植物半胱氨酸可逆氧化修饰蛋白质组学技术研究进展

活性氧(ROS)介导的蛋白质半胱氨酸(Cys)可逆氧化修饰对于调控植物发育和逆境应答过程具有重要意义.近年来新发展起来的高通量氧化还原蛋白质组学技术包括:基于荧光素、生物素-巯基特异性试剂、同位素亲和标签(ICAT)、巯基特异性串联质量标签(CysTMT/iodoTMT),以及iodoTMT与同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)试剂联用等标记技术.这些技术的发展完善为系统研究植物蛋白质氧化还原修饰提供了重要手段.综述了植物Cys可逆氧化修饰蛋白质组学技术的研究进展.     

交联聚合物中蛋白质含量的测定

蛋白质含量的测定是蛋白质研究中必不可少的手段.一般可利用蛋白质的物理性质,如折射率、比重、紫外吸收等进行初步的测定.进而采用化学方法进行严格的定量分析.以往的化学分析方法,如定氮法、双缩脲法[1]、Folin-酚试剂法[2~3]、考马斯亮蓝法[4]等,均是对蛋白质的溶液进行测量     

基于近红外与拉曼光谱的甲醇汽油定量分析

利用近红外和拉曼光谱法定量分析了甲醇汽油中甲醇的含量,采用偏最小二乘法(partial least squares,PLS)建立甲醇的定量模型.近红外光谱法测定甲醇定量模型的预测集相关系数RP为0.998,预测均方根误差(RMSEP)为0.289%;拉曼光谱法测定甲醇定量模型的预测集相关系数RP为0.982,预测均方根误差(RMSEP)为1.141%.实验表明,近红外与拉曼光谱技术均可用于甲醇汽油中甲醇含量的快速检测.     

日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进

采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂(RDP试剂)进行日本囊对虾性腺总蛋白质的制备,并通过双向电泳(2 - DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果.RDP法所得2- DE图谱清晰,条纹少,蛋白质点数多,而裂解液法存在横向和纵向拖尾,其碱性端蛋白质点大量缺失,说明RDP法能有效去除蛋白质样品中盐离子、脂...     

基于共振拉曼探针(BCA/Cu~+)的Cu~(2+)定量分析

开发了一种共振拉曼光谱(RR)技术用于二价铜离子的定量评价的新方法.通常二价铜离子(Cu~(2+))在碱性的条件下能够被蛋白质还原成一价铜离子,而两个BCA探针分子能够与一价铜离子发生螯合反应,形成BCA/Cu~+复合物,它有很强的RR活性.因此,采用这一RR方法进行蛋白质检测,能够比传统方法的检测浓度范围更宽.并且,基于RR方法可以对Cu~(2+)的最低检测浓度达到5×10~(-7)mol/L,要比传统的比色和紫外可见吸收光谱法更灵敏.该方法提供了一种新颖且高度敏感的RR技术用于金属离子的定量研究.     

基于粒子群算法的重叠拉曼谱峰解析

在拉曼光谱技术的应用推广中,检测样品拉曼谱峰的重叠是不可避免的。为了快速解析并定量分析重叠拉曼谱峰信号,该文将粒子群算法分别应用于三组分拉曼谱解析三组分(甲苯,邻二甲苯和间二甲苯)、解析四组分(甲苯,邻二甲苯,间二甲苯和和乙基苯)和解析两组分(邻二甲苯和间二甲苯)芳香烃混合物。实验结果表明:此方法具有较好的分析精度,对于实验中的多组分芳香烃的定量分析,其误差均小于1%,准确率最高可达99.5%,并且占用机时较少,符合在线测量要求。分析结果表明,粒子群算法不但适用于将多种重叠拉曼谱峰进行相互分离,而且可以快速完成各个成分的定量分析,是在线拉曼分析中解析重叠拉曼光谱信号的有效方法之一。     

基于粒子群算法的重叠拉曼谱峰解析

在拉曼光谱技术的应用推广中,检测样品拉曼谱峰的重叠是不可避免的。为了快速解析并定量分析重叠拉曼谱峰信号,该文将粒子群算法分别应用于三组分拉曼谱解析三组分(甲苯,邻二甲苯和间二甲苯)、解析四组分(甲苯,邻二甲苯,间二甲苯和和乙基苯)和解析两组分(邻二甲苯和间二甲苯)芳香烃混合物。实验结果表明:此方法具有较好的分析精度,对于实验中的多组分芳香烃的定量分析,其误差均小于1%,准确率最高可达99.5%,并且占用机时较少,符合在线测量要求。分析结果表明,粒子群算法不但适用于将多种重叠拉曼谱峰进行相互分离,而且可以快速完成各个成分的定量分析,是在线拉曼分析中解析重叠拉曼光谱信号的有效方法之一。     

