银杏花粉不同破壁方法的比较分析

试验比较了匀浆机破壁、高压细胞破碎仪破壁、温差破壁、酶法破壁等4种破壁方法对银杏花粉的破壁效果。结果表明：匀浆机破壁法优于其他破壁方法,且操作简单,能达到破壁要求。匀浆机破壁的最佳工艺参数为：转速15 000 r/min、花粉(g)与水(mL)的配比即料液比1∶50、时间10 min,破壁率达99.6%。     

微藻细胞破碎方法的研究

采用反复冻融和超声波破碎法破碎17种微藻细胞，通过细胞破碎率和抗菌活性检测破碎效果，以选择适合不同微藻的破碎方法，利于胞内活性物质的提取．细胞破碎结果显示：经过12min的超声处理，所有实验藻种的破碎率均在90％以上，特别是扁藻、角毛藻以及球等鞭金藻和甲藻，仅处理3min，破碎率达到了99％以上，更适合超声波法破碎、反复冻融法破碎藻细胞，经过2次冻融，10种微藻的破碎率在95％以上，4种在60％-80％，3种小于40％，对此三种藻（分别是扁藻，小球藻和紫球藻）的破碎应选择超声或组合法；以金黄色葡萄球菌（S.aureus）为指示菌，采用琼脂扩散法检测细胞破碎率对抑菌活性的影响，抗菌活性表明：细胞充分破碎，有利于活性物质的释放和提取．     

雨生红球藻提取虾青素不同机械破壁方法的研究

对雨生红球藻厚壁孢子细胞的几种常用机械破壁方法的工艺条件分别进行研究,得到高压均质法,超声波法和冻融法的较优工艺条件.并分别在上述几种机械破壁方法的最佳工艺条件下比较了几种不同破壁方法对破壁率和虾青素提取率的影响.结果表明,高压均质法最适合于雨生红球藻厚壁孢子的破碎和虾青素的提取.高压均质的优化条件为:40MPa,循环3次,室温,破壁率达到91.4%,虾青素提取率为28.0μg mg(细胞干重),比未经破壁处理的提取率提高了10.1μg mg(细胞干重),提高了56.3%.     

几种废啤酒酵母细胞破壁方法的比较

以废啤酒酵母为原料,根据实验室条件及试验要求,采用研磨法、冻融法、微波法、超声波法破碎废啤酒酵母细胞壁。利用紫外分光光度计测定上清液中可溶性蛋白质的含量为标准,来评价不同破壁方法对细胞内含物的释放程度。为进一步探索经济、高效的废啤酒酵母的破壁方法提供理论依据。结果表明,废啤酒酵母细胞破壁效果为超声波法﹥微波法﹥冻融法﹥研磨法。     

不同破壁方法获取海洋毕赤酵母提取物及其应用

以从红树林沉积物中分离的海洋毕赤酵母(Pichia guilliermondii) SY-19菌株为实验材料,制成质量分数分别为5.0%、7.5%及10.0%的细胞悬液,用蜗牛酶法、双酶法(甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶)及热碱法分组进行破壁处理12 h,每3 h检测1次酵母细胞数量及多糖、蛋白质、氨基氮和核酸等营养物质的含量,计算破壁率和得率,确定制备酵母提取物的最佳方法,并利用最优方法制备酵母提取物拌料,对经有害无机氮胁迫处理2周的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别以配合饲料、菌液拌料和酵母提取物拌料投喂3周,比较对虾的存活率及生长状况.结果表明:用双酶法、以质量分数5.0%的酵母悬液处理12 h,蛋白质、氨基氮和多糖的得率最高,营养保留效果最好;所制备酵母提取物作为饲料添加剂,对胁迫过的对虾经3周的恢复饲养,酵母提取物拌料饲喂的对虾的存活率、体质量最高(77.67%±4.62%,2.79±0.11 g),菌液拌料饲喂的次之(62.00%±9.90%,2.44±0.16 g),未拌料的最低(53.67%±12.91%,2.19±0.02 g),差异有统计学意义(P0.05).     

