细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

为了表达、纯化细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白及制备多克隆抗体,本研究构建细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白原核表达载体p ET30a-M26,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的副肌球蛋白,免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对副肌球蛋白及抗体进行检测。结果显示:成功表达并纯化了细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白,重组蛋白分子质量约41 k D,纯化后目的蛋白纯度可达85%,蛋白浓度为0.5mg/ml。副肌球蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1∶12800,结果表明,成功表达并纯化了六钩蚴副肌球蛋白。本研究可为研究包虫病早期诊断奠定了基础。     

开窗窗门自动风卡

本发明是一种无需人操作即可开、关窗门的自动风卡。它由一个孤度为95度的齿形风钩(1),一个卡座(2)和一个螺丝铁环(5)所组成。齿形风钩(1)里侧的一端和螺丝铁环(5)相     

钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32基因的克隆和表达及其在ELISA检测中的应用

钩端螺旋体 (钩体 )病是一种全球性的人兽共患病。人类感染钩端螺旋体后表现出多种器官和系统病变 ,愈后不良 ;也可垂直传播感染胎儿 ,引起流产。动物中 ,犬钩端螺旋体的感染率较高 ,感染后 ,临床表现多样 ,大多呈隐性感染 ,不发病 ,但钩体在肾脏中长期存在 ,持续随尿液向外排菌。由于钩端螺旋体对人的强致病性 ,以及由动物传播给人引起的严重公共卫生问题 ,因此快速准确地进行钩端螺旋体病的诊断 ,显得尤为重要 ,也是目前钩端螺旋体研究中亟待解决的问题。钩端螺旋体属钩端螺旋体科 ,钩端螺旋体属问号状钩端螺旋体种的成员。目前发现血清型…     

超敏C-反应蛋白测定在冠心病中的应用

超敏C-反应蛋白(hs-CRP)是一种急性时相反应蛋白,常作为炎症相关疾病的检测指标。冠心病存在慢性炎症过程,检测hs-CRP有助于预测急性冠状动脉事件、评估冠心病的严重程度和观察演变情况,对冠心病患者的临床危险分层有重要参考价值。     

重金属镉对铜绿微囊藻的分层胞外聚合物淬灭机制研究

通过三维荧光光谱法研究铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)产毒株FACHB-905和不产毒株FACHB-469分层胞外聚合物(EPS)的差异性以及Cd(Ⅱ)对EPS的淬灭机制。结果表明:FACHB-905分层EPS中主要含有4种荧光基团(色氨酸、芳香蛋白Ⅰ和2种类腐殖酸),FACHB-469分层EPS中主要含有6种荧光基团(色氨酸、芳香蛋白Ⅰ和4种类腐殖酸)。两者的分层EPS中芳香类蛋白比色氨酸、类腐殖酸有更大的Cd(Ⅱ)结合能力,FACHB-469比FACHB-905更易与Cd(Ⅱ)结合,附着型LB/TB-EPS中芳香蛋白Ⅰ均能被Cd(Ⅱ)有效淬灭,且以动态淬灭为主导,类腐殖酸能被静态淬灭。Cd(Ⅱ)致使FACHB-469的TB-EPS中出现了类富里酸物质。两种铜绿微囊藻与Cd(Ⅱ)的反应都是自发的放热反应,氢键和范德华力在反应中起主要作用。     

低碳钢连铸板坯表层凝固钩的特征

对不同浇铸条件下的低碳钢连铸板坯进行了凝固钩(Hook)的特征研究,根据凝固钩的形貌概括了凝固钩的不同类型,统计了凝固钩周围气泡和夹杂物的分布,讨论了不同浇铸参数对铸坯凝固钩深度的影响,并通过Bikerman方程和弯月面凝固理论对凝固钩的不同特征进行了解释.结果表明:按形貌可将凝固钩分为完整叶状、双凝固钩、弯曲截断型和二次凝固型四种类型,其中二次凝固型的凝固钩出现的概率最高为46.8%,而完整叶状、弯曲截断型和二次凝固型的凝固钩出现概率分别为25.3%、7.6%和6.3%;研究发现,凝固钩周围的夹杂物数量明显多于其他区域的夹杂物数量,说明凝固钩能够捕获结晶器内上浮的夹杂物;对比不同浇铸参数发现,采用结晶器电磁制动装置(FC-Mold)、减小结晶器水口浸入深度、增大浇铸拉速均能够减小凝固钩的深度;Bikerman方程的计算结果和弯月面凝固理论能在机理上解释凝固钩的形貌特征.     

