骨桥蛋白在免疫中的作用

骨桥蛋白（OPN）是一种多功能的磷酸化糖蛋白,其涉及多种病理生理学过程.近来研究发现骨桥蛋白通过不同的翻译起始位点产生两种形式的蛋白,即分泌型骨桥蛋白（ sOPN,secreted OPN）和胞内型骨桥蛋白（iOPN,intracellular OPN）.本文主要介绍了sOPN及iOPN在免疫应答中的作用.     

IGF-I、OPN、PTEN蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

探讨胰岛素样生长因子1(IGF-I)、骨桥蛋白(OPN)和PTEN在人非小细胞肺癌中的表达及其相关性,并分析其与非小细胞肺癌的关系。应用免疫组织化学SP法检测61例肺癌组织和30例癌旁组织中IGF-I、OPN、PTEN的表达情况。结果显示,①肿瘤组织中IGF-I、OPN蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.05),IGF-I的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),OPN的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),肿瘤组织中PTEN蛋白表达明显低于癌旁组织(P<0.05),PTEN的表达与肿瘤大小、肿瘤组织的分化程度、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。②IGF-I的表达与OPN的表达呈正相关(P<0.05),IGF-I、OPN与PTEN的表达呈负相关(P<0.05)。研究表明,IGF-I、OPN、PTEN蛋白与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,三者的表达对判断肺癌恶性程度和预后具有参考意义。     

MicroRNA与转录因子调控网络综述

MicroRNA是一类长度约为18-24nt的非编码小RNA,它在转录后水平通过调控靶基因来行使多种生物学功能,例如：细胞周期、分化、细胞增殖和凋亡等。在转录水平,转录因子作为一种重要的调控因子参与调控多种基因的表达。近些年研究表明转录因子可以直接调控miRNA的表达,并且参与了包括肿瘤疾病发生等多种生物学进程。转录因子与miRNA形成的调控网络已被广泛地研究,文中就目前已有的研究成果进行综述,以期为今后转录因子与miRNA调控通路的研究提供一定的理论基础。     

骨桥蛋白在卵巢肿瘤组织的表达及其与恶性肿瘤侵袭转移的关系

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)在卵巢肿瘤组织的表达及其与恶性肿瘤侵袭转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法测定OPN在48例卵巢恶性肿瘤组织、8例卵巢临界恶性肿瘤组织、20例卵巢良性肿瘤组织及10例卵巢正常组织中的表达。结果:OPN在卵巢恶性肿瘤组织表达强度为0.485±0.134,显著高于卵巢正常组织及卵巢临界恶性及良性肿瘤组织表达强度(0.122±0.023,0.243±0.076及0.168±0.045,P<0.01);OPN的表达与恶性肿瘤的临床期别及分化程度相关,而与细胞组织学类型无关。结论:OPN在卵巢肿瘤的发生发展中起重要作用,并与卵巢恶性肿瘤的侵袭转移相关。     

抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究

利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.     

HIF-1调控小鼠bace1基因的转录表达

阿尔茨海默症的一个关键致病原因是大脑中淀粉样蛋白（A13）的过度产生或堆积．Aβ是由其前体蛋白APP经β-和γ-分泌酶依次水解而生成的，但对于这些分泌酶基因表达的转录调控的了解还很少．由于大脑发生缺氧／缺血会造成Aβ的产量增加，而缺氧时所激活的转录因子HIF-1（Hypoxia-Inducible Factor 1）会调控下游多种基因的表达，我们对HIF-1是否参与调控β-分泌酶的表达进行了研究．对小鼠β-分泌酶基因bace1的调控序列进行分析，发现其中含有一个缺氧应答元件（Hypoxia-Responsive Element，HRE）．我们的数据显示，HRE突变片段启动报告基因荧光素酶表达的活性比正常序列片段的启动活性明显降低．电泳迁移率的变动分析（EMSA）实验进一步证实，HIF-1可以与小鼠bace1中HRE元件相互作用．当在哺乳动物细胞中过度表达HIF-1时，BACE1的mRNA水平和蛋白质水平均有明显的增高．这些结果表明小鼠bace1基因的表达受转录因子HIF-1的调控．鉴于目前阿尔茨海默症研究领域都把抑制BACE1作为首选治疗靶位，HIF-1因而有可能成为治疗AD的一种药物靶点．     

