‘黄樽’薄叶金花茶组培苗生根与移栽技术研究

【目的】优化组培苗生根和移栽技术,提高‘黄樽’薄叶金花茶组培生根率和移栽成活率。【方法】以苗龄60 d的继代芽苗为材料,在优选基本培养基(1/2 B5、3/4 B5、B5)与植物生长调节剂(ABT、IBA)组合的基础上,研究2种培养基质[(V_细河沙:V_蛭石=1∶1)(河沙蛭石基质)、琼脂]与2种附加物(白糖、活性炭)形成的5种组合对生根率的影响;以河沙蛭石基质+1/2 B5+ABT 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L为生根培养基,培养35 d,分别补充白糖15.0 g/L、K₂HPO₄15.0 mg/L、白糖15.0 g/L+K₂HPO₄15.0 mg/L及对照组(CK)等4种处理,培养65 d后,将生根苗移栽到V_细河沙∶V_蛭石=3∶1的基质上,研究4种处理对芽苗生根率、移栽成活率、芽苗茎粗和黄化率的影响。【结果】在优选的培养基1/2 B5+ABT 0.5~1.0 mg/L+IBA 0.5~1.0 mg/L+白糖15 g/L+琼脂6.0 g/L,芽苗生根率仅41.1%~42.2%;培养基质与附加物的5种组合对生根率的影响达极显著水平,河沙蛭石基质+白糖0 g/L和河沙蛭石基质+白糖15 g/L的生根率分别为84.4%和68.9%,高于传统的琼脂白糖组合;生根培养后期,4种处理对生根率的影响不显著,但对移栽成活率影响极显著,补充白糖15 g/L+K₂HPO₄ 15.0 mg/L,克服了芽苗黄化,提高芽苗质量,进一步提高了芽苗生根率和移栽成活率,生根率和移栽成活率分别为91.1%和93.3%。【结论】 ‘黄樽’薄叶金花茶采用传统的白糖琼脂培养方式,其组培生根及组培苗移栽效果不理想。生根培养前期用河沙蛭石基质+1/2 B5+ABT 0.5~1.0 mg/L+IBA 0.5~1.0 mg/L的无糖培养,培养后期补充白糖15 g/L+K₂HPO₄ 15.0 mg/L,是提高‘黄樽’薄叶金花茶生根率和移栽成活率的有效方法,也为其他组培生根困难的植物,尤其是金花茶组植物离体培养,提供了可借鉴的培养方法。     

金叶复叶槭水培嫩枝组织培养体系研究

【目的】筛选基本培养基、增殖和生根培养基最佳激素组合,探索炼苗移栽方法,建立金叶复叶槭组织培养体系,为该树种优良种苗规模化生产提供新途径。【方法】以金叶复叶槭水培嫩枝为试材,通过单因子逐步筛选法,研究MS、WPM、B₅培养基对初代培养,6-BA、TDZ和NAA对增殖培养,IBA和NAA对生根培养,以及相对湿度对移栽成活的影响。【结果】MS和WPM诱导外植体腋芽萌发率显著高于B₅培养基,但MS培养基在促进新芽伸长生长方面优于WPM。6-BA、NAA与低浓度的TDZ联合使用可有效地提高不定芽增殖系数,在MS附加0.5 mg/L 6-BA、0.01 mg/L TDZ、0.06 mg/L NAA的增殖培养基中,每个外植体可增殖5.8个新芽。添加生长素可显著提高增殖芽生根率,添加IBA生根效果显著好于NAA,1/2 MS附加0.05 mg/L IBA即可使生根率达100%。85%的相对湿度条件下组培苗移栽成活率可达95%。【结论】适宜金叶复叶槭水培嫩枝组培快繁的基本培养基为MS培养基,最佳增殖培养基为MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.01 mg/L TDZ + 0.06 mg/L NAA;最佳生根培养基为1/2 MS + 0.05 mg/L IBA;金叶复叶槭组培苗对移栽基质要求不高,保湿是关键。     

