双向电泳技术研究镉诱导后牙鲆肝的差异蛋白质组

采用改良的TCA/丙酮法直接提取牙鲆肝脏蛋白质组,并采用双向凝胶电泳技术予以分离.实验结果表明:经氯化镉诱导后,牙鲆肝表达出16个差异蛋白质(斑点),其中4个斑点上调,2个斑点下调,6个斑点消失,新增4个斑点;并且蛋白质斑点在凝胶上的分布表现出较高的重复性.一旦这些差异蛋白质点在双向凝胶电泳图谱上实现标准指纹化后,其图谱中的差异蛋白斑点分布规律可用于监测与评价流动水体中镉污染程度及危害性.     

双向电泳和肽质谱技术分析结核杆菌H37Ra感染巨噬细胞引致的差异表达蛋白

利用双向电泳及质谱技术对感染结核杆菌H37Ra株前后的巨噬细胞U937株的蛋白质组进行分离和比较分析．双向电泳后在分子质量20～200ku，等电点pI3～10范围内分离出1913个不同蛋白质斑点，肉眼可以明显看见4个蛋白质斑点在表达上的差异．对其中分子质量约75ku等电点约9．5的蛋白质斑点酶解后，进行质谱分析，鉴定为分子质量75．4ku、等电点9．52的蛋白DEAD／H Box Polypeptide 18．说明用蛋白质组学研究结核杆菌与巨噬细胞相互作用机理是可行的，所鉴定的蛋白质DEAD／H Box Polypeptide 18可能与巨噬细胞防御系统有关．     

草鱼病理学研究Ⅲ．草鱼出血病苹果酸脱氢酶（MDH）同工酶相对活性的变化

采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳方法，研究了正常草鱼和患出血病草鱼的肾脏、肝脏、脾脏、心脏、鳃、肌肉以及血清中的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶。结果表明，患病草鱼和正常草鱼各组织器官及血清中的ＭＤＨ同工酶酶谱均为６条带，患病鱼的酶谱明显地不同于正常鱼的酶谱；ＭＤＨ同工酶的活性具有组织和器官的特异性，同一组织及器官，患病草鱼ＭＤＨ同工酶的总活性较正常草鱼偏高，其中鳃、肝脏、脾脏以及血清中的ＭＤＨ同工酶总活性具有显著性差异（ｐ＜０．０５）；同种组织及器官，患病草鱼的ＭＤＨ同工酶的相应组分，活性序列产生了较大的差异；ＭＤＨ同工酶可以作为草鱼患出血病的一个生理、病理指标。     

拉萨地区渔场水体重金属砷的初步研究

近年来河流污染日益严重,水产品质量安全问题成为环境研究的热点之一。砷是五毒元素之一,具有极强的毒性,分布广泛,它所带来的各种环境问题和对人类健康的危害受到人们的广泛关注。文章以山南贡嘎渔场、曲水聂当渔场、林周渔场三个拉萨周边地区的主要渔场为研究对象,利用AF-610A型原子荧光光谱仪（AFS）等仪器对鲢鱼、鲫鱼、草鱼、鲤鱼、罗非鱼等5种共22条鱼体的肌肉、肝脏、心脏、鱼鳃和内残物等5个组织器官中砷的含量进行了测定。结果表明：①3个渔场水中砷的平均分布状况为：曲水聂当渔场〉山南贡嘎渔场〉林周渔场;②3个渔场5种鱼类不同器官中砷的平均分布状况为：山南贡嘎渔场〉曲水聂当渔场〉林周渔场;③不同鱼体组织器官中砷的平均分布情况为,山南贡嘎渔场：内残物〉肝脏〉心脏〉肌肉〉鱼鳃;曲水聂当渔场：鱼鳃〉心脏〉肝脏〉肌肉;林周渔场：内残物〉肝脏〉心脏〉鱼鳃〉肌肉;不同种类鱼体内砷（舡）蓄积量分析,单因素分析法比较：在肝脏中罗非鱼〉鲫鱼〉鲢鱼〉鲤鱼〉草鱼;在肌肉中罗非鱼〉鲫鱼〉鲢鱼〉草鱼〉鲤鱼;在内残物中鲢鱼〉鲤鱼;在心脏中罗非鱼〉鲫鱼〉草鱼〉鲢鱼〉鲤鱼;在鱼鳃中罗非鱼〉鲫鱼〉鲤鱼〉草鱼〉鲢鱼。     

铜及其配合物对鲫鱼肝脏谷胱甘肽的影响

研究在低浓度长期(40d)暴露条件下，不同形态铜(cu^2 及cu-EDTA)对鲫鱼(Carassius auratus)肝脏中谷胱甘肽的影响．结果表明：在实验剂量范围内，Cu^2 对谷胱甘肽还原酶(GR)在低浓度有轻微诱导，最终表现为抑制作用；cu-EDTA对GR则始终表现为抑制．Cu^2 对氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的影响是：低浓度显诱导，高浓度时抑制．Cu-EDTA则对GSSG是诱导作用，诱导程度随浓度增大而不同．Cu^2 及Cu-EDTA对鱼体肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)产生激活作用，Cu^2 对GSH的激活率相对高于Cu-EDTA处理．这表明不同形态的铜离子对鲫鱼肝脏谷胱甘肽的影响存在一定的差异．     

