CXA—1重组近交系小鼠生物学特性研究

对培育成功的ＣＸＡ－１重组近交系小鼠进行部分生物学特性观察（１）皮肤移植：（２）毛色基因测试；（３）血液学常规值，结果表明，同系异体植皮观察１００天以上，未见排斥现象，毛色基因测试，Ａ、Ｂ位点均为纯合，基因型为ａａｂｂｃｃＤＤ，血液学常规和血清蛋白质均在正常范围内，本观察所得结果可为ＣＸＡ－１重组近交系小鼠在科学实验中应用提供资料。     

可微因子、整因子与抽象Cauchy问题

讨论抽象Ｃａｕｃｈｙ问题的整解与可微解，证明了反向抛物问题的解都是整解，并给出了所有的解，即若－Ａ生成一个强连续解析半群Ｔ（．）则Ａ的整因子集等于∩Ｃ〉０ＩｍＴ（ｔ）；作者还证明了若Ａ生成一个Ｃ半群，则相应的Ｃａｕｃｈｙ问题，对初始值Ｘ∈Ｄ（Ｃ＾－１Ａ）存在唯一的解，给出了例子说明Ｄ（Ｃ＾－１Ａ）确实比Ｃ（Ｄ（Ａ））大，从而真正推广了Ｃ－半群理论中关于解的存在性的一个基本结果，此时，若Ｃ有稠值域，     

三种小鼠血液生理生化正常值的测定

本文通过对三种小鼠－ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠和昆明远交群小鼠的血液学和血液生化指标进行测定。其结果：⑴血液学指标：ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的嗜中性白细胞、淋巴细胞雌雄间差异显著;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠、昆明小鼠雌雄间差异不显著;昆明小鼠的白细胞比ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠的低;ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的单核细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞记数比Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小     

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ＴＨＥＴＨＩＲＤ┐ＯＲＤＥＲＰＯＬＡＲＩＺＡＢＩＬＩＴＹＯＦＤＯＰＹＢＡＬＬＳＣ６０－ｎＸｎ（Ｘ＝Ｂ，Ｎ；ｎ＝１，２）ＸｕＱｉａｎｇＪｉａｎｇＪｉｅＤｏｎｇＪｉｎｍｉｎｇＸｉｎｇＤｉｎｇｙｕ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｃｓ，ＮａｎｊｉｎｇＵ...     

重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠的繁育及其应用研究初报

应用带过滤罩的透明鼠笼在层流架内繁育先天性Ｔ和Ｂ淋巴细胞免疫缺陷的重度联合疫缺陷（ｓｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＳＣＩＤ）小鼠获得成功。１９９３年５月自中国医学科学院实验动物研究所引进了３对ｓｃｉｄ小鼠种鼠以来，现已近交繁育至第十代共繁育ｓｃｉｄ小鼠７Ｚ０只，其寿命均超过１２个月。平均产仔数为５．５只，不育率为１４．９％，离乳率为８８．２％。ｓｃｉｄ小鼠４－１０周龄的体重与ＢＡＬＢ／ｃ小鼠相比无明显差异，微生物学检测符合ＳＰＦ级小鼠标准。解剖发现其胸腺极小，胸腺的相对重量仅为同龄ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的６％左右；脾脏相对重量为２７－３７％；外周血淋巴细胞仅占白细胞总数的１１－２６％。应用酶联免疫酶标法测定３－４周龄和大于１０周龄的ｓｃｉｄ小鼠血清ＩｇＧ的含量均小于１×１０￣（－３）ｍｇ／ｍｌ，没有发现ｓｃｉｄ小鼠的“渗漏”现象。人癌移植于ｓｃｉｄ小鼠后获得３种人癌移植瘤：肺腺癌（ＬＡＸ－８３）、肝细胞肝癌（ＬＣ－４１２）、结肠粘液腺癌（ｃｏｌｏｎ），其平均瘤重均显著大于ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠。     

丙型肝炎病毒核酸疫苗的研究

从丙型肝炎病人的阳性血清中提取出丙型肝炎病毒ＲＮＡ，通过ＲＴ－ＰＣＲ的方法获得丙型肝炎病毒Ｃ区基因片段。并将此片段克隆到真核细胞表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋），得到重组质粒ｐｃＤＮＡ－ＨＣＶ／Ｃ，再将其通过肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／小鼠后，小鼠产生了抗ＨＣＶ／Ｃ区抗体。     

