中华雪胆中总皂甙和齐墩果酸的含量测定

为建立中华雪胆中总皂甙和齐墩果酸的含量测定方法,分别采用比色法和高效液相色谱法测定中华雪胆中的总皂甙和齐墩果酸的含量,测得中华雪胆中总皂甙的含量为2.53%,总齐墩果酸的含量为1.15%,游离型齐墩果酸的含量为0.010 5%,该方法操作简便、结果可靠,可用作中华雪胆中总皂甙和齐墩果酸的含量测定.     

齐墩果酸对铅致血脑屏障紧密连接损伤的保护作用

目的探讨生长发育期铅暴露对大鼠血脑屏障损伤的作用以及齐墩果酸的拮抗作用,并探讨铅对血脑屏障损害的分子机制.方法用醋酸铅饮水法建立生长发育期大鼠铅中毒模型,在铅暴露同时给予齐墩果酸进行干预.实验分为4组:对照组、齐墩果酸组、齐墩果酸+Pb组和Pb组.染毒结束后,应用Morris水迷宫法和旷场实验检测大鼠的神经行为变化,原子吸收光谱法检测血液和脑铅含量,蛋白免疫印迹法检测血脑屏障TJ相关蛋白ZO-1,Claudin-5,JAM-A的表达.结果染铅鼠血铅和脑铅含量明显高于对照组(P0. 05),染铅组大鼠空间探索和学习记忆能力明显低于对照组(P0. 05),ZO-1,Claudin-5,JAM-A蛋白表达水平低于对照组(P0. 05).而齐墩果酸可明显改善染铅鼠的血脑屏障损伤效应,与单独染铅组比较,齐墩果酸+Pb组大鼠血铅和脑铅含量升高,大鼠空间探索和学习记忆能力增强,但差异不显著(P0. 05); ZO-1,Claudin-5,JAM-A蛋白表达水平升高,与染铅组比较差异显著(P0. 05).结论生长发育期铅暴露可损害大鼠血脑屏障的紧密连接,使铅蓄积于脑组织,产生神经毒效应,齐墩果酸对铅的神经毒效应具有一定保护作用,能改善血脑屏障功能.     

齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞胰岛素/IGF1通路关键基因表达的影响

为了探讨齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞的作用,采用MTT法确定齐墩果酸最适药物浓度,氧化应激创建大鼠睾丸间质细胞衰老模型,RT-qPCR、免疫荧光和免疫印迹检测胰岛素/胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1, IGF1)信号通路关键基因转录情况和蛋白翻译情况,采用INSR抑制剂处理细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果显示:与正常组相比,INSR、IRS1、IRS2、IGF1的mRNA转录水平和蛋白翻译水平显著下降(P<0.05);IGFBP3的mRNA转录水平显著提高(P<0.05),免疫荧光和免疫印迹均未检测到此基因表达;与衰老组相比,齐墩果酸组明显逆转此现象(P<0.05);齐墩果酸能明显抑制衰老组细胞的凋亡(P<0.05),INSR抑制剂处理后,细胞凋亡率明显高于齐墩果酸组(P<0.05).综上可知,齐墩果酸通过调控胰岛素/IGF1信号通路关键基因的转录和翻译延缓Leydig细胞衰老.     

齐墩果酸C-28位修饰物的合成与表征及其抑菌活性研究

齐墩果酸属于五环三萜类化合物,在自然界广泛分布,并且显示出多种生物活性,如：抗菌、抗炎、抗病毒及抗肿瘤等。但对其衍生物抑菌活性研究方面的报道较少。为了更为深入地研究齐墩果酸及其衍生物的构效关系,我们以具有较好生物活性的齐墩果酸为先导化合物,通过对其C-28位进行结构修饰,设计合成了6种未见报道的齐墩果酸衍生物。目标化合物的结构经IR和1HNMR表征确证,并对金黄色葡萄球菌、抗甲氧西林金黄色葡萄球菌、抗喹诺酮金黄色葡萄球菌、变形链球菌和大肠杆菌进行抑菌活性测试。结果表明,经修饰后的齐墩果酸衍生物对变形链球菌的抗菌活性较母体化合物有不同程度的提升。     

