复合酶在合成洗衣粉中的应用

本文研究了由碱性蛋白酶、淀粉酶、碱性纤维素酶复配而成的复合酶在合成洗衣粉中的应用．结果表明：洗衣粉中添加复合酶,大大提高了其去污力,可同时去除各种类型污垢;在适宜条件下,复合酶与洗衣粉中各成分配伍性良好,并具有较高的酶活稳定性．     

减压渣油中氧化物的分离和鉴定

用吸附色谱分离法，根据减压渣油中的酸、碱性组分分布情况，将其分成烃、中性份、碱性份和酸性份，即氮化物的族组成分离，实验结果表明，用碱性氧化铝和酸改性的酸性氧化铝可以将不同渣油分离成四组分。其中，酸性化合物大部分浓集于酸性份中，碱性氮化物大部分浓集于碱性份中，部分非碱性氧化物浓集在中性份中。     

复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化

以DPPH自由基清除率和收率为响应值,采用响应面法对复合酶法水解花生粕生产抗氧化性肽工艺条件进行了优化.研究结果表明,碱性蛋白酶和中性蛋白酶对花生粕具有较强的水解能力,二者以2∶1的比例对花生粕水解时,较优水解条件是50℃,pH值8.54,底物质量分数8.34%.在此条件下酶解16 h,花生肽收率为65.80%,在花生肽质量浓度为0.55 mg/mL时,对DPPH自由基清除率为25.77%,与优化前相比,复合酶比碱性蛋白酶单酶水解时收率和DPPH自由基清除率分别提高了7.48%和7.66%,比中性蛋白酶单酶水解时分别提高了10.29%和22.53%.     

鲭鱼罐头蒸煮液蛋白酶解产物的生物活性分析

以鲭鱼罐头蒸煮液为原料,采用生物酶解方法制备活性肽,以实现鱼罐头加工废弃液的高值化利用.研究结果表明,采用复合酶(碱性蛋白酶和胰蛋白酶)分段酶解,得到相对分子质量MW1 ku的组分占50%,高于碱性蛋白酶(30%)和胰蛋白酶(28%)单酶水解效果.进一步采用超滤方法分离酶解产物,得到不同相对分子质量范围的3个组分,其中MW1 ku的P1组分的抗氧化活性和ACE抑制效果最好.     

用碱性脂肪酶消除磨木浆的树脂障碍的探索

用碱性脂肪酶对磨木浆及其沉积树脂进行水解和树脂沉积试验 .结果表明 :碱性脂肪酶能够消除树脂沉积 .加酶水解产物为较低粘性的组分 .加酶处理不会影响纸浆和纸的质量 .     

碱性蛋白酶对小麦麸皮中蛋白质的酶解作用

采用碱性蛋白酶降解小麦麸皮中的蛋白质成为可溶性组分,通过水洗过滤分离将其除去.以小麦麸皮中蛋白质残留量为考察指标,对酶解过程中的影响因素进行单因素和正交设计分析,优化工艺参数组合.通过比较分析后得到结论,采用碱性蛋白酶酶解分离小麦麸皮中蛋白质,酶解后小麦麸皮中蛋白质残留量仅为0.62%.     

地热田碱性蛋白酶菌株的选育与酶性质的研究

从温泉附近土样中成功分离到一株高温碱性蛋白酶产生菌株H-1,经初步鉴定为芽孢杆菌(Bacillus).菌株H-1最佳产酶的发酵时间为67.5h,该酶在30～70℃酶活性随温度升高而增强,70℃酶活性达到最高,在pH7.0～11.0范围内较稳定,从菌株H-1液体发酵液中提取粗酶液,经CMC-I阳离子交换层析和SepHadex G-75凝胶层析,得到单一组分;通过Native-PAGE、SDS-PAGE电泳鉴定,粗酶至少含有3种碱性蛋白酶同工酶;单组分碱性蛋白酶的比活力为3875U,相对分子量约为31KDa.     

