马铃薯微型薯诱导简报

马铃薯试管微型薯是通过组织培养在容器内诱导试管苗于叶腋内形成的小薯[1].试管微型薯诱导技术自70年代中期首次报道以来,现在已被广泛应用于种质资源保存、交换、无毒种薯生产及马铃薯基因工程研究与应用中,本试验研究了克新4号和东农303,在二种培养方式、二种碳源、二种调节剂条件下诱导结薯情况.     

紫色甘薯茎尖脱毒与快繁及试管苗移植技术研究

以紫色甘薯块根为外植体在70%酒精浸渍2 min,0.1%HgCl2溶液消毒12 min无菌下培养催芽,3-5 d获取无菌芽苗。茎尖分生组织（0.2-0.4 mm）含1-2片叶原基在MS＋6-BA 0.1 mg/L＋NAA 0.05 mg/L下诱导培养成不定芽苗,继而分段在MS＋6-BA0.25-1.0 mg/L＋NAA 0.2-0.3 mg/L培养基增殖快繁最佳。培养不定芽试管苗3-5 cm接种在1/2MS＋IAA0.25 mg/L＋IBA0.25 mg/L培养基5 d生根率100%。试管苗移植试验结果显示脱毒苗比种薯苗产量提高,藤蔓茂盛长势强,结薯整齐薯块大,薯皮光滑,颜色鲜艳,抗逆性增强。     

马铃薯试管薯诱导影响因素的研究

分别以甘农薯3号脱毒试管苗的顶芽切段和侧芽切段为外植体,研究了6-BA浓度,培养基状态,光照条件及蔗糖浓度对试管薯形成和发育的影响。     

草莓试管苗生根技术的改进研究

以“丰香”花药诱导产生的草莓脱毒无根试管苗为材料，探讨了无机盐、生长调节剂、糖对其不定根形成的影响。结果表明，在无机盐降为MS培养基的1/4时，生根效果更好；在促进生根的生长调节剂中，以NAA最为有效，适宜的浓度为0.05mg/L；蔗糖浓度20g/L时，生根最好、最经济。     

脱毒马铃薯试管苗的无土栽培及微型薯的繁殖

以“鲁引一号”马铃薯脱毒试管苗为材料,探讨了不同栽培条件和方法、不同生长调节剂预处理及不同收获期对脱毒试管苗微型薯形成及产量构成的影响。结果表明,采用试管苗切段扦插的方法不仅繁殖率高,而且植株结薯率也较试管苗整株移栽的植株高,在扦插前用吲哚丁酸（IBA）预处理切段,有利于切段生根,但对后期植株结薯量影响不大,而用矮壮素（CCC）预处理切段后,植株的结薯期提前,且后期结薯期提前,且后期结薯量增加,通过对苗床和育苗盘栽培比较,前者利用管理,结薯量和大薯率都较后者高,在烟台的气候条件下,微型薯的收获期以65d为宜。     

黄秋葵愈伤组织培养及再生体系建立的研究

以具有杂种黄蜀葵嫩茎为材料,采用组织培养的方法,进行了嫩茎的愈伤组织诱导、分化,不定芽的生根以及试管苗的生根继代增殖培养、移栽与定植的研究.结果表明:嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基是MS+6-BA0.75mg/L+2,4-D2.1 mg/L;愈伤组织分化培养的理想培养基是MS+AgNO31.0 mg/L+NAA0.1mg/L+ZT1.6mg/L;1/3MS+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L是不定芽生根培养的理想培养基;试管苗生根继代增殖培养的理想培养基是1/3MS+ABT0.6mg/L+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L.试管苗移栽成活率为93.9%,定植成活率为97.5%.定植的试管苗保持了杂种黄秋葵所有植物学性状和杂种优势.     

