四种电化学底物伏安酶联免疫分析法检测烟草花叶病毒

分别以对苯二胺，间氨基酚，邻联茴香胺和硫酸对氨基N，N－二乙基苯胺为辣根过氧化物酶（HRP）的电化学底物，这四种物质在HRP的催化下能够被H2O2氧化生成具有电化学活性的酶催化反应产物，可以用线性扫描二阶导数极谱法进行检测。将该法与抗原直接包被间接法（DAC－ELISA）相结合，应用于烟草花叶病毒（TMV）的检测，取得了较好的结果。     

蔬菜农药残留快速检测方法比较

比较了几种蔬菜农药残留快速检测方法.传统方法所用仪器昂贵,对分析人员专业水平要求高,周期长,成本高,我国现行的速测卡法和酶抑制法恰好能够弥补这些缺陷.酶抑制法灵敏度高、成本低.     

夹心ELISA检测新冠病毒及其抗原方法的建立和验证

研究制备了快速检测新冠病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）及其表面刺突糖蛋白受体结合域（receptor-binding domain,RBD）的ELISA试剂盒.该试剂盒由一对RBD单克隆抗体作为捕获抗体与检测抗体，其中检测抗体进行辣根过氧化物酶（HRP）偶联，通过方阵滴定法确定双抗夹心ELISA的最适工作条件.另外，对检测试剂盒进行线性、特异性、准确度、精密度等进行了验证.结果表明，双抗夹心ELISA方法中捕获抗体和酶标检测抗体的效价分别为1∶160 000和1∶320 000，试剂盒的定量检测下限为31 ng/mL.经验证，组装的试剂盒精密度为0.71%～1.59%，平均准确度为96.53%，与其他的同种属灭活病毒无交叉反应.试剂盒各项参数均符合《中国药典》（三部）2020版标准，表明该试剂盒适用于新冠病毒以及RBD抗原的快速检测.     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2

利用抗鸡白细胞介素-2（ChIL-2）单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统．此系统对鸡白细胞介素乏的检测灵敏度为50pg／mL．两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应．以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞，培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出．在促有丝分裂剂中，植物血凝素（PHA）导致ChIL-2的产生量最高；在病毒方面，传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌．本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具．     

两种方法检测汉坦病毒滴度的比较研究

【摘要】 目的：比较双抗体夹心ELISA法与直接免疫荧光(DFA）法在检测汉坦病毒灵敏度方面的差别。方法：用汉坦病毒76-118株感染Vero-E6细胞,取不同时间点的病毒感染细胞制备细胞爬片或细胞培养物冻融上清,分别用本室制备的抗汉坦病毒单克隆抗体标记荧光素或辣根过氧化物酶（HRP）建立直接免疫荧光法和双抗体夹心ELISA法检测上述细胞中的病毒抗原,并比较两者的检测灵敏度,用空斑形成实验结果作为金标准,以评价两种方法在检测病毒抗原灵敏度方面的差异。结果: 用两种检测方法测定不同时间点的汉坦病毒培养物抗原,双抗体夹心ELISA法不仅检出的时间早,而且其病毒滴度均较IFA法高（P＜0.01）。结论：ELISA法检测汉坦病毒滴度的灵敏度较IFA法更高,并且操作简单,可重复性好,便于大批量规模化检测,因此更适用于汉坦病毒的检测。     

动物牛皮蝇蛆病诊断方法的进展(综述)

综述了牛皮蝇蛆病临床诊断的方法以及一些免疫学诊断方法：免疫电泳、双向免疫扩散试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验。并重点介绍了国内外在酶联免疫吸附试验的进展,介绍了采样的方法、对血清和牛奶的检测以及检测循环抗原HC的夹心ELISA,并对该病未来诊断方法的发展做了展望。     

桩基动测法建模的研究

目前工程施工中对桩基质量和实际承载能力的检测大量采用动测法，通过测试中获得的动态参数间接求桩基的静态参数，基于对目前最常用的动测法研究的基础上，提出了具有普遍性规律的4种建模形式，且对每一种模型的理论基础、计算方程都进行了详细的分析、推导，根据每一种建模形式的特点，在动测法与建模形式之间建立起有机的联系，并通过试验，验证了桩基动测法建模研究的实际意义，对其他动测法的提出也作了理论性的探讨。     

一种适用于教学的酶联免疫吸附试验的抗原抗体系统制备

目的:探讨设计一种教学成本低、便于教学使用、有助于培养医学生综合实验设计能力和提高实验基本操作技能的酶联免疫吸附实验抗原抗体系统.方法:以提纯的人IgG免疫家兔获取兔抗人IgG抗体,再用其包被酶标反应板,以人血清(人IgG)作抗原,用酶标记羊抗人IgG抗体结合抗原及催化底物显色反应.结果:该双抗体夹心法,底物显色反应清楚肉眼即可作出判定,非特异干扰极小.结论:我们设计的酶联免疫吸附实验-双抗体夹心法原理清晰、便于理解和掌握、教学成本较低、结果易于观察、便于教学大量使用.     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2

利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应.以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞,培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出.在促有丝分裂剂中, 植物血凝素(PHA)导致ChIL-2的产生量最高; 在病毒方面,传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌.本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具.     

