红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

唐古特白刺愈伤组织诱导及再生体系的研究

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)子叶、下胚轴、根为外植体, 接种在不同浓度激素配比的培养基中, 研究愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明: 子叶和下胚轴是诱导愈伤组织的良好外植体; 以MS补加2,4-D(0.5～1.0 mg·L-1)或6-BA(1.0～2.0 mg·L-1)+NAA(0.5～1.0 mg·L-1)可100%高频产生愈伤组织;在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1培养基上,下胚轴可产生不定芽; 最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA(0.5～1.0 mg·L-1),增殖系数为5.75; 最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率达94.6 %.     

白簕愈伤组织的诱导及褐化的防治

研究了不同培养条件、激素和外植体对白簕愈伤组织诱导的影响,并探讨其愈伤组织褐化的防治．结果表明：白簕愈伤组织诱导的适宜外植体为叶片,叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D1．0mg／L＋6-BA1．0mg／L,诱导率高达92．7％．在继代培养中,采用固体培养对防止愈伤组织的褐化效果最佳,在培养基中分别添加1g/L的活性炭1g／LPVP,也可以有效防止褐化．     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

特种工业用油料作物Lesquerella fendleri的愈伤组织诱导和植株再生

以Lesquerella fendleri下胚轴和子叶作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对于愈伤组织诱导和植株再生的影响．研究表明,L．fendleri下胚轴和子叶在许多激素组合的培养基上都能诱导出愈伤组织．当6-BA的浓度从0提高到1．0mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率也从35．14％提高到97．30％,进一步提高6-BA浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将NAA浓度从0提高到0．2mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从70％提高到76．76％,进一步提高NAA浓度则降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将2,4-D的浓度从0提高到0．5mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从64．29％提高到85．00％,进一步提高2,4-D浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率．当6-BA的浓度为0．5mg．L-时子叶的愈伤组织诱导频率最高,达到80．00％;提高NAA浓度可以提高子叶愈伤组织诱导频率,提高2,4-D浓度则会降低子叶的愈伤组织诱导频率．绝大多数愈伤组织在含有6-BA和NAA的MS培养基上都能够分化出许多不定芽．不定芽在MS基本培养基能够诱导生根,生根率在80％以上．     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养研究

以曼地亚红豆杉(Taxusmedia var.hickss)嫩茎和嫩叶为外植体,进行愈伤组织诱导和继代培养研究。愈伤组织诱导以MS为基本培养基,继代培养以MS和B5为基本培养基,分别添加不同浓度和组合的细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT、2-ip)、生长素类激素(NAA、2,4-D),和水解乳蛋白、活性碳等抗褐化试剂,考察其对愈伤组织诱导和继代培养的影响。结果表明,曼地亚红豆杉嫩茎有很强的分生能力,比嫩叶更易于诱导愈伤;在培养基MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L 2,4-D1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L和MS KT1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L上,嫩茎愈伤的诱导率达100%,生长迅速,品质良好,利于继代培养;培养基B5 KT1.0mg/L 2,4-D2.0mg/L NAA1.0mg/L适用于愈伤继代,每30d增殖倍数5.2倍;培养基中添加活性碳500mg/L、维生素C 1000mg/L或水解乳蛋白1000mg/L对抑制材料褐化有一定的效果。     

益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究

以益母草根颈为材料,进行了愈伤组织诱导、增殖与分化,分化芽生根,试管苗移栽、定植的研究.结果表明：MS＋6-BA 0.5mg·L-1＋NAA 0.6mg·L-1＋2,4-D1.2mg·L-1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋2,4-D 1.5mg·L-1是愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.2mg·L-1＋NAA 0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养和分化芽继代分化增殖培养的理想培养基;N6＋IAA0.2mg·L-1培养基是益母草分化芽生根培养的理想培养基.移栽成活率为94.4%;定植成活率为99.1%;定植成活的试管苗保持野生益母草的所有植物学性状.     

杜仲叶片愈伤组织诱导及增殖培养条件的优化

以杜仲嫩叶为外植体,运用正交试验优选6-BA、NAA、2,4-D和PVP四种物质组合,进行杜仲愈伤组织诱导及增殖试验。结果表明:(1)这四种物质对杜仲愈伤组织诱导的影响顺序是6-BA>NAA>PVP,对增殖的影响顺序是6-BA>NAA>2,4-D。利用杜仲叶片诱导愈伤组织最佳培养基为MS+0.5 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1NAA+2%PVP。(2)增殖培养基中添加1.0 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-12,4-D为最适增殖组合,能明显提高杜仲愈伤组织增殖系数。应用优化的杜仲愈伤组织诱导及增殖培养条件,能获得较大量的愈伤组织,使规模化生产杜仲有效成分成为可能。     

沙枣叶片愈伤组织诱导研究初报

以沙枣叶片作为外植体,以MS为基本培养基,用两种不同浓度激素的组合,筛选5组培养基进行继代愈伤组织及增殖诱导.结果表明,沙枣叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5),诱导率达86.67%;以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5)作为愈伤组织增殖培养较理想.     

苦豆子愈伤组织的诱导与继代培养的去褐化研究

利用苦豆子的子叶进行愈伤组织的诱导与继代,筛选出诱导愈伤组织及继代时的最佳培养基．实验发现各种培养基均能诱导出愈伤组织,0．5—1．0mg／L的2,4-D和0．5—2．0mg／L的细胞分裂素6-BA或与Zt共同添加,诱导的愈伤组织状态较好,且当NAA（浓度为0．5mg／L）存在时可改善愈伤组织的状态;浓度为2．0mg／L的Kt和1．0mg／L以下的2,4-D、NAA分别或同时使用时同样可得状态较好的愈伤组织．低浓度的2,4-D、6-BA混合使用或添加1．0mg／L以下的NAA是愈伤组织继代时较好的激素组合,同时观察到0．5mg／L2,4-D和0．5mg／L Kt以及0．5mg／L2,4-D、0．2m-g／LNAA和0．2mg／LTDZ两种组合也能较好的继代愈伤组织．愈伤组织的去褐化除调节激素的浓度与配比外,还采取了其他的去褐化措施,发现添加0．1％活性炭的条件下快速继代（2d继代一次）以及调整基本培养基是较好的去褐化措施．