泥蚶体液凝集素性能的初步研究

在泥蚶(Tegillarca granosa Linnaeus)体液中发现有凝集素存在.利用14种天然或经酶处理的动物和人红细胞来测定泥蚶体液凝集素的凝集活力,并且进行糖(200 mmol·L-1)抑制、热稳定性、pH及Ca2 影响试验.结果显示:泥蚶体液凝集素对14种红细胞均有凝集作用.其中对兔红细胞的凝集作用可被乳糖和半乳糖所抑制,凝集活性依赖于Ca2 ,在pH7.0较稳定,温度为40～60℃范围内均具较高活性,经90℃保温10 min后活性完全消失.     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的细胞表面受体研究

从Ulex europaeus L.种子中纯化的荆豆凝集素I(UEH I),不仅专一地凝集人O型血细胞,也能凝集牛精细胞,表明这些细胞表面存在有UEH I的受体.应用经FITC或~(125)I标记的UEH I与牛精细胞结合,研究受体在精细胞表面的分布;Glc、Con A、PHA和Fuc的浓度对~(125)I-UEH I与O型血细胞结合的影响;O型血细胞和牛精细胞与~(125)I-UEH I的饱和实验,获得饱和结合曲线或竞争性结合曲线,得出各自的Scatchard图,分别计算出O型血细胞和牛精细胞表面的UEH I受体的数目。     

凝集素对上皮癌细胞的凝集作用

应用多种凝集素与6种上皮癌细胞株细胞、传代人羊膜胚胎细胞株细胞、正常人足月胚胎羊膜细胞和人A、B、O型血细胞、兔血细胞反应,检测其凝集素反应的程度;并通过荧光标记,测定凝集素受体在上述各型细胞膜上的分布;与此同时,还应用辣根过氧化物酶标记雪山豆凝集素,进行扫描电镜观察辣根过氧化物酶标记的雪山豆凝集素受体复合物在SGC肿瘤细胞表面上的分布情况.     

大豆凝集素的分离纯化及活性鉴定

以D-半乳糖胺为配基、 FF-sepharose 4B为固定相, 制备大豆凝集素亲和层析填料. 分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白, 测定其纯度、 免疫原性和凝集活性, 并与美国Sigma公司的标准品比较. 结果表明： 每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10 mg大豆凝集素; 纯化获得的大豆凝集素分子量为30 000; SDS-PAGE测定纯度大于98%; Western blot结果为阳性; 1 mg/mL SBA血集效价为1/2^10; 其纯度、 免疫原性和凝集活性等指标与大豆凝集素标准品相同, 与理论值相符.     

双壳贝类血清中凝集素凝集性能初步研究

在多种贝类血清中发现有可凝脊椎动物血细胞的因子－－凝集素。栉孔扇贝血清中的凝集互可凝集鸡、鹌鹑、小鼠我种动物血细胞,但对鳝鱼细胞不发生作用。该凝集素具有较强的热稳定性。１００℃处理４５ｍｉｎ仍具有活性;并具有广泛的ＰＨ范围,中在ＰＨ３－１１进行凝集作用。但其活性可被ＥＤＴＡ强烈抑制,Ｄ－甘露醇和Ｌ－鼠李糖对其活性有明显抑制作用,Ｄ－木蕈也有轻微抑制作用。在栉孔扇贝细胞的细胞膜上未发现有凝集鸡血细胞     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的研究

用硫酸铵分级沉淀,当饱和度达40％时,荆豆种子中的荆豆凝集素I就被沉淀出来,再经处理,获得冻干的无盐制剂.当凝集素浓度为7.8μg/mL时,就能凝集人O型血细胞,浓度分别为125μg/mL或500μg/mL时,对人B或A型血发生凝集反应.其凝集O型血的凝集作用可被Fuc所抑制.上述制剂可通过CM—纤维素柱和Sephadex G—200柱2次分子筛过滤而纯化,此纯化的凝集素在PAGE中显示一条蛋白带,浓度为1.25μg/mL时可使O型血和牛精细胞发生凝集反应;浓度为40μg/mL或500μg/mL时,可分别使B型和A型血发生凝集反应.     

野花生豆(Crotalaria mucronata)凝集素的细胞表面受体的研究

研究了异硫氰基荧光素和~(125)I标记的野花生豆凝集素,对A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体的定位、分布和数量。结果表明这些细胞表面的凝集素受体比较复杂,难以用一般动力学方法加以说明。D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺等糖类和Con A、PHA、BSA对标记凝集素与A型细胞结合的影响各不相同。通过饱和曲线计算出A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体数目,分别为1.29×10~7和3.09×10~6个/细胞.     

库拉索芦荟凝集素凝血活性影响因素研究

采用组织破碎匀浆法处理库拉索芦荟鲜叶,经冷冻离心、盐析、透析和冷冻干燥等方法可得到库拉索芦荟凝集素.经不同类型的细胞凝集反应实验,发现库拉索芦荟凝集素对兔血红细胞能够产生专一性的凝集,对鸭血、鸡血、细菌和霉菌不具有凝集作用;N-乙酰葡萄糖胺对凝血活性具有抑制作用,葡萄糖、乳糖和蔗糖则无抑制效果;改变不同的温度和pH值,发现凝血活性出现最适效应现象,表现出明显的蛋白质特性.     