苦丁茶药材有效成分动态积累研究

【目的】研究不同月份苦丁茶(Ilex kudingcha.)药材中有效成分熊果酸和齐墩果酸含量变化的动态积累。【方法】采用反相高效液相色谱法测定熊果酸和齐墩果酸在苦丁茶药材中的含量。【结果】当年10月至次年2月份苦丁茶样品中熊果酸和齐墩果酸的含量分别为1.12%~1.47%及0.16%~0.21%,3~9月份样品中熊果酸和齐墩果酸的含量分别为0.87%~1.21%及0.13%~0.18%。【结论】苦丁茶药材的最佳采收期应为当年10月至次年2月份。     

联苯双酯和齐墩果酸对 ANIT 致小鼠、大鼠 肝损伤的作用研究

摘要: 目的 观察联苯双酯和齐墩果酸对异硫氰酸-1-萘酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)橄榄油溶液致肝损伤小 鼠、大鼠的保 护 作 用。方 法 先 给 予 小 鼠、大鼠联苯双酯和齐墩果酸,然 后 对 小 鼠、大鼠分别灌胃给以 100 mg·kg － 1 、80 mg·kg － 1 ANIT 造成肝损伤,48 h 后测其空腹血清中的 ALT、AST、TBIL、DBIL、GGT、ALP,并剖取肝、 脾,称湿重,计算其脏器指数。结果 齐墩果酸具有降低小鼠 ALT、AST 和 TB 值,联苯双酯反而增加小鼠 ALT、AST 和 TB 值。联苯双酯具有降低大鼠 ALT、AST 和 ALP 值,齐墩果酸则不降低大鼠 ALT 和 AST 值。结论 齐墩果酸 对 ANIT 致肝损伤小鼠具有保肝作用,联苯双酯对 ANIT 致肝损伤大鼠具有保肝作用。     

紫外-可见光分光光度法测定八月瓜果皮齐墩果酸

为了建立齐墩果酸的紫外光谱分析方法,以香草醛-冰醋酸为显色剂,545 nm为测定波长,用标准比较法考察了齐墩果酸含量的紫外光谱分析条件.结果表明,用0.3 mL 5%香草醛-冰醋酸做显色剂,70 ℃下恒温显色15 min,8.00 mg/L齐墩果酸标准溶液的实验测定值为8.02 mg/L;齐墩果酸在2.00~16.00 mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 8.以质量比计,用本方法测定的八月瓜果皮中齐墩果酸含量为3.70 mg/g,平均加标回收率为101.06%,RSD为1.22%;精密度、重复性和稳定性实验的RSD分别为0.02%,0.29%,0.29%.     

齐墩果酸C-28位四氮唑衍生物的合成及体外抗肿瘤活性

采用亲核取代和Click反应在齐墩果酸的C-28位羧基引入五元氮杂环,合成了15个氮唑骈缀的齐墩果酸新衍生物,结构均经HRMS、1H-NMR和X射线单晶衍射确证,采用MTT法评价了目标物对人胃癌细胞MKN-45、人乳腺癌细胞MCF-7和大鼠胶质瘤C6细胞的体外抗肿瘤活性。结果表明,浓度为10μmol/L时,目标物的体外抗肿瘤活性较齐墩果酸有一定提高。实验结果证实了在齐墩果酸28位羧基缀合各种苄基取代的四唑,有利于提高齐墩果酸的体外抗肿瘤活性,是优化齐墩果酸的一种有效方法。     

女贞子中有效成分齐墩果酸的提取

用超声方法从中药女贞子中提取齐墩果酸。通过正交实验，紫外光谱法测定，考察了三种主要因素即溶剂体积，温度和时间对齐墩果酸提取含量的影响，得到了齐墩果酸的最佳提取条件为，样品：溶剂=1：4，提取温度40℃，提取时间45min。     

