NO诱导血管平滑肌细胞凋亡中Ca~(2 )的作用

探讨了ＮＯ诱导血管平滑肌细胞凋亡与细胞内游离Ｃａ２＋之间的关系．通过粘附式细胞仪和Ｃａ２＋ 荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ,检测分析了ＮＯ在供体ＳＮＡＰ的作用下,血管平滑肌细胞中游离Ｃａ２＋浓度的变化; 又通过ＳＮＡＰ与维拉帕米、ＥＧＴＡ、肝素钠、普鲁卡因共同孵育的方法,观测了Ｃａ２＋浓度变化在细胞凋亡中 的作用．得出ＳＮＡＰ能使细胞中游离Ｃａ２＋浓度升高,而胞外Ｃａ２＋内流在其中起主要作用;并且阻断胞外 Ｃａ２＋内流能够抑制ＳＮＡＰ所诱导的血管平滑肌细胞的凋亡．提示了胞内Ｃａ２＋浓度升高可能是ＳＮＡＰ诱导血管 平滑肌细胞凋亡的一条途径．     

江浙沪籍汉族人HLA—DQB1遗传多态性分析

用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法扩增了江浙沪籍汉族人群ＨＬＡⅡ类基因ＤＱＢ１基因的２第个外显子，扩增产物经ＨａｅⅢ，Ｂｓｐ１２８６１，ＢｓｓＨⅡ，ＳｓａⅠ，ＨａｅⅡ，，ＡｐａⅠ，ＨｐａⅡ，ＲｓａⅠ酶切分型，测定了江浙沪籍汉族人ＨＬＡⅡ类基因ＤＱＢ１的１６个等痊基因的分布频率。     

小鼠集落刺激因子（CSFs）的体外诱导研究

用体外淋巴细胞培养系统，对一些非淋巴因子诱导小鼠脾细胞产生集落刺激因子（ＣＳＦｓ）进行研究的结果发现，静止的小鼠脾细胞对原激酶（ＵＫ）不产生应答，只有当ＣｏｎＡ刺激后才能产生ＣＳＦｓ；表皮生长因子（ＥＧＦ）与ＣｏｎＡ协同作用能明显诱导ＣＳＦｓ的产生．人绒毛膜促性腺激素（ＨｃＧ）可直接作用于静止的脾细胞，使其产生ＣＳＦＳ．剂量依赖试验表明当ＵＫ为１６００ＩＵ／ｍｌ，ＥＧＦ为２０ｎｇ／ｍｌ，ＨＣＧ为４００ＩＵ／ｍｌ时所诱导的ＣＳＦｓ活性达到最高值．此外，ＣＳＦｓ的诱导还具有时间依赖关系．ＵＫ作用６０ｈ，ＥＧＦ和ＨＣＧ作用４８ｈ诱导产生的ＣＳＦｓ活性达到最高值．ＨＣＧ抗体中试验进一步说明ＨＣＧ可直接作用于脾细胞．联苯胺染色结果表明ＵＫ．ＥＧＦ和ＨＣＧ诱导的条件培养液中均不含红系集落刺激因子．     

幽门螺杆菌脂多糖诱导大鼠胃粘膜上皮细胞凋亡的 …

目的 研究幽门螺杆菌细胞脂多糖对大鼠胃粘膜上皮细胞凋亡的诱导作用。方法 在大鼠胃内给予２５，５０，１００，１５０，２００μｇ幽门螺杆菌脂多糖（Ｈｐ－ＬＰＳ），ｓｄ后取粘膜组织苏木素染色和末段脱氧核糖核酸转移酶介导的生物素化的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸切口末段标记（ＴＵＮＥＬ）。结果 脂多糖在大鼠胃粘膜能引起明显的上皮细胞凋亡增加。结论 来自于Ｈｐ的细胞脂多糖对大鼠胃上皮细胞凋亡起诱导作用。     

常压MOCVD法在多孔硅上生长GaAs

采用自己发展的ＨＦ化学预处理技术和常压ＭＯＣＶＤ法在多孔硅（ＰＳ）上首次生长出了基本上是单晶的ＧａＡｓ膜，研究了ＧａＡｓ膜的结构和光学特性．通过对Ｓｉ、ＰＳ、ＧａＡｓ／Ｓｉ和ＧａＡｓ／ＰＳ的Ｒａｍａｎ散射分析，初步论述了ＰＳ的Ｒａｍａｎ散射谱的峰肩起源可能与表面氧化有关．     