捕食线虫真菌自发产生捕食器官的菌株筛选

在Ｃｚａｐｅｋ,ＰＤＡ,ＣＭＡ,ＷＡ四种培养基上,从２１株捕食线虫真菌中筛选到７株在无线虫诱导条件下能自发形成捕食器官的真菌,这些菌株是：Ｊ８－１（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ ｌｌｉｇｏｓｐｏｒａ ｖａｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ）,ＭＷ１７－２（Ａ．ｊａｖａｎｉｃａ）,Ｊ３１－１（Ａ．ｖｅｒｍｉｃｏｌａ）,Ｊ３４－１（Ｄａｃｔｙｌｅｌｌａ ｌｅｐｔｏｓｐｏｒａ）,ＸＺ９－２,ＸＳ２－２,Ｏ１－１（Ａ．     

小鼠左右生殖器官生育机能的差异

本实验观察了怀孕１０天以上的封闭群ＫＭ母鼠，近交系Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ母鼠，近交系ＢＡＬＢ／ｃ母鼠，杂交（ＤＢＡ／２×ＬＣＥＢ）Ｆ＿１母鼠和杂交（Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ×ＬＣＥＢ）Ｆ＿１母鼠的卵巢上黄体数和子宫内的胚胎数。在五组实验中观察结果（见表１，２）。在近交系方面，Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ实验组出现左右两边生殖器官的生育机能差异显著（Ｐ＜０．０１），在其他实验组中，左右两边生殖器官的生育机能差异不显著（Ｐ＞０．０５）。由于它们的遗传背景不同，在各自的繁殖基因控制下，可以出现这些遗传多态现象。     

不同因素HCV结构区基因重组诱发小鼠产生抗体的影响

目的：寻求ＨＣＶ基因免疫的最佳动物实验方法,探讨不同处理因素对基因重组体ｐＣＤ－ＨＣＶ１诱发小鼠产生抗体的影响。方法：用分子生物学技术构建丙型肝炎病毒基因重组体ｐＣＤ－ＨＣＶ１,采用不同免疫次数、途径、剂量和不同处理方法免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠。结果：重组体ｐＣＤ－ＨＣＶ１经肌肉１、２、３和４次免疫小鼠后（１００μｇ／只,ｎ＝１２）,抗体水平分别为０．１８３±０．００６、０．４２８±０．０５、０．７０     

铜（Ⅱ）配合物[Cu（C8H4O2SF3）2]的合成,表征和晶体结构

室温下，金属铜粉和２－噻吩甲酰三氟丙酮在甲醇溶剂中反应生成铜配合物［Ｃｕ（Ｃ８Ｈ４Ｏ２ＳＦ３）２］通过元素分析，红外光谱、热重、Ｘ－射线粉末衍射对其进行表征，并经Ｘ－射线单晶测试该配合物为单斜晶体，空间群为Ｐ２１／Ｃ，晶胞参数ａ＝１０．５８２（１），ｂ＝１１．１６９（２），ｃ＝８．０４４（３）；β＝１０４．６１（２）°；Ｖ＝９１６．７３；ｚ＝２；Ｄｃ＝１．８３３ｇ·ｃｍ－３；Ｒ＝０．０８２，Ｒｗ＝０．０９２。铜原子与四个氧原子配位，形成四方平面     

CXA-1重组近交系小鼠全价颗粒饲料研究初报

根据国家标准和有关文献,作者设计了饲喂CXA－1系小鼠的颗粒饲料（蚌医新配方）,颗粒料直径12mm,饲料中粗蛋白质、脂肪、粗纤维、钙、磷含量分别为20.5％、9.2％、5％、1.35％、0.83％。其它营养成份含量均在标准范围内。饲喂结果表明,其受孕率、窝产仔数、离乳存活率等标准超过（蚌医旧配方）。经7年育种饲喂,能满足培育新品系小鼠饲养繁殖的需要,已基本得到全价营养的要求。     

微量元素锌缺乏大鼠实验动物模型的建立和研究

锌是人体必需的微量元素，微量元素锌缺乏是严重影响我国儿童正常发育的原因之一，有关锌对生长、生育过程营养生理作用的深入研究，已经引起了医学界的广泛关注，本项研究用自行制备的不同含锌量的人工半合成饲料，建立了生长大鼠的缺锌模型，对其生长，发育过程进行了详细的观察，结合多项血液学及生化参数的分析测试结果，对微量元素锌缺乏大鼠实验动物模型进行了讨论。     

