脑外伤患者血清S100β蛋白测定及其临床意义

目的:研究脑外伤患者血清S100β蛋白含量的变化及其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法测定30例脑外伤患者发病后24h内、第3天、第7天及20名健康人的血清S100β蛋白含量,进行动态的检测比较.使用格拉斯哥昏迷计分法(Glasgow Coma Scale,GCS)评估疾病状况.以GCS 8～3分者为重伤组,共15例.GCS 9～15分者为非重伤组,共15例,比较两组在各个时间点的血清S100β蛋白含量有无差异性.结果:两组发病后24h内、第3天、第7天,血清S100β蛋白含量均增高,且于3d达到高峰.重伤组和非重伤组24h内、第3天、第7天、血清S100β蛋白水平与正常对照组相比均明显升高(P<0.05),重伤组明显高于非重伤组.结论:血清S100β蛋白水平可作为反映脑外伤敏感的检测指标,并对患者病情严重程度及预后的评价具有重要的临床意义.     

游泳运动对2型糖尿病小鼠海马Aβ及生成相关蛋白的影响

为了了解8周的游泳运动对链脲佐菌素(Steptozotocin, STZ)所致2型糖尿病(T2DM)小鼠海马β-淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)及生成相关蛋白的影响。采用高脂膳食饲养结合腹腔小剂量注射STZ(25μg/kg)方法建立T2DM小鼠模型。把T2DM小鼠分为糖尿病对照组(DC)和糖尿病运动组(DE),正常小鼠作为普通对照组(C),DE组进行8周的无负重游泳训练, 5 d/周, 1 h/天, C组和DC组安静饲养。用Western Blot方法检测各组小鼠海马APP、BACE1、PS1和Aβ42蛋白相对表达情况。结果表明:(1)与C组比较, DC组小鼠海马BACE1蛋白相对表达水平显著增高(p0.01), PS1蛋白相对表达水平显著增高(p0.01), APP蛋白相对表达水平显著增高(p0.01), Aβ42蛋白相对表达水平显著增高(p0.01);(2)与DC组比较, DE组小鼠海马BACE1蛋白相对表达水平显著降低(p0.05), PS1蛋白相对表达水平显著降低(p0.01), APP蛋白相对表达水平显著降低(p0.01),Aβ42蛋白相对表达水平显著降低(p0.05)。8周的游泳运动抑制T2DM小鼠海马BACE1、PS1、APP蛋白相对表达水平,减少Aβ42蛋白相对表达水平。     

肝X受体α在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用研究

[目的]研究肝X受体alpha(LXRα)在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用.[方法]小鼠小胶质细胞株(BV2细胞)置于6孔培养板培养,分为对照组、Aβ组、干扰组、干扰+Aβ组、假干扰+Aβ组.应用倒置显微镜观察各组BV2细胞的形态学变化,Western blot方法检测LXRα蛋白表达变化,ELISA检测各组上清液中COX-2、iNOS的表达水平.收取BV2细胞上清液作为条件培养基用来培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),并通过CCK-8和免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞的存活率和凋亡蛋白Bax表达情况.[结果]与对照组相比,Aβ组及干扰组的BV2细胞表现为胞体变圆变大,细胞突起减少,呈阿米巴样活化状态,LXRα蛋白水平明显下调(P0.05),细胞上清液COX-2,iNOS的表达含量明显升高(P0.05),Aβ处理组和干扰组的细胞上清液明显引起SH-SY5Y细胞存活率降低、凋亡蛋白Bax表达增加(P0.05).与假干扰+Aβ组相比,干扰+Aβ组的细胞胞体变大,突起减少,LXRα蛋白表达减少,COX-2,iNOS的表达增加,干扰+Aβ组的细胞上清液导致SH-SY5Y细胞存活率降低,Bax表达增加(P0.05).[结论] LXRα参与调控Aβ诱导的小胶质细胞激活及炎症因子的释放,在AD的炎症机制中发挥重要作用.     

