广西食蟹猴群中志贺氏菌的检出、分型以及对抗菌药物的敏感性试验

采用国际（ＧＢ４７８９．２８－８４）的检验方法，对４４５０份猴粪便检测，检出志贺氏菌１７２株，阳性检出率３．９％，取其中５０株做血清学分型，皆属于Ｂ群志贺氏菌，主要血清型为３ｃ型３２株（占６４％），Ｙ变种１２株（占２４％）其次４ｂ型３株，Ｘ变种２株２ａ型１株（分别占６％，４％，２％），以此５０株福氏志贺氏菌对１０种抗菌素作了敏感度及抑菌效果评价，结果丁胺卡那霉素及先锋霉素Ｖ敏感度为１００％（高度敏     

志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用

以志贺氏菌ipaH基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44min。通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1.16fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1.3CFU/mL;对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1.8CFU/mL。研究结果表明,实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。     

L型菌所致肺部感染性疾病的研究

目的:探讨提高培养L型菌检出率的方法,了解L型菌对常用抗生素的耐药谱,为防治L型菌所致的肺部感染提供检测依据.方法:对200例肺部感染患者痰标本进行常规与L型菌培养的检测,对分离培养出的细菌进行药敏试验.结果:分离出细菌39株,其中L型菌21株,占53.8%,普通细菌18株,占46.2%;L型菌以克雷伯茵和大肠埃希氏菌最多,各占42.8%.药敏试验对丁胺卡那霉素、庆大霉素、左氧氟沙星及部分头孢类抗生素较为敏感,对氨苄青霉素耐药.结论:L型菌在肺部感染性疾病中比例较高,应将L型菌检测作为常规实验开展,以减少漏诊.同时,临床合理使用抗生素能减少L型菌的产生及提高治疗效果.     

一起多源性污染所致的攀枝花市某高校菌痢爆发调查分析

目的查明该高校菌痢爆发的流行因素，并迅速、有效控制该校菌痢疫情。同时对此次突发公共卫生事件进行分析评价，为制定我区肠道传染病防制对策提供科学依据。方法采用流行病学调查中的现场调查和个案调查，临床和实验室诊断，Excel统计方法。结果该校共发生90例菌痢，无死亡病例；全校学生罹患率为7．21％。；病例大便培养发现志贺氏菌，食堂饮用水采样检测发现细菌总数超标，有2例炊管人员检出奇异变形杆菌，炊具检出奇异变形杆菌、志贺氏菌等。经控制传染源、切断传播途径、保护易感人群等措施后，此次菌痢爆发得到控制。结论此次菌痢爆发是一起多源性污染，主要为局部水源、食品污染及未经处理的生活污水浇灌绿化地而引起的菌痢爆发。其经验教训将为我区制定学校传染病防治对策、紧急应对突发公共卫生事件提供针对性依据。     

