电离辐射对个体识别的影响分析

研究采用不同剂量和不同类型辐射射线照射后的DNA能否进行个体识别。准备人工合成的FAM标记单链DNA样品和293T双链DNA样品，应用X射线、伽马射线、电子束分别对DNA样品照射不同剂量，然后采用FISCAN GA118-16A遗传分析仪对单链DNA样品和Identifiler Pluse试剂盒扩增后的双链DNA样品进行检测，测定其荧光强度及基因座个数。在照射剂量分别为35 Gy、70 Gy、105 Gy时，单链DNA的荧光强度分别降为1 500 rfu、600 rfu、0 rfu,双链DNA的基因座均可检出16个；当照射剂量逐渐增加到10 kGy、25 kGy、50 kGy,双链DNA的基因座个数有减小趋势，照射剂量50 kGy时部分DNA样品的基因座个数小于10个。对于单链DNA,采用10 kV的X射线照射，照射剂量累计到105 Gy以上时，单链DNA全部断裂，且断裂程度已无法识别；对293T双链DNA,采用10 kV的X射线、⁶⁰Co伽马射线和2.5 MeV的电子束分别照射，照射剂量累计到50 kGy时，对DNA的破坏程度已影响到个体识别。     

铜矿品位仪的软件设计及应用

基于国产IED-20OOB型能量色散X射线荧光分析仪,以238Pu同位素为激发源,高探测效率的闪烁探测器。1024道核脉冲幅度分析系统为平台研究了XRF分析铜矿品位的方法与技术,最后用结构化C语言开发了适用于便携式XRF分析仪的铜矿品住分析软件,构建了铜矿品位分析仪。该仪器系统在北方铜业公司某铜矿应用,铜品位分析精度达到生产规范要求的标准。     

血中乙醇的顶空气相色谱分析

目的：探讨改良测定血中乙醇的顶空气相色谱分析方法。方法：以正常人空白血液添加乙醇为样本,采用1,4-二氧六环作为内标物并在稀释液中加入硫脲和高氯酸以提高挥发性并促进蛋白质的降解,通过顶空气相色谱法进行定性定量分析,在对实际案例检样的检验中与采用“标准方法”检测的结果进行对比。结果：采用新方法定量分析时,血中乙醇在0．0625mg／mL～1mg／mL范围内线性关系良好（r^2=0．9996）,各浓度组的变异系数（CV）〈2％,血中乙醇的最低检出限为0．2ug／mL（S／N≥3）。结论：以1,4-二氧六环为内标物的新方法简便、准确,比以往的方法更加灵敏且避免干扰,适用于血醇的定性、定量检验。     

不同类型DNA提取试剂盒提取牦牛乳粉DNA效果的比较

以牦牛乳粉为材料,采用了细胞/组织/血液基因组提取试剂盒、植物基因组提取试剂盒及食物核酸提取试剂盒3种不同类型的DNA提取试剂盒提取牦牛乳粉的基因组DNA,使用核酸和蛋白质分析仪检测后表明3种提取方法获得的DNA浓度相近;使用牦牛线粒体中细胞色素b的DNA序列特异性探针引物对所得的3种DNA进行实时荧光PCR,都获得了特异性扩增。结果表明3种类型的DNA提取试剂盒提取的牦牛乳粉基因组DNA都可以用于牦牛乳粉的分子特异性研究,综合提取操作的难易程度、耗时长短、成本高低及提取DNA的浓度分析,细胞/组织/血液基因组提取试剂盒为最佳选择。但食物核酸提取试剂盒的提取步骤简单,消解更彻底,更适用于一次性提取较多样本的基因组DNA。     

犬3个STR基因座遗传多态性研究

目的:研究犬的3个STR基因座PEZ12、VWFX、FH2054的遗传多态性,探讨其法医学应用价值。方法:应用自行建立的犬STR基因座复合扩增荧光检测系统,对90个无关个体犬唾液DNA样本进行复合扩增,用ABI310型遗传分析仪对扩增产物进行检测,并进行统计学分析。结果:90头犬的3个STR基因座遗传多态性研究结果表明,各基因座基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则。各基因座杂合度均大于0.7,个体识别率在0.9291以上,非父排除率在0.5776以上,3个STR基因座联合识别率大于0.9999,联合非父排除率为0.9369,具有较高的个体识别率和非父排除率。结论:3个犬STR基因座复合扩增体系具有较强的个体识别能力,在法医学犬的个体识别和亲权鉴定中具有较高的应用价值。     