血红素加氧酶-1 基因敲除小鼠的饲养和鉴定

摘要: 目的 繁殖并鉴定 HO-1 基因敲除( HO-1 － / － ) 小鼠。方法 将引进的 HO-1 基因敲除杂合子小鼠,进行 SPF 级饲养,与 C57BL/6 野生型小鼠配种繁殖,提取子代小鼠的基因组 DNA,PCＲ 法特异性扩增 HO-1 基因片段,使用 双脱氧测序法测得基因序列。子代小鼠出现 3 种基因型: 野生型、杂合子型及纯合子型。杂合子小鼠进一步配种 繁殖,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠,纯合子小鼠用以课题研究。结果 HO-1 基因敲除杂合子小鼠的饲养和 繁殖均获得成功,获得了 HO-1 基因敲除纯合子和杂合子小鼠。结论 正确的饲养繁殖及鉴定方法是从 HO-1 基因 敲除杂合子小鼠中获得纯合子小鼠的有效途径。     

PTA-1~（-/-）/ApoE~（-/-）双基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定

目的建立（PTA-1-/-/ApoE-/-）双基因敲除小鼠（double-gene knockout,DKO）模型,探讨该小鼠的繁育及鉴定方法,为进一步利用该小鼠研究相关疾病奠定基础。方法将引进的PTA-1-/-及ApoE-/-基因敲除小鼠通过杂交和互交的方法进行繁殖,以得到DKO小鼠。结果经过PCR基因鉴定的方法证实PTA-1-/-/ApoE-/-双基因敲除小鼠繁育成功。结论正确的饲养繁殖及鉴定方法是获得该DKO纯合子小鼠的有效途径。     

小鼠睾丸发育过程中Si1基因表达的研究

 以1天龄、未成熟(3周龄)、成熟期(10周龄以上)的昆明正常小鼠睾丸组织为实验材料,利用地高辛标记的Si1基因探针在其组织切片上进行DNA-mRNA分子原位杂交,探讨Si1基因在小鼠睾丸发育过程中的表达变化.同时,分别在生后15,20 d及25 d的昆明小鼠睾丸组织切片上进行凋亡细胞原位检测,验证小鼠睾丸上述发育时期的细胞凋亡情况.结果发现:①Si1基因在1天龄小鼠的睾丸组织生精上皮内无杂交信号;在未成熟小鼠的睾丸组织部分生精上皮内有极强的杂交信号;在成熟小鼠的睾丸组织生精上皮内无杂交信号.②小鼠睾丸组织生精上皮内,凋亡细胞数从生后第15-20天呈增加趋势,于生后第20天出现峰值,生后第25天又降低.上述结果表明Si1基因可能参与了小鼠睾丸的发育过程,在小鼠睾丸发育的特定时期发挥作用,由于Si1基因的表达与小鼠生精细胞凋亡发生的时期同步,表明该基因可能与小鼠睾丸发育过程中的细胞凋亡有关.     

以精子载体法制备转基因小鼠的初步研究

将外源融合基因BaLA-HI与DOSPER脂质体等比较混合,加入获能精子悬液中,37度,5％CO2共培养0．5h,以这种处理精子作为转基因载体乾鼠的体外受精及胚胎移植,在获得的40只移植后代后,经PCR特异片段扩增和Southern杂交,共检测出2只呈相性的转基因小鼠,证明人胰 基因已在小鼠染色体上实现了整合,基因整合率为5％。     

细小病毒H-1NS1基因在荷人肝癌裸小鼠几种组织及移植瘤中的转录和表达

为了解细小病毒H－1 NS1基因在移植瘤与荷瘤裸小鼠部分正常组织中转录和表达的差异性，采用RT－PCR和免疫组织化学的方法，对细小病毒H－1的NS1基因在NB－324K和QGY－7703细胞以及荷人肝癌裸小鼠的移植瘤及部分正常组织中的转录和表达进行了检测，NS1选择性地在人肝癌移植瘤中的高表达结果与细小病毒H－1的复制情况一致，这为细小病毒在活体内抑瘤作用提供了证据。     

