苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选及特性分析

用经返地卫星搭载诱变处理豆科牧草紫花苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织,以Ｌ－乙硫氨酸为筛选剂,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系ＭＥ＾ｒＢ．ＭＥ＾ｒＢ在脱离选择压９个月后,其对Ｌ－乙硫氨酸的抗性Ｉ５０（生长量半抑制时的Ｌ－乙硫氨酸浓度）比野生型高１４．２倍,表明抗性系抗笥表达稳定。抗性系还表现出对ＤＬ－甲硫氨酸的交叉抗性和对于冬氨酸     

小麦耐甘露醇变异细胞系的离体筛选及植株再生Ⅰ

目的 离体筛选小麦耐甘露醇变异细胞系并再生植株。方法 以耐盐系小麦850512r的幼穗和幼胚为外植体诱导胚性愈伤组织。以所得到的胚性愈伤组织为起始材料，采用一步和多步正筛选法离体筛选耐甘露醇变异细胞系。结果 成功获得小麦耐甘露醇变异细胞系，并再生植株。结论 小麦耐甘露醇变异细胞系的离体筛选并再生植株成功，证明在细胞水平上筛选并获得具有潜在耐水分胁迫特性的小麦新品系是完全可能的。     

草木樨抗乙硫氨酸变异系的筛选

用草木樨的愈伤组织，经ＮａＮ３诱为和筛选得到了抗ｄｌ－乙硫氨酸变异细胞系。该变异系在离开选择５个月后，仍明显表现出高于对照系的抗性。ｄｌ－乙硫氨酸变异细胞系愈伤组织中蛋氨酸含量是对照的３１倍，其可溶性蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱、过氧化酶同功酶图谱、细胞色素氧化酶同功酶图谱均呈现变异。     

苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选

用经返地卫星搭载诱变处理的豆科牧草紫花苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织,以Ｌ－乙硫氨酸为筛选剂,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系ＭＥ＾ｒＢ,ＭＥ＾ｒＢ在脱离选择压力９个月后,其对Ｌ－乙硫氨酸的抗性Ｉ＾５０（生长量半抑制时的Ｌ－乙硫氨酸浓度）比野生型高１４．２倍,表明抗性系抗性表达稳定。抗性系还表现出对ＤＬ－甲硫氨酸的交叉抗性和对天     

葡萄抗羟脯氨酸变异细胞系和抗盐变异细胞的生化特性比较研究

对抗HYP和抗盐的葡萄变异细胞系进行了比较分析，结果表明抗HYP变异系细胞的脯氨醛含量是抗盐变异系的2.86倍．在盐胁迫下，抗HYP变异系吸收的K+和Na+含量高于抗盐变异系，但二者的K+/Na+比值相近抗HYP变异系的耐盐和耐PEG的能力，明显比抗盐变异系强。实验表明在筛选葡萄抗逆变异系过程中。以HYP作为选择压力更为适合。     

葡萄抗羟脯氨酸变异细胞系和抗盐变异细胞系的生化特性比较研究

对抗ＨＹＰ和抗盐的葡萄变异细胞系进行了比较分析，结果表明抗ＨＹＰ变异细胞的脯氨酸含量是抗盐变异系的２．８６倍。在盐胁迫下，抗ＨＹＰ变异系吸收的Ｋ＾＋和Ｎａ＾＋含量高于抗盐变异系，但二者的Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比值相近。实验表明在筛选葡萄抗逆变异系过程中，以ＨＹＰ作为选择压力更为适合。     

小麦耐甘露醇变异系生理特性分析

目的对二次离体筛选获得的小麦耐甘露醇变异细胞系进行生理生化及分子生物学鉴定。方法检测该变异细胞系在甘露醇,NaCl和聚乙二醇(PEG-6000)模拟的渗透胁迫环境中的耐受生长能力,并测定变异系在甘露醇胁迫下游离脯氨酸含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、Na /K 含量等生理生化特性及可溶性蛋白质组成和基因组DNA多态性等分子特征。结果通过愈伤组织在甘露醇,NaCl和聚乙二醇(PEG-6000)模拟的渗透胁迫条件下的生长实验,发现变异系细胞系可以在对照细胞系不能生长的20%甘露醇,1.5%NaCl和20%PEG-6000胁迫条件下,分别表现出14.5%(见图1),12.8%(见图2),41.8%(见图3)的相对生长量;在20%甘露醇胁迫条件下变异系细胞系游离脯氨酸积累量为对照系的80%(见图4),可溶性糖积累量为对照系的1.2倍(见图5),可溶性蛋白含量为对照系的1.3倍(见表1)。在相同浓度的甘露醇模拟的渗透胁迫环境中变异系再生植株比对照植株相能维持较高的K /Na 比值(见表2)。与对照相比,耐甘露醇变异细胞系再生植株可溶性蛋白SDS-PAGE发生显著变化:6条新可溶性蛋白谱带出现在变异系再生植株中,同时对照系中的1条可溶性蛋白谱带在突变株中缺失(见图6)。变异系植株与对照株RAPD带型呈现一定的多态性(见图7),表明变异系基因组DNA与对照相比发生了突变。结论所研究的小麦耐甘露醇变异细胞系是一个具有较强渗透胁迫耐受能力,可用于进一步育种工作的良好突变体材料。     

用亮氨酸抗性法选育L-甲硫氨酸高产突变株

用亮氨酸(Leu)抗性为标记筛选L-甲硫氨酸(L-Met)高产突变株．以一株具有M-海因水解酶系统的芽孢杆菌MV0073为出发菌株，经过6轮紫外诱变，筛选出27株抗亮氨酸的L-Met高产突变株．其中突变株M604的L-Met产量是出发菌株的3倍，且培养液中积累的高含量L-Met能在培养后期稳定持续，M604连续传代6次，遗传性状稳定，表明用Leu抗性选育L-Met高产突变株是一种切实可行的方法。     