铝与阿尔茨海默病发生间关系的研究进展

近年来随着免疫铝佐剂与蛋白及多肽作用机制研究的不断深入,铝与AD发生之间的关系研究重新引起人们的重视.研究发现三价铝离子Al~(3+)对Aβ多肽及磷酸化Tau蛋白具有非常强的结合能力,Al~(3+)作为交联剂具有促进Aβ多肽及磷酸化Tau蛋白聚集等作用,铝在AD的发生过程中具重要作用.通过控制铝摄入防治AD的发生具有重要理论和临床意义.     

出血性脑卒中患者血浆和脑脊液中激素及内源性血管活性物质变化分析

目的 探讨出血性脑卒中患者血浆和脑脊液中激素及内源性血管活性物质变化情况.方法 将121例脑出血患者分为高血压性脑出血组(A组,78例)和自发性蛛网膜下腔出血组(B组,43例),50例无神经系统疾病的患者为对照组.检测各组患者血浆及脑脊液中促性腺激素释放激素、β-内啡肽、一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平.结果 入院时A组和B组患者血浆和脑脊液中促性腺激素释放激素、β-内啡肽水平明显高于对照组,B组明显高于A组,差异均具有统计学意义(P<0.01).入院后各时间点A组、B组患者促性腺激素释放激素、β-内啡肽水平均明显高于对照组,B组明显高于A组,差异均具有统计学意义(P<0.01).入院时A组和B组患者血浆和脑脊液中NO、CGRP水平明显低于对照组,B组明显低于A组,差异均具有统计学意义(P<0.01).入院后各时间点A组、B组患者NO、CGRP水平均明显低于对照组,B组明显低于A组,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 性腺激素释放激素、β-内啡肽、NO、CGRP均参与高血压性脑出血和自发性蛛网膜下腔出血患者的下丘脑应激反应,其中自发性蛛网膜下腔出血患者变化更明显.     

中脑腹侧被盖区多巴胺转运蛋白的变化对老年大鼠术后认知功能的影响

目的研究中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺转运蛋白的变化与老年大鼠术后发生认知功能障碍之间的关系。方法将50只大鼠随机分为空白组、假手术组、PND模型组、多巴胺转运蛋白敲低AAV·DAT·RNAi组、多巴胺转运蛋白敲低阴性对照AAV·NC组,每组10只。模型组大鼠进行丙泊酚全麻下脾切除手术; AAV干预大鼠预先经脑立体定位仪显微靶向注射AAV·DAT·RNAi或AAV·NC至VTA核团;假手术组大鼠输注丙泊酚。采用Morris水迷宫及条件恐惧实验判断大鼠认知功能损伤程度;免疫荧光染色观察VTA区及海马CA1区DAT、α-synuclein(α-syn)、β-Amyloid1-42(Aβ1-42)的蛋白定位及表达情况; Western blot法检测海马α-synuclein(α-syn)、β-Amyloid1-42(Aβ1-42)的蛋白含量,比较各组间蛋白含量的差异。结果与空白组比较,PND模型组大鼠行为学表现出明显的认知功能减退;海马CA1区α-syn、Aβ1-42蛋白含量明显升高(P0.05)。与PND模型组相比,AAV·DAT·RNAi组大鼠行为学显示认知功能减退改善; AAV·DAT·RNAi组VTA区多巴胺转运蛋白含量明显降低;海马CA1区α-syn、Aβ1-42蛋白含量明显降低(P0.05)。结论 VTA区多巴胺转运蛋白参与了老年大鼠认知功能障碍,并且VTA区DAT变化对老年大鼠术后认知功能的影响可能与调控海马区α-syn、Aβ1-42蛋白聚集有关。     