邓恩桉组织培养应用研究

用邓恩桉新抽梢半木质化的芽进行组织培养,可以生产组培苗.邓恩桉组培增殖培养基为Eu-6-BA 3 mg·L.1+NAA 0.3 mg·L.1+蔗糖3%,生根培养基为1/3 Eu+IBA 0.5 mg·L.1+ABT1#3 mg·L.1+蔗糖3%,壮苗培养基为Eu+NAA 0.1 mg·L.1+蔗糖3%.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

黄秋葵愈伤组织培养及再生体系建立的研究

以具有杂种黄蜀葵嫩茎为材料,采用组织培养的方法,进行了嫩茎的愈伤组织诱导、分化,不定芽的生根以及试管苗的生根继代增殖培养、移栽与定植的研究.结果表明:嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基是MS+6-BA0.75mg/L+2,4-D2.1 mg/L;愈伤组织分化培养的理想培养基是MS+AgNO31.0 mg/L+NAA0.1mg/L+ZT1.6mg/L;1/3MS+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L是不定芽生根培养的理想培养基;试管苗生根继代增殖培养的理想培养基是1/3MS+ABT0.6mg/L+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L.试管苗移栽成活率为93.9%,定植成活率为97.5%.定植的试管苗保持了杂种黄秋葵所有植物学性状和杂种优势.     

鸦胆子的组织培养与快速繁殖

以鸦胆子顶芽、侧芽为材料,采用正交实验方法,研究鸦胆子组培快繁技术.结果表明,1组合MS+NAA0.5mg/L+KT 1.0mg/L+6-BA 2.0mg/L有利于鸦胆子不定芽的诱导,诱导率为100%,不定芽数量为2.725个;2组合6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L+KT 1.0mg/L+40g/L蔗糖不定芽增殖率最高(2.75),同时高质量浓度(1.0mg/L)KT处理有利于不定芽增殖,低质量浓度(20g/L)的蔗糖不利于不定芽增殖;3 1/2 MS+(0.5~1.0)mg/L IBA(或NAA)均能诱导不定芽生根,生根率为89.3%.     

濒危药材红芽大戟组培快繁影响因素研究

【目的】研究濒危药材红芽大戟(Knoxia corym bosa Willd)最适宜的组培快繁方法,为规模化生产红芽大戟提供依据。【方法】选取红芽大戟不同组织器官为外植体,采用不同配方的培养基培养,研究影响外植体诱导分化、增殖和生根的因素,筛选获得最佳培养基。【结果】外植体采用茎尖优于叶轴、叶片,茎尖接种于MS+1.5mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,萌芽率为100%,MS+3.0mg/L 6-BA+0.30mg/L NAA最适用于继代增殖培养,1/2MS+2.0mg/L IBA+0.2mg/L NAA最合适生根培养。【结论】选取合适的外植体,采用适宜的培养条件和培养基,可以有效地进行红芽大戟的组培快繁。     

海金沙孢子体快速繁殖体系的建立

以海金沙孢子叶为材料进行了繁殖研究,得出孢子叶分化为GGB的最佳条件为MS+NAA 0.3mg/L+6-BA0.5 mg/L,诱导率达90%;GGB增殖分化形成幼苗的最佳条件为MS+6-BA1.5mg/+NaH₂PO₄200mg/L,增值系数达7.8;生根培养基最佳条件为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+2%蔗糖,生根率达86.7%或者是1/2 MS+IBA0.2 mg/L+2%蔗糖生根率为87%;炼苗移栽到珍珠岩:草炭=2:1的基质中,成活率达87.5%.能在短期内生产出大量海金沙组培苗,为工厂化育苗提供依据.     