BYDVCP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性愈伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病基因的质粒Ｐ＾ｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒Ｐ＾ＢｌＡｅｔＳＮ导入融合细胞中。经抗性筛选获得抗潮霉素的阳性克隆并再生植株。对再生植株作ＰＣＲ检测表明，     

红豆杉抗真菌细胞株的筛选及生理生化特性

通过胁迫筛选法筛选红豆杉抗真菌细胞变异系,并比较了该细胞系和原型在真菌诱导物处理后与抗病有关的几种酶的变化规律以及紫杉醇含量的变化,结果表明诱导物处理后抗性细胞的紫杉醇含量显著高于原型,并且过氧化物酶（ＰＯＤ）、苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）和超氧阴离子自由基（Ｏ２）释放速率与原型有明显区别。     

红豆草抗赖氨酸加苏氨酸愈伤组织变异系的选择和分析

利用红豆草不胚轴诱导的胚性愈伤组织，经过化学诱变和筛选，得到一个抗赖氨酸加苏氨酸（ＬＴ）的愈伤组织变异系，ＬＴ抗性愈伤组织在脱离选择压６个月后，仍表现出１．５倍于野生型的抗性。ＬＴ抗性可通过再生植株传递到次级愈伤组织，抗性细胞中游 离赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸及异氨酸都有较大提高，分别为野生型细胞的５３、５４、１．３９和４．０７倍。抗性细胞和野生型细胞中天冬氨酸激酶的总活性相近，但前者对赖氨酸的反馈抑     

鸟苷生产菌的诱变育种及摇瓶发酵条件优化

以枯草芽孢杆菌T1001为出发菌株，经硫酸二乙酯(DES)诱变处理，定向选育出具腺嘌呤缺陷(Ade^-)、蛋氨酸亚砜抗性(MSO^r)、8．氮鸟嘌呤抗性(8-AG^r)等遗传标记的目的突变株TA208．通过正交试验对TA208菌株进行发酵培养基的优化，同时对发酵温度、pH和装液量等条件进行了研究。在最佳条件下，该菌株能积累鸟苷最高可达25．0g/L。     

茉莉酸甲酯,蔗糖和氮源对蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮含量的影响

采用单因素和正交试验研究了氮源、蔗糖浓度和诱导子茉莉酸甲酯对蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮类物质积累的影响.结果表明:各因子影响黄酮积累量依次为:茉莉酸甲酯＞蔗糖＞水解酪蛋白＞氮源;蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮含量积累的最佳培养基组合为:MS+NAA 1.0 mg/L+ 6-BA 2.0 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖50.0 g/L+水解酪蛋白1.0g/L+ MeJA0.02 μmol/L,NH4+∶ NO3-为1∶1.在这种条件下,黄酮产量达到最高为9.78mg/L.     

非小细胞肺癌细胞A549对紫杉醇耐药机理研究

目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.     

中国产新种和新变种的报道

本文报道中国产黄芪属ＡｓｔｒａｇａｌｕｓＬ．新种贺氏黄芪Ａ．ｈｅｉ，新变种清河高山黄芪Ａ．ａｌｐｉｎｕｓＬ．ｖａｒ．ｑｉｎｈｅｎｓｉｓ，猫耳衣属ＬｅｐｔｏｇｉｕｍＳ．Ｆ．ｃｒａｙ，新种小五台山猫耳衣Ｌ．ｘｉａｏｗｕｔａｉｃｕｍ，河北猫耳衣Ｌ．ｈｅｂｅｉｅｎｓｅ，魏氏猫耳衣Ｌ．ｗｅｉｉ；此外本文还给出了新种粉芽胶衣的拉丁文补充描述。     

离子束介导的小麦低蛋白变异株系NRA、叶绿素含量动态分析

对离子束介导大豆DNA的小麦后代低蛋白质变异株系的旗叶硝酸还原酶活性(nitrate reductase ac-tivity NRA)、叶绿素含量进行分析.结果表明:株系05-49的NRA从抽穗中期至灌浆后期均高于对照,灌浆末期低于对照;株系05-14从扬花中期至灌浆中期均低于对照,灌浆后期至末期均高于对照.叶绿素总含量、叶绿素a和叶绿素b含量,株系05-14在被检测的各时期均高于对照,株系05-49仅在灌浆末期低于对照,其它各时期均高于对照.两变异株系叶绿素a/b值均低于对照.     

人肿瘤细胞株中细小病毒H—1的DNA扩增与非结构蛋白NS—1基因的表达

研究三株人癌细胞和两株对照细胞对细小病毒Ｈ－１杀伤作用敏感性的分子机制．表明了在感染复数ｍｏｉ（ｍｕｌｔｉｐｉｃｉｔｙｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）为５ｐｆｕ（ｐｌａｑｕｅｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ）／细胞的情况下，作为Ｈ—１病毒复制受纳细胞的人肝癌细胞株ＯＧＹ－７７０３和人胃癌细胞株ＳＧＣ—７９０１，能够支持病毒ＤＮＡ扩增和非结构蛋白ＮＳ—１基因的表达，这和作为阳性对照的由ＳＶ４０转化的新生儿肾细胞株ＮＢ—Ｋ一样，但对Ｈ—１病毒感染有抗性的人肾癌细胞株ＯＵＲ—１０和它的对照人胎肾细胞株ＨｕＫ—１，并不支持病毒ＤＮＡ扩增和ＮＳ—１蛋白的表达．本文结果指出，细小病毒Ｈ—１的杀伤作用与细胞中的病毒ＤＮＡ扩增及ＮＳ—１基因表达的程度相关．