粪便钙卫蛋白与炎症性肠病活动性关系的探讨

探讨研究粪便钙卫蛋白与炎症性肠病(inflammatory bowl disease,IBD)活动性的关系。收集52例北京军区总医院消化内镜中心接受肠镜检查患者的新鲜粪便标本提取钙卫蛋白,其中炎症性肠病患者32例、溃疡性结肠炎24例、克罗恩病8例、正常对照者20例。采用ELISA法定量检测粪便中钙卫蛋白浓度。采用Mayo评分系统判断IBD有否活动,积分≥3为有活动性。结果20例健康者粪便钙卫蛋白浓度为(77.15±160.9)μg/g,32例IBD患者为(646.58±439.44)μg/g。IBD患者与健康者粪便钙卫蛋白浓度比较有显著差别(P<0·001)。以450·3μg/g为临界值时,粪便钙卫蛋白判断IBD是否活动的灵敏度和特异度分别为75%和90%,活动期IBD患者与静止期IBD患者和健康者粪便钙卫蛋白浓度比较均有显著差别(P<0.05)。说明粪便钙卫蛋白检测是一种非侵入性观察指标,为判断IBD活动性具有一定的临床意义。     

电针对5月龄APP/PS1转基因小鼠海马组织及组织间液可溶性Aβ1-42水平短时作用的影响

目的探讨电针干预对早期阿尔茨海默病小鼠脑组织间液(brain interstitial fluid,ISF)及海马组织中可溶性Aβ_(1-42)水平的影响.方法将16只雄性5月龄APP/PS1转基因阳性小鼠随机分为模型组和针刺组,将8只同窝、同性别转基因阴性小鼠设为正常对照组,采用电针"百会"、"涌泉"或同等条件束缚作为干预手段,以脑微透析技术获取小鼠海马组织间液,应用ELISA法检测3组小鼠海马组织以及海马ISFβ淀粉样蛋白1-42水平,分别在干预后的6,7,8,9 h观察其是否发生改变.结果与正常对照组相比,模型组海马组织以及ISF中可溶性Aβ_(1-42)明显升高(P0.01);与模型组相比,针刺组小鼠ISF可溶性Aβ_(1-42)降低(P0.05),海马组织Aβ_(1-42)水平对比差异无统计学意义(P0.05).针刺组在电针治疗后6~9 h样品ISF中Aβ_(1-42)含量的检测结果没有随时间变化而变化(P0.05).结论电针可降低AD模型小鼠海马ISF可溶性Aβ_(1-42)水平.     

阿尔茨海默病与血管性痴呆患者血浆β-微管蛋白和APP的变化

目的: 对阿尔茨海默病(Alzheimers disease, AD)与血管性痴呆(vascular dementia, VD)血浆β-微管蛋白与淀粉样蛋白前体(APP)进行定量分析,分析这些指标的变化是否可以为临床诊断阿尔茨海默病提供生物学方面的帮助.方法:用蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定11例AD、11例VD和8个正常老年人血浆β-微管蛋白和APP的水平.结果:(1)血浆APP含量AD患者(84.36±41.34)的高于VD患者(56.34±18.68)和正常人(43.25±27.67), P<0.05;(2)血浆中β-微管蛋白含量AD患者(105.91±41.25)高于VD患者(64.36±28.27)和正常人(52.25±11.11), P<0.05;(3)VD患者和正常人之间APP和β-微管蛋白比较无明显差异(P>0.05).(4)Pearson相关分析显示:血浆中APP和β-微管蛋白含量可能存在一定的相关性,相关系数为0.451(P<0.05).结论:AD患者血浆APP和β-微管蛋白含量明显高于正常人和VD患者,对AD患者血浆APP和β-微管蛋白含量的测定对AD的诊断可能具有一定的意义.     

Aβ42对果蝇攻击和交配等社交行为的不同调节作用

Aβ42(β-amyloid 42)蛋白聚集的毒性作用可能是阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的主要病因之一.运用模式生物果蝇研究Aβ42可能对果蝇部分社交行为的影响.首先,在Aβ42果蝇AD模型中观察到Aβ42在果蝇神经中枢蘑菇体区域的聚集和沉积.然后,观察Aβ42果蝇的攻击性,实验发现Aβ42能加速首次攻击时间,并增加攻击频率等.最后,观察Aβ42果蝇的交配行为.实验证明,表达Aβ42可以增强中年果蝇攻击性行为,而对交配取向没有明显作用.实验结果可为后续深入研究Aβ42对攻击性行为影响的神经环路和分子基础提供参考.     

