龙血竭抗癌成分的虚拟筛选及体外抗癌活性检测验证

应用计算机辅助虚拟筛选技术研究龙血竭抗癌活性成分. 以HER2为靶蛋白受体，对龙血竭149种已知化合物进行了虚拟筛选，对其中具有潜在活性的成分进行了体外HER2影响测定以及SK-Br-3抗癌活性检测验证. 结果表明， HER2靶蛋白分子对接模型具有较强的活性分子富集能力，与HER2受体有效对接、具有抗癌潜力的活性分子主要为二氢查耳酮、黄烷、甾体以及芪类成分，与HER2胞外域和胞内域结合的4种成分及能与HER2胞内域结合的3种成分均能显著的抑制体外HER2活性，其中反式3-甲氧基-4′,5-二羟基二苯乙烯、反式3,4′,5-三羟基二苯乙烯能够抑制SK-Br-3癌细胞增殖、改变细胞周期，引发SK-Br-3极显著凋亡，具有良好的体外抗癌活性，可为龙血竭抗癌药物的研发提供基础数据.      

龙血竭总酚提取物化学成分的分离鉴定

运用聚酰胺、硅胶、葡聚糖凝胶等柱色谱方法,从云南产龙血竭总酚提取物中分离出4个黄烷类、2个芪类、4个甾体类成分. 通过现代波谱学方法结合化学显色方法,鉴定其结构分别是4’,7-二羟基黄烷;7-羟基-4’-甲氧基黄烷;4’,7-二羟基-3’-甲氧基-8-甲基黄烷;4’,7-二羟基高异黄烷;4’-羟基-3,5-二甲氧基二苯乙烯;反式-4’,5-二羟基-3-甲氧基-二苯乙烯;豆甾醇;4-甲基-胆甾-7-烯-3β-醇;环阿尔廷醇;25（R）-薯蓣皂苷元. 化合物4’,7-二羟基-3’-甲氧基-8-甲基黄烷、反式-4’,5-二羟基-3-甲氧基-二苯乙烯、环阿尔廷醇、25（R）-薯蓣皂苷元为首次从龙血竭中分离得到.      

白藜芦醇类似物对Bel-7404细胞增殖及凋亡的影响

为研制新型抗肿瘤药物,以3,4-二甲氧基苯乙腈和对甲氧基苯甲醛合成白藜芦醇类似物,并以MTT法、流式细胞仪细胞周期分析、Hoechst33258荧光染色及Western blot方法检测合成的白藜芦醇类似物对肝癌Bel-7404细胞的增殖影响及其机制。实验结果证明,所合成的含甲氧基白藜芦醇类似物可通过诱导Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达上调,引起Bel-7404细胞G2/M周期阻滞,并发生细胞凋亡,最终抑制细胞增殖。     

剑叶龙血树树叶化学成分及其改善HepG-2细胞胰岛素抵抗的作用

采用硅胶、Sephadex LH-20和反相RP C18等柱色谱技术,从云南剑叶龙血树(Dracaena cochinchinensis)树叶甲醇和石油醚提取物中分离了7个化合物,包括3个黄酮类化合物,1个三萜和3个甾体化合物,经综合波谱分析分别鉴定为:4',7-二羟基-3'-甲氧基-8-甲基黄烷(1),7-羟基-4'-甲氧基高异黄烷(2),2',4,4'-三羟基查尔酮(3),(22E)-3β-acetoxystigmasta-5,22-diene(4),lanost-9-en-3β-ol(5),β-谷甾醇(6),胡萝卜苷(7).测定了化合物1~3改善Hep G-2细胞对胰岛素抵抗的作用,化合物1~3能显著增加细胞的葡萄糖消耗量.     