麝香百合组培快速繁殖技术研究

通过对百合球茎鳞片离体组织培养的研究,探讨了丛生芽诱导、继代增殖培养、生根培养及移栽等方面的组培快速繁殖以及生产上实用的组培技术,结果表明,MS 6-BA3.0mg\L NAA0.5mg\L KT0.14mg\L 2.4-D0.3mg\L 蔗糖35mg/L为适宜的诱导培养基,其诱导率为92%;MS 6-BA2.5mg/L NAA0.5mg/L KT0.1mg/L 2.4-D0.2mg/L 蔗糖65g/L为最佳的继代增殖培养基,其繁殖倍数为10.9倍,1/2MS NAA1.0mg/L 蔗糖35g/L的培养基诱导生根效果较好, 其生根率为86.7%,移栽成活率为100%,这为麝香百合大规模工厂化育苗提供了理论依据和技术保证。     

马占相思和大叶相思优树组培不定根诱导研究

以10年生马占相思和大叶相思优良单株为研究对象,其茎段外植体通过初代培养和增殖培养后获得增殖芽,研究了生长素种类及浓度、基本培养基类型、蔗糖浓度和活性炭浓度对增殖芽生根的影响,分析了不同类型增殖培养基多次继代诱导的增殖芽对生根的影响。结果表明:马占相思的最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖,大叶相思最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.25 mg/L NAA+3%蔗糖,二者的生根率均能达到93%以上。以马占相思和大叶相思增殖芽为生根材料,含低浓度细胞分裂素且添加活性炭的增殖培养基诱导时,两种相思的生根率均能达到90%以上,生根率随着继代次数的增加保持稳定,生根苗生长健壮。     

落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

高盆樱桃的组培快繁研究

【目的】通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化,解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低、增殖率低、生根难等问题,为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础。【方法】以高盆樱桃带芽茎段为外植体,探讨了外植体的灭菌方法、基本培养基类型(MS、1/2 MS和1/4 MS)以及不同外源激素(6-BA、NAA和IBA)对丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根等过程的影响。【结果】高盆樱桃茎段在75%乙醇灭菌20 s,0.1%升汞灭菌300 s时,污染率最低。在MS培养基中添加1.2 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA时,丛生芽诱导率最高(82.22%)。在MS培养基中同时添加0.8 mg/L 6-BA、0.06 mg/L IBA、0.08 mg/L NAA时丛生芽增殖效果最好,增殖率为7.32。1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)培养基有利于生根,生根率达92.22%。【结论】高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为75%酒精处理20 s后,再以0.1%升汞处理300 s; 丛生芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA(1.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L); 丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA(0.8 mg/L)+IBA(0.06 mg/L)+NAA(0.08 mg/L); 适宜高盆樱桃生根的培养基为1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)。以体积比为1(河沙):1(腐殖质):2(蛭石)的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达72.2%。该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑。     

南川百合组织培养与快繁技术体系研究

为加快南川百合的繁殖速度,对南川百合进行离体组织培养研究,结果表明:南川百合外植体的诱导率从大到小依次为:鳞片,花丝,子房,茎段,叶片.用鳞片作为外植体时,下部的诱导率最高,中部次之,上部最差.鳞片诱导丛生苗的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L;用花丝和子房作为外植体时,诱导丛生苗的最佳培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L;用再生苗的叶片作为外植体时,诱导丛生苗的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L;用再生苗的茎段作为外植体时,诱导丛生苗的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L.用于不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.05mg/L.无根苗生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L,生根率可达到86.7%,移栽后成活率很高.     

白芨高效再生体系建立及工厂化育苗技术研究

以白芨种子为外植体,1/2MS或MS为基本培养基,通过添加不同浓度配比的植物生长调节剂,筛选最适合原球茎的诱导、芽的增殖与分化以及生根培养的条件。最适宜白芨原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;原球茎的芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数达6.6;最佳分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+70.0 g/L香蕉泥,生根率达100%;炼苗基质配方以黄土∶腐植土∶锯木粉按体积比4∶4∶2,白芨苗移栽成活率高。以白芨种子诱导原球茎获得的高效再生技术体系可以在白芨产业化发展中推广应用。     