应用酵母双杂交系统筛选与Spr2相互作用的蛋白

Spr2在斑马鱼胚胎发育过程中的中胚层和外胚层中表达,它可以通过调控Fgf信号通路来调控斑马鱼中胚层的发生.为了进一步揭示Spr2调控Fgf信号通路的分子机制,本文通过酵母双杂交系统在斑马鱼早期胚胎cDNA文库中筛选可能与Spr2相互作用的蛋白,以酵母融合的方法在6.3×106个转化子中筛选到78个阳性克隆,测序鉴定后最终得到Pairedboxgene6a、mSin3A-associatedprotein130等11种可能与Spr2蛋白相互作用的蛋白,通过结果分析推测Spr2可能通过fgf8参与Fgf信号通路的调控.     

玉米渣多微发酵生产蛋白饲料的研究

采用固态多微混合发酵方式，进行以玉米淀粉渣为原料生产蛋白饲料的研究。通过从自然界分离的多株菌种进行诱变，筛选出能够很好降解玉米渣中纤维素物质的黑曲霉菌株Ｈ１和酵母菌Ａ、Ｂ。经研究发现，Ｈ１和Ａ、Ｂ酵母菌混合培养后，培养物中粗蛋白含量达２１．９％，纤维素转化率为４３．２１％，氨基酸组成齐全，并富含多各酶类。     

分子碎片共轭帽基团法研究蛋白质相互作用能

分子碎片共轭帽基团法（MFCC）是近年来发展的一种线性标度方法，在此基础上可以使用全体系量子力学方法来研究蛋白质体系的各种性质．本文采用该方法对蛋白质与小分子之间的相互作用能进行了研究．     

鸡肉蛋白水解液的研究

用酶水解鸡肉 ,通过单因素实验确定胰蛋白酶 1、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶 2、胃蛋白酶水解鸡肉的最适条件 ,并确定在它们的最适条件下 ,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶是单酶水解较好的酶。在双酶水解中 ,发现胰蛋白酶 1与酸性蛋白酶在各自最适条件下组合水解鸡肉水解率最高 ,进一步确定双酶水解的条件为胰蛋白酶先在 5 0℃ ,p H8.5 ,加酶量 40 0 0 U/ g蛋白质 ,固液比 1∶ 4,水解 3h,后酸性蛋白酶在 45℃ ,p H2 .5 ,加酶量 40 0 0 U/ g蛋白质水解 2 h。在这种组合下酶解 ,水解产物的水解度为 40 .5 % ,蛋白回收率为 81.0 %     

蛋白质的开发和利用

蛋白质不足是第三世界普遍存在的问题。该文就如何开发和利用蛋白质提出了几点建议。     

SCP的生产工艺设计

本文概述了ＳＣＰ的生产工艺及设计中的注意事项．     

高蛋白昆虫食品的研究

详细介绍了高蛋白昆虫食品的生产工艺和最佳配方的获得,并对其主要机理进行了探讨。     

绿色荧光蛋白基因转化内生解淀粉芽孢杆菌的研究

通过重叠延申法将枯草芽孢杆菌的启动子PSJ2与绿色荧光蛋白基因（gfp）的ORF连接起来,构建绿色荧光蛋白表达盒,再通过Rco R I和Pxt I双酶切将表达盒连接到pUS186载体上,转化解淀粉芽孢杆菌TB2菌株,得到可发出绿色荧光工程菌,工程菌对黄瓜枯萎病菌的拮抗作用与野生菌株相当。     

绿色荧光蛋白基因转化内生解淀粉芽孢杆菌的研究

通过重叠延申法将枯草芽孢杆菌的启动子PSJ2与绿色荧光蛋白基因(gfp)的ORF连接起来,构建绿色荧光蛋白表达盒,再通过RcoR I和PstI双酶切将表达盒连接到pUS186载体上,转化解淀粉芽孢杆菌TB2菌株,得到可发出绿色荧光工程菌,工程菌对黄瓜枯萎病菌的拮抗作用与野生菌株相当。