NaBF_4/DMF溶液的拉曼光谱和密度泛函研究

随近年来工业发展的需要 ,四氟硼酸盐被广泛地应用于高能密度电池、电容器、有机合成和核工业等多方面 .四氟硼酸根是一种弱的亲核试剂 ,在水或有机溶液中将与阳离子发生缔合作用[1] .本文利用拉曼光谱研究了NaBF4 /二甲基甲酰胺 (DMF)溶液中的离子溶剂化和离子缔合现象 ,并运用量子化学的方法 (DFT)计算了气态和DMF溶液中Na+ BF- 4的稳定构型和振动光谱数据 .实验所用NaBF4 和DMF均按照标准方法提纯 .溶液按重量法配置 ,浓度以质量摩尔浓度表示 .溶液的拉曼光谱利用美国Nicolet公司Nexus型红外光谱仪的拉曼附件测定 .激光光源波…     

用邻苯二甲醛荧光法检测肽——与茚三酮方法的比较

自Sanger测定胰岛素结构和Moore,Stein测定核糖核酸酶(RNA酶)结构以来,近二十年来蛋白质化学领域发展极为迅速,这些发展的一个重要方面是分析手段的超微量化,使蛋白质化学结构的研究进入一个新阶段。在各种超微量分析技术中,荧光法尤其引人注目。Udenfriend首先引入荧光胺试剂,将氨基酸、肽、蛋白质检测灵敏度提高到微微     

拉曼光谱技术的发展及其在生物医学领域中的应用

拉曼光谱技术自发现以来广泛应用于检测固体和液体材料的化学成分,它可利用物质的光谱"指纹"信息,区分各种物质样品、检测不同生理状况的细胞及其中的生物分子,如核酸、蛋白质等.为探索拉曼光谱在生物医学领域的应用前景,在概述拉曼光谱原理的基础上,介绍拉曼光谱技术及其衍生出的其他技术,包括表面增强拉曼散射(SERS)、共振拉曼光谱(RRS)、相干反斯托克斯拉曼光谱(CARS)、受激拉曼光谱(SRS)技术等,最后对拉曼光谱的改进与应用提出展望.     

基于表面增强拉曼光谱分析水溶液中的泰乐菌素

高效液相色谱具有灵敏度高、精确度高和检出限低等优点,因此常被用来检测抗生素类物质;但是该法操作复杂、成本高、对实验人员有较高的要求。表面增强拉曼光谱(surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)克服了拉曼光谱灵敏度低的缺点,具备信息丰富、灵敏度高、准确度高、无需样品预处理、可现场探测等优点。因此实验使用暴沸法-柠檬酸钠还原硝酸银法制备银胶,采用表面增强拉曼光谱检测典型大环内酯类兽药抗生素泰乐菌素(tylosin,TYL)。在考察银胶制备条件对TYL拉曼光谱增强效果影响的基础上,利用最优条件下制备的银胶,考察银胶与待测样品混合比例对TYL拉曼光谱响应信号的影响;并在最佳的实验条件下,对TYL进行了定量分析。结果表明,制备银胶的最佳加热时间为25 min、最佳柠檬酸钠与硝酸银配置比为10∶1。银胶与TYL最佳的混合体积为5∶1。TYL浓度与拉曼信号强度具有较好的线性关系(y=0. 002 4x+4. 146 2,R2=0. 940 1),可以考虑用拉曼光谱定量分析水中的TYL。     

甲烷水合物拉曼光谱特征及其在流体包裹体分析中的应用

甲烷水合物具有明显的拉曼光谱特征,但会受到压力和组成的影响,压力主要影响甲烷水合物拉曼峰强度,而组成会影响甲烷水合物的类型以及特征峰的拉曼位移.流体包裹体中甲烷水合物形成时的温度和压力是流体包裹体分析中的重要参数.采用原位拉曼光谱技术对南黄海盆地栖霞组地层石英脉中的天然CH4-H2O体系流体包裹体进行了分析.实验结果表明,利用激光拉曼光谱技术可以获得包裹体中甲烷水合物的拉曼光谱信号.该研究包裹体中的水合物为Ⅰ型甲烷水合物,其形成温度为7.5℃(280.65 K);结合甲烷水合物相平衡关系计算得到包裹体中甲烷生成的压力为5.6 MPa.原位拉曼光谱技术不仅可以准确识别甲烷水合物的类型,而且也可定量获取包裹体中水合物的生成条件.     

二硫化钠的芳基化法制DTNB的研究

<正> DTNB又称Ellman试剂,是定量蛋白质巯基的专一性分析试剂。在合成中,本文改用了Na_2S_2为试剂,选择并控制适当条件,一步进行二硫代反应,以代替Ellman合成法中的巯基化和氧化偶联两步反应,其反应式表示如下:     

表面等离激元增强拉曼散射（SERS）的机理

被称为"指纹谱"的拉曼谱在生物、化学及医学研究中具有重要应用,特别是在单分子传感方面具有优势。但相对于入射光强,拉曼散射信号强度非常弱,需借助科学手段增强信号,即增强拉曼研究,这主要从增强拉曼信号强度和提高信噪比两方面着手。其中,表面增强拉曼散射(SERS)是其中一支极其重要的研究方向。本文从拉曼散射的基本原理出发,研究了金属微纳结构增强拉曼信号的机理,为基于拉曼信号的高灵敏度传感提供理论参考,并给出了一个实验结果。     

