邻联茴香胺—H2O2—辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析检测四种 …

将邻联茴香胺（ＯＤＡ）－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系于测定南芥菜花叶病毒、黄瓜花叶病毒、南方菜豆花叶病毒和芜菁地病毒等四种重要植物病毒,其灵敏度高地酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）。     

间接酶联检测法浅谈

比较了间接酶联检测法和双抗体夹心法检测烟草花叶病毒(TMV)的结果，检测提纯的病毒和叶片榨汁中的病毒，间接酶联检测法的灵敏度都比夹心法高．     

斑点免疫结合法检测3种植物病毒

研究了改进的斑点免疫结合法在检测芜菁花叶病毒、烟草花叶病毒和小西葫芦黄化花叶病毒中的应用.无论是使用全抗血清还是纯化的免疫球蛋白,检测感染组织粗汁液中的病毒或纯化的病毒,均获得了满意的结果.同时进行的斑点免疫结合试验、酶联免疫吸附试验和免疫吸附电子显微术等的比较结果表明:无论是检测纯化病毒还是感染组织粗汁液中的病毒,斑点免疫结合法的检测敏感性均优于后2种方法,病毒的可测感度芜菁花叶病毒为0.65ng,烟草花叶病毒为0.39 ng,小西葫芦黄化花叶病毒为0.45 ng;应用碱性磷酸酶标记抗体及羟基吲哚磷酸盐和氮兰四唑为底物较为合适,这种底物可在室温下长期保存,并且反应产物为不褪色的紫色,易于观察和保存.     

产酶溶杆菌C3对大豆种子萌发和幼苗生长及SOD与POD活性的影响

采用实验室光照培养箱培养方法,测定产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)C3发酵液对大豆种子萌发、幼苗早期生长和幼苗体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性的影响.结果表明:不同稀释倍数的产酶溶杆菌C3发酵液对大豆种苗生长影响不同,当用稀释10倍C3发酵液处理大豆种子时,大豆种子的萌发率、幼苗主根和幼芽长度均达到最低值,表现出低稀释倍数抑制,当C3发酵液稀释150倍时,大豆种子的萌发率、幼苗主根和幼芽长度均达到最高值,表现出高稀释倍数促进的作用.大豆幼苗体内的SOD和POD活性在C3发酵液被稀释10倍时最低,稀释50至150倍时,活性逐渐增大,但C3发酵液稀释200倍时,SOD和POD活性降低,但仍然高于对照(CK).初步证实产酶溶杆菌C3发酵液中含有能够促进大豆种子萌发、幼苗生长及提高超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性的物质.     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2

利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应.以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞,培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出.在促有丝分裂剂中, 植物血凝素(PHA)导致ChIL-2的产生量最高; 在病毒方面,传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌.本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具.     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2

利用抗鸡白细胞介素-2（ChIL-2）单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统．此系统对鸡白细胞介素乏的检测灵敏度为50pg／mL．两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应．以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞，培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出．在促有丝分裂剂中，植物血凝素（PHA）导致ChIL-2的产生量最高；在病毒方面，传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌．本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具．     

迭部县16年来饮食服务人员乙肝病毒携带情况分析

探讨16年来迭部县饮食服务人员乙肝病毒携带情况,从而分析乙肝流行趋势,为制定乙肝防治计划提供科学依据;空腹采取静脉血2Ml,分离血清后,用酶联免疫吸附法（1999年前用反向间接血凝法）检测乙肝表面抗原;乙肝病毒携带率呈逐年下降趋势;男性高于女性;青年人高于中年和20岁以下人;藏族高于回族和汉族;乙肝防治效果明显,病毒携带率逐渐降低,应进一步宣传乙肝防治知识,加大乙肝疫苗的接种力度,保护所有易感人群。     

甪直地区鹅副黏病毒病的流行病学调查

采用多级随机抽样法对苏州市甪直地区43个鹅场采集520份血液样品,分离血清应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测鹅副粘病阴阳性,对阳性的鹅场进行临床跟踪,对病死鹅进行病理剖检,似鹅副黏病毒病的病料进行病原分离与鉴定。酶联免疫吸附法检测结果为甪直地区13个鹅场鹅副黏病毒病阳性,对采集的病料进行病毒的分离与鉴定结果为鸡胚于30～48h内全部死亡,分离毒株能凝集鸡红细胞并能被NDV标准阳性血清所抑制,不能被禽流感病毒标准阳性血清所抑制。     

