家蚕BmMet2基因的组织定位与激素诱导表达分析

Met作为保幼激素(JH)的受体, 能编码bHLH-PAS结构域结合DNA并调控下游基因的表达。为了探究BmMet2是否作为JH的受体参与调控家蚕的生长发育,以家蚕为材料,用生物信息学方法分析了BmMet2蛋白结构,利用实时定量PCR检测其在翅原基不同时期和激素诱导下的表达情况;原核表达了BmMet2中能与DNA结合的蛋白区域BmMet2DBD,并制备了抗体;利用蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组化检测了BmMet2在家蚕多个时期和各组织中的定位表达情况。结果显示:在翅原基中,BmMet2在5龄第3天和5龄第6天有较高水平的表达,蛹期的表达量较低,这与家蚕体内JH的滴度一致;BmMet2在5龄第6天、吐丝期和预蛹期的胸节表皮、脂肪体及翅原基等组织中都有较高的表达;JH和20E均对BmMet2有不同程度的诱导,说明其可能同时参与了JH和20E的调控, 进而参与调控家蚕变态发育过程。     

家蚕非编码RNA Bm-152功能初探

Bm-152是前期研究中发现的一个在家蚕丝腺中高表达的非编码RNA.采用实时荧光定量PCR技术对Bm-152在家蚕5龄到预蛹期不同发育天数丝腺中的表达谱进行检测.同时,在个体中过表达Bm-152,检测Bm-152可能参与的信号通路.结果显示,Bm-152在家蚕5龄幼虫丝腺发育过程中无明显的变化规律,但在吐丝第1天表达量较高,随后表达量又下降.通过在血淋巴中注射2μg piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-152]过表达载体,48h后发现Bm-152在丝腺组织中无明显过表达,但在非丝腺组织中可实现明显过表达,且表达量上调1.66倍;蜕皮激素信号通路基因Usp在非丝腺组织中上调1.95倍,E75A在非丝腺组织中上调2.26倍,保幼激素信号通路基因Met在非丝腺组织中上调1.79倍.表明非编码RNA Bm-152可能通过蜕皮激素和保幼激素信号通路参与家蚕发育,该结果为进一步探索Bm-152的功能提供了方向.     

外源激素对褐飞虱翅型分化的影响

以褐飞虱为研究对象,首次使用保幼激素类似物ZR-515和具有蜕皮激素活性的新型化合物RH-2485表面处理飞虱3龄或4龄若虫,来研究外源激素对飞虱翅型分化的影响。结果表明:ZR-515可诱导短翅型分化,当用1μg/μL的ZR-515处理3龄若虫时,短翅率达到60.48%;而用1μg/μL及100 ng/μL的ZR-515对4龄期若虫进行处理时,短翅率则分别达到59.09%和77.78%;同时发现ZR-515对褐飞虱翅型分化的作用也表现出性别的差异,形成的雄虫个体中短翅型明显增多,如用1μg/μL和100 ng/μL的ZR-515分别处理3龄若虫,形成的雄虫中短翅型个体分别达到98.74%和83.33%,若处理4龄若虫,雄虫短翅型个体也分别高达86.67%和94.44%,与对照组相比差异显著。RH-2485对翅型分化无明显影响。     

抗保幼激素的应用前景

有关昆虫发育的激素,目前已知的有脑激素(PTTH)、保幼激素(JH)、蜕皮激素(MH)、滞育激素(DH)和羽化激素(EH)。本世纪七十年代,随着昆虫激素研究的深入,人们发现一些化学物质能引起昆虫的早熟变态,有的并随之产生体色变化和生育障碍。这类化学物质,阻碍了昆虫体内JH正常的合成、释放、运输和接受。虽然此类化学物质并不是昆虫本身分     

EcR-RNAi和印楝素处理斜纹夜蛾幼虫诱导腹足发育受阻表型(英文)

蜕皮激素是一种可以诱导一系列变态发育关键过程的昆虫蜕皮调节激素,与蜕皮激素受体结合以后与配体蛋白Usp作用形成一个复合体发挥作用.通过兼并引物克隆获得斜纹夜蛾一个600 bp的EcR cDNAs片段编码200个氨基酸,斜纹夜蛾是东亚地区一种主要的农作物害虫.利用这段序列设计了EcR-dsRNA通过注射幼虫的实验来分析EcR基因在不同发育阶段的功能.同时利用印楝素喂食RNAi注射的幼虫观察其与正常对照组有何发育差异.结果显示EcR RNAi会影响正常的蜕皮过程并导致不完成蛹化,在EcR RNAi注射并喂食印楝素的实验组,幼虫出现生长迟缓、发育进程紊乱和腹足发育不正常等现象,由此推测印楝素和EcR RNAi或许影响了蜕皮级联调控通路,由此引发变态发育过程中组织重建紊乱.     