用RNase保护法定量检测鲤鱼组织IGF—ImRNA的表达

建立了定量分析ｍＲＮＡ表达的ＲＮａｓｅ保护法，并用于鲤鱼ＩＧＦ－Ｉ的研究．结果表明鲤鱼ＩＧＦ－ＩｍＲＮＡ在肝组织的丰度为每微克ＤＮＡ含５０．４５×１０－１７ｍｏｌ，在其他组织有少量ＩＧＦ－ＩｍＲＮＡ表达．     

人肿瘤坏死因子受体Ⅰ(hTNFRⅠ)基因死亡域在大肠杆菌中的表达

将人肿瘤坏死因子受体Ⅰ（ｈＴＮＦＲＩ）死亡域基因克隆在氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）的后面,构建成重组表达质粒ｐＬＴ１０ ＣＡＴＬＤｄ．该融合蛋白基因转化大肠杆菌后发酵,ＩＰＴＧ诱导２ ｈ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定ＣＡＴＬＤｄ 蛋白质的分子质量为３９ ｋｕ．Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹实验进一步作了鉴定．表达产物为包涵体．ＣＡＴＬＤｄ 蛋白质经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ 柱层析后纯度大于９５％ ．     

茵陈等六种中药对肝葡萄糖醛酸转移酶的体外诱导作用

为了解中药治疗新生儿黄疸是否通过酶的诱导作用，用洋地黄皂甙作为体外肝葡萄糖醛酸转移酶（ＵＧＴ）诱导的阳性对照物。用Ｂｌａｃｋ法测定茵陈（Ａｒｔｅｍｉｓｉａｃａｐｉｌｌａｒｉｓ）、黄连（Ｃｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、大黄（Ｒｈｅｕｍｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、黄芩（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ）、栀子（Ｆｒｕｃｔｕｓｇａｒｄｅｎｉａｅ）及甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｇｌａｂｒａ）的水提物对Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝匀浆在体外ＵＧＴ酶诱导作用。结果表明，在体外实验，这６种中药水提取物不能增加大鼠肝细胞中ＵＧＴ的活性。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对培养人肾间质成纤维细胞的影响

探讨丹参酮ⅡA磺酸钠对培养的人肾间质成纤维细胞增殖、凋亡及分泌胶原蛋白的影响,为肾脏疾病的临床防治提供理论依据.体外培养的成纤维细胞第2~4代,经不同浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠及不同时间培养后,采用免疫细胞化学技术和TUNEL法检测其PCNA、p27、Ⅲ型胶原蛋白的表达及凋亡情况.丹参酮ⅡA磺酸钠能抑制肾间质成纤维细胞表达PCNA和Ⅲ型胶原蛋白,促进p27蛋白的表达和细胞凋亡,在一定浓度、时间范围内具有量效、时效关系(P＜0.05).丹参酮ⅡA磺酸钠能够在体外发挥抗肾间质纤维化的作用,其机理可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及减少胶原蛋白的合成等有关.     

人粒细胞集落刺激因子在昆虫细胞中的表达

利用苜蓿尺核型多角 体病带β－Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ基因标志的非融合蛋白基因转移载体ｐＢＢ成功地构了重组杆状病毒ＡｃＮＰＶ－Ｇ－ＣＳＦ．在感染重组病毒的草地夜蛾细胞中ｈＧ－ＣＳＦ得到了高效表达。表达产物由ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检出，其分子量约为１９ＫＤａ。     

Self-Converse Score Lists in Oriented Graphs

Ｓｅｌｆ－ＣｏｎｖｅｒｓｅＳｃｏｒｅＬｉｓｔｓｉｎＯｒｉｅｎｔｅｄＧｒａｐｈｓ￥ＰｉｒｚａｄａＳｈａｒｉｅｆｕｄｄｉｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｐｐｌｉｅｄＭａｔｈｅｍａｔｉｃｓＦａｃｕｌｔｙｏｆＥｎｇｇ．ａｎｄＴｅｃｈ．Ａ．Ｍ．Ｕ．，Ａｌｉｇａｒ...     