勋章菊试管开花研究

试管花卉有较高的观赏和科研价值,勋章菊适宜作为试管花卉的材料进行研究和推广。以勋章菊叶片诱导的不定芽为材料,通过不同的培养基处理进行开花诱导,探讨勋章菊在试管内开花的条件。研究结果表明:多效唑和矮壮素对勋章菊的花芽分化有促进作用,而且使植株矮化、增壮,提高了观赏价值。MS+0.5mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.4 mg/L PP333和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.7 mg/L CCC的处理最好,60 d花芽诱导率分别为54.4%和50.2%。     

白花碎米荠组织培养及快速繁殖的研究

以白花碎米荠的嫩茎为材料,采用组织培养的方法,进行了愈伤组织诱导与分化,不定芽生根,试管苗的生根继代增殖培养与试管苗的移栽和定植的研究.结果证明:MS+6-BA 1.2 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养的理想培养基;1/2MS+AgNO 31.0 mg/L与1/2MS+AgNO31.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;把不定芽的下部切口浸到浓度为5 mg/L的NAA溶液中处理约5 min,再将其接种到1/3MS+IAA 0.5 mg/L～0.7 mg/L两种培养基上进行生根培养的方法是不定芽生根培养的理想方法;1/3MS+IAA 0.6 mg/L是试管苗生根继代增殖培养的理想培养基.试管苗移栽成活率为90.1%,定植成活率为96%.定植的试管苗保持了野生白花碎米荠的所有生物学性状.     

文心兰的快速繁殖和试管苗移栽

通过对文心兰试管苗的增殖、生根以及试管苗的移栽进行研究。结果表明：影响试管苗增殖和生根的最敏感的因素是培养物的生理状态，其次为激素的比例。其培养方案为：(1)增殖培养：选择原球茎为培养物．培养基为：MS 6-BA3.0mg／L NAA0.2mg/L 0．1％活性炭；(2)生根培养：选择具有3片叶子，高约6-7cm的小苗作为培养物，培养基为：MS 6-BA3.0mg/L NAA0.3mg／L 0.1％活性炭．并将发育形成的试管苗经“炼苗处理”后，移栽成活。     

翼柄山莴苣愈伤组织分化及试管苗培养的研究

为保护翼柄山莴苣的野生资源,满足栽培对种苗的需求,以嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导及分化培养、生长芽试管苗培养、试管苗移栽与定植的研究,成功培养了生长旺盛的试管苗。结果表明:MS+琼脂4.6g/L+蔗糖34 g/L+ZT 0.7 mg/L+2,4-D 2.2 mg/L是嫩茎愈伤组织培养的适宜培养基;在光照强度4 000 Lx的条件下,MS+La(NO3)3·6H2O 0.5 mg/L+蔗糖36 g/L+琼脂0.52 g%+IAA 0.05 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/3 MS+蔗糖36 g/L+琼脂0.52 g%+IAA 0.05 mg/L+NAA 0.15 mg/L是生长芽试管苗培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为86.9%,定植成活率为97.5%。定植的试管苗保持了野生翼柄山莴苣的植物学性状。     

马铃薯组织培养技术研究

以马铃薯茎尖、茎段和芽体3种不同外植体为材料，用浓度为1．0mg／L的NAA与不同浓度的2，4-D组合诱导愈伤组织；用浓度为0．2mg／L的NAA和不同浓度的BA组合诱导不定芽。试验结果表明：NAA1．0mg／L 2，4-D1．5mg／L最适于愈伤组织的诱导，NAA0．2mg／L BA0．3ms／L最适于不定芽的诱导；NAA对马铃薯根的分化有促进作用。     

凉山州气雾栽培法生产微型马铃薯营养液配方的研究

马铃薯原原种气雾栽培法是一种新型的无土栽培技术,相较传统栽培方式,具有较多优势。调控营养液营养元素是获得马铃薯原原种高产的关键技术。以马铃薯"米拉(Mira)"品种的脱毒试管苗为试验材料,在水培壮苗培养阶段采用Box-Behnken设计,对改良霍格兰营养液中硝酸钾、磷酸二氢钾、硝酸铵的比例进行了优化。优化后(即优化霍格兰)的营养液中三者的比例为:硝酸钾645 mg/L、磷酸二氢钾230 mg/L、硝酸铵120 mg/L,采用此营养液用于后续的原原种气雾栽培试验。优化霍格兰在雾培马铃薯植株生长阶段与改良霍格兰和荷兰配方相比,株高和叶面积显著增加,但是匍匐茎数和匍匐茎分枝数低于后两者。在雾培马铃薯结薯期,与营养液中采用230 mg/L磷酸二氢钾喷雾相比,330 mg/L磷酸二氢钾喷雾可显著增加单株结薯数,530 mg/L的磷酸二氢钾喷雾可显著增加单粒重和最大单薯重。雾培马铃薯的不同生育时期可采用不同的营养液,但需要加以验证才能用于大规模生产。     

