UPLC-MS/MS法测定苦蘵宿萼中physalin H和physalin D的含量

建立了同时测定苦蘵中2种酸浆苦味素类化合物含量的方法.应用超高效液相色谱(UPLC)与Qtrap质谱(MS)联用同时测定苦蘵中酸浆苦味素H(physalin H)和酸浆苦味素D(physalin D)2个成分的含量.采用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,以水(0.1%甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min~(-1),使用ESI~+离子源,多反应监测(MRM)模式扫描,对physalin H和physalin D进行定量.结果表明physalin H和physalin D在5～10 000 ng·mL~(-1)范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)分别为0.999 7和0.999 5;平均加样回收率(n=5)分别为71.1%和71.0%,RSD值分别为1.36%和1.47%.该方法准确可靠,可用于苦蘵药材中physalin H和physalin D的含量测定,为有效控制苦蘵药材的质量奠定了基础.     

药食两用模式植物苦蘵基因功能研究方法的建立

苦蘵中的酸浆苦素R可能有抗癌功效,基因组测序结果预测其生源代谢合成途径缺失环节可能分布于3个基因家族的89个相关同源基因里,这给其药效成分的生源合成阐明带来困难.本实验构建了由植物病毒介导的苦蘵基因功能研究体系,应用狗尾草花叶病毒(Foxtail mosaic virus,FoMV)来实现相关外源基因(eGFP)的稳定表达;同时,基于烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)建立苦蘵的功能基因表达沉默技术,实验中有效地抑制苦蘵内源的八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)的表达水平.该方法可对候选基因实现差异化表达,对上下游的相关性基因进行分析,可以用于苦蘵的功能基因筛选和鉴定.     

高效液相色谱法测定肋柱花中獐牙菜苦苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定肋柱花中獐牙菜苦苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(25∶75);流速为1.0 ml/min;检测波长为237nm;柱温为50℃.结果:獐牙菜苦苷对照品进样量在0.313 mg~1.875mg范围内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.999 99;平均回收率为99.50%、CV(%)=0.92(n=6).结论:该方法简便、快捷、准确、重复性好,可用于肋柱花中獐牙菜苦苷的含量测定.     

茄科植物古汉名训诂

采用训诂学与现代植物学相结合的方法,将收集到的白英、枸杞、曼陀罗、青杞、天仙子、龙葵、酸浆、苦蘵、刺天茄、红丝线等10种茄科植物古汉名进行了考证.     

橘核中柠檬苦素的提取与含量测定

建立了高效液相色谱测定橘核中柠檬苦素含量的方法。采用超声法从橘核中提取柠檬苦素,以Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,乙腈—水(65∶35,v/v)溶液为流动相,用紫外检测器在波长210 nm处进行测定。结果表明,柠檬苦素的质量浓度在(20～160)μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9。方法的平均加样回收率为101.5%,RSD=1.37%(n=6)。该法简便、准确、可靠,能为橘核中柠檬苦素的测定及开发利用提供参考。     

RP-HPLC法测定苦皮藤素中苦皮素A的含量

建立了一种测定苦皮藤根皮及其产品中苦皮素A的反相高效液相色谱方法.采用Zorbax eclipse XDB C18(150 mm×4.6 mm i.d.,5μm)色谱柱,以甲醇-水(V甲醇∶V水=70∶30)为流动相,流速为1.0 ml/min,在波长232 nm处进行检测.实验结果表明,在0.000 9～0.020 7 mg/ml范围内,苦皮素A的峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数R=0.999 5,平均回收率为98.8%,相对标准偏差RSD=0.313%.该法简便、快速且重现性好,适用于苦皮藤原料及其产品中苦皮素A的定量分析.     

HPLC-ELSD法测定珠子参根茎中新化合物24(R)-珠子参苷R_1的质量比

采用高效液相色谱蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定珠子参根茎中新化合物24(R)-珠子参苷R1的质量浓度.色谱条件为:Aglilent Zorbax SB-C18(ODS,4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相V(甲醇)∶V(水)=58∶42,流速1.0mL/min,柱温25℃,载气压力1.94×105 Pa,漂移管温度85℃,撞击器关闭,进样量20μL.结果表明:在0.40~20.0μg内,24(R)-珠子参苷R1线性关系较好,r=0.999 3(n=6);24(R)-珠子参苷R1的平均回收率为98.7%,RSD=1.28%(n=6).     