试剂通道排列对生化分析的影响

在应用自动化生化分析仪时，不同试剂的PH值所排列的不同试剂通道序列，所检测的结果有差异，如合理的通道排列顺序就能有效地消除系统误差。作者对此作了试验，提出以下报告。1．材料和方法（1）试剂磷（P）试剂：IL公司试剂盒pH值为1．6测定方法：磷钥酸法。肌肝（Cr）试剂：长征公司试剂盒PH值为12测定方法：苦味酸法。钙（Ca）试剂：长征公司试剂盒pH值为12测定方法：邻甲酸酞酪合团法。（2）仪器：岛津CL－7O00型全自动生化分析仪（3）标本来源：美国IL公司质控血清（LOtNO．N0211856简称A，LOtNO·NO211857简称B）。（4）…     

车辆平顺性评价标准适用性分析

针对目前国内外适用不同类别车辆及地形的平顺性评价标准空缺,介绍了轮式车辆平顺性评价体系,主要有两类:一类为ISO 2631及相似标准,一般用于评价普通车辆;另一类为基于6W平均吸收功率和垂直方向加速度峰值两个限值的评价方法,该方法一直为美军及北约组织用于评价军用战术车辆。参考国家标准GB/T 4970-1996对某国产乘用车进行了道路试验,确定了平顺性客观评价值,研究了基于限值的平顺性评价方法的适用性。该研究重要意义在于能够在各种类别车辆和不同地形中更好理解并适用平顺性评价标准。     

石油设备中冷拔方管用Q345A钢低温冲击韧性

为保证石油设备低温下工作的可靠性,对国产Q345A(16Mn)钢冷拔方管在20--60℃的冲击韧性进行了检测,并用API Spec 8C标准进行安全性评价。检测结果表明,取自冷拔方管Q345A钢的冲击韧性在20-- 40℃范围内对温度不太敏感,可完全满足该温度范围的服役条件,而且在-50℃下仍可安全使用。冲击断口分析表明,温度从20℃降低到-60℃,断口塑性纤维区宽度由1．7mm减少到0．4mm。这一检测和评价结果, 为国产石油钻采设备进入北美及俄罗斯地区提供了依据。     

两种方法检测汉坦病毒滴度的比较研究

【摘要】 目的：比较双抗体夹心ELISA法与直接免疫荧光(DFA）法在检测汉坦病毒灵敏度方面的差别。方法：用汉坦病毒76-118株感染Vero-E6细胞,取不同时间点的病毒感染细胞制备细胞爬片或细胞培养物冻融上清,分别用本室制备的抗汉坦病毒单克隆抗体标记荧光素或辣根过氧化物酶（HRP）建立直接免疫荧光法和双抗体夹心ELISA法检测上述细胞中的病毒抗原,并比较两者的检测灵敏度,用空斑形成实验结果作为金标准,以评价两种方法在检测病毒抗原灵敏度方面的差异。结果: 用两种检测方法测定不同时间点的汉坦病毒培养物抗原,双抗体夹心ELISA法不仅检出的时间早,而且其病毒滴度均较IFA法高（P＜0.01）。结论：ELISA法检测汉坦病毒滴度的灵敏度较IFA法更高,并且操作简单,可重复性好,便于大批量规模化检测,因此更适用于汉坦病毒的检测。     