昆虫蜕皮激素、幼龄激素的化学和生物学

昆虫在一生中要经过从卵到成虫的多次变态。迄今已经证实,昆虫的变态是受蜕皮激素和幼龄激素相互协调地控制的。这些激素的化学结构和人工合成已被突破。并且,已经开始研究与这些激素作用相反的所谓拮抗物的作用,试图从相反的方面打乱昆虫的变态过程,从而达到防治害虫的目的。研究表明,昆虫激素具有潜在的广泛应用的可能性。去年日本《化学与生物》杂志的一篇文章,介绍了研究蜕皮激素和幼龄激素的最新成果。本刊本着“洋为中用”的精神予以译载,希望引起有关方面应有的注意。     

家蚕表皮型几丁质合成酶基因BmCHSA-2a的鉴定及其对激素的响应

文中采用5'Race方法获得了家蚕几丁质合成酶基因(BmCHSA-2a)的第1外显子(Exon 1,141 bp)和第2外显子(Exon 2a,106 bp),证明外显子2a在鳞翅目昆虫几丁质合成酶中高度保守.根据该外显子序列设计引物,分析BmCHSA-2a对激素的响应,结果表明:蜕皮激素(Ecdysone,20E)抑制BmCHSA-2a的表达;保幼激素(Juvenile Hormone,JH)间接促进其表达.根据家蚕基因组所预测的启动子序列,扩增了调控BmCHSA-2a表达的启动子,证明蜕皮激素抑制启动子活性,并存在大量蜕皮激素通路BmFTZ-F1的调控元件.对BmFTZ-F1表达调控的进一步研究表明:蜕皮激素抑制其表达.研究结果初步分析了家蚕表皮几丁质合成酶基因BmCHSA-2a可能的表达机制,为深入研究其表达调控机理及发现害虫防治新靶标提供了理论基础.     

神经激素对蝗虫配子发生的影响

激素对昆虫的配子发生有很大作用,就昆虫激素、包括保幼激素、蜕皮激素以及昆虫脑肽等 对昆虫特别是蝗虫配子影响作了介绍.     

家蚕促咽侧体素受体基因克隆及发育表达

文章克隆得到家蚕(Bombyx mori)神经肽促咽侧体素受体基因(Allatotropin receptor,BommoATR),开放阅读框全长为1 254 bp,编码416个氨基酸.Bommo-ATR氨基酸序列的二级结构预测为7次穿膜蛋白,符合GPCR家族成员的典型特征.实时荧光定量PCR结果表明,家蚕脑-咽下神经节复合体中的ATR mRNA在5龄幼虫期表达量最高,其次为蛹后期,蛹前期和成虫阶段表达量最低.其中5龄幼虫第2天表达量最高,1～5 d持续维持较高的表达水平,这可能与保幼激素的合成有关.     

EcR-RNAi和印楝素处理斜纹夜蛾幼虫诱导腹足发育受阻表型(英)简

蜕皮激素是一种可以诱导一系列变态发育关键过程的昆虫蜕皮调节激素,
与蜕皮激素受体结合以后与配体蛋白~Usp~作用形成一个复合体发挥作用.
通过兼并引物克隆获得斜纹夜蛾一个~600~bp~的~EcR
cDNAs~片段编码~200~个氨基酸, 斜纹夜蛾是东亚地区一种主要的农作物害虫.
利用这段序列设计了~EcR-dsRNA~通过注射幼虫的实验来分析~EcR~基因在不同发育阶段的功能.
同时利用印楝素喂食RNAi注射的幼虫观察其与正常对照组有何发育差异.
结果显示~EcR RNAi~会影响正常的蜕皮过程并导致不完成蛹化, 在~EcR
RNAi~注射并喂食印楝素的实验组,
幼虫出现生长迟缓、发育进程紊乱和腹足发育不正常等现象,
由此推测印楝素和~EcR RNAi~或许影响了蜕皮级联调控通路,
由此引发变态发育过程中组织重建紊乱.     

斜纹夜蛾前胸腺的生长发育研究

 通过解剖观察4龄至蛹期斜纹夜蛾前胸腺,对其形态特点和生长发育规律进行了研究,主要结果如下：发现斜纹夜蛾前胸腺由53个左右的圆形或椭圆型细胞成串组成,Y型,成对,外围包裹一层透明鞘膜,位于胸部第一气门的气管丛内;在斜纹夜蛾4龄到蛹期的发育过程中,前胸腺不发生有丝分裂,细胞数量基本恒定;前胸腺细胞直径在幼虫发育期间不断增大,斜纹夜蛾幼虫在4龄第1天的前胸腺直径为(28.80±0.47) μm,而到了6龄末期,则增加到(92.22±2.43) μm;幼虫期的斜纹夜蛾前胸腺细胞直径和虫体体质量呈显著相关,r=0.826,P=0.000,拟合曲线方程为Y=82.1X ^0.263;此外,幼虫期的斜纹夜蛾前胸腺细胞直径和虫体体长也呈现出显著相关,r=0.886,P=0.000,拟合曲线方程： Y=e^{(4.781-1.863/Z)}。     