GaAsMESFET模型参数自动提取方法的研究

提出了一种基于ＰＳＰＩＣＥ４．０２通用电路模拟程序与优化技术相结合提取ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ模型参数的方法，根据实例的ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ小信号Ｓ参数与大信号Ｓ参数，利用约束优化技术提取模型等电路元件参数，并利用该电路模型参数设计制作１了３．７ＧＨｚ－４．２ＧＨｚ和５．２ＧＨｚ＝－５．８ＧＨｚ ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ放大器，给出了设计和测试结果并验证了该方法的正确性。     

The Effects of Different Culture Systems on the Quality of Bovine In Vitro Fertilized Embryos

研究探讨了不同体外培养条件下牛体外受精胚胎的发育速度及囊胚细胞数，从而了解不同体外培养系统对牛体外受精胚胎质量的影响．实验一中将体外受精卵分别在ＳＯＦ＋牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ）和ＴＣＭ１９９＋ＢＯＥＣ两种培养系统内培养，在这两种培养条件下囊胚发育率分别为２２．２％和２１．２％，囊胚细胞数分别为１１３．３±５．０和９７．９±８．３，受精后第６～９ｄ的囊胚出现率分别为４０．１％ａ、３７．０％、１９．２％ｂ、２．７％和１３．５％ｃ、３２．７％、３６．５％ｄ、１７．３％（ａ＞ｃ，Ｐ＜０．０１，ｄ＞ｂ，Ｐ＜０．０５），表明牛体外受精卵在ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ中的发育速度快于在ＴＣＭ１９９＋ＢＯＥＣ中．实验二中将体外受精卵分别培养于ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ、ＳＯＦ＋牛卵丘细胞、ＳＯＦ＋ＢＳＡ三种培养系统中，结果囊胚发育率分别为３５．５％ｅ、２９．４％和２２．４％ｆ（ｅ＞ｆ，Ｐ＜０．０１），囊胚细胞数分别为１１７．３±８．０ｇ、９４．２±９．３和９０．２±９．４ｈ（ｇ＞ｈ，Ｐ＜０．０５）．实验三观察了体外受精胚胎在ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ培养条件下发育速度与囊胚细胞数的关系，结果第６～９ｄ的囊胚细胞数分别为１１０．８±１０．２ｉ、１２８．     

GaAs600门门阵列及电路设计系统的研究

本文提出一种以ＧａＡｓＭＥＳＦＥＴ双层金属布线工艺和ＳＤＦＬ电路形式为基础的ＧａＡｓ６００门门阵列基片的结构，阐述了实用ＧａＡｓ单元库的设计准则和方法，并以全加器为例说明了宏单元库的电路形式，几何结构，内部布线及对输入输出的考虑，实用ＧａＡｓ门阵列设计系统已在ＣＯＭＰＡＣＡＤ工作站上建立，文中给出了一个用该系统设计的应用实例。     

STR对幼鲤生长和肝脏IGF-ⅠmRNA表达的影响

通过以体质量６０～７０ｇ的幼年鲤鱼（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）,每ｋｇ体质量以２００ｍｇ的剂量体腔注射链脲佐菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ,ＳＴＲ）或载体溶液２００ｍｇ,观察鲤鱼生长、血糖、血清生长激素（ＧＨ）水平和肝组织胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦⅠ）ｍＲＮＡ水平的变化．注射ＳＴＲ的鱼生长速率比对照组显著减慢．在第１５天和第３０天实验组鲤鱼血糖水平以及血清ＧＨ水平皆无明显变化．在注射ＳＴＲ后的第１５天肝组织ＩＧＦⅠｍＲＮＡ的表达水平比对照组明显下降,第３０天两组鱼肝组织ＩＧＦⅠｍＲＮＡ含量则无明显差异．注射ＳＴＲ后鲤鱼出现胰岛遭受破坏的症状．实验结果提示ＳＴＲ可能通过破坏胰岛Ｂ细胞导致胰岛素（Ｉｎｓ）分泌下降,而后者则可能通过ＧＨ受体水平或ＧＨ受体以后水平的某种机制导致鲤鱼肝组织ＩＧＦⅠｍＲＮＡ表达的下降,进而引起鲤鱼生长减慢     

哮喘患者肺泡巨噬细胞中IL－6mRNA表达的研究

应用逆转录酶链反应及索氏转移杂交技术分析过敏性支气管哮喘患者（激素治疗组９例，非激素治疗组１２例）及正常对照组（１０例）肺泡巨噬细胞（ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，ＡＭ）中白细胞介素一６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－６／β－ａｃｔｉｎ比值表示。结果发现未用激素治疗的哮喘患者ＡＭ的ＩＬ－６／μ－ａｃｔｉｎ为０．６６±０．３２，显著高于正常对照者（０．３４±０．１３，Ｐ＜０．０１）及激素治疗组（０．４１±０．１５，Ｐ＜０．０５）。提示表达ＩＬ－６的ＡＭ在哮喘的发病机理中可能具有重要的作用，而皮质激素治疗哮喘的机制之一可能与其抑制ＡＭ表达及产生ＩＬ－６的能力有关。     