杜鹃兰的化学成分研究

为研究杜鹃兰假鳞茎中的化学成分,利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备液相色谱对其进行了分离纯化,并通过1H NMR和13C NMR波谱技术进行了结构鉴定.结果表明:从乙酸乙酯层中分离获得了5个化合物,分别鉴定为1-(4-羟苄基)-2,7-二羟基-4-甲氧基菲(I),3',5-二羟基-2-(p-羟苄基)-3-甲氧基联苄(II),2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(III),2,7-二羟基-1-(p-羟基苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲(IV),4-羟基-2-甲氧基苯-1-O-β-D-吡喃葡萄糖(V),化合物IV~V为首次从该植物中分离获得.     

三氮唑席夫碱衍生物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用

用不同浓度的3-吡啶-3-基-4-[(4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基)氨基]-5-甲硫基-1,2,4-三唑(LH-37)处理细胞,观察其对人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡诱导作用. 结果发现,LH-37可抑制细胞增殖,且抑制率随浓度的增加而增高,IC50为2.0×10-4 mol/L;药物浓度为1×10-5 mol/L时作用48 h,SMMC-7721细胞皱缩,呈现凋亡各期改变,Caspase-3阳性细胞明显增加,细胞凋亡率显著高于对照组的现象(P＜0.05).     

苦绳中木脂素类化学成分的分离与结构鉴定

为明确苦绳Dregea sinensis Hemsl中的主要化学成分,采用AB-8大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和反相制备液相等色谱方法从苦绳中首次分离得到5个木脂素类化合物. 通过一维和二维核磁共振波谱、有机质谱等方法确定它们分别为4',4"-二羟基-3,3',3",5,5',5"-六甲氧基-7,9':7',9-二环氧-4,8"-氧-8,8'-倍半新木脂素-7",9"-二醇(1),4',4"-二羟基-3,3',3",5,5'-五甲氧基-7,9':7',9-二环氧-4,8"-氧-8,8'-倍半新木脂素-7",9"-二醇(2),(+)-异落叶松树脂醇(3),赤式-愈创木酚基甘油基-β-O-4'-松柏醇(4),diasyringaresinol (5).      

大籽獐牙菜的化学成分研究(Ⅰ)

对采自云南新平县的大籽獐牙菜脂溶性部分进行了化学成分研究,采用各种柱色谱法进行分离纯化得到11个化合物,通过波谱数据分析鉴定它们的结构为:1,7-二羟基-3-甲氧基(口山)酮(1),1,2,6 -三甲氧基-8-羟基(口山)酮(2),1,7-二羟基-3,8 -二甲氧基(口山)酮(3)、齐墩果酸(4),马钱苷酸(5),獐牙菜苷(6),7 -甲氧基獐牙菜苷(7),2'-0-(3-羟基苯甲酰基)-獐牙菜苷(8),3 -0-葡萄糖基-1,7,8-三甲氧基(咄)酮(9),2-对羟基苯基乙醇(10),3,7,4',4"-四羟基-3',3"-二甲氧基-2,5-环氧木脂素(11),其中化合物11为首次从该属植物中分离得到.     

杜鹃兰Cremastra appendiculata化学成分研究

采用硅胶、凝胶柱色谱及HPLC对杜鹃兰(Cremastra appendiculata)的干燥假磷茎--山慈菇进行化学分离,根据化合物波谱数据鉴定其结构.结果表明,从山慈菇乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分中分离得到4个化合物,分别为5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,I);3',5',3"-三羟基联苄(3',5',3"-trihydroxybibenzyl,II);3,3'-二羟基-2-(P-羟苄基)-5-甲氧基联苄(3,3'-dihydroxy-2(P-hydroxybenzyl)-5-methoxybibenzyl,Ⅲ);3',5-二羟基-2-(p-羟苄基)-3-甲氧基联苄(3',5-dihydroxy-2-(P-hydroxybenzyl)-3-methoxybibenzyl,Ⅳ).4个化合物均为首次从该种植物中分离得到.     