西双版纳州医院2008年细菌感染分布及耐药性分析

目的:对我院细菌感染分布及耐药性进行调查分析,为临床合理使用抗生素药物提供依据.方法:对我院临床送检的各类标本采用英国Aris全自动微生物鉴定/药敏分析仪进行培养分离、鉴定及药敏试验,对结果进行回顾性统计分析.结果:阳性标本703份,检出率为35.42%,以革兰阴性杆菌检出较高.革兰阴性杆菌498株,占70.84%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌;革兰阳性菌205株,占29.16%,主要为凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属和金黄色葡萄球菌.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌除对亚胺培南敏感外,对其他常用抗生素药物不同程度耐药;铜绿假单胞菌对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林的耐药率在45.00%～50.00%范围内;耐药率最低的是左氧氟沙星、亚胺培南、氨曲南、头孢吡肟、头孢他啶,耐药性分别为18.42%、21.79%、21.79%、23.1%、25.79%;阴沟肠杆菌除对亚胺培南、阿米卡星敏感外,对青霉素类、一至三代头孢菌素等多药高度耐药.耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检出率为68.37%,其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为85.06%.结论:细菌耐药性较严重,临床医师应重视细菌培养和药敏试验,合理使用抗生素.     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解吉林市区肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因型分类及耐药情况,并对其分子流行病学特征进行分析.方法采用PCR扩增法检测118株肺炎克雷伯菌产CTX-M型ESBLs基因型情况,调查其阳性株对14种常见抗菌药物的耐药情况,对产CTX-M型肺炎克雷伯菌进行AP-PCR同源性分析,并绘制基因分析图谱.结果 118株肺炎克雷伯菌中共扩增出CTX-M型菌株25株,占21.19%;其中CTX-M-1组13株,占11.02%;CTX-M-9组16株,占13.56%;同时含CTX-M-1组和CTX-M-9组菌株4株,占3.39%;扩增未发现CTX-M-2组、CTX-M-8组和CTX-M-25组阳性株.25株产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶均为多重耐药菌（耐3种以上抗菌药物）,对红霉素耐药率高达100%;其次耐药率依次为头孢噻肟92%,氨苄西林92%,四环素88%;对亚胺培南耐药率较低,对美罗培南均敏感.25株CTX-M型阳性菌株做随机扩增多态性分析,共发现13种RAPD.结论吉林市区产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株均为多重耐药,且对红霉素、头孢噻肟和氨苄西林类耐药率均很高.CTX-M酶在一定程度上存在克隆传播.     

乳粉中常见致病菌的多重荧光PCR检测

利用多重荧光PCR技术快速检测乳粉中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌.以沙门氏菌的invA基因、志贺氏菌的ipaH基因、金黄色葡萄球菌的nuc基因为靶基因,选择特异性引物,以参照菌种为对象,验证引物的特异性,建立多重荧光PCR检测方法,人工添加沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌,确定方法的检出限.结果表明该方法特异性强、灵敏度高,乳粉中检测的灵敏度为1CFU/mL,可在8h内完成对乳品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌的检测.     

碧玉兰菌根真菌的调查

采用根组织切片法调查碧玉兰菌根真菌，菌根感染率为23．44％；共得到15株真菌，属于半知菌，共计5属，其中头珠霉属5株，占33．33%．为优势菌;从碧玉兰栽培土壤中分离到85珠真菌，其中，黑乌霉属73珠，占85．88％，为优势菌。     

通辽地区志贺菌属菌群分布及耐药性研究

目的：了解通辽地区志贺菌菌群分布及耐药情况,为临床合理用药提供科学依据.方法：从腹泻病人的粪便标本中分离到98株志贺菌,用生化反应和血清学方法鉴定分群,用Kirby—Bauer纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.结果：98株志贺菌中,B群（福氏志贺菌）60株,D群（宋内氏志贺菌）38株,未分离出其他群的志贺菌;98株志贺菌对哌拉西林/他唑巴坦和头孢噻肟/舒巴坦合剂的耐药率明显低于其他β-内酰胺类抗生素,对碳青霉烯类的厄他培南敏感率为100%,对喹诺酮类的环丙沙星和左氧氟沙星耐药率分别为33.76%、25.18%,对氨基糖苷类的庆大霉素和大环内酯类的红霉素耐药率分别为26.27%、33.57%.结论：作者自通辽地区检出的志贺菌,对喹诺酮类、头孢类、氨基糖苷类和大环内酯类有较高的耐药率,治疗感染性疾病应该以药敏试验结果指导临床用药.     