中国钩顶螽属的新种记述(直翅目:螽蟖总科,草螽科)

记述了采自四川省昭觉地区及云南省昆明市草螽科的钩顶螽属二新种,即凉山钩顶螽 Ruspolia liangshanensis sp.n.和云南指顶螽R.yunnana sp.n.;并报道了该属一新组合种,即印度钩顶螽R.indica(Redtenbacher,1891)Conmb.n.     

钩端螺旋体的保存方法

钩端螺旋体引起的钩体病是一种严重人兽共患传染病，在医学微生物学教学与科研中经常使用钩端螺旋体菌种，钩端螺旋体按常规方法保存一般每月传代１次，超过这时间易于死亡，频繁传代，费时费力，也增加钩端螺旋体菌种污染机会。目前在国内多数单位无特殊设备情况下，能否长期保存钩端螺旋体，具有重要意义。我们通过对３种途径保存方法进行比较，经过多年的实践，培养钩端螺旋体传代时间延长至９０ｄ，而安瓶封闭保存至少达到６年以上。１材料与方法 按以下顺序配置无血清的柯氏培养基，其成分为国产蛋白陈 ０．４ ｇ、ＮａＣ１ ０．７ ｇ…     

贵州钩藤不同产地钧、茎微量元素比较分析

为了解贵州不同产地钩藤不同部位主要微量元素的含量,采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),对采自贵州剑河、都匀钩藤样品进行钩、茎微量元素(Na、Mg、K、Ca、Mn、Fe、Co、Zn、Cu、Mo)含量测定分析。结果表明:剑河钩藤钩、茎中Na、Mg、K、Ca、Fe、Zn、Cu、Mo含量均高于都匀钩藤钩、茎中含量。Zn/Cu比大小顺序均为茎钩和茎钩,都匀钩藤钩、茎、钩和茎中Zn/Cu比均高于剑河钩藤对应部位的Zn/Cu比。不同产区钩藤间Mn和Mg,Mn和Ca、Fe和K、Zn和Mg、Zn和Ca、Cu和Na、Cu和Na、Mo和Fe(p0.05)显著正相关,K和Na、Ca和Mg、Cu和K、Cu和Fe(p0.01)极显著正相关。     

胞间活性氧产生对盐胁迫下两种小麦叶抗氧化反应的影响

以春小麦新品种"陇春27号(27号)"和"陇春30号(30号)"为研究材料,分析过氧化氢酶(CAT)和二苯基氯化碘盐(DPI)对NaCl胁迫下小麦叶片渗透性调节和抗氧化反应的影响.结果表明,盐诱导两种小麦叶中w(脯氨酸)、ρ(可溶性糖)、w(可溶性蛋白)和c(丙二醛)均增加, CAT的加入减少了盐诱导的27号ρ(可溶性糖)及30号w(脯氨酸)和w(可溶性蛋白)的积累, DPI提高了两种小麦w(脯氨酸)、ρ(可溶性糖)和c(丙二醛),降低了w(可溶性蛋白).盐处理导致小麦27号c(O2·-)、w(H2O2)、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性均降低,使c (·OH)及过氧化物酶(POD)活性增高;小麦30号c(O2·-)、c (·OH)及APX活性增高, CAT和POD活性减弱.与单独盐处理相比,外源CAT使盐处理下两种小麦w(H2O2)降低,谷胱甘肽还原酶(GR)活性及27号APX和30号CAT活性增强; NaCl+DPI处理导致两种小麦w(H2O2)及27号APX活性降低,两种小麦c(O2·-)及POD和GR活性均增高, 30号小麦SOD与APX活性变化与27号相反.表明盐胁迫提高了两种小麦叶中渗透性调节物w(脯氨酸)、ρ(可溶性糖)和w(可溶性蛋白),导致不同的抗氧化反应,可能与胞间H2O2及质膜烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶O2·-的产生有关,因为胞间H2O2的清除和NADPH氧化酶活性的抑制改变了盐诱导两种小麦的渗透性调节和抗氧化反应,且二者的效应不同.     