辛伐他汀对压力负荷下大鼠心肌骨桥蛋白表达的影响

研究辛伐他汀对压力负荷下大鼠心肌骨桥蛋白(OPN)的影响,将Sprague Dawley大鼠随机分为3组:假手术组(n=10)、模型组(n=10)和辛伐他汀组(n=10).腹主动脉缩窄术建立大鼠压力超负荷模型,8周后测定左室重量指数(LVWR)、B超检测左室游离壁厚度及室间隔厚度Westernblot检测心肌OPN表达水平.结果是①模型组和辛伐他汀组LVWR高于假手术组,辛伐他汀组LVWR低于模型组(P<0.01).②模型组和辛伐他汀组心肌OPN表达水平高于假手术组(P<0.01),辛伐他汀组低于模型组 (P<0.01).辛伐他汀能够减轻压力负荷引起的大鼠的心肌肥厚,其过程伴随着OPN水平的降低,提示辛伐他汀改善心脏功能的过程与OPN有关.     

骨桥蛋白与骨质疏松

骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)又叫骨桥素，是一种分泌型的磷酸化糖蛋白(secreted phosphoprotein，SPP)，属于非胶原蛋白分子的一种，主要由成骨性谱系细胞和活化型T淋巴细胞表达，存在于骨组织、外周血液和某些肿瘤中。OPN于1983年由Herring等在骨基质中分离出来，后来一些学者分别在肾、内耳、     

拟南芥转录因子TDF1的原核表达及多克隆抗体制备

在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起到关键的作用．利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a．将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21（DE3）,用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的TDF1融合蛋白．该融合蛋白主要以包涵体形式存在,分离出包涵体后进行可溶性处理作为抗原免疫家兔．制备出的多克隆抗血清经ELISA测定效价为1：2560,Westernblot检测表明该抗血清与TDF1融合蛋白识别良好．TDF1抗体的制备有助于进一步从生化水平上研究TDF1在花药发育中的功能．     

miRNA调控诱导的随机增益和双峰表达

一方面,miRNA通过加速mRNA的降解对基因表达进行后转录调控; 另一方面,最新的研究表明某些细胞中miRNA以切换的方式对mRNA进行调控.基于此,建立起一个miRNA后转录调控的基因表达模型.通过对相应化学主方程的分析求解与数值模拟,研究了miRNA调控过程中的噪声对mRNA表达的定量和定性影响.结果显示:这种随机涨落既能提高mRNA的平均表达水平(称这种现象为随机增益)又能诱导mRNA的双峰表达.研究结果表明:miRNA后转录调控是一种有效控制基因表达的机制.     

基于OPN模型的装备维修保障系统动态性能仿真

为克服用数学方法分析装备维修保障系统的OPN(Object-oriented Petri Net) 模型数量庞大和结构复杂的问题,提出了用CPN(Colored Petri Net) tools 仿真软件分析装备维修保障系统的OPN模型,成功地构建了对装备维修保障系统OPN模型的CPN仿真模型,并用CPN tools对装备维修保障系统的OPN模型进行动态性能仿真。结果表明,用该方法分析装备维修保障系统的OPN模型动态特性是合理可行的,无任何冲突和死锁现象。     

Cytoskeleton reorganization and FAK phosphorylation are involved in lanthanum(Ⅲ)-promoted proliferation and differentiation in rat osteoblasts