湘西桐叶药材熊果酸及齐墩果酸的HPLC法测定

建立一种高效、准确、稳定的桐叶熊果酸和齐墩果酸测定方法,测定湖南省湘西地区桐叶药材中熊果酸和齐墩果酸含量.采用高效液相色谱（HPLC）法,色谱条件依次为,色谱柱：TADE-PAKAF-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵溶液（体积比61∶18∶21）;流速：1 mL/min;检测波长：210 nm;柱温：35 ℃;进样量：10 μL.结果表明：齐墩果酸与熊果酸分离度为1.73,均符合要求;熊果酸和齐墩果酸对照品分别在0.497 6～9.952 0 μg/mL和0.126 1～2.523 0 μg/mL范围内线性关系良好（r均为0.999 9）;熊果酸、齐墩果酸平均加样回收率分别为99.93%,98.97%;湘西产桐叶含熊果酸4.54～7.07 mg/g,含齐墩果酸2.50～3.20 mg/g.HPLC法分离效果好、灵敏度高、准确度高,是检测桐叶中熊果酸、齐墩果酸含量的科学有效手段.     

广西藤茶提取物TTF抗肿瘤作用的实验研究

观察广西藤茶提取物（简称TTF）及其含药血清抗肿瘤作用,采MTT法,观察含药血清对肉瘤细胞（S180）、肝癌细胞（H22）、白血病细胞株（L1210）细胞增殖的抑制作用;体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价TTF对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价TTF对H22移植性腹水癌的抑制作用。实验结果表明含药血清在体外对S180细胞、H22细胞和L1210细胞有明显的抑制作用,体内能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间。证明TTF体内及含药血清具有一定抑制S180、H22、L1210肿瘤细胞增殖及S180、H22诱发的移植性肿瘤作用．     

鸦胆子油乳剂对小儿喉乳头状瘤细胞抑制作用的初步研究

目的：探讨鸦胆子油乳剂在体外对喉乳头状瘤细胞的抑制作用。方法：将不同质量浓度的鸦胆子油乳剂加入体外培养的喉乳头状瘤细胞中，通过MTT法和流式细胞仪观察其对喉乳头状瘤细胞的抑制作用。结果：鸦胆子油乳剂对喉乳头状瘤细胞有明显的抑制作用，并且随药物质量浓度的增高及作用时间的延长而增强。结论：鸦胆子油乳剂对喉乳头状瘤细胞有明显的抑制作用，为临床小儿喉乳头状瘤术后应用鸦胆子促进康复提供了实验依据。     

白英抗肿瘤作用的实验研究

探讨白英(solanum lyratum thunb)的抗肿瘤作用,采用MTT法观察白英含药血清对人癌A2780、Hela、SGC-7901细胞的体外抑制作用.采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价白英对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价白英对H22移植性腹水癌的抑制作用.白英含药血清均能明显抑制体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞的生长;白英能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间.说明白英对体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞有明显的抑制作用;具有一定抑制S180、H22诱发的移植性肿瘤作用.     

空间环境对黑色素瘤B16细胞体内增殖及免疫原性的影响

初步探讨空间环境对黑色素瘤B16细胞增殖及免疫原性的影响。选择4株经体外实验筛选出生物学性状变异明显的第20颗返回式卫星搭载的空间培养B16细胞,检测其体内增殖能力及免疫原性的变化。将筛选出的4株空间培养B16细胞接种于C57BL/6小鼠,其中一组接种于腹腔,观察荷瘤小鼠生存期;另一组接种于腋下皮肤,检测小鼠出瘤时间。接种至2周时,处死,分离荷瘤小鼠移植瘤和血清。称重荷瘤小鼠移植瘤,观察空间培养B16细胞增殖能力;利用HE染色法观察荷瘤小鼠移植瘤切片细胞形态;采用放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)测定荷瘤小鼠血清白介素-2(InterLeukin-2,IL-2)浓度,观察空间培养B16细胞免疫原性变化情况。与对照细胞相比,1株空间培养B16细胞的荷瘤小鼠生存期明显缩短,出瘤时间明显延长。HE结果显示:此株空间培养B16肿瘤组织内有淋巴细胞浸润;RIA结果显示:3株空间培养B16细胞荷瘤小鼠血清IL-2浓度明显增加。空间环境的复合因素可诱导B16细胞增殖能力及免疫原性产生变化。     

一种肿瘤甲基化谱纯化的统计方法

肿瘤组织的高度异质性是癌症基因组学研究的一个重要课题.在临床实验中获得的肿瘤样本的甲基化谱通常是来自不同成分的混合信号,如癌细胞 (cancer cells)、正常细胞 (normal cells)、基质 (stromal)和免疫浸润细胞 (immune cells).其中正常细胞的混合被认为是许多下游分析的主要混淆因素,忽视或不恰当地考虑肿瘤纯度可能会导致DNA甲基化分析出现偏差或错误的结果,因此建立合适的统计模型修正肿瘤纯度至关重要.文章开发了一个线性统计模型InfiniumPurifyMT,基于肿瘤样本、邻近正常样本和肿瘤纯度得到纯化的肿瘤甲基化谱.     