[RE(Cl2C4H5O2)3·dipy]·H2O配合物的合成

以 2 ,3一二氯异丁酸根 (Ｃｌ2 Ｃ4Ｈ5Ｏ2-)和 2 ,2′一联吡啶 (ｄｉｐｙ)为配体 ,在丙酮溶液中合成得到配合比ＲＥ3 + :ｄｉｐｙ =1:1、配位数为 8的混配配合物。产物的ＲＥ3 + :ｄｉｐｙ配合比以及ＲＥ3 + 的配位数均与文献[3 ] 、[4]不同。标题配合物的合成与表征工作目前尚未见报道。1　实验部分1.1　主要仪器与试剂ＣＡＲＬＯ -ＥＲＢＡ110 6型元素分析仪 ,Ｎｉｃｏｌｅｔ170 -ＳＸＦＴ红外光谱仪 (ＫＢｒ压片 ) ,日本精工ＥＸＳＴＡＲ系列ＴＧ ＤＴＡ 6 30 0型热分析仪 ,岛津ＵＶ - 2 6 0紫外分光光度计 ,ＤＤＳ - 11型电导率仪 ;2 ,3…     

代谢组学技术在兽药违规使用监测中的应用及研究进展

兽药残留分析检测技术的开发与创新是动物源性食品安全监测的重要研究内容。作为系统生物学的重要组成部分,代谢组学研究及其检测技术在动物源性食品安全领域发挥了不可或缺的作用。基于当前代谢组学技术在兽药残留检测领域的研究成果,阐述了代谢组学的概念、原理与分类;以"瘦肉精"和类固醇两类违禁兽药残留检测为例,简述了液相色谱串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS)、气相色谱串联质谱法(gas chromatographytandem mass spectrometry,GC-MS)等代谢组学常用检测技术对动物血液、尿液等生物样本进行残留分析检测的应用现状,分析了非靶向代谢组学与靶向代谢组学存在的精确度差与通量低等问题,以及代谢组学技术对大型仪器设备与专业数据库过度依赖的局限性;进一步提出了代谢组学技术在兽药残留检测的应用中应根据样品特点及检测目的,将多技术平台(液相色谱-电喷雾飞行质谱、超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱)、分析平台(主成分分析、偏最小二乘判别分析)与多组学技术(基因组学、转录组学、蛋白组学)联合使用以提高代谢组学技术在兽药残留检测领域的适用性与应用范围,为兽药残留分析检测提供新的研究方向。     

拉布拉多犬神经类型相关基因SNP的分析

目的检测拉布拉多犬基因组DNA中与神经类型密切相关的4个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬神经类型的早期鉴定提供分子遗传学鉴定指标。方法依据中国导盲犬大连培训基地成熟的导盲犬神经类型行为学评估标准,选取典型的安静、活泼、胆小型(弱型)三种神经类型的犬各4只为研究对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法和PCR-RFLP分析法对12个样本4个基因的6个SNP位点:COMT(G482A)、MOAB(T199C)、ABCB1(A985T、T3442C、377-378 ins C)、GNB1L(961-962 ins G)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与神经类型的关联度。结果 COMT基因G482A SNP位点的G/A型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼型和安静型中所占比例(P=0.014;P=0.014),A/A型在活泼型犬中所占比例显著高于安静型和胆小型中所占比例(P=0.025;P=0.025);MAOB基因T199C SNP位点的T/C型在安静型犬中所占比例显著高于其在活泼和胆小型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因A985T SNP位点的T/A型在活泼型犬中所占比例显著低于其在安静和胆小犬中所占比例(P=0.014;P=0.014);ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼和安静型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因的377-378 ins C和GNB1L基因的961-962 ins G均没有发现显著性差异(P0.05)。结论 COMT基因G482A SNP位点的G/A型和A/A型,MAOB基因T199C SNP位点的T/C型,ABCB1基因A985T SNP位点的T/A和ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型与拉布拉多犬神经类型具有显著相关性,可做为拉布拉多犬神经类型早期鉴定的分子遗传诊断指标,但尚需大样本确认。     

毛细管电泳快速分析鼠药氟乙酸钠

建立了毛细管电泳高频电导法检测鼠药氟乙酸钠的分析方法.优化了电泳分离检测条件,以2.5 mmol/L Na2B4O7 0.5 mmol/L HAc 0.1 mmol/L CTAB (φ)=5%乙醇溶液体系为分离介质,在反向电泳分离电压-16 kV时,氟乙酸钠峰形良好.该法在5～250 μg/mL范围内,线性相关系数 r 为0.998,检出限为3 μg/mL(S/N=3).不同添加浓度水平的谷粒样本,日间和日内RSD均小于5%,回收率均在95%以上,方法高效、快速、灵敏,适于法医和临床中毒急救中的鼠药的快速分析.     