HPLC法同时测定红直獐牙菜中3种有效成分的含量

建立了反相高效液相色谱法(HPLC)同时测定红直獐牙菜中的獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷含量的方法。在检测波长254 nm、柱温30℃、流速1 mL/min时,用ZORBAX SB-C18(250mm×4.6mm i.d.,5μm)柱,以MeOH和H2O(含0.04%H3PO4)在0~20 min内由20%至35%线性梯度洗脱。上述3种成分均达到基线分离,獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷的线性范围分别为0.0095~2.9μg(r=0.9999),0.0486~2.56μg(r=0.9999),0.0056~2.8μg(r=0.9999);回收率为97.7%(RSD=4.3%),99.5%(RSD=3.5%),103%(RSD=1.1%)。     

苦蘵组织培养技术初探

为建立药用植物苦蘵稳定高效的组织培养体系,以苦蘵的子叶为外植体进行离体培养,对培养条件进行探索和优化.结果表明:苦蘵种子在1/2 MS培养基中萌发可培养出适于后续试验的健康子叶;诱导愈伤组织和不定芽的最佳培养基为含6-BA(3 mg/L)和NAA(0.05 mg/L)的MS培养基,其愈伤组织诱导率达100%,从愈伤组织诱导不定芽率最高达78%;将生长良好的2~3cm的不定芽接种到1/2 MS生根培养基中,两周左右可形成较好的根系,生根率可达100%.     

HPLC法测定枸橼酸坦度螺酮片含量和有关物质

采用高效液相色谱法,用Luna C_(18)柱(250×4.6mm,10μm),以乙腈-0.01mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(35:65,pH3.0)为流动相,流速:1ml/min,柱温:25℃,进样量20μL,检测波长:239nm.在该色谱条件下枸橼酸坦度螺酮和杂质峰达到良好分离(R1.5),枸橼酸坦度螺酮在1.0~200.0μg·ml~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9991);重复性及精密度良好(RSD2%),3种浓度的平均回收率分别为100.17%、99.03%及99.75%(n=3).方法快速、简便、准确,适用于枸橼酸坦度螺酮片的含量测定和有关物质检查.     

HPLC测定药品中多贝斯的含量

采用hypersil ODS-C18色谱柱(150×4.6 mm,5μm);以甲醇-水=70:30(V/V)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,检测波长为301 nm,外标法测定了多贝斯胶囊中多贝斯的含量.多贝斯在1～60μg/mL浓度范围内,峰面积(A)与浓度(C)呈现出良好的线性关系,回归方程为A=-3 019.9 7 127.9 C(μg/mL)(r=0.999 6),此方法的最低检出限为0.1μg/mL.多贝斯在水溶液和尿液中的回收率分别在97.20%～101.0%和97.90%～101.5%之间,重现性良好.本法准确、简单、快速,可应用于药物制剂中多贝斯的质量监控.     

苦皮素A标准品的制备研究

为测定苦皮藤素产品中苦皮素A的含量,以控制苦皮藤素产品的质量,将苦皮藤根皮的95%乙醇提取物用硅胶柱分离、活性碳脱色后,利用制备高效液相色谱法制得苦皮素A的标准品,纯度达98.5%.制备型色谱柱为Shimpack PREP-ODS(20 mm×250 mm,15μm;)流动相为甲醇-水(体积比为703∶0)溶液;流速为15 ml/min;检测波长为232 nm;柱温为25℃.用13CNMR鉴定苦皮素A的结构.此方法得到的苦皮素A产品的纯度高,可用作分析方法的对照品.     

青海不同地区秦艽、麻花艽中落干酸和龙胆苦苷的含量测定

采用Kromasil-C18(250 nn×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.04%磷酸水溶液系统,流动相梯度洗脱程序为在15 min内甲醇从体积23%线性变化为30%,检测波长为238nm,流速为1 mL/min,柱温为35℃,建立了对青海不同地区秦艽、麻花艽中落干酸和龙胆苦苷的高效液相色谱测定方法.结果表明:落干酸和龙胆苦苷的回收率分别为95.19%和96.01%;RSD分别为0.57%和0.33%;线性范围分别为0.198 0～5.5440μg(r=0.999 9)和0.026 0～0.733 6μg(r=0.999 9).     

高效液相色谱法测定苦玄参药材中的苦玄参苷ⅠA含量

采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB C8 色谱柱(4.6×150mm,5μm),以乙腈-0.5%醋酸(32:68)为流动相,流速1ml·min-1,检测波长264nm,建立高效液相色谱法(HPLC),测定广西梧州大坡种植基地和龙州县种植的苦玄参药材的茎、叶中苦玄参苷ⅠA的含量.实验结果显示,苦玄参苷ⅠA在2.28～11.4μg范围内线性良好,平均加样回收率为101.1%RSD=2.4%(n=5),梧州大坡种植基地和龙州县种植的苦玄参药材中苦玄参苷ⅠA在茎、叶中的平均含量分别为0.10%,0.31%,0.11%,0.58%.本方法简便、快速,重复性好,可实际用于苦玄参药材中苦玄参苷ⅠA含量测定.     

