眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人鼻咽癌CNE-2细胞株的影响

目的：了解眼镜蛇毒灌胃后的兔血清(serum of rabbit taking orally cobra venom，SRCV)对人鼻咽癌CNE-2细胞的影响。方法：采用体外细胞培养的方法，观察SRCV对人鼻咽癌CNE-2细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用，及对细胞生长和分裂指数的影响。结果：发现SRCV能够明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞的生长，且其抑制效应随剂量的增加而增加，但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响。结论：SRCV对鼻咽癌CNE-2细胞的生长有明显的抑制作用，并且有高度的选择性。     

中华眼镜蛇毒抑制豚鼠至大鼠异种肾移植超急性排斥反应的实验研究

目的：探讨中华眼镜蛇毒对异种移植超急性排斥反应的影响。方法观察质量分数为0．1％中华眼镜蛇毒（0．4mg／kg)腹腔注射豚鼠到大鼠异种移植肾存活时间、病理及血清补体C3的影响。结果中华眼蛇毒能延长移植肾存活时间、降低受体血清C3水平,减轻移植肾病理损害,结论：补体抑制剂中华眼镜蛇毒能有效抑制效制豚鼠到大鼠的异种超急性排斥反应。     

口服三种形式眼镜蛇毒的急性毒性及对肝癌移植瘤的抑瘤作用

目的 :了解口服 3种形式眼镜蛇毒的急性毒性及对肝癌的在体抑瘤作用。方法 :按Bliss法设计急性毒性实验 ,蛇毒兔血清、原毒和经酸热处理后蛇毒分别一次性给小鼠灌胃 ,观察其急性毒性。移植小鼠腹水型肝癌于小鼠右腋皮下 ,应用以上 3种形式蛇毒连续灌胃 9d ,每天给药量以最大耐受量 (LD1)的 1/3,计算其抑瘤率。结果 :小鼠口服上述 3种形式蛇毒的LD50 及 95 %可信限分别为 5 4 10mg·kg- 1(46 5 0～ 6 2 90mg·kg- 1)、5 2 94mg·kg- 1(42 0 7～ 6 6 6 3mg·kg- 1)和 97 4 5mg·kg- 1(83 6 2～ 113 5 6mg·kg- 1)。 3种形式蛇毒 2次抑瘤实验的抑瘤率 :蛇毒兔血清冻干粉为35 5 %、32 9% ,原毒为 2 2 9%、2 0 3% ,经酸热处理后蛇毒为 2 5 3%、2 1 3%。结论 :眼镜蛇毒原毒的抗肿瘤作用在蛋白变性或消化吸收后仍然得以保留 ,蛇毒兔血清冻干粉的毒性较其他两种低但抑瘤作用强     

中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用

【目的】探究中华眼镜蛇(Naja atra)血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用。【方法】不同稀释倍数的中华眼镜蛇血清与蛇毒于37℃孵育30min后,检测蛇毒中磷脂酶A2、透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶、L-氨基酸氧化酶和5′-核苷酸酶活性的变化情况。【结果】中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中磷脂酶A2和5′-核苷酸酶具有明显的抑制作用:当血清稀释2倍时,可以使蛇毒磷脂酶A2活性降低28.44%(p<0.001);当血清稀释8倍时,可以使蛇毒中5′-核苷酸酶活性活性降低23.44%(p<0.001)。中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中的透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶和L-氨基酸氧化酶均无抑制作用。【结论】中华眼镜蛇血清中存在蛇毒磷脂酶A2和5′-核苷酸酶的抑制剂,该结果为后期蛇毒抑制剂的筛选提供了理论依据。     

鬼桕毒自旋标记物的生物活性——对HeLa、BHK及KMB细胞的体外抑制和对cAMP-PDE的影响

用鬼桕毒自旋标记衍生物对子宫颈癌细胞(HeLa)、乳地鼠肾传代细胞(BHK)和人胚肺成纤维细胞(KMB)进行了体外抑制试验,发现鬼桕毒自旋标记衍生物在用量为0.1毫克时,对HeLa、BHK细胞有较强的抑制作用。我们还就鬼桕毒自旋标记衍生物对兔脑环腺苷酸磷酸二酯酶(cAMP-PDE)活性的抑制效果进行了观察.结果表明,对cAMP-PDE活性有较强的抑制,抑制率普遍与阳性药物-氨茶碱相近似,达30—40％。     