两株小鼠诺如病毒的分离与鉴定

摘要: 目的了解江苏地区常用实验小鼠诺如病毒( murine norovirus,MNV) 的感染情况及进化特征。方法在江苏地区抽取三个实验动物中心的实验小鼠,采集直肠及内容物样本,应用ＲT-PCＲ 方法检测MNV OＲF2 特异性基因( 547bp,MNV nt5104-5650) 。阳性样本经ＲAW264. 7 细胞分离病毒,对MNV 分离株的VP1 基因进行扩增,将其连接在pEASY-Blunt 载体上,转化至大肠杆菌Trans1-T1 感受态细胞,通过Kanamycin 抗性筛选,挑取菌落进行PCＲ鉴定,鉴定为阳性的克隆送检测定其VP1 基因序列,构建系统发生进化树。结果共检测小鼠直肠内容物30 份,检出MNV 阳性样本4 份,包括ICＲ 小鼠( 2 /8) 、BALB/c 小鼠( 1 /12) 和C57BL/6J 小鼠( 1 /10) ,感染率为13. 3%;ＲAW264. 7 细胞接毒盲传三代,两只ICＲ 小鼠样品接种的细胞产生明显细胞病变( CPE) ,表现为细胞圆缩聚集,大部分脱落死亡,而C57BL/6J 和BALB/c 小鼠样本接种ＲAW264. 7 细胞无CPE; 应用VP1 特异引物经ＲT-PCＲ 检测,表现CPE 的细胞样本出现特异条带,测序结果显示分离到的2 株MNVVP1 核酸序列均为1626bp,与引物设计参考毒株S7-P2( GenBank 登录号: AB435514) VP1 基因大小相同,进化树图表显示检测到的2 株MNV 属同一独立小分支与参考株BJ10-2062、CＲ4 最为相近。结论此次抽检的实验小鼠MNV 感染率为13. 3% ( 4 /30) ,考虑可能在同一设施内传播。常用实验小鼠携带病毒的生物学意义有待进一步研究。     

DRD1 基因敲除影响雄鼠生育的分子机理研究

摘要:目的 研究 DRD1 基因敲除引起雄鼠生殖功能下降的机制。 方法 本研究以 DRD1 基因敲除鼠( KO)和野生鼠( WT)为研究对象,对 8 周龄 KO 与 WT 雄鼠进行基因型鉴定,测体质量并计算睾丸系数,一侧睾丸 HE 染色观察形态,另一侧睾丸 TRIzol 法提取 RNA,通过 qRT-PCR 反应,采用相对定量法,分析与生殖密切相关基因的表达差异倍数。 结果 KO 与 WT 鼠体质量相比较具有显著差异( P<0. 05) 。 睾丸组织病理学切片观察发现,相对于 WT 鼠,KO 鼠生精小管排列疏松紊乱,生殖细胞层数少,提示精子形态及功能存在异常。 通过 qRT-PCR 进行基因表达差异分析,KO 小鼠相对 WT 小鼠 CFTR 表达上调 2. 32倍, Spata19 上调 4. 58 倍,SMCY 下调 5. 25 倍,DAZ 下调 3. 14倍。 结论 以上研究发现,敲除 DRD1 基因可通过影响睾丸组织结构及相关基因表达,进而影响生殖。     

人参皂苷 Rb1 干预 DSS 诱导结肠炎模型小鼠转录组高通量测序及分析

摘要:目的 研究人参皂苷 Rb1 干预葡聚糖硫酸钠盐( Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS)诱导结肠炎模型小鼠转录组学信息特征。 方法 C57BL / 6 雄性小鼠构建动物模型,将 15 只小鼠分为正常组、模型组和 Rb1 组,每组 5 只。 模型组和 Rb1 组给予 4% DSS 并自由饮水,第 2 天给 Rb1 组 40 mg / kg Rb1 进行干预。 持续 9 d,处死小鼠后,取结肠组织。 利用 Illumina 高通量测序平台分别对三组小鼠结肠组织进行转录组测序。 利用测定的转录组学数据对 Rb1 组和模型组两两比较之后进行重叠分析,筛选差异基因进行 GO 和 KEGG 分析。 结果 Rb1 干预后各项指标均有改善;GO 富集后其有 10 450 个有效差异表达基因得到 GO 注释,其中分子功能占 13. 5% ,生物过程占 68. 73% ,细胞组成占 17. 77% ;富集最显著的前 20 个 KEGG 通路中与 Rb1 干预后密切相关的有钙离子信号通路、神经活动配体-受体相互作用通路以及 cAMP 信号通路。 结论 人参皂苷 Rb1 能够缓解 DSS 诱导结肠炎模型小鼠的症状。 通过构建 Rb1 干预后 DSS 诱导结肠炎模型小鼠结肠组织转录组序列数据库,为以后 Rb1 功能基因的挖掘和参与代谢途径提供数据支撑,为临床应用提供新的思路。