胡萝卜愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养研究

分别以胡萝卜子叶、下胚轴和直根形成层为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系.实验结果表明:胡萝卜下胚轴是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是1.0mg/L2,4 D+0.5mg/LKT;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.125×104个/mL～2.325×104个/50mL时,7d～9d为对数生长期;继代培养4代～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系.     

悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件.以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化.结果表明:珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基(MS+2,4-D 4.0 mg/L+6-BA 2.0mg/L+3%蔗糖)对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇舍量(鲜重)最高,达到160 μg/g.     

甘肃康县地方茶树愈伤组织诱导研究

以康县地方茶树的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对茎、叶诱导愈伤组织的影响。结果表明,以幼叶和幼茎作为外植体能获得较多的愈伤组织;幼叶外植体的适宜培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,幼茎外植体的适宜培养基为6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L。     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

白背三七叶组织培养研究(英文）

以白背三七幼叶和带芽茎段为外植体,探讨不同激素配比对白背三七离体繁殖的影响,建立白背三七种苗再生繁殖体系.结果表明：当NAA超过1.0 mg/L时,愈伤化都非常好,出愈率达到100%,但是当NAA浓度过高时,愈伤组织长势不好,不利于器官的诱导分化.继代培养中,1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L 6-BA更有利于愈伤组织的进一步增长,达到完全愈伤化.愈伤组织的生长曲线基本上呈现迟滞期、对数增长期和稳定期.在不定芽诱导分化中,1.0 mg/L NAA＋1.5 mg/L 6-BA最有利于芽的生长分化,过高浓度的6-BA时,不定芽生长较弱,不利于根分化及移栽.在带芽茎段诱导丛生芽的过程中,加入适量的IBA和赤霉素更有利于丛生芽的生长.根分化的过程中,高浓度的NAA抑制根的生长与分化.     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

植物激素对荞麦组织培养的研究

分别用荞麦自然苗和无菌苗的幼茎和幼叶作材料进行荞麦的组织培养,结果发现,荞麦愈伤组织诱导的最佳培养基是MS 2,4-D(7.0 mg/L) 6-BA(0.5 mg/L),幼茎的出愈率为100%,在器官诱导实验中发现MS 2,4-D(0.2 mg/L) 6-BA(4.0 mg/L)为芽诱导的最佳培养基,诱导率高达90%;根诱导最佳培养基为MS 2,4-D(4.0 mg/L) KT(0.2 mg/L),诱导率为78%.虽然荞麦自然苗和无菌苗在愈伤组织和芽诱导中无明显差异,但自然苗外殖体愈伤组织的生长和颜色与无菌苗的不同,且芽生长状况也更良好.同时,还探讨了培养基中琼脂浓度对荞麦愈伤组织诱导的影响.     

两种补血草属植物愈伤组织诱导的比较

以黄花补血草和大叶补血草无菌苗叶片为外植体,采用不同激素配比诱导愈伤组织,并分化获得不定芽,以建立两种补血草无性系,为植株快繁和细胞悬浮培养提供理论依据.结果表明:以补血草无菌苗叶片为外植体进行愈伤组织诱导和分化,可实现补血草快速繁殖,黄花补血草愈伤组织的诱导和分化较大叶补血草的容易.黄花补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA(1.0～2.0 mg/L),最适分化培养基为MS 6-BA(0.3～1.0 mg/L) NAA(0.5～1.0mg/L);大叶补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA 2.0 mg/L,最适分化培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L.     

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养，发现在改良1/2MN培养基，1.0-2.0mg/L的2,4-D浓度及1000mg/L肌醇存在下，适合所有不同基因型玉米自交系悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高.悬浮培养5-6天继代1次是适宜的.大量元素减半和0.5-1.0mg/L的2,4-D浓度用于玉米单细胞培养，能获得良好的细胞分裂和生长.细胞悬浮培养获得了愈伤组织.     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

连翘组织培养研究Ⅰ愈伤组织的诱导与培养条件的优化

在MS培养基上附加不同种类和浓度配比的激素,2000lx的光照条件下对连翘植物愈伤组织的继代培养和生长量进行了比较.当2,4-D 3.0mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达100%;当2,4-D0.5mg/L,KT0.5mg/L和BA2.0mg/L时最适合继代和细胞生长.结果还表明:单一2,4-D的各种浓度对愈伤组织都有较高的诱导率.不同激素组合对愈伤组织生长量和发生的状况有明显影响.在固体培养基上,愈伤组织的生长周期为28d.为连翘植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决连翘植物的资源提供了新途径.     