北京鸭血清中C-反应蛋白的研究

C-反应蛋白(CRP)从北京鸭血清中分离和纯化。其方法是根据此蛋白对Ca~(2+)结合依靠性的亲和层析,之后通过Sepharose 4B和DEAE-Sephadex A-50层析。在C_4~(2+)存在下,鸭CRP很容易和肺炎球菌C-多糖反应生成沉淀。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和SDS-PAGE测定结果表明,鸭CRP的表观分子量是1,100,000 doltons。很可能天然条件下的CRP是两种不同亚基的聚合体。鸭CRP是糖蛋白。在电子显微镜下观察到CRP分子呈圆盘状,其直径约为100nm。     

酸性棕染料与蛋白结合反应的研究(Ⅰ)

采用分光光度法研究了酸性棕SR(ASR)在不同酸度条件下的吸收光谱,并研究了其与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应,探讨了结合反应的机理,考察了表面活性剂对结合反应的影响.实验证明:ASR存在着两种平衡结构;在酸性水溶液中能与牛血清白蛋白结合生成沉淀,随着ASR浓度的变化,结合反应产物也发生变化;表面活性剂对结合反应有较大的影响,非离子表面活性剂阿拉伯胶的加入可使沉淀完全转化为结构稳定的可溶物 ,使ASR作为一种新型、廉价的染料应用于蛋白的定量分析成为可能,拓宽了染料结合法的应用范围.     

HSP27和CFL-1在角质细胞急性刺激反应中相关性的研究

研究急性刺激条件下,角质细胞中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)和Cofilin-1(CFL-1)的表达是否具有相关性,初步探讨皮肤急性刺激反应的作用机理.通过免疫印迹法检测十二烷基硫酸钠(SDS)诱发的急性刺激反应下,角质细胞中HSP27和CFL-1蛋白的表达,并通过RNAi技术...     

γ-聚谷氨酸合成酶系PgsBCA结构的生物信息学分析

利用ProtParam、TopPred、PredictProtein、PSORT-B Prediction、SWISS-MODEL等软件分别分析蛋白质的理化性质、跨膜区、二级结构、亚细胞定位、三维结构.结果显示:PgsB是亲水不稳定蛋白,通过豆蔻酰锚钩锚定于质膜上,催化作用需与ATP结合提供能量;PgsC是疏水稳定蛋白,通过4个跨膜区和多个豆蔻酰锚钩定位于质膜,具有酰胺化位点;PgsA是亲水稳定蛋白,通过N端一个跨膜区和豆蔻酰锚钩结合于质膜,具有多种磷酸化位点.说明γ-聚谷氨酸(Polyγ-glutamic acid,γ-PGA)合成酶系3个组分蛋白形成复合物定位于质膜上,其中PgsB在胞内催化γ-PGA合成,PgsC固定于质膜,连接PgsB和PgsA组分,PgsA在胞外负责γ-PGA的运输.通过对γ-PGA合成酶系各组分蛋白结构的分析,为日后在谷氨酸高产菌株中的表达奠定了基础.     

松龄血脉康胶囊干预大鼠动脉粥样硬化的作用及机制

<正>常大鼠饲喂高脂饲料配合腹腔注射维生素D3建立AS(动脉粥样硬化)大鼠模型。将实验大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、松龄血脉康胶囊低(0.6 g·kg~(-1)·d~(-1),C组)、高(1 g·kg~(-1)·d~(-1),D组)剂量组、阳性对照辛伐他汀组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1),E组)。12周后腹主动脉取血检测各组血脂;酶联免疫吸附法测定各组血清超敏C反应蛋白、白介素6及单核细胞趋化蛋白1含量。12周后与B组相比,D组可以显著降低血脂(TC、LDL)(P0.05)并使血清超敏C反应蛋白及白介素6含量显著下降(P0.01);C组、D组血清单核细胞趋化蛋白1含量显著下降(P0.05,P0.01)。松龄血脉康胶囊可通过降低AS大鼠血脂;降低血清超敏C反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、白介素6的水平,减轻炎症反应,阻止AS发展。     