谷氨酸菌体核酸释放条件的优化研究

采用均质破碎法、加酶法和自溶法等方法对谷氨酸菌进行破碎试验，以使核酸释放，并对相应的工艺参数及检测方法进行了优化研究。结果表明：自溶法效果最好，当菌液浓度为１％、ｐＨ值为１０、温度为７０℃时，自溶３０ｍｉｎ的核酸释放率达到９２％。     

加热与加酸对污泥释磷影响研究

利用热和酸有助于微生物细胞破碎原理,对含磷污泥在不同温度（60、70、80、90℃）,不同无机酸（H2SO4、HCl、HNO3）以及两者共同作用下的释磷效果进行了比较研究．结果表明,随着加热时间延长和温度升高,污泥释磷率提高,90℃下加热2h,总磷（T-P）释放率为22．5％,明显比60℃下高．在加酸条件下,随着酸浓度提高,T-P释放率提高．在10％HCl反应条件下,污泥磷释放效果最好,释磷比率为52．2％;10％HzS0t条件下,释磷效果稍差,释磷率为46．0％;10％HNO3与前两者相比,释磷效果最差,释磷率为39．6％．加热和加酸条件下释磷效果的比较结果表明,加酸比加热更有利于T-P释放．在热和酸联合作用下,污泥T-P释放效果更好．在90℃＋2％HCl条件下经2h后,T—P释放率达到96．3％．显微镜观察显示仅仅加热对含磷污泥中微生物的细胞形态破坏得不彻底,但通过加热和加酸联合作用和反应后,微生物细胞被完全破碎．     

渗透处理三七细胞促使人参皂甙的有效释放

二甲基亚砜渗透处理三七悬浮培养细胞，使细胞有效释放胞内皂甙。体积分数ψ＝０．０２－０．０５的ＤＭＳＯ溶液短期处理三七细胞，胞内皂甙释放量为３０－８０ｍｇ／Ｌ，ψ〉０．１，的ＤＭＳＯ溶液对细胞有严重伤害，胞内蛋白质大量放出。     

含硒酵母细胞壁破碎方法的选择

通过采用细胞自溶法和酸－热破碎法，对含硒酵母细胞壁破碎后内容物溢出量有有机硒含量进行比较，发现这两种方法破碎效果差别不大。对酵母细胞的破碎，适合用酸－热破碎法，优点是操作简便、省时，不受实验室设备条件的限制；若将高硒酵母作为营养补剂，则适合用细胞自溶法，优点是安全性高，可最大限度地保持细胞溢出物的生物活性。     

一种快速提取致癌农杆菌(Agrobecterium tumefaciens)Ti质粒的方法

本文比较了前人提取致癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒的方法,改变了溶菌的条件和蛋白质除去的程序,找到一种简易、快速、重复性高的提取Ti质粒的方法。本文的方法是将一份致癌农杆菌细胞同四份碱性SDS溶菌液(pH12.6)混合,这样溶菌液的pH为10.5,然后将此碱性溶菌液(pH10.5)置37℃保温30分钟。为了有效地提取Ti质粒又改变了去除蛋白质的程序,溶菌液首先用苯酚—氯仿抽提,随之加5M NaCl于溶菌液中,使NaCl最终浓度达0.6M,溶菌液于冰水中盐析2小时,悬浮的溶菌液经高速高心,大部分蛋白质和变性DNA被除去,DNA提取液由混浊变清。这种方法也可以用于提取其它菌株中的小分子质粒。     