响应面法优化南靖金线莲组培培养基工艺研究

采用南靖金线莲为组培材料,以金线莲接种60 d后鲜植株增殖倍数为评价指标,在研究培养基中各单因素对金线莲鲜植株增殖影响的基础上,再利用响应面法优化金线莲培养基。结果表明:细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA)对金线莲生长影响显著;同时各组培成分对金线莲增殖倍数影响顺序为:6-BANAA基本培养基MS蔗糖;最佳组培培养基制作工艺为1/2 MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.55 mg/L+蔗糖为38 g/L,在此条件下,金线莲增殖倍数可达9.48。     

兰州百合组织培养及快速繁殖技术研究

【目的】建立适于兰州百合(Lilium davidii var.Unicolor(Hoog)Cotton)的快速无性繁殖技术,为食用兰州百合试管苗规模化生产提供技术参考。【方法】以球根鳞片为外植体,采用不同消毒方法、取材部位、接种方法和植物生长调节剂及其浓度配比,筛选适合的诱导、增殖和生根培养基。【结果】球根鳞片先用75%酒精处理后,用10%的次氯酸钠与0.13%的升汞等体积混合液消毒,再用0.13%升汞消毒为最佳消毒方式;接种选择与鳞茎盘相连的下部鳞片为初代培养的最佳外植体;外植体在MS+6-BA 1.5mg/L+GA30.8mg/L+2,4-D 1.0mg/L的培养基中,能诱导出较多长势健壮的不定芽;在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L的培养基中,增殖倍数达1.25;而生根培养以MS+NAA 0.6mg/L+IBA 0.1mg/L为最佳,生根苗生长良好,生根率达100%。【结论】获得适合兰州百合快速繁殖的培养基配方,建立了兰州百合的快速繁殖技术。     

芒萁组培技术体系的优化

【目的】芒萁(Dicranopteris pedate)是尾矿及酸性边坡修复的优良植物。优化芒萁组培技术,提高组培效率,可为困难立地修复提供大量芒萁孢子体。【方法】以芒萁孢子为外植体,研究外植体收集时间、消毒时间与孢子萌发率的关系;通过改变培养基中无机盐浓度、蔗糖浓度及植物生长调节剂类型及浓度,研究孢子萌发、原叶体增殖、孢子体生成3个过程的最佳培养基配方。【结果】春季2—4月采集的芒萁孢子萌发活性最强;孢子诱导萌发最佳处理为DKW+5%(质量分数) NaClO消毒15 s,萌发率97.15%,20 d原叶体可见;原叶体最佳增殖培养基为1/2 MS+蔗糖5 g/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L,30 d质量增殖倍数为7.28;孢子体诱导生成最佳培养基为1/2 MS+蔗糖30 g/L+NAA 1.0 mg/L,第8天孢子体即可产生,生成率53.33%。【结论】芒萁孢子活性与生长区域、生成月份存在关联性,广州地区3月的孢子活性最强;在幼孢子体的瓶苗生成率较低的情况下,研发原叶体绿色球状体(prothallus green globular body, PGGB)高效增殖...     

米老排优树组培技术体系优化研究

【目的】建立米老排(Mytilaria laosensis)优良单株组培再生体系,为今后其无性化推广提供技术支撑。【方法】以米老排优树基部半木质化萌芽为外植体,采用丛芽发生途径,通过初代腋芽诱导、继代增殖培养、生根培养等过程,研究筛选最适的外植体采集时间、继代及生根培养的基本培养基以及植物生长调节剂的种类及浓度配比等。【结果】10月采集的外植体诱导效果最好,存活率为32.38%;米老排腋芽诱导最适配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L,诱导率为100%,萌发时间为4.07 d;最适增殖培养基为MX(改良WPM)+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖系数达4.94,芽生长旺盛;最适生根培养基为MX+NAA 0.3 mg/L,生根率100%,平均根数13.18,根生长健壮,移栽成活率可达92.3%。【结论】米老排外植体诱导成活率与取材地点、时间相关,广东地区10月的米老排外植体材料最佳;在使用MS基本培养基增殖系数低的情况下,改用MX(改良WPM)培养基能够显著提高米老排增殖继代倍数;本研究还对米老排诱导培养基、增殖培养基、生根培养基进行...