利用分子标记分析22种上海市重要水稻10个食味品质相关基因的基因型

稻米食味品质改良是目前水稻育种的重要研究方向之一.明确不同水稻食味品质基因型,可为优质水稻育种研究的亲本选择提供依据.本研究利用分子标记检测技术,对22个目前上海市种植的重要常规水稻和杂交稻亲本食味品质基因的基因型进行检测.结果发现,"紫香糯861"水稻含有相对较多不良食味品质基因型.3种杂交稻父本,"湘晴"、"R44"和"繁14"的食味品质基因型比这3种杂交稻母本,"寒风A"、"秋风A"和"申9A"以及其他常规稻有欠缺.从蜡质基因多态性分析显示,在本研究选用的22种水稻中,2个为糯稻、20个为粳稻,但其中有4个为软米型粳稻;在16个非软米型粳稻中,"宝农34"、"金丰"和"银香18"是具有相对最好食味品质基因型的水稻品种.     

基于amy基因的中国野桑蚕遗传多样性及其与家蚕的系统发育关系

为探索中国野桑蚕Bombyx mandarina的遗传多样性及其与家蚕B.mori的系统发育关系,采用PCR产物直接测序法(少数样本克隆测序)获得34个家蚕和野桑蚕样本淀粉酶基因amy序列片段(715bp)。分析发现56个多态性位点,鉴定出28种单倍型(haplotype);核苷酸多样性π=0.01390±0.00103,单倍型多样度Hd=0.988±0.011。核苷酸不配对分析(mismatchan alysis)和Fu’sFs检测表明中国野桑蚕曾发生过种群扩张。分子方差分析(AMOVA)表明,遗野桑蚕传差异主要在种群内,种群间和地理组群间差异不显著。聚类树上34个样本聚为3枝/3蔟,野蚕和家蚕都不按地理区域或系统(类型)聚类,A枝由来自不同地区的野蚕和不同类型的家蚕混合构成,并且进一步分成3个亚枝,每一亚枝也同时包含家蚕和野蚕,B枝由3个家蚕和1个野蚕混合构成,C枝全部由来自不同地区的野蚕构成。网络分析没有发现“祖先单倍型“和优势单倍型。结果提示,淀粉酶基因是一个多态性丰富的分子标记,中国野桑蚕遗传多样性十分丰富,据此推测家蚕起源于多种生态类型混杂的野桑蚕。     

大管幕工法地铁车站站型研究

介绍了大管幕工法(SPR)基本版的施工步序、工法特点及地层适用性.详细阐述了SPR工法的3个发展阶段及基于标准版的多种衍生SPR站型.建立三维结构-荷载模型,对通长直管型SPR车站"三跨两柱标准站型"、"两跨单柱站型"和"单跨站厅无柱站型"在施作不同二衬结构及顺、逆作工况下结构体系的变形和内力进行了比较验算.结果表明:SPR车站结构变形较小,对地表及周边环境影响较小;大管幕体系中大管幕内力相对较小,应重点验算内撑环梁和中柱受力;施作二衬可降低环梁整体受力,但需优化二衬厚度,避免施工时下部结构内力过大;逆作法施工的三跨标准站型最安全,其次为两跨单柱薄二衬站型,单跨站型受力最大.     

甜瓜致病菌株哈 17A的鉴定及其抗生素敏感性的初步分析

运用16SrDNA序列同源性分析、特异性引物PCR和全细胞脂肪酸分析的方法,对分离自新疆甜瓜罹病植株上的菌株哈17A的分类地位进行了鉴定,同时对其抗生素的敏感性也进行了初步分析。16SrDNA序列同源性分析表明该菌株的遗传进化距离与嗜酸菌属最近。对哈17A基因组的特异性PCR结果表明,能扩增出燕麦嗜酸菌特有的360bp的DNA片段;脂肪酸分析的结果说明,菌株哈17A中检测到13种不同的脂肪酸,其中比例较高的16:1 omega7c/15iso2OH占44.60%,16:0占37.44%。系统谱库中的标准菌株数值匹配结果:相似指数最高的Acidovorax avenaesubsp.cattleyae为0.835,其次A.avenaesubsp.citrulli相似指数为0.737;在其抗生素敏感性检测中,哈17A在分别含有卡那霉素、氯霉素、四环素的5种不同浓度的LB液体培养基中均未见生长,但在加有100μg/mL的氨苄青霉素LB液体培养基中有浑浊出现。以上试验结果表明:哈17A被鉴定为Acidovorax avenaesubsp.citrulli,对卡那霉素、氯霉素、四环素均敏感,对氨苄青霉素(100μg/mL)不敏感。     