大叶白麻的离体培养及植株再生的研究

在附加激素的MS培养基上,培养大叶白麻消毒茎切断,诱导产生愈伤组织和丛生芽。经过继代培养,建立了大叶白麻无性繁殖系,实验结果表明:1)培养基MS+6BA1mg/L+NAA2mg/L愈伤组织诱导,MS+6BA1mg/L+NAA0.2mg/L及MS+6BA2mg/L诱导外殖体产生丛生芽和继代培养,1/2+IAA0.2mg/L诱导生根效果最好。     

百合细胞悬浮体系构建及多糖含量测定的探索

该文旨在研究百合悬浮体系构建及诱导百合多糖产生的最佳培养方案。首先采用不同取材部位及激素组合来诱导百合愈伤组织形成,将其扩繁进而构建起百合细胞悬浮体系;然后使用不同激素处理来诱导其产生次生代谢产物百合多糖,并通过苯酚硫酸法测定多糖含量。结果发现,百合愈伤组织诱导的最佳取材部位为叶柄,最佳激素配比为6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;百合悬浮细胞培养及诱导百合多糖产生的最佳激素配方为6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L,其多糖含量可达到3.8%。该项目可以用于指导百合细胞悬浮体系构建及百合多糖的生产等方面的研究。     

“三月花”黄花菜的组织培养研究

采用单因素和正交实验方法对"三月花"黄花菜的组织培养技术进行了探索.结果显示:幼叶用0.1%升汞灭菌12 min时效果最佳,外植体污染率、死亡率均为0, 14 d后外植体启动率为62.5%.最佳愈伤诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA,外植体出愈率为86.67%;愈伤组织最适分化培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,愈伤组织分化率达到80%,平均每块愈伤组织不定芽个数为1.72.最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率达到93.33%,平均每个芽苗生根数为5.83条,试管苗炼苗移栽后,成活率达95%.利用该组织培养技术,幼叶外植体通过愈伤组织途径获得"三月花"黄花菜再生苗.     

Ce(NO_3)_3对盾叶薯蓣茎段愈伤组织生长和不定根诱导影响的研究

为研究硝酸铈对盾叶薯蓣快速繁殖的影响,采用以盾叶薯蓣茎段为外植体,在其愈伤诱导培养基、丛生芽培养基及生根培养基中添加不同浓度的Ce3+.结果表明,含Ce3+为5 mg/L的培养基可显著提高愈伤组织诱导率,含Ce3+1 mg/L的培养基丛生芽诱导率最高;1~15 mg/L的Ce3+对盾叶薯蓣组培苗生根有明显的促进作用,5 mg/L的Ce3+显示出最强的促进效应.可以认为,一定浓度Ce3+对诱导愈伤组织生长、丛生芽萌发及不定根生长有促进作用,但高浓度的Ce3+均对其呈现抑制效应.     

外源诱导子和温度对黑果枸杞悬浮细胞花青素积累的影响

黑果枸杞富含花青素,是一种具有很高开发利用价值的药食同源植物。以黑果枸杞无菌苗的叶片为外植体诱导愈伤组织建立细胞悬浮体系,研究不同外源激素和温度对黑果枸杞悬浮细胞中花青素含量的影响。黑果枸杞愈伤组织诱导的最佳培养体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+20.0 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂,悬浮细胞培养的最优体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+0.01 mg/L萘乙酸+20.0 g/L蔗糖,其生长曲线呈“S”形,活细胞数量在悬浮培养第18天时达到峰值,为7.93×10⁵个/mL。30 g/L蔗糖、200 mg/L茉莉酸甲酯、2 mg/L脱落酸及16℃单一处理均能显著促进悬浮细胞花青素产量的提升(P<0.05),2 mg/L脱落酸诱导效果最佳。在16℃和3种外源激素的复合处理下,200 mg/L茉莉酸甲酯+16℃的复合诱导处理能显著促进细胞花青素积累(P<0.05),含量是16℃单因素处理的1.13倍。研究结果为进一步优化黑果枸杞悬浮细胞培养体系、促进花青素积累奠定了基础。     

花生愈伤组织的诱导及植株再生

研究花生愈伤组织的诱导及植株再生的条件．用汕油71花生幼苗上胚轴、下胚轴、子叶、幼叶等不同外植体类型进行比较,发现幼叶较易诱导愈伤;用不同激素质量浓度配比研究对花生幼叶愈伤诱导的影响,发现IAA（吲哚乙酸）对花生的愈伤诱导效果较2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）和NAA（萘乙酸）好;用不同叶龄及叶切段比较,发现以10d苗龄的叶片中部切段愈伤诱导率较高取苗龄10d的花生无菌苗的幼叶中段为外植体,置于ρ（MS＋IAA）3mg／L＋ρ（BA）1mg／L培养基中培养,30d后诱导率达到100％且愈伤呈淡绿色、半透明、疏松状．50d后转至ρ（MS＋IAA）0．5mg/L＋ρ（BA）2mg／L＋ρ（TDZ）0．5mg／L分化培养基中诱导芽（TDZ,噻重氮苯基脲）,截取诱导芽单芽,转接至根诱导培养基中。获得再生植株     

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养,发现在改良1/2MN培养基,1.0-2.0mg/L的2,4-D浓度及1000mg/L肌醇存在下,适合所有不同基因型玉米自交悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高,悬浮培养5-6代继代1次是适宜的,大量元素减半和0.5-1.0mg/L的2,4-D浓度用于玉米单细胞培养,能获得良好的细胞分裂和生长,细胞悬浮培养获得了愈伤组织。