通辽地区志贺菌属菌群分布及耐药性研究

目的：了解通辽地区志贺菌菌群分布及耐药情况,为临床合理用药提供科学依据.方法：从腹泻病人的粪便标本中分离到98株志贺菌,用生化反应和血清学方法鉴定分群,用Kirby—Bauer纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.结果：98株志贺菌中,B群（福氏志贺菌）60株,D群（宋内氏志贺菌）38株,未分离出其他群的志贺菌;98株志贺菌对哌拉西林/他唑巴坦和头孢噻肟/舒巴坦合剂的耐药率明显低于其他β-内酰胺类抗生素,对碳青霉烯类的厄他培南敏感率为100%,对喹诺酮类的环丙沙星和左氧氟沙星耐药率分别为33.76%、25.18%,对氨基糖苷类的庆大霉素和大环内酯类的红霉素耐药率分别为26.27%、33.57%.结论：作者自通辽地区检出的志贺菌,对喹诺酮类、头孢类、氨基糖苷类和大环内酯类有较高的耐药率,治疗感染性疾病应该以药敏试验结果指导临床用药.     

猕猴群及新引入猕猴群志贺菌分布情况及药物敏感性调查

目的对原有猴群及新引入猴群进行志贺菌带菌情况及抗生素敏感性调查。方法采用国标(GB/T14926.47-2001)的检测方法,对1 149份猕猴粪便样品进行细菌分离、鉴定及药敏实验。结果原猴群感染率比引入猴群高2.75%,且两组均以B群志贺菌感染为主;原猴群D群感染率也较高,而新引入猴群无D群感染,C群感染率较高。药物敏感性试验,原猴群感染菌对头孢噻肟、头孢唑啉较敏感,但高敏菌株并不多,绝大多数菌株耐药;新引入猴群感染菌对头孢曲松、头孢噻肟、痢特灵、头孢哌酮较为敏感,且高敏感率较原猴群高。结论由于引入新的猴群,志贺菌的分型较复杂,且综合药物敏感性较差。此试验为动物生产及防病治病提供了依据。     

STEC的耐药性监测和分析

目的了解各种标本来源的产志贺样毒素大肠杆菌(STEC)对常用抗生素的敏感性.方法采用WHO推荐的K-B法,进行分鉴定菌株对18种抗生素的药物敏感试验,依照NCCLS判定结果.结果各种来源产志贺样毒素的大肠杆菌共46株,O157型23株,其余为非O157型.全部STEC对复方新诺明耐药,对链霉素耐药率为28.3%(13株),氨苄西林为30.4%(14株),红霉素为69.6%(32株),而且有5株对至少4种以上抗生素产生多重耐药,耐药谱为复方新诺明-链霉素-红霉素-氨苄西林.非O157型STEC耐药菌次为122,而O157型为63.结论非O157型STEC对抗生素可能较易形成耐药性.     

猪源沙门氏菌的耐药性检测与分析

采集辽宁省大连市鲜猪肉78份,选择性培养基分离沙门氏菌,划线纯化后,通过invA 序列对菌株进行鉴定,采用纸片琼脂扩散法(K-B法)检测沙门氏菌对12种抗生素的耐药性。结果共得到15株沙门氏菌,检出率为19.23 %。沙门氏菌对各种抗生素的耐药率在0 ％～73.3 %,其中对硫酸庆大霉素的耐药率最高,为73.3 %;对其他抗菌药物的耐药率依次是盐酸诺氟沙星(60 %)、氟苯尼考、盐酸环丙沙星(53.3 %)>阿莫西林(13.3 %)>头孢噻吩、头孢噻肟、氨苄西林(6.7 %)>头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、亚胺培南(0 %),共产生10种耐药谱。由此表明,目前大连市开发区的超市和农贸市场受沙门氏菌污染率较高,并且沙门氏菌对各类抗生素表现出了多重耐药谱,应该给予足够的重视。     

鸡源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

为明确引起宁都黄鸡沙门菌病的菌株的血清型和耐药情况,经疑似沙门菌病死亡鸡中分离细菌、PCR法鉴定细菌种属和血清型,纸片法分析其药物敏感性.结果 分离到4株沙门菌,均为鼠伤寒沙门菌.4株细菌同时敏感的药物有头孢噻肟、氟哌酸、多粘菌素B,4株细菌同时耐受的药物有阿莫西林、四环素、强力霉素.结果 提示,近期预防和治疗35日龄内发病宁都黄鸡沙门菌病的优选药物是头孢噻肟、氟哌酸和多粘菌素B等.     