Tanis\SelS蛋白的研究进展

Tanis蛋白是一种新发现的由189个氨基酸残基组成的蛋白。研究发现,Tanis蛋白具有胰岛素抵抗的现象,抵抗过氧化氢引起的细胞损伤。Tanis是一种跨膜蛋白,可能作为血清淀粉样蛋白A(SAA)的受体存在,通过与SAA相互作用参与糖代谢。在2型糖尿病、炎症反应、心血管疾病以及代谢性疾病之间建立了连接,为了解这些疾病的发生发展提供了新的研究方向。     

海洋贝类的病害性纤毛虫研究Ⅰ.吻毛类纤毛虫

报道采自山东沿海贝类鳃表及外套腔中寄生／共栖的３种吻毛类纤毛虫：原生钩毛虫（Ｈｎｃｉｓｔｒｏｃｏｍａ ｐｒｉｍｉｇｅｎｅｕｓ）、派氏钩毛虫（Ａｎｃｉｓｔｒｏｃｏｍａ ｐｅｌｓｅｎｅｅｒｉ）及威海下毛虫（Ｈｙｐｏｃｏｍｉｄｅｓ ｗｅｉｈａｉｅｎｓｉｓ）。作者依据活体观察、蛋白银和银浸法染色对其活体形态学、纤毛图式及茛线系进行了综合描述。该研究系钩毛虫属纤毛虫在我国的首次报道。     

猪的繁殖障碍疾病的诊断要点及防制对策(续)

(接上期) 2.9钩端螺旋体病 本病是一种重要而复杂的人畜共患病和自然疫源性传染病,7～10月为流行高峰.     

筼筜湖大型海藻群落的几种藻栖端足类的种群动态研究

研究了2007年11月至2008年5月期间筼筜湖大型海藻群落几种藻栖端足类的种群动态.结果显示,筼筜湖藻栖的端足类主要有:上野蜾蠃蜚(Corophium uenoi)、日本大螯蜚(Grandidierella japonica)、强壮藻钩虾(A mpithoe vali-da)、平掌拟钩虾(Grammaropsis laevipalmata)和尖额麦秆虫(Caprella panantis).但不同时期、不同藻丛,端足类的种类组成和丰度存在差异.条浒苔(Enteromorpha clathrata)主导的藻丛,主要出现在2007年11月至2008年1月,上野蜾蠃蜚和日本大螯蜚是丰度最高的两种端足类,它们在11月达到丰度的最大值,分别为3.22×104和1.07×104m-2.细基江蓠繁枝变种(Gracilarla tenuistipitatavar.liui)和根枝藻(Rhizocloniumsp.)主导的藻丛分别出现在2008年1—3月和3—5月,上野蜾蠃蜚是其中最优势的端足类,但丰度较低.石莼(Ulva lactuca)主导的藻丛在整个调查期间都有分布,端足类以上野蜾蠃蜚和强壮藻钩虾为主,丰度在3月最高,分别为11.59×104和1.20×104m-2,而后迅速下降.不过,在石莼主导的藻丛,端足类的丰度和大型海藻生物量之间的变化并不同步,而是存在一个月的滞后,据推测,可能是由于大型海藻啃食者(如强壮藻钩虾)的滞后造成的.     

免疫学与生化方法检测C反应蛋白相关性分析

为比较酶联免疫双抗体夹心法与生化免疫比浊法在检测C反应蛋白方面的差异,并进行相关性分析,分别利用4个厂家酶免方法的超敏C反应蛋白试剂盒(HS-CRP)和1种生化方法的普通C反应蛋白(CRP)作为考核试剂盒,选择21例低中高值样本,采用双盲法与参比试剂盒做临床平行比对并进行相关性分析.结果表明,与参比产品相比,免疫学方法检测HS-CRP具有高度相关性,并且有较好的检测低限.得出免疫学与免疫比浊法试剂盒有较好的临床相关性,能较好的满足国际上心血管事件风险评估新标准规定的1 mg/L以下为低风险区的检测需要的结论.