方解石晶体定向性对水的拉曼光谱影响的实验评估——天然包裹体盐度的测定

拉曼光谱是一种原位、快速、无损的分析技术,被广泛用于流体包裹体组分的定性描述和半定量-定量分析.盐水溶液的OH伸缩振动谱峰(ν_s-H_2O)随流体盐度升高向高波数偏移,同时其对称性也逐渐增强,是反映流体盐度的良好指标.需要注意的是,具有双折射性的寄主矿物本身的晶体定向性也会影响ν_s-H_2O谱峰的峰形,是限制该方法应用于自然包裹体盐度测定的重要因素.方解石是最常见的包裹体寄主矿物之一,其晶体定向性对ν_s-H_2O谱峰的影响规律缺少系统的实验研究.应用熔融毛细硅管合成包裹体技术制备了一系列含不同浓度NaCl溶液的透明腔体,在室温条件下收集其拉曼光谱,经过拟合处理后,建立了NaCl浓度和拉曼光谱参数之间的定量关系.而后,系统分析了沿{1011}{1121}和{0001}方向制备的方解石薄片的方向性对溶液的ν_s-H_2O谱峰的影响规律.方解石晶体定向性对ν_s-H_2O光谱形态的影响表现为使低波数部分得以增强或者减弱.在系统实验观测的基础上,提出了较为可行的方解石中包裹体盐度的原位拉曼光谱测定流程,即将包裹体片旋转0°～180°获取多条拉曼光谱,经拟合处理后获得其光谱参数的平均值,而后计算流体盐度.最后,将该方法应用于地质实例分析,测定了瑶岗仙钨矿晚期热液方解石脉中的包裹体盐度,并与显微测温法进行了对比,其偏差在±5%以内.     

刚果红/Triton X-100/蛋白质共振光散射体系的研究及分析应用

蛋白质作为生命活动的物质基础,其定量分析在生物学、医学及其营养科学等领域中具有重要意义共振光散射(RLS)分析技术应用于蛋白质的测定具有快速、灵敏的特点.应用蛋白质测定的共振光散射探针主要有卟啉,酸性三苯甲烷染料以及酸性偶氮染料等.     

半定量RT-PCR法在检测基因表达水平中的应用

半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR法)是近年来常用的一种快速、简捷、特异的RNA检测方法,也是探讨基因转录水平的有效手段.该文就半定量RT-PCR法的检测步骤及技术的关键因素(总RNA提取、引物设计、循环数的确定和内参的选择等)进行综述.     

一种基于AAO树枝状银SERS基底的制备及其在气体检测上的应用

表面增强拉曼散射(SERS)技术因具有高效检测与识别能力而成为一种常用的物质检测手段.本文采用电化学沉积法在阳极氧化铝(AAO)基上制备了树枝状银纳米材料并得到SERS基底,并研究了电化学沉积时间与PVP/AgNO3浓度对树枝状银形貌的影响.结果表明,PVP/AgNO3浓度为0.06M、电化学沉积5min时所获AAO基树枝状银具备最佳的SERS性能.利用此基底组装的便捷式拉曼气体检测装置对甲醛蒸汽、4-DNT蒸汽、二甲苯蒸汽的SERS检测也得到了很好检测信号与较短的响应时间.     

受激拉曼光谱系统的研制

拉曼光谱是一种包含丰富样品结构信息的光谱技术,但是拉曼光谱检测的缺点是检测灵敏度低和荧光干扰.本实验室研制的受激拉曼光谱系统,是将一束皮秒(10-12 s)脉宽的可见泵浦光和一束由飞秒(10-15 s)脉宽的探测白光共同作用于样品,产生受激拉曼信号.该光谱系统的拉曼泵浦光在可见和近紫外波段可连续调谐,可以同时获取受激拉曼光谱的增益和损失光谱,具有灵敏度高和抑制荧光干扰等优点.分别考察了拉曼泵浦光和拉曼探测光脉冲相对时序、拉曼泵浦光强度对受激拉曼光谱的影响,受激拉曼信号强度在拉曼泵浦和拉曼探测脉冲时间上完全重合时达到最大.在拉曼泵浦光强较小时,受激拉曼谱峰强度随泵浦光强度增大而增大;当拉曼泵浦光强度较大时,损失谱峰强度会趋于饱和,在研究的光强范围内增益谱峰会持续增长,未达到饱和.     

高通量筛选高特异性的检测类风湿关节炎的生物探针分子

从靶蛋白-配体特异性结合角度,采用蛋白折叠码(PFSC)技术在PDB数据库中高通量地筛选出与TNFA_HUMAN靶点区结合灵敏度高的分子作为检测类风湿关节炎的生物探针分子.结果显示,小分子307具有相对较高的灵敏度和较低的检出限,可以作为生物探针来检测类风湿关节炎.结果显示,蛋白指纹检索技术是一种快速、有效的蛋白质结构检索工具,通过对数据库中海量数据的筛选,可为重大疾病的检测试剂开发提供先导信息.