致病疫霉菌株交配型的检测及其检测方法的比较

致病疫霉(Phytophthora infestans)是马铃薯晚疫病的病原体,可导致马铃薯大面积减产。致病疫霉的有性生殖可以产生卵孢子,由于其抗逆性较强,利于致病疫霉渡过不利的生存环境,给马铃薯晚疫病的有效防治带来巨大的困难。致病疫霉的有性生殖属于异宗配合,即A1、A2交配型同时培养时才会产生卵孢子。因此,快速而有效地检测致病疫霉菌株的交配型将为致病疫霉有性生殖分子机理的研究及致病疫霉的防治奠定基础。通过直接配对法、纸盘法和分子标记法三种方法,对5株来源不同的致病疫霉菌株进行了交配型检测。三种方法的检测结果均表明,菌株HQK8-3、2PO-D、USA1的交配型与ATCC标准菌株64093的交配型一致,为A1交配型,而菌株2PO82001、P7723的交配型与ATCC标准菌株32835的交配型一致,为A2交配型。说明三种方法均可有效鉴定致病疫霉交配型,但三种方法各有优缺点,应根据实验条件,采取合适的方法进行菌株交配型测定。     

喉癌患者血细胞线粒体DNA控制区发现高频率变异

利用PCR SSCP技术检测线粒体DNA(mtDNA)复制控制区中 16 4bp的片段 ,在 2 2例喉癌患者的血细胞中发现 3例同质性突变 ,5例异质性突变 ,而在 12例正常人中未发现带型改变 (0 /12 ) .序列分析发现其中一个样本有T146A ,T199C和T2 0 4C的变异 ,T146A为新发现的线粒体DNA多态性 ;这个研究结果提示血细胞线粒体DNAD Loop区的变异 ,可能与喉癌发生有一定的联系 ,对线粒体DNA突变的更深入的研究可以考虑与细胞内信号传导联系起来 ,这将有助于理解线粒体DNA在实体瘤和恶性血液病的研究以及肿瘤细胞中线粒体DNA的复制机制 ,这对寻找新的肿瘤基因诊断的标志物和监测肿瘤发生的遗传易感性是有意义的 .     

缺血修饰白蛋白检测方法的分析性能评价

应用湖南长沙颐康科技开发有限公司开发的缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)检测试剂盒,在OLYMPUS AU5400全自动生化分析仪上设计合理的实验参数,建立白蛋白-钴结合力(albumin cobalt binding,ACB)实验检测系统,用比色法测定IMA的浓度,参考美国临床实验室标准化协会(clinical and laboratory standards institute,CLSI)系列文件的要求,评价IMA检测系统的线性实验、精密度(用批内和批间变异系数CV表示)、干扰试验;收集表征健康人群血清(366例),检测该人群血清IMA浓度,建立本实验室的参考区间.结果表明白蛋白-钴结合线性分析方程式为y=1.470 6x+5.260 6,R2=0.974 8,线性良好;IMA的高、中、低值样本的批内CV和批间CV分别为3.01%和3.24%、2.63%和4.36%及4.77%和5.59%,均小于厂商说明书声明的5.06%和6.72%,表明本实验检测系统精密度性能符合临床实验室质量目标管理的要求.高、低两个浓度标本在干扰物为临床标本时可能出现的最高含量(甘油三酯8.5mmol/L、胆红素75.2mmol/L、血红蛋白160g/L)结果测定值均在95%置信区间内,表明在临床实验室该方法抗干扰性能良好;健康人群IMA的本实验室的参考区间为IMA>65.2U/mL.