加工番茄CMV与ToMV的ELISA检测及其相关性分析

用针对CMV和ToMV的单克隆抗体对田间表现病毒病症状的137个加工番茄自然病株进行了间接ELISA检测,检测结果表明,CMV和ToMV在加工番茄上的侵染率分别为83．2％和61．3％,并且2种病毒常复合侵染,复合侵染率达58．4％。用Eviews3．0软件借助加权最小二乘法（WLS）分析CMV和ToMV在病株上的带毒量,结果表明,2种病毒在病株上的积累是相互影响的,互为正相关关系。     

白草花叶病毒原的生物学鉴定

从甘肃省农业科学院植物研究所（甘谷）培养的表现花叶症状的白草上分离出一种线状病毒,经鉴别寄主,蚜传,酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,免疫电镜（ＩＳＥＭ）和组织病理学等方面的研究,初步认为此分离物是高粱花叶病毒ＳＣＨ株系。     

马铃薯病毒一步法RT-PCR诊断研究

运用一步法RT-PCR对马铃薯和烟草中的马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒和马铃薯卷叶病毒进行了检测,实验表明:对酚-SDS方法提取的病毒核酸进行扩增,一步法RT-PCR检测到的扩增产物的灵敏度较两步法RT-PCR的高100倍左右.两种提取方法对比,用一步法RT-PCR进行扩增,检测到的PEG法扩增产物的灵敏度较酚-SDS法扩增产物的灵敏度高3倍.建立了快速、简便、灵敏度高、特异性强的马铃薯病毒一步法RT-PCR检测技术.     

水杨酸对盐胁迫下西瓜种子萌发特性的影响

采用培养皿发芽法,研究了水杨酸浸种对盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,300mmol/L NaCl溶液浸种显著降低了西瓜种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数及胚根长和胚芽鲜重;1.0mmol/L以下浓度水杨酸浸种使盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长量随水杨酸浓度提高而显著增加;2.0 mmol/L水杨酸浸种对盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长无明显影响,3.0 mmol/L水杨酸浸种进一步降低了盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长量。结果说明,较低浓度水杨酸浸种可缓解盐胁迫对西瓜种子萌发和幼苗生长的抑制作用,减轻西瓜种子萌发期盐胁迫伤害的最适水杨酸浓度为1.0 mmol/L。     

五种不规则抗体检测方法的比较研究

比较盐水法、木瓜酶法、凝聚胺法、试管间接抗人球蛋白法、全自动微柱凝胶间接抗人球蛋白法检测受血者血清中不规则抗体的敏感性、特异性。选取解放军总医院门诊及住院输血患者5000例,分别采用盐水法、木瓜酶法、凝聚胺法、试管间接抗人球蛋白法、全自动微柱凝胶抗人球蛋白法对其输血前标本进行抗体筛选,对阳性结果进行抗体鉴定。盐水法未能检出阳性结果;木瓜酶法检出其中的15例,特异率86．7％;试管间接抗人球蛋白法检出了其中的19例,特异率为89．5％;凝聚胺法检出阳性结果18例,特异率100％;全自动微柱凝胶间接抗人球蛋白法检出阳性标本22例,特异率90．9％。说明盐水法不适合不规则抗体检测;木瓜酶法检出率低,具有一定局限性;试管间接抗人球蛋白法需要反复洗涤红细胞,费时较多,不便于开展大规模筛查;凝聚胺法简便、快速,但手工操作,不易标准化;全自动微柱凝胶抗人球蛋白法灵敏度高、重复性好、易于标准化,适于临床输血前大批量抗体筛选。     

四种电化学底物伏安酶联免疫分析法检测烟草花叶病毒

分别以对苯二胺，间氨基酚，邻联茴香胺和硫酸对氨基N，N－二乙基苯胺为辣根过氧化物酶（HRP）的电化学底物，这四种物质在HRP的催化下能够被H2O2氧化生成具有电化学活性的酶催化反应产物，可以用线性扫描二阶导数极谱法进行检测。将该法与抗原直接包被间接法（DAC－ELISA）相结合，应用于烟草花叶病毒（TMV）的检测，取得了较好的结果。     

在新疆发生的芜菁花叶病毒的鉴定

从新疆感染病毒的萝卜(Raphanus sativus)分离到一株线状病毒,该病毒在人工接种条件下可经汁液传播侵染属于9科的25种草本植物;该病毒可经桃蚜以非持久性方式传播;染病组织粗汁液和提纯病毒制备物在SDS双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附(ELISA)试验中与芜菁花叶病毒抗血清发生强烈的免疫反应;该病毒的病毒粒子为长约750 nm的线形病毒粒子;以差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯了该病毒,纯化病毒的A260/A280为1.26;用提纯病毒制备了ELISA试验所用效价为1∶106的抗血清,证明该病毒株应属于芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus)的一个株系.     