肿瘤细胞微环境对癌症转移力的影响

过去,科学界普遍关注的是由肿瘤细胞自身性质的改变而引起的恶化现象,如:基因突变的累积效应导致肿瘤恶化成癌。近几年的研究发现,细胞微环境(microenvironment)也对癌细胞转移起着至关重要的作用。本文从微环境的重要性和微环境影响肿瘤细胞转移的机制两方面讨论胞外基质与癌细胞转移的关系。     

重离子辐照对神经相关肿瘤细胞旁效应的影响研究

提出一种新型检测重离子辐射诱导肿瘤细胞旁效应的方法.建立了通过细胞培养基的转移,利用经辐照后的细胞分泌的信号因子来影响未受辐照细胞的模型.使用该方法模拟体内神经相关肿瘤细胞遭受到重离子辐照的条件,考察其周围未受辐照细胞受其影响在细胞增殖以及细胞凋亡方面的变化.结果表明：重离子辐照神经相关肿瘤细胞会对未辐照正常细胞产生增殖抑制的效应,在一定范围内,其效应与辐照的时间和剂量成正比,且一定范围内,辐照剂量越高,细胞凋亡及坏死的比例越大.     

血管球瘤的光镜和电镜观察

本文报道了7例血管球瘤的光镜和电镜观察结果。光镜下肿瘤组织由毛细血管网和围绕这些血管的肿瘤细胞群组成。电镜下肿瘤细胞主要具有平滑肌细胞的超微结构特征,毛细血管结构正常。     

栓塞化疗后原发性肝癌的病理变化研究

探讨肝癌肝动脉栓塞化疗后肿瘤的病理及某些分子生物学的变化。方法：从１９９２年１月到１９９７年１２月,结合临床对手术切除的原发性肝癌术前曾接受肝动脉栓塞化疗的１１７例标本作大体病理、镜下病理、免疫组化方法的肿瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,ｐ５３蛋白及抑癌基因ｐ５３ＰＣＲ技术的检测。结果：肉眼见坏死组织约占肿瘤体积不到５０％的有３２例,坏死占５０％～９０％的有５４例,９０％以上而有未完全坏死的有１８例,１００％的有１３例。镜下仍见有肿瘤细胞的有１１１例,全部为坏死组织而未见肿瘤细胞的有６例。肿瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）高指数的有７２例（６４９％）,ｐ５３表达强阳性的有８５例（７６６％）。结论：本组资料表明,肝动脉栓塞化疗能使大部分肿瘤细胞坏死,但仅有极少部分全部坏死,而未坏死的肿瘤细胞增殖活跃     

EC109细胞株细胞周期DNA代谢和形态改变的研究

人食管癌细胞株 EC109以显微分光光度计测定癌细胞核 DNA 含量,以放射自显影测定细胞核摄取~3H-TdR 和扫描电镜检查细胞表面的超微结构.大多数 EC109瘤细胞间期细胞核的 DNA 含量增加,主要干系细胞 DNA 含量为2 C,属 G_1期,也可见低于四倍体(3 C),高于四倍体(>4 C).甚至多倍体(>8 C)的瘤细胞.~3H-TdR 加入培养基10分钟后,许多瘤细胞核有银粒出现(S 期细胞).大量细胞进入细胞周期反映其恶性程度高.扫描电镜可见 EC109在细胞周期不同阶段其细胞大小形状和微绒毛也不同.本文结果说明用细胞核 DAN 含量测定,~3H-TdR 掺入和细胞表面超微结构可测定肿瘤周期.也可用这些方法判定瘤细胞的恶性程度.