右旋一叶萩碱对小鼠黑色素瘤B16增殖及细胞周期的影响

目的:探讨右旋一叶萩碱对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:右旋一叶萩碱作用于小鼠黑色素瘤细胞B16,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期。结果:右旋一叶萩碱以时间和浓度依赖的方式抑制B16细胞生长;药物作用72 h IC50为63.34μmol/L;右旋一叶萩碱诱导B16细胞凋亡并显著减少S期、G2/M期细胞。结论:右旋一叶萩碱可以抑制黑色素瘤细胞的恶性增殖,其作用机制与诱导细胞凋亡、减少S期和G2/M期细胞有关。     

白藜芦醇对卵巢癌细胞株SKOV-3细胞周期的影响及诱导其凋亡的机制研究

目的探讨白藜芦醇对人卵巢癌SKOV-3细胞的细胞周期及诱导其凋亡机制的影响;探讨白藜芦醇诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的机制.方法设置不同浓度的白藜芦醇实验组(20,40,80)μmol/L及细胞对照组,PI(碘化丙啶)单染后应用流式检测分析其凋亡细胞在细胞周期中不同阶段所占百分率;应用Annexin-v/PI双标记法染色后流式检测并通过散点图分析白藜芦醇诱导对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测白藜芦醇对SKOV-3细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达影响.结果 PI(碘化丙啶)单染后流式检测结果提示:白藜芦醇可以将卵巢癌SKOV-3细胞周期阻滞于S期;三色散点图提示白藜芦醇可诱导SKOV-3细胞早期凋亡的增加,此作用与白藜芦醇浓度呈正相关性;白藜芦醇可使人卵巢癌SKOV-3细胞中的Caspase-3表达增加.结论白藜芦醇可阻断SKOV-3细胞周期并诱导其早期凋亡;白藜芦醇诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的发生可能与Caspase通路的激活有关.     

乳苣水提取物对人肺癌细胞SPCA-1生长的影响

为了探讨乳苣水提取物对体外培养的肺癌细胞SPCA-1的影响,分别用质量浓度为0.5、1、1.25和1.5 g/L(mg/m L)的乳苣水提取物处理SPCA-1细胞,24 h后通过CCK-8法检测发现,与对照组(未处理)相比,处理组细胞增殖活力均显著下降(P0.001).流式细胞仪检测(AnnexinⅤ-FITC/PI染色)发现随着处理浓度的增加,处理组细胞凋亡率都显著提高(P0.05),且呈剂量依赖关系.为了探索乳苣是否对体内肿瘤有抑制作用,构建了SPCA-1细胞的裸鼠皮下瘤模型,通过观察喂食乳苣水提取物后皮下瘤的生长情况发现,与未喂食乳苣水提取物的对照鼠相比,喂食5周后的实验组的瘤体得到明显的抑制.实验结果表明乳苣水提取物能够抑制体外和体内生长的SPCA-1细胞,可以作为一种潜在的预防和治疗肺癌的药物做进一步研究.     

Dual regulatory effects of resveratrol on activation of NF-κB and cell proliferation in human embryonal kidney 293 cells

Resveratrol (3,4‘,5-trihydroxystilbene, Res), a naturally occurring polyphenol, exhibits antioxidant, antiinflammatory, potential chemopreventive and chemotherapeutic properties in preclinical studies. To further understand its potential clinical efficacy and safety, effect of Res at 10^-9-10^-4 mol/L on human embryonal kidney (HEK293) cell proliferation and its potential mechanism were investigated in present study. Cell viability was detected by using trypan blue dye exclusion method. Cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry with propidium iodide stain.Activation of nuclear factor-κB (NF-κB) was determined by luciferase reporter gene assay using stably transfected HEK293/κB-luc cells. Secretion of human interleukin-8(hlL-8) was measured by ELISA. Our results show that HEK293 cell proliferation was significantly stimulated by 10^-7 mol/L Res after treatment for 48 hours, or by 10^-8-10^-7mol/L Res combinated with 10 ng/mL TNFα for 24 h, but was suppressed by 10^-4 mol/L Res with or without TNFα. Both endogenous and TNFα-induced NF-κB activation were downregulated by Res at 10^-7 mol/L, but were upregulated at 10^-4 mol/L. With 10^-4 mol/L Res, the content of secreted IL-8 was increased, and apoptosis rate was increased from lessthan 5 % to 10%, together with significant cell-cycle arrest in S phase. TNFα has coordinative effects with Res on HEK293 cell apoptosis, cell-cycle arrest and IL-8 secretion. These results indicate that Res promotes cell proliferation at low concentration through down-regulation of NF-κB activation in HEK293, but suppresses its growth at high concentration through up-regulation of NF-κB activation, increasing IL-8 and cell-cycle arrest. As resveratrol has dual regulatory effect on cell proliferation in vitro, comprehensive evaluation of its potential clinical utility is needed.     