甘肃省痢疾杆菌菌型变迁及耐药检测

为了解我省志贺氏菌属在我省的流行、变迁及耐药状况,甘肃省疾病预防控制中心于2006年2月-10月对兰州市城关区、武威市凉州区菌痢监测点采集腹泻病人粪便540份,检出志贺氏菌属菌85株,对菌株进行了血清学鉴定、生化试验及耐药试验.85株菌以福氏志贺氏菌为主占89.41%.宋内氏菌占10.60%.S.F4c 59株,是我省流行的优势菌型.85株菌均为多重耐药,对10种药物的耐药率自97.60%-8.20%不等.结果为我省今后开展菌痢防治及临床用药提供了依据.     

云南昆钢医院2013年三、四季度细菌耐药性监测分析

目的:分析云南昆钢医院2013年三、四季度的细菌耐药情况,为临床治疗提供可靠依据。方法:用VITET-2 Compact全自动微生物分析仪鉴定细菌,采用肉汤微量稀释法做体外药敏试验,依照美国临床实验室标准化协会2013年制定的判断药敏试验标准。结果:第三、四季度检验科收到标本3 920份,检出致病菌953株,阳性率24.3%。其中排在前5位的病原菌株种类分别是:大肠埃希氏菌263株、肺炎克雷伯112株、金黄色葡萄球菌56株、铜绿假单胞菌48株、鲍曼不动杆菌41株。药敏大肠埃希氏菌对复方新诺明、氨苄西林的耐药率分别为93.6%、100.0%,肺炎克雷伯菌对复方新诺明、哌拉西林耐药率分别为100.0%、96.4%,鲍曼不动杆菌对头孢唑林、复方新诺明耐药率均大于75.0%,金黄色葡萄球菌青霉素P的耐药率为90.3%,未发现万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松耐药率均为100.0%。结论:结合昆钢医院细菌耐药趋势参照抗生素目录及使用指南合理选用抗生素,减少或减缓耐药菌株的产生。     

耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的分离鉴定及生物学特性分析

以临床尿路感染患者尿液为研究对象,通过分离培养及16s rDNA进行肺炎克雷伯菌的分离鉴定;采用Kirby-Bauer纸片法进行药敏实验,并对分离株进行碳青霉烯酶表型筛选;通过PCR检测常见的碳青霉烯酶耐药基因、荚膜血清型和毒力基因分布情况;对分离的肺炎克雷伯菌株进行了生物被膜形成能力及其对小鼠致病力的分析。本研究从采取的86例尿液标本中分离检出11株耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,分离率为12.79%。耐碳青霉烯酶基因PCR检测结果显示,blaNDM、blaVIM、blaIMP和blaKPC基因在分离株中均呈现不同程度的分布。耐药性分析发现11株肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率为90.91%,对头孢噻肟耐药率为63.64%,对链霉素、庆大霉素、氯霉素和诺氟沙星的耐药率较低。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌荚膜分型结果显示,分离的11株细菌中10株均为强毒力型菌株（90.9%）,其中K57血清型4株（36.4%）,K1血清型1株（9.1%）,K2血清型1株（9.1%）,K5血清型1株（9.1%）,K20血清型3株（27.3%）,提示该批分离株具有较强的致病力。此外,毒力因子分布结果显示,其毒力因子rmpA（54.5%）、Aerobactin F（54.5%）在菌株中分布较为广泛。生物被膜形成能力检测及小鼠致病性试验结果显示,9株分离株均有较强的生物被膜形成能力,菌株致病力可能与荚膜血清型及生物被膜形成能力相关。综上所述,临床分离的致尿路感染病原肺炎克雷伯菌呈现多重耐药特征,强毒力菌株以K57荚膜型为主,K1、K2均有分布,提示对尿路感染病原应加强耐药监测,合理使用抗菌药物,有效防控多重耐药和强毒力菌株的感染与流行。     

血培养中的病原菌分布及耐药性分析

目的：了解血培养病原菌分布及耐药情况,为临床感染性疾病的治疗提供参考依据。方法：采用Bact/Alert3D血培养仪、VITEK-2 Compact鉴定系统及K-B法进行血培养、细菌鉴定和药敏试验,统计、分析病原菌分布及药敏结果。结果：4758份血培养标本分离出病原菌391株（8.22%）,检出革兰阴性杆菌197株,其中大肠埃希菌（131株）、肺炎克雷伯菌（21株）、洋葱伯克霍尔德菌（10株）检出率较高;革兰阳性球菌检出182株,以表皮葡萄球菌（53株）、人葡萄球菌（39株）、金黄色葡萄球菌（22株）为主。大肠埃希菌对氨苄西林、头孢曲松、复方磺胺甲恶唑耐药率高达94.92%、81.36%、63.49%;表皮葡萄球菌对青霉素G、红霉素耐药率高达95.65%、75.51%。结论：血培养病原菌菌种多样化,以大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌为主,且对常用抗生素耐药率较高,临床应加强耐药性监测,合理选用抗生素。     