甘肃省流脑菌群分布及耐药性检测

目的:为了解流脑菌群在我省的流行、分布及耐药状况,以便采取防制措施。方法:我们于2005年-2007年对我省流脑病例咽拭子及脑脊液、密切接触者、健康人群咽拭子,依据流行性脑脊髓膜炎诊断标准和处理原则⑴进行了流脑菌群的分布监测。结果3年分离流脑菌株47株。从流脑病人咽拭子中分离Nm4株,脑脊液中分离Nm5株。密切接触者咽拭子分离Nm32株,(A群31株、C群1株)。健康人群咽拭子中分离Nm6株(B群4株,A群2株)。对23株Nm做了药敏试验。敏感率依次为氨苄西林100%、头孢噻肟100%、氯霉素100%、环丙沙星100%。其它6种抗生素耐药率自82.80%-4.35%不等。结论:监测结果为流脑防治工作提供了依据。     

肺结核并下呼吸道感染489株病原菌的分布及耐药性分析

目的:调查我院肺结核并下呼吸道感染病人痰液标本中临床分离病原菌的分布及耐药状况,以指导合理用药。方法:对我院近两年来肺结核并下呼吸道感染病人1 321份痰液标本分离的病原菌进行回顾性分析。结果:共检出489株致病菌,其中革兰阳性菌184株,占37.6%,主要有表皮葡萄球菌、粪肠球菌、链球菌属、金黄色葡萄球菌;革兰阴性菌169株,占34.6%,主要有大肠埃希氏菌、醋酸钙不动杆菌、假单胞菌属、克雷伯菌属;真菌136株,占27.8%,多为为白色念珠菌。药敏结果(除真菌)显示:大多数革兰氏阳性菌及阴性菌对多种抗生素耐药,耐药率较高的抗生素依次为苯唑西林、克林霉素、磺胺甲恶唑、红霉素、万古霉素、青霉素钠、环丙沙星、左氧氟沙星;仍具有较高敏感率的依次为亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢哌酮钠。结论:肺结核病并下呼吸道感染的细菌多为条件致病菌,且具有多重耐药性,临床上应加强监测,根据药敏结果合理使用抗生素。     

葡萄球菌的耐药性分析

目的探讨葡萄球菌的耐药性,为临床用药提供参考依据.方法采用K-B法药敏试验对158株葡萄球菌进行耐药性分析、琼脂扩散法测MRS、Nitrocefin纸片法测定其β-内酰胺酶.结果 158株葡萄球菌中耐药菌占67.1%,其中MRSA为38.0%,MRSCON为29.1%.结论临床医生在治疗葡萄球菌引起的感染时应根据药敏试验结果选择适宜的抗菌药物.     

云南昆钢医院2013年三、四季度细菌耐药性监测分析

目的:分析云南昆钢医院2013年三、四季度的细菌耐药情况,为临床治疗提供可靠依据。方法:用VITET-2 Compact全自动微生物分析仪鉴定细菌,采用肉汤微量稀释法做体外药敏试验,依照美国临床实验室标准化协会2013年制定的判断药敏试验标准。结果:第三、四季度检验科收到标本3 920份,检出致病菌953株,阳性率24.3%。其中排在前5位的病原菌株种类分别是:大肠埃希氏菌263株、肺炎克雷伯112株、金黄色葡萄球菌56株、铜绿假单胞菌48株、鲍曼不动杆菌41株。药敏大肠埃希氏菌对复方新诺明、氨苄西林的耐药率分别为93.6%、100.0%,肺炎克雷伯菌对复方新诺明、哌拉西林耐药率分别为100.0%、96.4%,鲍曼不动杆菌对头孢唑林、复方新诺明耐药率均大于75.0%,金黄色葡萄球菌青霉素P的耐药率为90.3%,未发现万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松耐药率均为100.0%。结论:结合昆钢医院细菌耐药趋势参照抗生素目录及使用指南合理选用抗生素,减少或减缓耐药菌株的产生。     