生物细胞在极低频电磁场中的效应

探讨极低频电磁场对洋葱根尖细胞及人肺成纤维细胞生物学特性的影响.对生长发育过程中洋葱根和体外培养的人肺成纤维细胞进行50 Hz,3 mT极低频电磁场(ELFMFS)处理,对洋葱根的外部形态及细胞有丝分裂指数、染色体形态等进行观察分析,对人肺成纤维细胞进行增殖量比较及凋亡分析.结果表明:50 Hz,3 mT ELFMFS在20 ℃时对洋葱根的生长量无明显影响,但在30 ℃下对洋葱根的生长起抑制作用且可导致根生长异常;正常培养条件下,ELFMFS照射组人肺成纤维细胞生长受到抑制,有细胞凋亡发生.ELFMFS与温度的叠加效应(50 Hz,3 mT,30 ℃)可对洋葱根的生长及根尖细胞的增殖产生重要作用,ELFMFS对人肺成纤维细胞的生长起抑制作用并可引起细胞凋亡.     

阿尔泰藜芦(Veratrum lobelianum Bernh)总碱对细胞DNA合成和磷代谢的影响

藜芦总碱浓度为20μg/ml时,对小白鼠S180和小白鼠腹水型肝癌细胞及人胚肺成纤维细胞(KMB—17)的DNA合成有显著抑制作用,对癌细胞的磷代谢也有抑制。     

牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制作用

【目的】考察牛奶菜(Marsdenia sinensis)水提物对中华眼镜蛇(Naja atra)毒神经毒性的抑制作用。【方法】利用四通道离体组织灌流系统和昆明小鼠(Mus musculus)离体回肠标本检测牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制、即时中和与恢复作用。【结果】牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性有一定抑制作用。【结论】研究结果揭示了牛奶菜用于治疗中华眼镜蛇咬伤的有效性,为后续开发抗蛇毒药物奠定了基础。     

白藜芦醇抗肿瘤作用的体外实验研究

选用呼吸、消化、循环系统来源的４种癌细胞株：人肺癌ＰＧ细胞、人大肠上皮癌ｌｏｖｏ细胞、人肝癌细胞ＨｅｐＧ２、人白血病ＨＬ－６０细胞以及小鼠成纤维细胞３Ｔ３作为研究对象,检测Ｒｅｓ的体外抗癌活性。采用ＭＴＴ法检测细胞的生长增殖活性。结果显示,Ｒｅｓ不影响正常细胞（３Ｔ３）的生长增殖性、对ＰＧ、ｌｏｖｏ细胞的生长增殖也不发生作用;但明显抑制ＨｅｐＧ２、ＨＬ－６０细胞的生长增殖。表明Ｒｅｓ的抗癌作用具有     

培养方法及胎牛血清浓度对人胎儿成纤维细胞体外生长的影响

采用单细胞培养法和组织块培养法从原代培养人胎儿成纤维细胞,并在不同体积分数胎牛血清(FBS)(0%、4%、8%、10%、12%)的条件下观察人胎儿成纤维细胞培养的状况并采用台盼蓝染色法进行活细胞计数.结果表明,早期由组织块培养法原代培养获取的细胞形态要比单细胞培养法原代培养获取的细胞稍好些,且在细胞传代后极少出现无法贴壁的死细胞.FBS对hFFs生长影响比较明显.在实际应用中,在体积分数8%FBS下,采用组织块培养法进行人胎儿成纤维细胞体外培养,效果良好.     

中华眼镜蛇毒组份Ⅲ的碘化标记物制备及质量鉴定

目的：研究对眼镜蛇毒(Naja naja atra venom)组份Ⅲ进行^125I放射性标记的方法及其质量评价．方法：用氯胺-T法碘化标记眼镜蛇毒组份Ⅲ．结果：用氯胺-T法按^125I标记组份Ⅲ，标记物放化纯为98．38％，比活度为0．945mCi／mg，RF值为0．76，每个组份Ⅲ分子上带0．56个^125I原子，与非标记组份Ⅲ有相同的生物学活性和理化性质．结论：所标记的眼镜蛇毒组份Ⅲ符合放射结合分析的要求．     

蛇毒神经生长因子的分离纯化及鉴定

采用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０、ＣＭ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ３２柱层析，从中华眼镜蛇中分离出神经生长因子（Ｎｅｒｖｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｅｒ，ＮＧＦ）。经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法证明所得以的ＮＧＦ为单一组分，相对分子质量约为１．３×１０＾４。经凝胶等电聚焦电泳测得ＮＧＦ等电点ＰＩ约为７．０左右。经ＨＰＬＣ及电泳图像分析系统测得纯度为９８％。此ＮＧＦ等８ｄ鸡胚背     