双抗原夹心ELISA检测抗鳗弧菌抗体效价的研究

建立检测抗鳗孤菌抗体效价的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。采用高碘酸盐法对鳗孤菌抗原进行辣根过氧化物酶标记,并通过血清抗体效价比较双抗原夹心ELISA与微量凝集法的优越性。结果显示：标记蛋白含量为2．5mg的抗原所需HRP的最适量为0．20rag。以超声破碎后鳗弧菌离心上清为最适标记抗原,其工作浓度为12．25mg／L．并且双抗原夹心ELISA操作简易具有较高的敏感性和特异性。     

146例孕妇宫颈分泌物及血清病毒感染调查

应用组织培养，中和试验，酶联免疫吸附法，对１４６例孕妇进行病毒感染调查．结果：从１１７例宫颈分泌物中分离出肠道病毒３株．１１４例血清检测，巨细胞病毒（ＣＭＶ）阳性率为８７．１％．疱疹病毒（ＨＳＶ），柯萨奇病毒（ＣＶ）中和抗体检测，与正常人群比较，经ｔ检验表明，仅ＣＶＢ１型差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）．     

酶联免疫吸附法检测哈密瓜(WMV—2)种子及幼苗的带毒研究

本文采用微量板间接酶联免疫吸附法检测西瓜花叶病毒获得成功。此方法灵敏度高,特异性强,能够检测病毒提纯液的最低浓度为40毫微克/毫升,也能检测出稀释40000倍病叶澄清液中的病毒,灵敏度比琼腊双扩散高1000倍以上。间接酶联免疫吸附法也能检测出单粒哈密瓜种子及单株幼苗的西瓜花叶病毒,测得种子带毒率为22％,幼苗带毒率为20％。此法快速简便,适合大量种子及幼苗标样的检测,尤其对于田间幼苗的隐症带毒及流行研究更有实际意义。     

酶联免疫吸附分析双抗夹心法检测临床鼻咽抽吸物中呼吸道合胞病毒

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医疗机构中推广,国内尚无上市的快速诊断试剂用于临床检测.为此建立用于RSV抗原检测的早期快速诊断试剂,并以反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测为参比,同时使用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗夹心法和免疫荧光法对112份临床鼻咽抽吸物(NPA)样本进行检测.ELISA双抗夹心法和免疫荧光法的灵敏度分别为79.31%和74.14%,特异度分别为100%和96.30%,Kappa值分别为0.787 1和0.689 5,两者均与RT-PCR检测结果具有高度一致性.此外,将ELISA双抗夹心法与免疫荧光法比较,两者无显著差异(p0.05).综上,ELISA双抗夹心法操作简便,特异性高,有望代替进口检测试剂盒完成RSV感染的早期快速诊断.     

应用免疫酶标电镜技术对水仙花时病毒的检测

免疫酶标电镜技术是把免疫酶标技术与电镜技术结合起来，一种灵敏度较高的检测植物体内病毒的有效方法，本实验就是运用该方法对水仙花叶病毒进行检测．     

免疫酶技术检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

以抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型ＩＢＶ）Ｔ株的鼠源免血清为一抗，辣根过氧化酶（ＨＲＰ）标记的羊抗鼠ＩｇＧ为二抗，建立了检测石蜡切片中肾型ＩＢＶ抗原的免疫酶组化技术，经过特异性试验和阻断性试验，表明该方法具有高度的敏感性和特异性，应用该法对人工感染肾型ＩＢＶＲＳ株的鸡气管和肾脏石蜡切片中的病毒抗原进行了检测，结果气管从感染后０．５～１１ｄ，肾脏从感染后１～２０ｄ均检测到病毒抗原，阳性染色体主要集中     

酶标记伏安免疫法进展

通过引用２２篇文献，以标记酶为分类，对酶标记伏安免疫法的进展作了较详细的评述，阐明了其基本原理、实现条件、各种可行途径、检测技术及研究现状和应用前景     

用酶标凝集素检测胃液中的胃蛋白酶

采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记ＡＬＬ，通过夹心酶联法检测各种胃病患者胃液中的胃蛋白酶。结果：胃蛋白酶在正常组（１５例）、胃炎组（２８例）、十二指肠溃疡组（２５例）、胃溃疡组（２５例）及胃癌组（１３例）中的含量无显著性差异。但胃液ｐＨ值≥５的胃蛋白酶含量明显高于ｐＨ值＜４的酶含量。表明胃粘膜屏障的局部缺陷使之对胃蛋白酶抵抗能力下降，可能与消化性溃疡的发生关系更为密切。     

仙台病毒抗原的制备及初步应用

目的纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测。方法通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定;优化确定间接SeV-ELISA抗原的最佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证。结果用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80%;确定SeV-ELISA抗原最佳包被浓度为2.5μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100%,并由Western-blot检测法得到了证实。结论通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性。     

水质检测中大肠菌群的研究

介绍了大肠菌群概念和水质检测中相关检测项目和检测方法,并比较了用多管发酵法和固定底物酶底物法检测水源水中的耐热大肠菌群,结果表明两种方法无差异.固定底物酶底物法可以作为准确的检测方法推广.     

用酶标凝集素检测胃液中的胃蛋白酶

采用辣根过氧化酶（ＨＲＰ）标记ＡＬＬ，通过夹心酶联法检测各种胃病患者胃液中的 胃蛋白酶。结果：胃蛋白酶在正常组（１５例）、胃炎组（２８例）、十二指肠溃疡组（２５例）、胃溃疡组（２５例）及胃癌组（１３组）中的含最无显著性差异。但胃液ｐＨ值≥５的胃蛋白酶含量明显高于ｐＨ〈４的酶含量。表明胃粘膜屏障的局部缺陷使之对胃蛋白酶抵抗能力下降，可能与消化性溃疡的发生关系更为密切。