光周期对白芥下胚轴和子叶形态发生的影响

以 15h/d的长光照和 10h/d的短光照预处理 7d的白芥幼苗下胚轴和子叶切段为材料 ,诱导愈伤组织和器官再生 .结果表明 ,外植体的切口处均有愈伤组织形成 ,但生理学下端切口处出愈率高于上端 .下胚轴生理下端有根的分化 ,芽仅出现在下胚轴的生理上端。子叶外植体中只有根的分化 ,长光照预处理与短光照相比 ,愈伤组织形成较早 ,生长较快 ,对外植体生理下端的诱导作用较明显 .长光照对器官发生的影响因外植体部位而异     

超声波辅助的发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积,提高农杆菌对外植体的转化频率。用野生型发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes)A4菌株感染黄瓜（Cucumis sativus L.) 无菌苗的子叶和下胚轴,建立了黄瓜的发根遗传转化体系。同时,对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮的添加与否等影响因素进行了研究。结果表明,采用外植体在添加0．5mg/L NAA和2mg/L 6-BA的MS培养基上预培养4d,超声波处理2s,共培养3d,在预培养共培养期间子叶上表皮向下可以取得最佳的转化效果,发根诱导率为94．7％。乙酰丁香酮对发根诱导频率影响不明显。冠瘿碱检测表明,发根确定能合成农杆碱。     

大豆与花生愈伤组织的诱导与培养

大豆品种Ｍｏｎｋｅｙ,Ｒ３４,８４－８７种子萌发４ｄ后,取其子叶,子叶节,子叶尖芽作为外植体,于５ＢＡ培养基和１ＢＡ培养基中培养,只能诱导白色愈伤组织及生根,不能获得再生植株。不同基因型的花生种子萌发需要不同时间。取不同叶龄的小叶作为外植体在Ｂ３Ｎ１培养基上导芽分化,后转至Ｂ５培养基上诱导芽伸长,最后于Ｎ２培养基上诱导生根,获得再生植株,芽诱导率为７９．４％￣９３．８％。     

生长调节剂对金边玉簪丛生芽诱导影响的研究

以芽为外植体建立了金边玉簪组织培养的技术体系,重点研究了激素配比对玉簪丛生芽诱导的影响,并有效防止外植体褐变、玻璃化的问题。结果表明,金边玉簪的培养条件为:温度(26±1)℃,光照12 h/d,光照强度2 500 lx左右,pH值5.8～6.0,丛生芽诱导培养基以MS NAA4.0 BA0.1(mg/L)为好,30 d后启动率可达95%。     

Micro-Tom番茄转基因植株再生体系的优化

转基因植株的再生频率较低一直是植物基因工程研究的瓶颈之一.以番茄的MicroTom突变体为材料,探索了外植体植物激素配比、预培养时间、共培养时间、筛选剂对愈伤组织发生和不定芽生长的影响.结果表明:子叶比下胚轴更适合作为愈伤组织和不定芽诱导的外植体;当玉米素(zeatin,ZT)质量浓度为0.5 mg/L,吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)质量浓度为1.0 mg/L时最有利于不定芽诱导;外植体预培养的适宜时间为3 d,农杆菌和外植体共培养的适宜时间为2 d;外植体对卡那霉素的耐受上限为40 mg/L,替门汀的适宜质量浓度为150 mg/L.实验所建立的转基因再生体系为Micro-Tom番茄的遗传工程应用奠定了基础.     

甘蓝(Brassica oleraea)外植体离体培养再生系统的建立

对甘蓝培养基组成、外植体类型、取材时间和品种进行了研究,建立了甘蓝器官型的高效再生系统.选取中甘11号6日龄无菌苗的带柄子叶和下胚轴做外植体,接种于MS BA4.5 mg·L-1 NAA0.01mg·L-1的琼脂培养基上,35 d后不定芽的分化率分别达到100%和88.9%.本实验所建立的直接出芽程序为甘蓝的遗传转化研究提供了一个良好的再生体系.     

高乌头愈伤组织诱导及增殖研究

以高乌头(Aconitum Smomontanum Nakai.)植株为材料,研究了不同外植体(芽、叶片、叶柄)、基本培养基、植物生长调节剂和培养条件对高乌头愈伤组织诱导和增殖的影响.结果表明:以MS或B5为基本培养基,附加不同组合的2,4-D、NAA、KT、BA,均可诱导产生愈伤组织,但不同外植体、不同生长调节剂组合对愈伤组织发生均有一定影响;作为外植体,高乌头的芽、叶柄和叶片都可顺利诱导出愈伤组织,生长素2,4-D对高乌头外植体的脱分化起促进作用,但 NAA却抑制愈伤组织的形成,细胞分裂素KT和 BA均能与2,4-D组合促进愈伤组织的诱导.在B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 BA 1.0 mg·L-1培养基上,光照14 h·d-1, 温度(22±1)℃,最有利于高乌头愈伤组织的诱导.在此条件下,30 d后,芽的诱导率达95%,叶片的诱导率达70%,叶柄的诱导率达87.5%.愈伤组织最佳增殖条件为B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 KT 0.5 mg·L-1,光照14 h·d-1,温度(22±1)℃.继代培养 14 d后 ,平均增殖率达197.5%.     

满天星不同外植体离体培养芽形成的研究

本试验研究了满天星不同外植体,不同取材时间及生长调节剂,对芽分化形成的影响。结果表明:以茎尖为外植体,芽诱导率最高可达95 0%,茎段次之,叶片的芽诱导率很低。取材应在5月至6月间,此时芽的诱导效果最好。6-BA和KT分别在(0 1-0 5)mg L及(0 1-1 0)mg L浓度范围内,对芽的产生起促进作用,且以6-BA0 5mg L的效果为好;当6-BA或KT与生长素NAA或IBA配合使用时,可提高芽的诱导率,以NAA0 5mg L 6-BA1 0mg L的效果最优。     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

影响农杆菌介导的辣椒基因转化因素的研究

试验设置农杆菌类型、辣椒基因型、外植体、vir基因活化培养基、方法5个因素，研究了利用根癌农杆菌介导法辣椒遗传转化的效果。以获得Km抗性芽外植体频率为指标，发现农杆菌菌株类型和辣椒基因型对转化效率都有较大影响，直接影响着转化效率。采用预培养2d的子叶外植体，用农杆菌侵染5～7min，可获得最高的转化效率。