眼镜蛇毒神经生长因子对成年猫坐骨神经损伤治疗效果的实验室观察

目的 :探讨从眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对成年猫坐骨经损伤后的影响。方法 :本实验制成成年猫坐骨神经损伤模型 ,损伤局部注射蛇毒NGF(2μg/kg/d) ,分别治疗10d和30d ,并与对照组(损伤坐骨神经 ,不给药物)比较。结果 :眼镜蛇毒NGF在神经损伤早期应用能减轻神经纤维发生的溃变 ,促进神经纤维再生。结论 :损伤局部长时间注射NGF会导致神经纤维增生过度 ,丧失传导功能     

福建连江产眼镜蛇（Naja naja atra）核型及等臂染色体研究

本文较详细地分析了福建连江产眼镜蛇的核型,绘出其染色体组型模式图。它与浙江产眼镜蛇的核型相比,有一对大染色体着丝点位置差异显著。文中首次报道了眼镜蛇的等臂染色体,并初步探讨了用双线期染色体进行蛇类染色体组型分析的方法。     

抗人胃腺癌细胞株AGS单克隆抗体的制备和初步鉴定

用人胃癌细胞株AGS作为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗人胃癌细胞mAb,应用间接ELISA法进行筛选,显微操作法进行亚克隆并用琼脂糖双向免疫扩散法鉴定亚类,免疫化学法检测特异性,获得l株分泌抗AGS细胞株的mAb的杂交瘤(命名为1B4).该杂瘤分泌的mAb与人宫颈癌细胞株Hela、肝癌细胞株HepG2和正常胎儿肺细胞均为阴性反应,而与AGS细胞呈阳性反应.结果表明,该mAb对AGS细胞株具有一定的特异性,可为胃癌相关抗原的筛选研究提供一定的帮助.     

细菌内毒素诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究

为了探讨细菌内毒素对人肺腺癌细胞株A549的影响及细胞凋亡与肿瘤坏死因子的关系,用含有细菌内毒素1000EU/mL、500EU/mL、100EU/mL、50EU/mL、0EU/mL的MEM细胞培养液来培养A549细胞,通过细胞计数来绘制细胞生长曲线,并用台盼兰拒染率测定细胞活率、用DNA梯形条带法及TUNEL原位法检测细胞凋亡情况.结果显示,细菌内毒素对肺癌细胞A549生长有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,此种抑制是通过诱导细胞凋亡达到的.肿瘤坏死因子检测结果没有发现规律性.表明内毒素在体外可以诱导肺腺癌细胞的凋亡,且存在明显的剂量关系,并且此凋亡不是依赖TNF-α途径发生的,为临床上通过诱导细胞肿瘤细胞凋亡,从而为预防和治疗肿瘤提供了理论依据.     

中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究

采用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ和ＳｅｐｈｏｓｉｌＣ８以及ＨＰＬＣ层析方法，自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子（ＮＧＦ），此ＮＧＦ经８ｄ鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经ＨＰＬＣ及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成，经ＳＤＳＰＡＧＥ及ＨＰＬＣ测定分子量分别为２４．１ＫＤ和２４．９ＫＤ，等电聚焦电泳测得ｐＩ为８．２，氨基酸组分分析表明ＮＧＦ含酸性氨基酸较少，通过１２５｜标记ＮＧＦ测定出ＮＧＦ在生物体内主要分布于肾、肺、及周围神经     

胚胎大鼠肺成纤维细胞的体外培养

目的:探讨胚胎大鼠肺成纤维细胞的体外培养条件.方法:采用胶原酶消化19d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞后采用加胎牛血清的DMEM培养液,进行细胞培养.用波形蛋白免疫细胞化学染色对所分离的细胞进行鉴定.结果:细胞培养24h后有一定量细胞贴壁,48h后贴壁细胞开始生长.结论:该实验方法可以成功地培养大鼠胚胎肺成纤维细胞.     

河池学院校园两栖爬行动物初步调查

2008年7月至2009年12月,利用标本采集和访问的方法对河池学院校园内两栖爬行动物资源进行了初步的调查,共记录到两栖爬行动物26种,其中两栖动物1目4科6种,爬行动物2目7科20种.在校园中最常见的两栖动物是斑腿泛树蛙(Polypedates leucomystax),最常见的爬行动物是红脖颈槽蛇(Rhabdphi...