云南香格里拉高獐牙菜的化学成分研究

对采自云南省香格里拉县海拔4 000 m的龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属植物高獐牙菜(Swertia elata)的化学成分进行研究.方法采用正相硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,HPLC,Zorbax PrepHT GF反相柱色谱及MCI等现代分离分析技术进行分离和纯化,并用95%的乙醇对该植物全株进行超声提取,在其正丁醇萃取部分分离出10个已知的化合物.并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构分别为:1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮(1),1-羟基-3,5-二甲氧基酮(2),1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮(3),1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮(4),1,5-二羟基-3,8-二甲氧基酮(5),1,8-二羟基-3,7-二甲氧基酮(6),1,3-二羟基-7,8-二甲氧基酮(7),獐牙菜苷(8),(E)-aldosecologanin(9),葡萄糖香草醛苷(10),其中化合物9为首次从獐牙菜属植物中提取分离得到.     

藏药云南兔耳草的化学成分研究(Ⅰ)

 从产于德钦的云南兔耳草(Lagotis yunnanensis W.W.Smith)的乙醇提取物中分离得到8个已知化合物,经波谱分析确定其结构分别为:3,5-二羟基-4’,7-二甲氧基黄酮(3,5-dihydroxy-4’,7-dimethoxyflavone),4’,5,7-三羟基-3’-甲氧基黄酮(4’,5,7-trihydroxy-3’-methoxyflavone),对甲氧基苯甲酸(p-methoxybenzoicacid),β-谷甾醇(β-sitosterol),肉桂酸(cinnamicacid),3,4-二甲氧基肉桂酸(3,4-dimethoxycinnamicacid),香草醛(vanillin),胡萝卜苷(daucosterol).以上化合物均为首次从该植物中分离得到.     

PPP-CI方法计算双苯基噁二唑乙烯类化合物的电子光谱

应用自编的兀电子半径验自洽场分子轨道方法(PPP-CI)程序对十二种苯基(口恶)二唑乙烯衍生物的电子光谱进行了计算研究,得到了与实验值相一致的结果.     

粗毛纤孔菌的化学成分及抗炎活性

采用大孔树脂分离、 LH20凝胶层析及高效液相色谱法, 从粗毛纤孔菌成熟黄色子实体中分离得到3个多酚类化合物, 用核磁共振、 质谱结合其理化性质鉴定化合物的结构, 并考察所得化合物的抗炎活性和细胞毒性. 结果表明： 所得化合物分别为phellibaumin A（化合物1）, phelligridin D（化合物2）和3′,4′-二羟基-5-［［11-羟苯基］-6,7-乙烯基］ 3,5-二氧杂 芴-5-酮（化合物3）, 其中化合物3为新化合物; 3个化合物对脂多糖诱导RAW264.7细胞产生的NO均具有抑制作用, 且呈剂量关系; 各化合物对RAW264.7细胞增殖抑制率均呈剂量依赖趋势, 当抗炎有效剂量为50 μmol/L时, 抑制率均远低于50%.