重组毕赤酵母细胞壁蛋白的抽提和分析

建立稳定有效的细胞壁蛋白(CWPs)抽提方法,是开展毕赤酵母细胞壁蛋白质组学及甲醇代谢调控相关性研究的基础.为此,以具重组非共价结合壁蛋白Flo1p絮凝素的酵母GS115/KFS-CALB、具共价结合壁蛋白α凝集素的酵母GS115/KNS-CALB和具重组共价结合壁蛋白Pir1的酵母GS115/Pir1-CALB为对象,用热十二烷基磺酸钠(SDS)、昆布多糖酶、氢氟酸吡啶和温和碱水解对上述壁蛋白进行抽提,结果表明:3种壁蛋白已成功地展示于毕赤酵母细胞壁的表面;用这3种毕赤酵母锚定蛋白展示脂肪酶,对细胞的生长状况影响不大,而对展示酶的表达量影响较大,GS115/KFS-CALB、GS115/KNS-CALB和GS115/Pir1-CALB的脂肪酶水解比酶活最高达855.02、1239.40和210.47 U/g(以干细胞计);热SDS可有效抽提GS115/KFS-CALB上的Flo1p絮凝素,昆布多糖酶和氢氟酸吡啶可释放GS115/KNS-CALB上的α凝集素,而昆布多糖酶和温和碱可释放GS115/Pir1-CALB上的Pir1.     

真菌菌丝细胞壁可溶性蛋白抽提方法研究

本文以烟草赤星病菌Alternaria alternata为研究材料。分别用三种不同的化学方法即冷碱、热碱和SDS法，对真菌菌丝细胞壁可溶性蛋白的抽提方法进行了比较和研究，结果表明三种方法均为有效的抽提真菌细胞壁蛋白的方法，所抽提的主要成分均一致，抽提液的蛋白组分和含量又有差异。对不同抽提液含糖量的测定结果表明，冷碱抽提液含糖量低，热碱抽提液含糖量较高，SDS抽提液含糖量最高。     

不同培养方式对白腐菌降解染料体系抑杂菌效果的影响

研究了非灭菌环境白腐菌降解染料体系的抑菌方法。采用3种不同碳氮摩尔比液体培养基。试验结果表明,当采用白腐菌孢子作为种子在非灭菌环境进行培养时,3种碳氮摩尔比液体培养基在培养2 d后全部感染酵母菌,使体系失去降解染料能力;而采用先灭菌环境培养后非灭菌环境脱色的方法却获得了较好的脱色效果,3种液体培养基中的白腐菌对染料的脱色率均在70%以上,与灭菌环境得到的结果基本相当。因此,当采用白腐菌孢子作为种子进行培养时,只有采用灭菌环境培养的方法,才能使白腐菌在非灭菌环境具有较高的降解染料的能力。     

白腐菌的筛选及对松木片木素和树脂的脱除

为评价从野外筛选得到的白腐菌对造纸原料马尾松的木素降解和树脂脱除能力,将带菌样本经室内平板初筛及平板变色反应复筛,得到了20株纯白腐菌菌株,并对变色系数最小的一株菌株G进行松木片固体接种试验,测定3、5、7、9天后松木片的木素、树脂降解情况.结果表明,随着培养时间的延长,松木片失重率逐渐增大,K lason木素和总木素含量逐渐降低,二氯甲烷抽提物脱除率逐渐增大.表面扫描电镜(SEM)照片表明,接种白腐菌的木片细胞壁上产生了明显的腐朽沟槽现象;切片断面显微结构显示,在细胞壁及胞间层有菌丝出现.     

烟曲霉细胞壁作为药物靶标的鉴定研究

烟曲霉(Aspergillus fumigatus)作为侵袭性真菌感染的三大机会病原真菌之一,因其高致病率和高致死率而成为威胁人类健康的重大隐患。有限的抗真菌类药物以及近年来耐药性菌株的涌现使得寻找新的药物靶标并开发新型抗真菌药物迫在眉睫。真菌细胞壁作为真菌所特有的结构一直以来被认为是理想的药物靶标。本文概述了烟曲霉细胞壁结构及合成过程的相关研究进展,并分析了参与细胞壁各组分合成的酶作为药靶的可行性。     

毛霉BFL-5菌株的分离鉴定及染料脱色特性

筛选对染料具有良好脱色能力的真菌.采集当地腐朽树木样品,以染料脱色为目标,筛选、分离真菌菌株;采用真菌26S rDNA D1/D2区域鉴定法对菌种的26S rDNA进行测序.以花生壳等为固定化培养载体,培养得到固定化真菌,用于对含酸性红B,酸性金黄G,直接湖蓝5B,直接耐晒黑G等染料的模拟染料废水脱色实验.初步鉴定其为...     