马铃薯脱毒种薯的工厂化生产研究

以马铃薯的茎尖为外殖体，经脱毒处理，并检测无病毒的苗进行快速繁殖，生产种薯，组培生产的培养基分别为：（1）茎尖培养基：MS＋GA30.1mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.01mg/L；（2）壮苗培养基：MS＋B90.8g/L。     

甘薯毛状根植株再生研究

用发根农杆菌Ｒ１０００菌株感梁甘薯（渝薯３４品种）,获得转化毛状根,从毛状根中选择出了５个无性系,当毛状根培养在含有２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１ｍｏｌ／Ｌ玉米素的ＭＳ培养基上诱导出了愈伤组织,当愈伤组织培养在含有１ｍｇ／ＬＫＴ＋１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ的培养基上,３周以后获得了再生植株,用随机及增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分子标记检测出了再生植株的多态笥。     

马铃薯酸解氧化淀粉的加工工艺研究

以马铃薯淀粉为原料,研究酸解氧化淀粉的加工工艺,采用正交试验确定了制备马铃薯酸解氧化淀粉的优化工艺条件.结果表明,在温度为55℃,盐酸浓度为0.5 mol/L,过硫酸铵的质量分数为3.0%,反应时间为50 m in的条件下制得的马铃薯酸解氧化淀粉的黏度最低,抗凝沉性较好.     

红头兰(Tuberolabium quisumbingii)胚培养和快速繁殖

以红头兰的胚为材料,研究了红头兰的胚培养和快速繁殖技术.结果表明:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭均有利于胚的萌发;在继代培养中,适宜的培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L;分化和壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+AC2.0g/L+蛋白胨2.0g/L+琼脂7g/L。     

甘薯愈伤组织的诱导、生长调节及原生质体培养

甘薯叶片培养在附加NAA0.01-1.0/ZT0.01-10mg/L的MS培养基上可以100％地诱导产生愈伤组织,NAA1.0/ZT0-0.1mg/L可诱导叶片产生根。经HPLC测定,甘薯叶片内源生长素含量为480ng/g·FW,可能与甘薯叶片易诱导生根有关。在MS培养基上诱导产生的甘薯愈伤组织质地致密、生长缓慢,当继代于高NO_3~-低NH_4~+含量的改良MS培养基上就可转变为疏松、生长迅速的愈伤组织。用疏松愈伤组织酶解出了大量原生质体,并培养再生成了愈伤组织块。     

饱和D最优设计法在马铃薯微繁培养基筛选中的应用

采用饱和D最优设计法,研究了5种植物生长调节剂与扦插个数的关系,通过记录青薯2号、6号两种脱毒试管苗生长状况,建立了不同植物生长调节剂、不同接种数对试管苗生长的函数模型。结果表明：试管苗最佳扦插个数：7—9个,2,4-D最佳浓度：1．32—2．514mg／L;6-BA最佳浓度：1．05—1．95mg／L;NAA最佳浓度：0．165—0．335mg／L;KT最佳浓度：0．35-0．65mg／L;CA最佳浓度：3．5～6．5mg／L。     

两种遗传标记筛选物在马铃薯Desiree遗传转化应用中的研究

以马铃薯茎段为外植体,采用农杆菌介导法,将带有Bar和hpt基因的植物表达质粒载体转入马铃薯栽培品种Desiree,并对遗传转化过程中的预培养时间、抑菌素浓度、筛选物抗除草剂Basta和潮霉素的浓度等因素进行了研究.结果表明:预培养时间2 d转化效率最高;头孢霉素浓度为300 mg/L时,能够有效的抑制农杆菌的生长;以除草剂Basta为筛选物时,适宜的筛选压为0.6 mg/L,用潮霉素(Hyg)作为筛选物时,以15 mg/L为最合适;获得的转基因植株经PCR分析,证实Bar基因己经整合到马铃薯基因组DNA中,从而建立了以除草剂Basta或以潮霉素为遗传标记筛选物的马铃薯栽培品种Desiree的遗传转化体系,为利用基因工程进一步改良马铃薯品质奠定了基础.