咪唑类化合物对天蚕幼虫生长发育的影响

本文报告了咪唑类化合物——金鹿三眠素对天蚕幼虫生长发育的影响。三龄0～48小时喂饲浸渍过500～2000ppm三眠素溶液的白栎鲜叶后,三眠蚕诱导率最高可达94.56％;诱导所得三眠蚕三、四龄历期明显延长,四龄起蚕体重和四龄末丝腺鲜重重于正常四眠蚕(对照),而三龄至结茧的总历期和熟蚕体重、丝腺鲜重则反之;仍为四眠蚕的三、五龄历期和三龄至结茧的总历期多长于对照、四龄起蚕和熟蚕体重大多重于对照。四龄0～48小时喂饲浸渍过500～2000ppm三眠素溶液白栎鲜叶后,极大多数仍为四眠蚕,三眠蚕诱导率最高仅为9.88％;其中四眠蚕四、五龄历期和四龄至结茧的总历期大多长于对照;诱导所得三眠蚕的四龄历期明显长于对照,但总历期反之。三眠蚕四龄期丝腺鲜重增长明显快于正常四眠蚕,但最终鲜重不及正常四眠蚕。     

家蚕表皮型几丁质合成酶基因BmCHSA-2a的鉴定及对激素响应

文中采用5'Race方法获得了几丁质合成酶基因（BmCHSA-2a）的第1外显子（Exon 1, 141 bp）和第2外显子（Exon 2a,106 bp）,证明外显子2a在鳞翅目昆虫几丁质合成酶中高度保守. 根据该外显子序列设计引物,分析BmCHSA-2a对激素响应分析. 结果表明蜕皮激素(Ecdysone ,20E)抑制BmCHSA-2a的表达,而保幼激素(Juvenile Hormone, JH)间接促进其表达. 根据家蚕基因组所预测的启动子序列,扩增了调控BmCHSA-2a表达的启动子,证明蜕皮激素抑制启动子活性,并存在大量蜕皮激素通路BmFTZ-F1的调控元件,对BmFTZ-F1表达调控的进一步研究表明,蜕皮激素抑制其表达. 研究结果初步分析了家蚕表皮几丁质合成酶BmCHSA-2a可能的表达机制,为深入研究其表达调控机理及发现害虫防治新靶标提供了理论基础.     

马尾松毛虫幼虫生殖系统的形态学初报

<正> 马尾松毛虫(Dendrolimns punctatus Walker)属鳞翅目、枯叶蛾科(Lepidoptera Lasiocam-pidae),它繁殖力强,迁移扩散快,经常猖獗成灾,是我国危害森林的最严重的历史性大害虫。为了防治马尾松毛虫,必须建立准确、可靠、方便的预测预报方法,掌握其种群数量动态;而昆虫的性比则是种群结构的重要特征,它对种群的数量动态有重要影响。故研究马尾松毛虫雌雄区分问题对建立上述预测、预报方法具有重要实践意义。目前尚未见到关于马尾松毛虫幼虫生殖系统的研究报道。 自1982年起,我们开始对马尾松毛虫的生殖系统进行研究。本文报道此项研究的部分结果。     

Ecdysteroids in the larvae of Opogona sacchari （Bojer）, a invasive alien pest

In order to understand the composition and quantitative variation of ecdysteriods in the larvae of Opogona sacchari (Bojer), a invasive alien pest, we analyzed the larval ecdysteroid composition and titers in this pest. The main component of ecdysteriods in the larvae of O. sacchari is 20-hydroxyecdysone, and also there is a little 26-hydroxyecdysone. The titer of ecdysteriods in the larvae from the 1st instar to the 7th instar was gotten higher gradually compared on ng ecdyster-oid/larva, but no regularity could be found about the titer if compared on ng ecdysteroid/g avoirdupois. There was only one peak of ecdysteroids (0.5475 ng/larva) showed at day 2 during the developmental time of the 6th instar larvae. However, there were two peaks appearing during the developmental time of the 7th instar larvae , one peak (0.29415 ng/larva) at day 3, another (0.214 ng/larva) at day 5.     

Substrate phosphoprotein availability regulates eclosion hormone sensitivity in an insect CNS

The final step in the moulting of all insects is ecdysis, the shedding of the cuticle of the previous instar, which is triggered in Lepidoptera by the neurosecretory peptide eclosion hormone. This hormone acts directly on the nervous system to release the appropriate motor patterns for larval, pupal and adult ecdysis, but there are only brief periods near the end of each moult when the nervous system is competent to respond to the hormone. Previous experiments have shown that the action of eclosion hormone on the nervous system at pupal ecdysis in the tobacco hornworm, Manduca sexta, is mediated by the second messenger cyclic GMP. Here we report that the hormone-stimulated increase in cGMP results in the phosphorylation of two proteins, each with an apparent relative molecular mass (Mr) of 54,000. Moreover, the brief periods during which the central nervous system (CNS) is responsive to eclosion hormone seem to result from the transient presence of these substrate proteins within the nervous system. This provides a novel mechanism by which hormonal responsiveness can be regulated.