减压渣油中氧化物的分离和鉴定

用吸附色谱分离法，根据减压渣油中的酸、碱性组分分布情况，将其分成烃、中性份、碱性份和酸性份，即氮化物的族组成分离．实验结果表明，用碱性氧化铝和酸改性的酸性氧化铝可以将不同渣油分离成四组分．其中，酸性化合物大部分浓集于酸性份中，碱性氮化物大部分浓集于碱性份中，部分非碱性氧化物浓集在中性份中．     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

镁合金微弧氧化的电解液组分研究

利用交流微弧氧化装置对AZ91D镁合金在1组分、2组分、3组分和4组分电解液中进行了微弧氧化处理,并通过电化学测试技术研究了微弧氧化处理后膜层的耐蚀性能.实验结果表明:能显著提高镁合金耐蚀性能的微弧氧化电解液,多为含NaAlO2组分的碱性溶液;电解液中添加H2O2和C4H4O6Na2等组分,可进一步提高膜层的耐蚀性.微弧氧化处理后,膜层表面光滑、均匀、致密,并由尖晶石结构的MgAl2O4相和MgO相组成.NaAlO2组分的存在,能与膜层中的MgO相在微弧氧化过程中一起烧结形成具有尖晶石结构的MgAl2O4耐蚀相,从而提高镁合金的耐蚀性能.     

Evidence that three structural genes code for human alkaline phosphatases.

The number of structural gene loci that code for the different molecular forms of human alkaline phosphatase is unknown. Physical properties of the enzymes, immunological data, chemical inhibition and genetic studies suggest that at least three structural genes are involved: one coding for alkaline phosphatase from placenta, another for the enzyme from intestine, and one or more for the enzymes from liver, kidney and bone. Badger and Sussman have shown that alkaline phosphatases from human liver and placenta are products of different structural genes, and Greene and Sussman have shown that alkaline phosphatase from a metastasised bronchogenic carcinoma was nearly identical to the enzyme from placenta. However, other tumour-associated alkaline phosphatases and the enzymes from normal tissue other than placenta and liver have not been identified by conclusive structural criteria, and thus it is not known whether these onco-alkaline phosphatases represent ectopic production or unusual post-translational modification of the enzymes found in normal tissues. We present here, using a sensitive peptide-mapping technique, structural evidence that the enzyme forms from liver, kidney and serum from a patient with Paget's disease of bone (osteitis deformans) are products of the same structural gene and can be easily distinguished from either the intestinal or placental isoenzymes. The technqiue seems to be useful for the classification of tumour-associated alkaline phosphatases on a structural basis.     

New strategies of protein engineering——directed evolution of enzyme in vitro

New and highly effective strategies for directed enzyme evolution in vitro have been developed in the protein engineering field. They allow engineering all kinds of enzymes in vitro so that new ones with novel functions and features can be obtained by the methods of error-prone PCR, DNA shuffling (exon shuffling), hybrid enzyme, random-priming in vitro recombination (RPR), stagger extension process (StEP), random-directed mutagenesis in vitro, etc., even with little knowlodge of spatial structure and catalytic mechanism of enzymes in advance. The process that would take millions of years in nature can in principle be accomplished in the test within several years.     

芦苇收割对湖滨湿地土壤酶活性的影响

为探讨一定收割年限后芦苇湿地土壤酶活性的变化,以苏州太湖旅游度假区湖滨湿地人工恢复的芦苇群落为研究对象,采用野外控制实验方法,研究了芦苇收割移出和自然保留两种处理下湖滨湿地土壤脲酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶和蔗糖酶的活性变化。结果表明:土壤蔗糖酶活性对芦苇收割最为敏感,碱性磷酸酶次之,脲酶和过氧化氢酶活性在两种处理下没有表现出显著的差异;土壤有效磷在两种处理对应土层的差异性都较为显著,而其他土壤养分含量在两种处理下差异不显著。相关分析表明:土壤脲酶、碱性磷酸酶和蔗糖酶活性与有机质、全氮和有效磷极显著相关。说明芦苇收割导致土壤养分含量变化可能是土壤酶活发生变化的主要原因之一。     

酶解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽的初步研究

目的:牦牛乳富含酪蛋白,其经酶解制备的降血压肽以安全性高、无副作用等优点已成为乳品开发和高血压防治药物研究的新热点.方法:本实验对从牦牛乳中提取的酪蛋白,依据复合蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及胰蛋白酶各自的最适pH及温度采用酶解方法制备降血压肽,并且以ACE抑制活性为指标初步筛选最佳水解酶.结果:五种酶ACE抑制肽抑制率分别为:复合蛋白酶为39.02%,中性蛋白酶为67.48%,碱性蛋白酶为56.10%,木瓜蛋白酶为71.54%,胰蛋白酶为8.94%.结论:说明,在最适pH及温度条件下,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为制备降血压肽的最佳酶选,这为后续进一步的制备降血压肽实验提供依据.     