584株铜绿假单胞菌的耐药性分析与研究

目的监测本单位的病原菌对抗菌药物的敏惑性与耐药性,从而提高抗生素的治疗效果,针对性地选用抗菌药物,控制医院铜绿低单胞菌感染的发生率。方法采用vitek-2的ID-GNB鉴定卡和AST-GN药敏卡,用K-B法手工药敏鉴定检测,用铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922进行质量控制。结果丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最强;美洛培南、哌拉西林、妥布霉素、头孢吡肟、亚胺培南、庆大霉素次之;头孢曲松、头孢唑肟、头孢噻肟、头孢他啶、四环素、复方新诺明等的抗菌作用最弱。结论单一抗生素对铜绿假单胞菌的治疗不理想,易出现耐药株,主张联合用药。     

阴道念珠菌病患者阴道分泌物念珠菌培养鉴定及药敏分析

目的：了解大理地区妇科女性患者阴道分泌物念珠菌检出状况、菌群分布及对常用抗真菌药物的敏感性。方法：取有自觉阴道症状到妇科门诊就诊患者的阴道分泌物进行念珠菌培养、鉴定和药敏试验。结果：192份标本中念珠菌阳性标本55例,检出率28．6％,汉族和少数民族妇科门诊女性患者阴道分泌物念珠菌检出率分别为32．2％和25．7％,差异无显著性（P=0．324）;56株念珠菌中白色念珠菌32株、光滑念珠菌12株、克柔念珠菌5株、热带念珠菌4株、其它2株。56株念珠菌对KETO、FCZ、5-FC和Amb的耐药率最高的是KETO,达73．2％;最低的是Amb,无耐药株。结论：外阴阴道念珠菌病是妇科门诊的常见疾病,白色念珠菌仍是主要致病菌,光滑念珠菌感染逐渐增多。本地区妇科患者阴道异常分泌物检出念珠菌对常用抗真菌药物酮康唑存在普遍耐药现象,对两性霉素B基本无耐药株产生。     

产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM耐药基因研究

目的:研究新余市产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM-1D型耐药基因流行特征。方法:收集新余新钢中心医院、新余市人民医院、新余市中医院、新余市妇幼保健院2008年1月—2010年6月分离出的伤寒杆菌产酶株6株和痢疾杆菌产酶株13株共19株,用头孢哨噻吩滤纸片法做β-内酰胺酶的定性检测,确定为产酶株后,采用PCR技术扩增质粒blaTEM-1D耐药基因,用Mark标记量出扩增子的大小(bp),统计blaTEM-1D耐药基因阳性率。结果:伤寒杆菌、痢疾杆菌产酶株blaTEM-1D耐药基因阳性率分别为66.7%(4/6)、76.9%(10/13)。结论:blaTEM-1D型耐药基因在本地区各家医院间存在水平传播和医院内垂直传播。     

2008年大理学院附属医院肠杆菌科细菌耐药性监测

目的:研究大理学院附属医院2008年临床分离肠杆菌科细菌的耐药状况,为更好地指导临床应用抗生素.方法:收集本院所分离的190株肠杆菌,分析其菌种来源、临床分布和耐药性.细菌分离、培养按常规方法,菌种鉴定采用Vitek-32全自动微生物分析仪,药敏试验采用K-B法.结果:190株肠杆菌科细菌中,菌种来源于口痰76株(40%)、尿液42株(22.1%)、消化道分泌物26株(13.7%)、其它46株(24.2%).分离菌种前3位分别是大肠埃希菌103株(54.2%)、克雷伯菌属37株(19.5%)、肠杆菌属15株(7.9%)、其它35株(18.4%).耐药性分析提示大肠埃希菌对头孢他啶/棒酸、阿米卡星、亚胺培南、氨苄西林,棒酸、哌拉西林/舒巴坦等耐药率较低,分别为5.2%、11.1%、11.3%、13.4%、14.3%;而对氨苄西林高度耐药,为78.9%.结论:临床分离的肠杆菌科细菌耐药性较严重,而头孢他啶,棒酸有一定的效果.     