ELISA技术及在甘肃马铃薯脱毒种薯生产中的应用现状

酶联免疫吸附（Ｅｎｚｙｍｅ－ＬｉｎｋｅｄＩｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔＡｓｓａｙ）测定即ＥＬＩＳＡ技术，是近年来继免疫荧光技术与放射免疫分析法之后发展应用于植物病毒检测的新方法。它不仅可以定量测定抗体，也可以鉴定抗原，具有灵敏度高、特异性强、测定方法简单、便于直接观察、可快速大规模检测样品的特点。目前已广泛应用于生物学和医学的许多领域，成为检测鉴定病毒的最新血清学方法之一。１ＥＬＩＳＡ技术的起源与发展１９９６年Ｎａｋａｎｅ和Ａｖｒａｍｅａｓ分别用酶代替荧光色素标记抗体，进行生物组织中抗原的鉴定及定位…     

动物牛皮蝇蛆病诊断方法的进展(综述)

综述了牛皮蝇蛆病临床诊断的方法以及一些免疫学诊断方法：免疫电泳、双向免疫扩散试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验。并重点介绍了国内外在酶联免疫吸附试验的进展,介绍了采样的方法、对血清和牛奶的检测以及检测循环抗原HC的夹心ELISA,并对该病未来诊断方法的发展做了展望。     

丹参和白花丹参对黄芩化感效应的比较研究

采用室内生物测定法研究不同浓度（0、0.1、0.5、1.0、5.0 g/L）的1年生、2年生丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果表明, 丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发率、发芽指数和活力指数表现出相似的影响趋势,即低浓度时促进种子萌发,随浓度增加化感抑制作用增强,浓度为5 g/L时抑制作用强烈。白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发率的化感指数绝对值小于丹参。丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩幼苗苗高和根长表现出相似的影响趋势,高浓度时对幼苗鲜重的抑制作用较为强烈。白花丹参根及根茎水浸液对黄芩幼苗苗高和鲜重的化感指数绝对值小于丹参。丹参和白花丹参对黄芩种子萌发和幼苗生长均表现出低促高抑的双重效应,且白花丹参对黄芩的化感潜力小于丹参。该研究比较了丹参和白花丹参对黄芩的化感效应,可为优化复合种植模式提供科学依据。     

番茄病毒病的调查研究

1984——1985年在石河子地区采集了蕃茄病毒标样175个,包括不同症状和严重度的病株。通过鉴别寄主反应,蚜传实验,物化属性测定血清学反应及病毒提纯后的电子显微镜形态观察进行了病毒种类的常规鉴定。初步认为,1984年石河子地区蕃茄病毒病的主要病源是TMV—蕃茄株系,占田间流行病源的74.5%,占调查样点的81.8%,其次为TMV—普通株系和CMV分别占30.6%和24%,同时占调查样点的63.6%和72.76%,但未发现CMV单独感染的病株。 在鉴定工作的同时,对蕃茄病毒病的流行与环境因素的关系,品种抗病性,种子带毒情况,种子消毒及蕃茄病毒病的田间防治作了初步探讨,认为对蕃茄病毒病影响较大的主要是温度,连作及田间管理等。远离菜地且有自然屏障的蕃茄病毒病明显减轻。除此,蕃茄品种间有一定的抗病性差异。新鲜种子带毒率高,贮藏数月后带毒率明显降低,用磷酸三钠和次氯酸钠对种子进行消毒,可以降低种子带毒率;磷酸二氢钾在蕃茄病毒病发病初期喷洒有明显的控制作用,且有增产效果。     

贵州南方菜豆花叶病毒的ELISA检疫

采用ELISA间接法对分布于贵州几个地区的菜豆进行南方菜豆花叶病毒的检测 ,结果表明 :在所采集到的样品中 ,仅贵阳地区的菜豆感染有南方菜豆花叶病毒。其检测的灵敏度和最佳反应稀释度分别为 80 6ng/mL和 1∶5 0 0稀释度。