青霉素茵丝体中麦角固醇分离和纯化研究

探索从青霉素菌丝体中提取麦角固醇以及纯化的方法,并进行条件的优化．实验证明：以麦角固醇含量为1．2％的青霉素湿菌丝为原料,使用浓度为15％的NaOH溶液,物料比1：15,在温度为85℃条件下皂化2h,选择乙醇作为萃取剂进行萃取,是从青霉素菌丝体中提取麦角固醇的最优方法．选择碱性蛋白酶对粗提产品进行酶解,最佳酶解条件为：温度45℃,时间2h,加酶量2．0％,pH为8．在该酶解条件下麦角固醇纯度可达到70％,提取率为95％．     

蛋白酶对脂肪酶活性影响的研究

为了弄清洗涤剂中碱性蛋白酶及金属离子对碱性脂肪酶稳定性的问题，对加酶洗涤剂中的碱性蛋白酶及金属离子对圆弧青霉ＰＧ３７所产碱性脂肪酶的活力影响进行了研究。在碱性脂肪酶溶液中分别添加不同量的碱性蛋白酶和金属离子，并在２５℃保温３０ｍｉｎ，分别测定保温前后的脂肪酶活力。结果表明：在一定浓度范围内的蛋白酶对ＰＧ３７碱性脂肪酶活力的影响较小，可同时应用于洗涤剂中；金属离子对脂肪酶活力无明显影响，甚至在一定浓度范围内对酶活有激活作用。总之，ＰＧ３７菌株所产碱性脂肪酶具有良好的酶学特性，非常适合于洗涤剂用酶。     

喀斯特山地不同人工林土壤酶活性与草本层结构特征的关系

以贵州喀斯特山地3种不同类型人工林(刺槐林、滇柏林、刺槐滇柏混交林)和未造林对照标准地为研究对象,探讨不同类型林分的土壤酶活性与林下草本层结构特征之间的关系。结果表明:(1)除多酚氧化酶外,未造林对照地的脲酶、转化酶、碱性磷酸酶及过氧化氢酶活性均最低。(2)林下草本层特征值中,Shannon-Weiner多样性指数(H)、Pielou均匀度指数(Ep)及物种丰富度指数(R)间呈相同变化趋势,生态优势度指数(C’)则相反。(3)土壤酶种类不同,其与林下草本层特征值之间的相关性存在一定的差异;脲酶、转化酶、碱性磷酸酶和过氧化氢酶活性与H、Ep、R、C’之间的相关程度达显著或极显著水平,而多酚氧化酶活性与H、Ep、R、C’之间的相关性较低。     

The structural basis of Holliday junction resolution by T7 endonuclease I

The four-way (Holliday) DNA junction is the central intermediate in homologous recombination, a ubiquitous process that is important in DNA repair and generation of genetic diversity. The penultimate stage of recombination requires resolution of the DNA junction into nicked-duplex species by the action of a junction-resolving enzyme, examples of which have been identified in a wide variety of organisms. These enzymes are nucleases that are highly selective for the structure of branched DNA. The mechanism of this selectivity has, however, been unclear in the absence of structural data. Here we present the crystal structure of the junction-resolving enzyme phage T7 endonuclease I in complex with a synthetic four-way DNA junction. Although the enzyme is structure-selective, significant induced fit occurs in the interaction, with changes in the structure of both the protein and the junction. The dimeric enzyme presents two binding channels that contact the backbones of the junction's helical arms over seven nucleotides. These interactions effectively measure the relative orientations and positions of the arms of the junction, thereby ensuring that binding is selective for branched DNA that can achieve this geometry.     

生活污水灌溉对土壤微生物生物量及酶活性的影响

为了研究生活污水灌溉对土壤微生物生物量和酶活性的影响,采用不同污水灌溉量（0,300,600,900,1200,1500m3／（hm。·week））,进行了生活污水杨树林地灌溉试验．结果表明：随着污水灌溉量增加,土壤微生物生物量碳、生物量氮、生物量磷含量增加,多酚氧化酶、尿酶、磷酸酶活性增强,在一定灌溉量达到最大值后,随着灌溉量的增加而降低．较低灌溉量改善了土壤微生物学性质,灌溉量过大,土壤微生物生物量含量与酶活性降低,土壤质量下降．