丹参营养器官中丹参酮IIA的高效液相色谱法分析

目的:建立测定丹参各营养器官中丹参酮IIA的高效液相色谱分析法,并用该方法测定丹参各营养器官中丹参酮IIA含量。方法:采用反相高效液相色谱法,以Zorbax SB-C18(150mm×4.6mm,5.0m)为色谱柱,柱温为30℃;甲醇:水=75:25为流动相;流速:1.0mL.min-1;检测波长:268nm。结果:丹参酮IIA浓度在4.4～70.4μg.mL-1(r=0.9996)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)为99.7%(R S D=2.1%)。结论:该法是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为丹参的种植、采收、品质鉴定、扩展药用部位以及控制丹参药材质量提供理论依据。     

HPLC法测定人参叶中人参黄酮苷的质量分数

采用高效液相色谱法,测定人参叶中的主要黄酮类成分人参黄酮苷[山柰酚-3-O-β-D-半乳糖(2→1)-β-D-葡萄糖苷]的质量分数.色谱条件:Zorbax Extend C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为V(甲醇):V(乙腈):V(体积分数为0.1%的醋酸水溶液)=25:5:70,流速为1.2mL/min,检测波长268nm,色谱柱温度为25℃.结果表明:在进样量0.5～20.0μg范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999(n=6);人参黄酮苷的平均回收率为98.5%;RSD=0.64%(n=6)。     

HPLC测定益肝颗粒中五味子甲素的质量浓度

建立测定益肝颗粒中五味子甲素质量浓度的方法.室温条件下超声提取五味子甲素,HPLC测定其质量浓度,SinoChrom ODS-BP色谱柱,以甲醇-水(87∶13)为流动相;检测波长为254 nm;柱温25℃;流速为1.0 mL/min;进样量10μL.五味子甲素进样量在0.2～1.0μg范围内与峰面积线性关系良好;结果平均加样回收率为98.82%,(n=3),RSD为1.19%.该方法灵敏、准确、重复性好,可用于益肝颗粒的质量控制.     

RP-HPLC法测定川楝子水提醇沉提取物中川楝素的含量

建立川楝子水提醇沉提取物中川楝素含量测定的反相高效液相色谱法。采用Diamonsil TMC18柱(250×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(40∶60);流速为1.2 mL.min-1;检测波长为220 nm,柱温为25℃,进样量20μL。川楝素检测浓度在(10.39～249.36)μg.mL-1范围内与川楝素峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6);平均加样回收率为99.52%,RSD为0.81%。建立了简便、快速、准确、重复性好的川楝子水体醇沉提取物中川楝素的RP-HPLC含量测定方法。     

HPLC-ELSD法测定顺铂脂质体中DSPE-PEG2000含量

为建立以HPLC-ELSD法测定顺铂脂质体中DSPE-PEG2000含量的方法,以Waters Sun Fire prep Silica(250 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱(柱温25℃),甲醇-冰醋酸-三乙胺(500∶8∶2,V/V/V)为流动相(流速1 m L/min),蒸发光散射检测器检测(雾化温度50℃,蒸发温度100℃,气体流速1.6 m L/min).结果表明,DSPE-PEG2000在21.08421.6μg/m L浓度范围内线性关系良好(r=0.999 3),加样回收率为99.03%101.23%(RSD=1.08%,n=9).该法能简便、快速、准确地测定顺铂脂质体中DSPE-PEG2000含量,重复性良好.     

HPLC法同时测定蒙药复方述达格-4中四个黄酮类成分的含量

建立同时测定蒙药复方述达格-4中山奈酚、高良姜素、山奈素、高良姜素-3-甲醚含量的方法.采用HPLC法,色谱柱为AgilentC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈-0.2%乙酸水溶液(梯度洗脱),流速0.6mL·min-1,检测波长254nm,柱温30℃,进样量为10μL.得出山奈酚、高良姜素、山奈素和高良姜素-3-甲醚线性范围分别为0.00067-0.00670μg(r=0.9999)、0.5240-5.2400μg(r=0.9999)、0.1484-1.4840μg(r=0.9999)、0.0996-0.9960μg(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD2%;平均加样回收率分别为96.79%(RSD=1.70%,n=6)、97.38%(RSD=1.59%,n=6)、100.96%(RSD=1.49%,n=6)、97.01%(RSD=1.50%,n=6).结果表明该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于蒙药复方述达格-4中4个黄酮成分含量的测定.本研究可为蒙药复方述达格-4资源开发利用提供理论依据.