多重耐药UPEC细菌毒力基因分布特征及进化分型分析

本研究对临床尿路感染病例病原菌耐药情况、毒力基因分布及其进化分型特征,以期为耐药性尿路感染病原防控提供参考。通过对收集的尿样进行细菌分离培养,结合革兰氏染色镜检、16S rDNA对细菌进行鉴定,利用K-B纸片扩散法对细菌进行药敏试验,并通过PCR扩增进行毒力基因及系统发育和进化分型分析。本研究成功检测出20株尿路致病性大肠杆菌（Uropathogenic Escherichia coli, UPEC）,药敏试验显示多数菌株具有多重耐药特征,该批UPEC对青霉素、红霉素、万古霉素耐药率达100%;对羧苄西林、氨苄西林、阿奇霉素耐药率达90%以上;对四环素、诺氟沙星、链霉素、耐药率达80%以上;对环丙沙星、 庆大霉素、卡那霉素、氟氧沙星、头孢曲松耐药率达70%以上;对头孢噻肟、呋喃妥因、氯霉素耐药率在35%以上;对阿莫西林与多粘菌素B耐药率低,分别仅为10%与5%。六个毒力基因（iutA、fimH、hly、fyuA、tsh、traT）检出率分别为85%、95%、85%、75%、25%、10%。其系统发育分型中,归属B2群的细菌最多,占比40%（n=8）;D群次之,占比35%(n=7);其次为A群,占比25%（n=5）;未检测到B1群菌株。通过MLST分型分析,20株大肠杆菌涉及10个ST型,其中ST131、ST648、ST744、ST1193型别较多。CRISPR序列扩增结果显示其中6株细菌含有CRISPR序列,提示不同菌株的进化差异。本研究通过对临床多重耐药UPEC进行毒力和分型特征分析,为临床有效防控耐药菌导致的尿路感染提供重要依据。     

4种检测超广谱β-内酰胺酶方法的比较

以头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和氨曲南为指示底物,用双纸片协同实验、纸片表型确证实验、三维实验和E-test法4种方法检测45株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性和59株产ESBLs阴性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.结果发现,4种方法的敏感性依次为95.56%,97.78%,93.33%,97.78%,特异性依次为96.61%,100.00%,98.31%,100.00%;头孢噻肟为宁夏地区用于检测ESBLs的最适指示底物;纸片表型确证实验和E-test法是4种检测方法中用于检测产ESBLs较可靠的方法,用三维实验检测产ESBLs菌株适合标本量较少的小型医院,双纸片协同实验和纸片表型确证实验在所有医院都适用.     

Neutrophil elastase targets virulence factors of enterobacteria

Shigellae cause bacillary dysentery, a bloody form of diarrhoea that affects almost 200 million people and causes nearly 2 million deaths per year. Shigella invades the colonic mucosa, where it initiates an acute inflammation, rich in neutrophils, that initially contributes to tissue damage and eventually resolves the infection. Neutrophils are phagocytic cells that kill microorganisms but it is unclear how neutrophils control pathogenic bacteria expressing virulence factors that manipulate host cells. In contrast to other cells, neutrophils prevent the escape of Shigella from phagocytic vacuoles in which the bacteria are killed. Here we identify human neutrophil elastase (NE) as a key host defence protein: NE degrades Shigella virulence factors at a 1,000-fold lower concentration than that needed to degrade other bacterial proteins. In neutrophils in which NE is inactivated pharmacologically or genetically, Shigella escapes from phagosomes, increasing bacterial survival. NE also preferentially cleaves virulence factors of Salmonella and Yersinia. These findings establish NE as the first neutrophil factor that targets bacterial virulence proteins.     

多重RT-PCR方法对人肺炎链球菌菌种、血清型及耐药性的鉴别检测

首先,选择肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)基因LytA、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)基因P1、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,CP)基因ompA作为目标检测靶点设计引物探针,建立鉴别肺炎链球菌菌种的多重RT-PCR方法.其次,针对肺炎链球菌cps基因座序列,利用MGB-TaqMan探针的多重RT-PCR方法对肺炎链球菌的血清型进行鉴别检测.最后,针对肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA为靶标设计引物探针,采用多重RT-PCR方法对其临床阳性样本的耐药性进行鉴别检测.肺炎链球菌鉴别检测多重RT-PCR方法,线性范围为102~107 copies/mL,R2分别为0.999、0.996和0.995,灵敏度可达102copies/mL,与其他病原体无交叉反应.512例临床样本经多重RT-PCR方法鉴别检测,肺炎链球菌189例(189/304,62.17%),肺炎支原体83例(83/304,27.30%),肺炎衣原体32例(32/304,10.53%),与单重FQ-PCR及基因测序法比较无统计学差异(P0.05).189例肺炎链球菌临床样本,经多重RT-PCR检测,血清分型为:19(19.58%,37/189)、23(15.87%,30/189)、6(13.23%,25/189)、14(6.3%,12/189),其他血清型(22.75%,43/189),其他血清型(22.22%,42/189).肺炎链球菌抗药菌株突变检测为:ermB突变115例(115/189,60.85%),mefA突变56例(56/189,29.63%),两基因共突变15例(15/189,7.94%).