不同分子量的探针在细胞间的运输

利用Ｏｐｔｏｎ显微注射系统（Ｍｉｃｒｏｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ）将不同分子量的荧光分子探针分别注射到不同生育期的紫竹梅雄蕊花丝毛细胞内，在ＯｌｙｍｐｕｓＢＨ—２型荧光显微镜下观察探针在细胞内的转移情况，取得以下结果，花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞的胞间连丝允许ＬＲＢ（５５９Ｄａ），ＦＩＴＣ－（Ａｌａ）６（８７０．３Ｄａ）通过，而ＦＩＴＣ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｖａｌ－Ａｌａ（１１６１．３Ｄａ）难以通过．花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞间的胞间连丝的通透性差异不大．且允许通过的分子探针不超过１１６１．３Ｄａ．在花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞间不能通过的分子探针ＦＩＴＣ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｖａｌ－Ａｌａ（１１６１．３Ｄａ），ＦＩＴＣ－ＩｎｓｕｌｉｎＡＣｈａｉｎ（２９２１．０Ｄａ）在衰老花雄蕊花丝毛细胞间可以转移，但分子量为４４００．０Ｄｅ和９４００．０Ｄａ的ＦＩＴＣ－Ｄｅｒｔｒａｎ探针却难以转移．胞间连丝的通透性能，随着植物的生长发育发生相应的变化．     

中国人群DMD基因含外显子片段的限制性带型和RFLPs研究（Ⅰ）──BglⅡ片段的杂交带型及限制性片段长度多态的频率

采用ＤＭＤ基因的全长ＣＤＮＮ（４ｋｂ）为杂交探针，分析了中国人群ＤＭＤ基因含外显子片段（ｅｘｏｎ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｆｒａｇｍｅｎｔ）的ＢｇｌⅡ限制性片段和ＲＦＬＰｓ．新揭示出四个ＢｇｌＩＩ片段，ＤＭＤ基因全长范围内含外显子的ＢｇｌⅡ限制性片段总数至少为５９个，这为制作ＤＭＤ基因的ＢｇｌⅡ部分限制图奠定了重要基础；另分析了四个ＢｇｌⅡＲＦＬＰｓ在中国人群中的等位频率，在ｃＤＮＡ２ｂ－３、ｃＤＮＡ４－５ａ和ｃＤＮＡ５ｂ－７三个亚克隆探针的杂交带型中，杂合体频率预期值（ＥＨＦ）分别是０．３３、０．３３和０．４４，实际观察值为：０４０、０．４０、０．４８，表明有较高的临床应用价值．此外，在ＢｇｌⅡ／２ｂ－３和ＢｇｌⅡ／４－５ａ的带型中，还分别发现一个新的罕见等位片段．     

凝血因子IX的体外检测方法研究

凝血因子ＩＸ的检测是血友病Ｂ基因治疗研究中的重要工作，在实验室原有基础上，发现和完善了凝血因子ＩＸ在蛋白质水平上的检测系统，为基因治疗血友病Ｂ提供了更为直观可靠的依据。首先，建立了以鼠抗人ＦＩＸ单克隆抗体Ａ－７为一抗的检测活性ＦＩＸ蛋白量的ＥＬＩＳＡ法，为检测活性ＦＩＸ提供了快速简便的方法。其次，实现了用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测转染细胞培养液上清中ＦＩＸ，确证了体外培养的转有人ＦＩＸｃＤＮＡ细     

电针对大脑中动脉阻塞大鼠一氧化氮合酶mRNA表达的影响

本课题旨在探讨电针对动物急性脑缺血时神经保护作用的可能机制，由于ＮＯ的作用在脑缺血不同阶段及细胞来源而有所不同，因此，观察了电针对脑缺血后各型ＮＯＳｍＲＮＡ表达的影响，结果表明，针刺可能通过抑制脑缺血后ｎＮＯＳｍＲＮＡ，ｉＮＯＳｍＲＡＮ的过量表达而起到对神经元的保护作用