在新疆发生的芜菁花叶病毒的鉴定

从新疆感染病毒的萝卜(Raphanus sativus)分离到一株线状病毒,该病毒在人工接种条件下可经汁液传播侵染属于9科的25种草本植物;该病毒可经桃蚜以非持久性方式传播;染病组织粗汁液和提纯病毒制备物在SDS双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附(ELISA)试验中与芜菁花叶病毒抗血清发生强烈的免疫反应;该病毒的病毒粒子为长约750 nm的线形病毒粒子;以差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯了该病毒,纯化病毒的A260/A280为1.26;用提纯病毒制备了ELISA试验所用效价为1∶106的抗血清,证明该病毒株应属于芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus)的一个株系.     

感染新疆番茄的一种杆状病毒的鉴定

从新疆感病毒番茄分离到一株属于类草花叶病毒组的病毒，感病番茄显示生长阻滞，叶片皱缩花叶畸形以及坏死等系统侵染症状；该病毒可经汁液传播侵染属于１０科的１８种草本植物，但不能经桃蚜传播，感病组织粗汁液和提纯病毒制备物在ＳＤＳ双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验中与烟草花叶病毒ＵＩ株系抗血肖发生强烈的免疫反应，该病毒的病毒粒子为长２９０ｎｍ，宽２０ｎｍ的直杆状病毒粒子，其体外存活期在粗汁液中２个月，在干组     

宝坻大蒜病毒病原的初步研究

宝坻蒜区的栽培大蒜普遍感染病毒,发病率几乎百分之百。病毒病的主要症状是花叶,并伴随有叶片黄化,扭曲畸形,植株矮化。病叶的汁液作电镜负柒,发现有大量的线状病毒颗粒,主要分为两种:15nm×600—1200nm和9—10nm×600nm;病叶细胞超微结构中,存在典型的风轮状内含体;经免疫电镜方法,发现两种颗粒与烟草花叶病毒(TMV)抗血清反应为阴性,与马铃薯Y病毒(PVY)抗血清反应为阳性;感染了蒜病毒的昆诺阿藜,在叶子上产生枯斑症状。初步研究认为,宝坻大蒜感染的是属于PVY的大蒜花叶病毒(GMV);通过超离心方法已经得到了两种线状病毒的复合提取物。     

危害新疆西瓜的一种线状病毒的研究

从新疆染病的西瓜分离到一种线状病毒,该病毒可经汁液传播侵染属于６个科的１７种草本植物;染病的西瓜、哈密瓜和西葫芦引起植株生长阻滞、叶片皱缩、褪绿、泡斑、黄花叶以至坏死等系统侵染症状;该病毒可经桃蚜以非持久性方式传播;该病毒的病毒粒子为长约７５０ｍｍ的线形病毒粒子,在染病组织中形成风轮状内含体,证明该病毒属于马铃薯Ｙ病毒组;染病组织粗汁液提纯病毒制备物在ＳＤＳ双向免疫扩散试验中与小西葫芦黄花叶病毒抗     

邻联茴香胺—H2O2—辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析检测四种 …

将邻联茴香胺（ＯＤＡ）－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系于测定南芥菜花叶病毒、黄瓜花叶病毒、南方菜豆花叶病毒和芜菁地病毒等四种重要植物病毒,其灵敏度高地酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）。     

本氏烟ORSV和CymMV病毒的侵染性检测及鉴定

以本氏烟为研究材料,分别接种感染齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)和建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)的蝴蝶兰病汁液,通过免疫捕获RT-PCR( IC-RT-PCR)和Western-Blot等分子免疫分析手段,发现这两种在兰花上常见的病毒均能侵染烟草.研究结果为建立有效的多年生兰科植物常见病毒的实验室模式寄主,更深入高效地研究这两种病毒的发病机制提供了有效材料.     