鹭宁两地植物根际土壤中放线菌的生物多样性分析及生物活性检测

为探究不同地区植物根际土壤中可培养放线菌的多样性,筛选具有抗菌及抗肿瘤活性的药源菌株,采用改良聚乳酸-明胶和海藻糖-脯氨酸2种培养基,选择分离采自厦门市翔安区香山风景区、南京市中山植物园及玄武湖公园的17份植物根际土壤样品中的放线菌,并进行16SrRNA基因鉴定、系统进化分析及抗菌和抗肿瘤生物活性测定.共分离到178株放线菌,其中链霉菌151株,其余27株为稀有放线菌,占总数的15.2%.稀有放线菌分布在9个属中:微杆菌属(Microbacterium)、拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)、韩国生工菌属(Kribbella)、野野村氏菌属(Nonomuraea)、小单孢菌属(Micromonospora)、链孢囊菌属(Streptosporangium)、拟孢囊菌属(Kibdelosporangium)、纤维微菌属(Cellulosimicrobium)和栖白蚁菌属(Isoptericola),包含2株新种.对分离得到的所有放线菌进行液体小量发酵,并测定其发酵粗提物的抗菌和抗肿瘤活性.结果显示:所测定的178株放线菌中,有82株对一种或多种指示菌表现出抗菌活性,占供测菌株的46.1%;有60株对一种或多种肿瘤细胞具有抑制作用,占供测菌株的33.7%.研究结果表明植物根际土壤中放线菌资源丰富,其中抗菌和抗肿瘤活性较强的菌株可为后续微生物药物研发提供有利资源.     

2008年大理学院附属医院肠杆菌科细菌耐药性监测

目的:研究大理学院附属医院2008年临床分离肠杆菌科细菌的耐药状况,为更好地指导临床应用抗生素.方法:收集本院所分离的190株肠杆菌,分析其菌种来源、临床分布和耐药性.细菌分离、培养按常规方法,菌种鉴定采用Vitek-32全自动微生物分析仪,药敏试验采用K-B法.结果:190株肠杆菌科细菌中,菌种来源于口痰76株(40%)、尿液42株(22.1%)、消化道分泌物26株(13.7%)、其它46株(24.2%).分离菌种前3位分别是大肠埃希菌103株(54.2%)、克雷伯菌属37株(19.5%)、肠杆菌属15株(7.9%)、其它35株(18.4%).耐药性分析提示大肠埃希菌对头孢他啶/棒酸、阿米卡星、亚胺培南、氨苄西林,棒酸、哌拉西林/舒巴坦等耐药率较低,分别为5.2%、11.1%、11.3%、13.4%、14.3%;而对氨苄西林高度耐药,为78.9%.结论:临床分离的肠杆菌科细菌耐药性较严重,而头孢他啶,棒酸有一定的效果.     

痢疾志贺氏菌8型O-抗原基因簇的破译和特异基因的筛选

志贺氏菌是引进细菌性痢疾的重要病原菌，尤其对发展中国家卫生条件不平衡的地区，可造成爆发性流行．本研究用鸟枪法对痢疾志贺氏菌8型的O—抗原基因簇进行测序，得到序列全长为9227bp．用生物信息学的方法进行序列分析，共发现7个基因，分别是：单糖合成基因gne，糖基转移酶基因(4个)；O—抗原转运酶基因wzx和O—抗原聚合酶基因wzy．并用PCR的方法筛选出了针对痢疾志贺氏菌8型细菌的特异基因，可以用于基因芯片或PCR方法对痢疾贺氏菌8型细菌的快速检测．     

铜绿假单胞菌随机扩增DNA多态性基因分型研究

利用微量液体稀释法进行药敏检测和RAPD技术进行基因分型,调查了铜绿假单胞菌在临床各科中的流行情况,以期建立稳定的临床检测系统,在控制院内感染的流行病研究中发挥更大的作用.结果表明耐药谱分6型,Ⅰ型占44.5%,Ⅱ型占18.5%,Ⅲ型占7.4%,Ⅳ型占7.4%,Ⅴ型占11.1%,Ⅵ型(不定型)占11.1%;RAPD分9型,A型占51.9%,B型占7.4%,C型占7.4%,D型占7.4%,E型占7.4%,F型占3.7%,G型占3.7%,H型占7.4%,I型占3.7%.说明基因型A型、耐药谱Ⅰ型的铜绿假单胞菌是此次ICU医院感染暴发流行的菌株,其他型别为非流行相关菌株.比较结果还说明RAPD基因分型的灵敏性、特异性及可靠性优于耐药谱分型,在医院感染流行病学调查中具有较大的应用价值.     

