较了SDS法、CTAB法和改进CTAB法3种DNA提取方法.结果表明:TNE和PVP预处理三次并且采用改进的CTAB法更适合于翅果油树基因组DNA提取.该方法提取的DNA经紫外分光光度法检测,其A260/A280为1.82,优于CTAB法(1.59)、SDS法(1.00).琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增结果也得出同样的结论.  相似文献   

11.
岩陀DNA提取方法研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
以岩陀植物嫩叶为材料,用不同方法对岩陀叶片DNA进行提取,比较提取的质量差异,寻找适合岩陀叶片总DNA的提取方法,以满足多基原民族药岩陀DNA条形码识别系统构建的研究需要。采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、改良的CTAB法、十二烷基硫酸钠(SDS)法及碱裂解法提取岩陀叶片总DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法及PCR扩增效果检查DNA提取的质量。结果显示四种方法均能从岩陀植物叶片中提取到基因组DNA,改良CTAB法提取的DNA纯度和完整性明显好于其他方法,且采用此法进行PCR扩增获得的目标条带明亮单一,扩增效率达到100%。改良的CTAB法是岩陀叶片总DNA的提取中最为合适的提取方法,能够满足后续DNA条形码的研究需要。  相似文献   

12.
文章通过传统CTAB法、改良CTAB法、SDS法、高盐低pH法和试剂盒法等5种方法,对菊叶香藜进行基因组DNA提取,旨在筛选一种菊叶香藜基因组DNA的适宜提取方法。同时用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对5种方法所提DNA进行检测,并对改良CTAB法提取的DNA进行RAPD-PCR扩增检测。结果表明:改良CTAB法提取速度较快,便于操作,提取的DNA质量较好,进行的RAPD-PCR扩增条带清晰,能满足分子标记的要求。因此,改良CTAB法为菊叶香藜基因组DNA可靠并合适的提取方法。  相似文献   

13.
扩展青霉(Penicillium expansum)PF898基因组DNA提取方法的比较   总被引:3,自引:2,他引:3  
利用CTAB法、SDS改进法和SDS快速法3种DNA提取代表性方法,对扩展青霉(Penicillium expansum)PF898基因组DNA的提取进行比较研究.CTAB法提取的DNA样品纯度最高,SDS裂解法制备的DNA得率最高;CTAB法和SDS改进法所得DNA都可直接应用于限制性酶切分析;3种方法所提取的DNA均能满足扩展青霉PF898脂肪酶基因和18S rRNA的PCR扩增.总体而言,SDS法简便、快速、得率高,是一种理想的扩展青霉基因组DNA提取方法.  相似文献   

14.
采用改良的CTAB法、SDS法、高盐低pH法提取蒲公英药材基因组总DNA,通过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳检测其纯度与浓度.结果表明,改良的CTAB法所得DNA纯度最高,电泳条带最清晰、完整性好,可作为RAPD,ISSR等分子生物学研究.  相似文献   

15.
采用CTAB法、改良SDS法、高盐低pH法提取了剑叶龙血树叶DNA,并通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测了不同方法的提取效果.结果表明:CTAB法所提取的DNA浓度与纯度均高于其它2种方法,泳带分布集中,无拖尾现象,A260/A280=1.81,DNA浓度为735 ng/μL,能满足RAPD、SSR/ISSR扩增的要求,是提取龙血树叶片DNA的最佳方法.  相似文献   

16.
从血液中提取基因组DNA的传统方法是先得到淋巴细胞,再用蛋白酶K、SDS消化,然后用酚、氯仿抽提,乙醇沉淀.CTAB法提取基因组DNA多应用于植物和微生物,从全血中提取基因组DNA报道甚少.采用改良的CTAB法从全血中提取基因组DNA,并以传统方法和TAKARA Blood Genome DNA Extraction Kit作对照.结果表明:CTAB法可以得到大量的、较完整的基因组DNA,并且纯度达到1.8~2.0,可以满足PCR扩增和限制酶切等实验的要求.  相似文献   

17.
快速而稳定地提取大草履虫的基因组DNA是进行后续分子生物学研究的前提.文章通过比较传统SDS法、CTABⅠ法和CTABⅡ法等提取大草履虫DNA的效果,进一步优化提取方法,获得快速稳定地提取大草履虫基因组DNA的方法.结果表明:用CTAB I法提取的DNA浓度低,杂质较多;CTABII提取的DNA电泳时检测不出条带;而SDS法提取的DNA在电泳时带型较整齐,无降解,且DNA的得率和纯度较高,但仍有蛋白质污染.针对蛋白质的去除,用SDS-蛋白酶K法和SDS-NaAc法来提取DNA,经过试验发现这2种方法都能够很好地去除蛋白质,所获DNA样品的纯度和得率都能用于进一步分子试验,而SDS-NaAc法更经济适用.  相似文献   

18.
忍冬科部分植物DNA提取方法的研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
应用改进的高盐低pH法、改良高盐法、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法和改良十二烷基硫酸钠(SDS)法,对七子花不同器官的总DNA进行了提取.结果显示,4种方法均有较好的提取效果,产率由大到小依次为改良SDS法、CTAB法、高盐低pH法、改良高盐法,纯度依次为改良高盐法、高盐低pH法、CTAB法、改良SDS法,其中高盐低pH法提取的综合效果最好.对七子花不同组织DNA的提取显示,产率由高到低依次是嫩叶、茎和老叶,质量以嫩叶和茎抽提的较高.以冰冻茎为材料应用筛选出的高盐低pH法对9种忍冬科植物的总DNA进行了提取,结果发现多糖、酚或胶类物质含量较高植物的DNA沉淀中有一定量的次生物质;对方法进行了少许改进,可以有效去除这些物质对DNA提取的干扰.  相似文献   

19.
4种提取水稻基因级DNA方法的比较   总被引:10,自引:2,他引:8  
对于含有大量硅质及多糖如酚、酯、萜等其它次生代谢产物的水稻,要从其组织中提取高质量的基因组DNA,一般比较困难,作者以水稻叶片为材料,分别采取了简易提取法,CTAB法,QIAGEN公司Dneasy Plant Mini Kits法,Shanghai Sangon公司Genomic DNA Isolation Kits法4种方法提取水稻基因组DNA;并通过质量分数为0.8%琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增的方法所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA的产量、质量和耗费等方面进行简要比较,并根据分子生物学研究工作的实际特点,确定了CTAB沉淀法为最佳方法。  相似文献   

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