野生与养殖暗纹东方鲀(Fugu obscurus)脂肪酸组成和含量的初步研究

对野生及２龄养殖暗纹东方肝脏和肌肉总脂中脂肪酸的组成和含量进行了测定,结果表明主要的组分均为１６０、１６１、１８１,其中１８１（亚油酸）是最主要的脂肪酸．野生暗纹东方肝脏和肌肉总脂中的脂肪酸种类,尤其是多烯酸种类,均多于养殖鱼．养殖鱼肝脏中（ＤＨＡ＋ＥＰＡ）的含量超过了野生鱼,而肌肉中（ＤＨＡ＋ＥＰＡ）的含量与野生鱼相近     

低浓度镱暴露对鲫鱼肝脏多种酶活性的影响

选择重稀土元素镱（Yb)和幼体鲫鱼为材料,研究了稀土元素低浓度长期（40d）暴露对鲫鱼幼体（Carassius auratus)肝脏所产生的生理生化反应。在实验剂量范围内,镱对鲫鱼肝脏内过氧化氢酶（CAT）表现出明显的抑制作用,对谷丙转氨酶（GPT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活性的影响在低浓度时表现为诱导作用,高浓度时抑制,对超氧化物歧化酶（SOD）活性表现为诱导。过氧化氢酶（CAT）对镱最为敏感,是一种很有前途的水生生态系统中镱的生物监测指标。     

三种弹涂鱼的生化组成及能值分析

测定了三种弹涂鱼肌肉的蛋白质，脂类和糖类的组成以及能值，分析了其氨酸的种类及其比例，结果表明：１）蛋白质三种弹涂鱼最主要的生化物质，含量占鱼体湿重的６．６８５％～９．８９１％；２）三种鱼的比能值，能量与蛋白质的比值均不高，分别为３．０４４～４．２４９ｋｊ／ｇ和３９．８７３～４５．５３５ｋｊ／ｇ；３）蛋白质中氨基酸的种类齐全，不同种鱼及雌雄个体物各种氨基酸含量差异不大，必需氨基酸的含量较高，占总氨基     

磁化水对团头鲂卵巢相关物质的影响

运用多种生化方法测定了磁化水组与对照组团头鲂血液、肝脏中与性腺发育有关的生化成份,包括血清蛋白成分、血清钙、磷含量,肝脏糖原、粗脂肪、RNA 含量。据所测数据,比较磁化水组与对照组雌鱼的差异及各组中雌雄鱼间的差异,以进一步证实两组雌鱼卵巢发育是否处同一时期.结果表明:磁化水对雌性团头鲂早期性腺发育无显著影响。     

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。     

河南淇河鲫Carassius auratus的生物学

<正> 淇河发源于山西省陵川县境内,流经河南省林县、淇县,于小河口村入卫河,全长161.5公里,是海河水系的一条三级支流。淇河盛产鲫鱼,当地俗称淇河鲫。淇河鲫产量很高,为淇河的主要经济鱼类之一,其肉味鲜美,营养丰富,甚为人们所喜爱。我国《诗经(毛诗)》中曾有“藋藋竹竿,以钩于淇”的诗句;古诗中还有“以其食鱼,唯淇之鲫”的记载。中国科学院考古研究所,曾经在淇河南面的辉县流璃阁区的战国时代墓中祭器内,发现鱼骨,其     

贵州省云台山亚气生蓝藻植物初报

本文为贵州省舞阳河国家级风景区四大景区之一的云台山的亚气生蓝藻类的首次报道。据初步调查鉴定，共收录正气生蓝藻１８６种（含变种）。其中包括３个新种和４个新变种。     

Proteomic comparison of four maize inbred lines with different levels of resistance to Curvularia lunata(Wakker)Boed infection

Protein profiles of leaves in four maize inbred lines with different disease resistance to pathogen Curvularia lunata(Wakker)Boed were studied by two-dimensional electrophoresis(2-DE)and mass spectrometry.Proteins were extracted from the forth leaf of maize seedlings 24 h after fungal inoculation,and fractionated by polyethylene glycol to precipitate the most abundant leaf protein,Rubisco,before gel separation.Protein profiles from 2-DE showed that total numbers of protein spots were increased in all four inbred lines inoculated with C.lunata CX-3 strain compared with the control.The numbers of changed protein spots in abundance were higher in resistant inbred lines than in susceptible ones,which implied that resistant inbred lines were more sensitive than susceptible ones to pathogen infection.Among proteins identified by MALDI-TOF MS,germin-like protein GLP and translation initiation factor eIF-5A were supposed to play important roles in maize resistance against C.lunata infection.     