儿童大肠埃希菌产ESBLs检测及耐药分析

目的分析吉林地区儿童产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药特点,以指导临床用药.方法用双纸片协同试验检测115株大肠埃希菌产ESBLs的情况,并用K-B纸片扩散法对其耐药性进行了检测.结果产ESBLs大肠埃希菌为36株,阳性率为31.3%;产ESBLs大肠埃希菌对多种抗生素的耐药率高于非产ESBLs大肠埃希菌;所有大肠埃希菌均对亚胺培南敏感.结论吉林地区儿童产ESBLs的大肠埃希菌检出率高并呈多重耐药性.临床治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征,并动态监测其耐药性变迁,防止ESBLs大肠埃希菌的局部流行.     

耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的分离鉴定及生物学特性分析

以临床尿路感染患者尿液为研究对象,通过分离培养及16s rDNA进行肺炎克雷伯菌的分离鉴定;采用Kirby-Bauer纸片法进行药敏实验,并对分离株进行碳青霉烯酶表型筛选;通过PCR检测常见的碳青霉烯酶耐药基因、荚膜血清型和毒力基因分布情况;对分离的肺炎克雷伯菌株进行了生物被膜形成能力及其对小鼠致病力的分析。本研究从采取的86例尿液标本中分离检出11株耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌,分离率为12.79%。耐碳青霉烯酶基因PCR检测结果显示,blaNDM、blaVIM、blaIMP和blaKPC基因在分离株中均呈现不同程度的分布。耐药性分析发现11株肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率为90.91%,对头孢噻肟耐药率为63.64%,对链霉素、庆大霉素、氯霉素和诺氟沙星的耐药率较低。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌荚膜分型结果显示,分离的11株细菌中10株均为强毒力型菌株（90.9%）,其中K57血清型4株（36.4%）,K1血清型1株（9.1%）,K2血清型1株（9.1%）,K5血清型1株（9.1%）,K20血清型3株（27.3%）,提示该批分离株具有较强的致病力。此外,毒力因子分布结果显示,其毒力因子rmpA（54.5%）、Aerobactin F（54.5%）在菌株中分布较为广泛。生物被膜形成能力检测及小鼠致病性试验结果显示,9株分离株均有较强的生物被膜形成能力,菌株致病力可能与荚膜血清型及生物被膜形成能力相关。综上所述,临床分离的致尿路感染病原肺炎克雷伯菌呈现多重耐药特征,强毒力菌株以K57荚膜型为主,K1、K2均有分布,提示对尿路感染病原应加强耐药监测,合理使用抗菌药物,有效防控多重耐药和强毒力菌株的感染与流行。     

伤口分泌物病原种类调查及耐药性分析

为调查伤口感染的病原菌分布及耐药情况,指导临床合理用药,采集伤口分泌物进行常规细菌培养鉴定,以纸片扩散法进行药物敏感性试验.从2 329份标本中分离出致病菌1 394株,总分离率为59.85%.阳性率高的科室主要为骨科、普通外科和内分泌科.感染的病原菌以革兰阴性杆菌为主,占65.06%,革兰阳性球菌占30.13%.革兰阴性杆菌中鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌分离率较高,药敏结果显示头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低.革兰阳性球菌中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和粪肠球菌分离率较高,药敏结果显示万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁和米诺环素的耐药率较低.分离出的病原菌对常用抗生素耐药情况严重,临床应根据药敏结果合理使用抗生素,减少院内感染,延缓耐药菌的产生.