螺旋藻基因组DNA制备方法的摸索与比较

为了得到高质量的螺旋藻基因组DNA,采用超声波法和溶菌酶法两种方法提取基因组DNA,并对实验方法进行了摸索与比较。结果表明:影响螺旋藻基因组DNA制备质量和得率的重要因素之一是螺旋藻细胞壁的破壁程度。本实验中采用两种破壁方法均可得到高质量高得率的螺旋藻基因组DNA,但超声波法破壁不易掌控,而适当浓度的溶菌酶法可获得较理想的结果。     

油菜花粉破壁技术研究

以双子叶植物中的十字花科芸苔属油莱(Bassica Campestros L．)为试验材料，探讨了水合法、冷冻酶解法、直接酶解法、水合-酶解二步法和三步法等多种破壁方法，比较得出油莱成熟花粉，水合法破外壁最为理想，而其中以1mol／L蔗糖为水合液最好，其破外壁率可达92．4％。油莱幼嫩花粉的破壁以水合-酶解二步法最好，其中以0．8mol／L甘露醇 2％纤维素酶组合最好，其破壁率达85．7％。     

应力刺激在植物细胞防卫反应中的作用

在病原菌与植物初步接触并企图定植期间，有一系列的识别活动，其中包括物理学和生化识别等．二者的相互关系，将直接影响以后的侵染．在病原真菌侵染过程中，不仅对植物细胞有一个酶解的过程，还有一个物理挤压的过程．后者的应力刺激几乎总是能够引起细胞壁相关的防卫反应，诸如细胞外超氧化物的产生和胼胝质的沉积等．化学信号和力学信号诱导的有机结合才能引发完整的细胞防卫反应．和哺乳动物细胞相似，植物细胞对于力学信号的感知和传导依赖于细胞壁和细胞膜之间的粘附。该粘附是由包含RGD（Arg-Gly-Asp）序列多肽特异介导的，并且该粘附为植物细胞壁相关防卫基因表达所必需．     

The genome of Laccaria bicolor provides insights into mycorrhizal symbiosis

Mycorrhizal symbioses--the union of roots and soil fungi--are universal in terrestrial ecosystems and may have been fundamental to land colonization by plants. Boreal, temperate and montane forests all depend on ectomycorrhizae. Identification of the primary factors that regulate symbiotic development and metabolic activity will therefore open the door to understanding the role of ectomycorrhizae in plant development and physiology, allowing the full ecological significance of this symbiosis to be explored. Here we report the genome sequence of the ectomycorrhizal basidiomycete Laccaria bicolor (Fig. 1) and highlight gene sets involved in rhizosphere colonization and symbiosis. This 65-megabase genome assembly contains approximately 20,000 predicted protein-encoding genes and a very large number of transposons and repeated sequences. We detected unexpected genomic features, most notably a battery of effector-type small secreted proteins (SSPs) with unknown function, several of which are only expressed in symbiotic tissues. The most highly expressed SSP accumulates in the proliferating hyphae colonizing the host root. The ectomycorrhizae-specific SSPs probably have a decisive role in the establishment of the symbiosis. The unexpected observation that the genome of L. bicolor lacks carbohydrate-active enzymes involved in degradation of plant cell walls, but maintains the ability to degrade non-plant cell wall polysaccharides, reveals the dual saprotrophic and biotrophic lifestyle of the mycorrhizal fungus that enables it to grow within both soil and living plant roots. The predicted gene inventory of the L. bicolor genome, therefore, points to previously unknown mechanisms of symbiosis operating in biotrophic mycorrhizal fungi. The availability of this genome provides an unparalleled opportunity to develop a deeper understanding of the processes by which symbionts interact with plants within their ecosystem to perform vital functions in the carbon and nitrogen cycles that are fundamental to sustainable plant productivity.