The effect of lanthanum ion(La3+)on osteoblast function and cytoskeleton is assessed in vitro. Osteoblasts were isolated from Snraeuo-tjawiey tetai neonatal rats.Cell proliferation and gene expression levels of cbfa-1,alkaline phosphatase(ALP),osteocalcin(OC),bone sialo-protein(BSP)and osteopontin(OPN)were examined by cell counting and RT-PCR.Cytoskeleton F-actin was stained with rhodamine-con-jugated phalloidin and was visualized by a confocal microscope.As the results,10-8-10-4M La3+-induced osteoblast proliferation on day2.Data from the RT-PCR assay revealed that 10-6 M La3+ up-regulated the expression levels of ALP,BSP,and cbfa-lon day 4,while it enhanced the expressions of OC and OPN on day 21.The F-actin cytoskeleton was strengthened and reorganized under the exposure of La3+.In addition,the phosphorylation of focal adhesion kinase(FAK)was significantly promoted in 24 h evaluated by Western blot analysis.These findings indi-sate that La 3+ promotes osteoblast activity through the phosphorylation of F AK and reorganization of the cytoskeleton.     

基于面向对象Petri网的供应链运作建模

采用了面向对象的Petri网(object-oriented Petri net,OPN)的方法来分析网络化制造环境下的供应链运作,这种方法采用计算机集成制造开放系统(CIMOS)的规则来模拟制造供应链的业务流程.通过这种模式下的供应链运作描述,以网络化制造技术中心为支持,提出供应链运作模式;构建各参与对象OPN模型,获得系统P不变量,在此基础上分析系统的性能如死锁、溢出以及冲突等.以制造商为例的OCN的关联矩阵和P不变量分析,证明构建的模型具有良好的性能.     

一种扩充的面向对象 Petri 网

在面向对象的Ｐｅｔｒｉ网基础上，引入依赖消息，提出了一种扩充的面向对象Ｐｅｔｒｉ网（ＥＯＰＮ）模型，并以企业中的一项生产活动——ＰＣＢ元件贴装为实例，建立了描述这一活动系统的完整的ＥＯＰＮ模型，据此实现了物料分配的优化调度，构成了ＣＡＤ／ＣＡＭ集成系统中重要的一环     

Cytoskeleton reorganization and FAK phosphorylation are involved in lanthanum （Ⅲ）-promoted proliferation and differentiation in rat osteoblasts

The effect of lanthanum ion (La³⁺) on osteoblast function and cytoskeleton is assessed in vitro. Osteoblasts were isolated from Sprague-Dawley fetal neonatal rats. Cell proliferation and gene expression levels of cbfa-1, alkaline phosphatase (ALP), osteocalcin (OC), bone sialoprotein (BSP) and osteopontin (OPN) were examined by cell counting and RT-PCR. Cytoskeleton F-actin was stained with rhodamine-conjugated phalloidin and was visualized by a confocal microscope. As the results, 10⁻⁸-10⁻⁴ M La³⁺-induced osteoblast proliferation on day 2. Data from the RT-PCR assay revealed that 10⁻⁶ M La³⁺ up-regulated the expression levels of ALP, BSP, and cbfa-1 on day 4, while it enhanced the expressions of OC and OPN on day 21. The F-actin cytoskeleton was strengthened and reorganized under the exposure of La³⁺. In addition, the phosphorylation of focal adhesion kinase (FAK) was significantly promoted in 24 h evaluated by Western blot analysis. These findings indicate that La³⁺ promotes osteoblast activity through the phosphorylation of FAK and reorganization of the cytoskeleton.     

战术IP网络中OSPF与EIGRP的性能分析

战术IP网络要求路由协议具有较快的收敛性、较小的端到端时延和遭遇突发事件时较强的数据响应能力。利用OPNET仿真工具,比较了OSPF和EIGRP这两种协议上述3个方面性能的差别。仿真结果表明：EIGRP的收敛性比OSPF快近2倍并且峰值流量减少了50％,平均端到端时延比OSPF减少了20％,异常情况下对数据的响应时间明显少于OSPF。因此,EIGRP协议更适用于战术IP网络。同时,针对OSPF协议提出了一些修改建议。     

OPNET的关键技术研究

网络仿真是一种新的网络规划和设计技术,OPNET可以完成各种通信系统的仿真,包括核心网、接入网、无线网络、卫星网络以及各种混合型网络等。文章介绍了功能强大的网络建模和仿真工具OPNET,研究了OPNET采用的关键仿真技术,给出了一个OPNET在学校局域网扩展中的应用实例。