板蓝根凝集素对小鼠胸腺淋巴细胞分裂作用的电镜观察

目的：研究板蓝根凝集素引起小鼠胸腺淋巴细胞分袭增殖过程中的超微结构变化。方法：用生物化学方法提取板蓝根凝集素，并测其凝集活性，以0．054mg/kg/d的剂量灌胃，连续30d，胸腺组织经处理后，用Epon812包埋，经超薄切片后，在电镜下观察，结果：与对照组相比，实验组小鼠胸腺淋巴细胞质内的线粒体、核糖体数量均较对照组多，处于分裂前期的细胞数目较对照组多。结论：板蓝根凝集素可能具有促进小鼠胸腺淋巴细胞分裂的作用。     

正常人和不育患者精子表面凝集素受体的研究

应用4种凝集素和经过FITC标记后分别与正常人或不育患者的精子相互作用,研究其凝集作用和膜上凝集素受体的分布.以铁蛋白或辣根过氧化物酶标记城口豆凝集素后再与精子反应,应用扫描电镜或透射电镜观察了正常人或不育患者精子表面膜受体的分布.     

牛精细胞膜上凝集素受体的分离及其测定方法

应用非离子型去垢剂Brij58增溶牛精细胞获得的膜蛋白,经VBL-Sepharose4B亲和柱层析分离,可获得在PAGE、SDS-PAGE中均呈现单一蛋白带的VBL受体.其亚基分子最为46500d.牛精细胞经Brij58增溶的膜蛋白经用~(125)I标记,再经VBL-Sepharose4B亲和柱层析,也能获得~(125)标记的凝集素受体.经测定,用亲和层析法获得的凝集素受体,保持了原有的生物学活性.     

正常人和不育患者精子膜上凝集素受体的数量与部分性质

应用＾１２５Ｉ－ＣＫＬ对正常人和不育患者精子膜上凝集素受体进行研究的结果表明，不育精子膜上凝集素受体的差异，可能是不育的原因之一。     

棉花凝集素对枯萎病菌的抑制作用与其受体的研究

研究了ＦＩＴＣ或ＨＲＰ标记的棉花凝集与枯萎病菌丝体作用后，在荧光显微镜下或扫描电镜下可以清晰地看到ＦＩＴＣ－凝集素或ＨＲＰ－凝集素－受体复合物在菌丝体上的均匀分布实验表明，纯化的棉花凝集素对棉花枯萎病菌丝体的生长有较强的抑制作用，当凝集素浓度达１５０μｇ／ｍＬ时，可以使枯萎病菌丝体的生长完全停止。     

正常胃肠和癌变胃肠粘膜凝集素受体的研究

ＦＩＴＣ标记的２０种凝集素与正常和癌变胃肠组织的石蜡切片进行标记，结果表明，ＦＩＴＣ－ＰＮＡ和ＦＩＴＣ－ＬＰＬ对正常胃体和幽门上皮细胞呈阴性反应；ＦＩＴＣ－凝集素与胃癌粘膜细胞反应，以ＰＮＡ、ＬＰＬ阳性率最高，与肠癌粘膜细胞反应，则以ＳＭＬ和ＣＫＬ的阳性率最高。实验揭示了癌变胃肠粘膜与正常胃肠粘膜表面的糖复合物各不相同，导致与凝集素结合反应的强度也不相同。     

Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中A型血专一性凝集素的研究

用亲和层析法从Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中纯化出一种对人类A型血专一的凝集素.该凝集素的粗浸提液都只对A型血细胞凝集,而对B、O型绝不凝集.当纯化的凝集素浓度为0.98μg/mL时,即能凝集A型血细胞,GalNAc、对硝基苯酚-β-D-吡喃半乳糖苷能抑制其凝集作用;酚—硫酸法测得凝集素含有3.8％的中性糖;该凝集素是一个促有丝分裂原,其细胞转化为67.9％;它的分子量为56500,有两种亚基,分子量分别为17200和14600.凝集素分子中亮氨酸和缬氨酸含量较高,分别为9.83和9.64,而酸性氨基酸含量远比碱性氨基酸为高.     

淡水育珠蚌血清凝集素的研究

在两种淡水育珠蚌（三角帆蚌和背角无齿蚌）血清中发现有凝集素存在,三角帆蚌的血清凝集素能凝集鸡、鸭和兔的红细胞,在ｐＨ５～９的范围内保持活性, 凝集活性能被甘露糖抑制,对Ｃａ＾２＋没有表现出明显的依赖性,背角无齿蚌的血清凝集素能凝集鸡和鸭的红细胞,但不能凝集兔的红细胞,在ｐＨ６～９的范围内保持活性,其凝集活性对Ｃａ＾２＋有明显的依赖性,而且可被Ｎ－乙酰葡萄糖胺强烈抑制,两者的血清经６０℃加热处理３０     

岩豆凝集素寡糖链的研究

用肼解法释放了岩豆凝集素（ＭＤＬ）的寡糖链，经离子交换柱层析和滤纸层析除去肽钛和其它小分子物质，所获得的寡糖部分，以ＮａＢＨ４还原，得到还原末端为Ｎ－乙酰氨基葡萄糖醇的寡糖链。再经Ｂｉｏ－Ｇｅｌ Ｐ－４凝胶柱过滤，可以从ＭＤＬ分离出两个寡糖链。此纯化的两个寡糖链经甲醇－盐酸水解，最后制备三甲基硅醚衍生物，用气相色谱法分析其糖基组成。分析结果表明；ＭＤＬ分子中含有以Ｎ－型糖苷链连接的两条寡糖链，其糖