Proteomic comparison of four maize inbred lines with different levels of resistance to Curvularia lunata （Wakker） Boed infection

Protein profiles of leaves in four maize inbred lines with different disease resistance to pathogen Curvularia lunata(Wakker)Boed were studied by two-dimensional electrophoresis(2-DE)and mass spectrometry.Proteins were extracted from the forth leaf of maize seedlings 24 h after fungal inoculation,and fractionated by polyethylene glycol to precipitate the most abundant leaf protein,Rubisco,before gel separation.Protein profiles from 2-DE showed that total numbers of protein spots were increased in all four inbred lines inoculated with C.lunata CX-3 strain compared with the control.The numbers of changed protein spots in abundance were higher in resistant inbred lines than in susceptible ones,which implied that resistant inbred lines were more sensitive than susceptible ones to pathogen infection.Among proteins identified by MALDI-TOF MS,germin-like protein GLP and translation initiation factor eIF-5A were supposed to play important roles in maize resistance against C.lunata infection.     

双向凝胶电泳分析动脉粥样硬化大鼠心肌蛋白表达图谱

采用双相凝胶电泳分离大鼠冠状动脉总蛋白，胶态考马斯亮蓝G-250染色，GS-800凝胶扫描仪获取凝胶图像，并用PDQUEST软件分析，检测出2626个蛋白质斑点，并且得到不同条件下的蛋白质组的差异图谱，在相同的参数设置下，不同谱图间的匹配斑点数为1841，匹配率达70．1％以上，测量了凝胶蛋白斑点的在IEF、和SDS—PAGE方向上的位置偏差；对比分析了两种心肌组织的差异蛋白，发现33个蛋白质斑点只在正常大鼠心肌蛋白检测到表达；46个蛋白点在两种细胞中表达量上有显著变化，为从分子水平上理解心血管类疾病的发病机制，寻找防治药物和药物的构效关系的进一步研究开拓了新的途径，同时为深入研究AS的发病机制和药效研究提供参考数据。     

补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证“方证相关”的蛋白质组学研究

揭示补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证"方证相关"的现代生物学基础,制作高血压病气虚血瘀证细胞模型。用补阳还五汤含药血清干预细胞模型,利用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)技术筛选及鉴定差异表达的蛋白点。并对其进行生物学分析。结果高血压病气虚血瘀证组与健康对照组比较,差异蛋白质点有30个。其中,有16个蛋白上调,14个蛋白质下调。补阳还五汤组与高血压病气虚血瘀证组比较,差异蛋白质点有14个。其中,有9个蛋白上调,5个蛋白质下调。MALDI-TOF-MS/MS鉴定出:高血压病气虚血瘀证组与健康对照组差异蛋白点共有8个蛋白被成功鉴定出来。表达上调的蛋白有肽基脯氨酰异构酶A、肽基脯氨酸顺反异构酶A样1亚型、真核翻译起始因子5A-1 B亚型、微管蛋白beta-2C、CRA_b亚型、3-羟酰辅酶A脱氢酶2型异构体2。表达下调的蛋白有丙酮酸激酶同工酶M1亚型、抑制蛋白-1、抑制蛋白-1 1亚型、补阳还五汤组与高血压病气虚血瘀证组差异蛋白点共有3个蛋白被成功鉴定出来。表达上调的蛋白有丙酮酸激酶CRA_c亚型、热休克蛋白27;表达下调的蛋白有膜联蛋白A1,CRA_b亚型。这些蛋白多与促进或抑制细胞凋亡有关。说明高血压病气虚血瘀证存在着细胞凋亡,补阳还五汤可以纠正高血压病气虚血瘀证引起的细胞凋亡。这些差异蛋白可以作为高血压病气虚血瘀证的标志蛋白或补阳还五汤的作用靶点,抑制细胞凋亡可能是补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证"方证相关"的现代生物学基础之一。     

Ras /MAPK / ERK 通过协同 NF- KB 促进肝癌细胞中 cyclinD1 的表达

摘要: 目的 探讨 Ras 癌基因在体内诱导肝肿瘤发生过程中促进 cyclin D1 表达的分子机制。方法 利用 H-ras12V 转基因雄鼠肝肿瘤组织、肿瘤周围组织以及非转基因雄鼠肝组织进行病理分析和总 RNA 及蛋白质的提取。应用 qRT-PCR 和 Western blot 方法检测 cyclin D1 的表达以及调控 cyclin D1 表达的相关信号通路激活状态。采用 miRNA 测序、生物信息学分析和 qRT-PCR 验证方法检测 miR-5102 基因的表达水平。结果 与非转基因雄鼠肝组 织和肿瘤周围组织相比,肿瘤组织中 cyclin D1 基因的 mRNA 和蛋白表达水平显著升高。与非转基因雄鼠肝组织 和肿瘤周围组织相比,在肿瘤组织中 MAPK 信号转导通路中的 ERK 信号分子的蛋白表达水平和磷酸化水平都显 著升高,在肿瘤组织中成高激活状态,NF-KB 信号通路中的抑制因子 IKB 蛋白水平显著降低。miR-5102 的表达水 平没有显著变化。结论 在 Ras 癌基因诱导的肝肿瘤发生过程中,主要通过激活 MAPK/ERK 和 NF-KB 信号通路促进 cyclin D1 的表达。