罗汉果花叶病病原病毒鉴定

从典型病株上分离到1种大小为12nm*(600-800)nm的线状病毒,该病毒可通过汁液摩擦和棉蚜（Aphis gossypii)传播,人工接种可侵染罗汉果（Siraitia grosvenorii),西葫芦（Cucurbita pepo),南瓜（C.Moschata),黄瓜（Cucumis sativus),西瓜（Cirullus vulgaris),毛节瓜（Citrullus vulgaria)和瓠瓜（Lagenaria siceraria)等葫科植物引起花叶症状,侵染苋色藜（Chenopodium amaranticolor)引起局部褪绿斑点,接种番木瓜（Carica Papaya),普通烟草（Nicotiana tabacum),心叶烟（N,glutimosa),曼陀罗（Datura stramonium),洋酸浆（Physalis floridana),番杏（Tetragonia tetragonioides),豇豆（Vigna sinensis),未见有任何症状：病毒的致死温度为55度－60度,稀释终点为10^-3,10^-4,存在17度－25度下放置10d还有侵染活力;ELISA测定结果表明该病毒与西瓜花叶病毒－2（WMV－2）有密切的血清学关系,上述结果表明,引起广西罗汉果花叶病的病原病毒是WMV－2的一个株系,本研究还表明,罗汉果花叶病毒与番木瓜环斑病毒（PRSV）,马铃薯Y病毒＊PVY）,烟草蚀纹病毒（TEV）,大豆花叶病毒（SMV）及莴苣花叶病毒（LMV）均有较密切的血清学关系。     

烟草花叶病毒快速检测方法的建立及应用

应用单克隆抗体技术获得抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)单克隆抗体,并通过胶体金标记技术,免疫层析快速检测技术和SQUID磁学定量测定技术建立起烟草花叶病毒的快速检测方法,并开发出用于定性检测的TMV胶体金快速检测试纸及用于定量检测的TMV纳米磁珠快速检测试纸,其检测灵敏度分别为1 ng/mL和0.1 ng/mL.所建立的方法操作简单,快速,灵敏度高,特异性好,是作为烟草育苗中各种TMV无症和有症烟株现场筛查的有效手段.     

用斑点免疫结合法检测转化的烟草植株中的TMV—CP和CMV—CP

1982年,Hawkes 等人仿照分子生物学中点杂交(dot hybridization)的方法发展了斑点免疫结合测试技术(DIBA)用于检测单克隆抗体。本实验就 DIBA 应用在检测转基因烟草。烟草用发根农杆菌 Ri 质粒介导,将烟草花叶病病毒外壳蛋白基因(TMV—CP)和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因(CMV—CP)导入烟草的叶片外植体中,通过对外植体的培养,得到愈伤组织,从愈伤组织进而获得了再生植株,对再生植株进行检测导入的外壳蛋白基因的表达量。     

西瓜花叶病毒-2新疆株的纯化

研究了西瓜花叶病毒 2新疆株的纯化 .感病西葫芦叶组织在含有w =0 .2 %巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1乙二胺四乙酸二钠 (EDTA)的 0 .5mol·L- 1的磷酸钾缓冲液中匀浆 ,用匀浆体积 1/4的氯仿澄清 ,粗提取液中的病毒经含有 φ =1%TritonX 10 0和w =3%NaCl的w =6 %聚乙二醇沉淀 ,并以含有 0 .5mol·L- 1尿素、w =0 .1%的巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1EDTA的 0 .5mol·L- 1磷酸钾缓冲液悬浮 ,后经含有w =0 .1%巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1EDTA的w =10 %～ 4 0 %蔗糖密度梯度离心 ,获得了经电子显微镜、紫外检测和接种试验证实侵染活性为 94 .8%的纯化病毒 .纯化病毒的A2 6 0 /A2 80 =1.2 1,A2 6 0 /A2 4 5=1.15 ,纯化病毒产量约为每kg西葫芦感病叶组织中可提取 16mg .     

白草花叶病毒原的生物学鉴定

从甘肃省农业科学院植物研究所（甘谷）培养的表现花叶症状的白草上分离出一种线状病毒,经鉴别寄主,蚜传,酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,免疫电镜（ＩＳＥＭ）和组织病理学等方面的研究,初步认为此分离物是高粱花叶病毒ＳＣＨ株系。     

生物素-抗生物素系统斑点免疫结合试验检测棘球蚴病患者的免疫应答

建立了生物素-抗生物素系统斑点免疫结合试验(BAS-DIBA),并以此法研究了棘球蚴病患者对细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)抗原的免疫应答.79例棘球蚴病患者血清、69例非棘球蚴病患者血清和119例健康人血清的BAS-DIBA试验结果为:两试验检测抗棘球蚴抗原抗体的敏感性分别为97.45%和92.41%;特异性分别为98.40%和98.94%;在91.14%的棘球蚴病患者血清中,BAS-DIBA试验较DIBA法敏感;两法同为阳性的棘球蚴病患者血清中,BAS-DIBA检出的抗体效价的几何均数为DIBA法的5.48倍;4例DIBA试验阴性的棘球蚴病患者血清在BAS-DIBA法中为阳性.证实所建立的BAS-DIBA法是检测棘球蚴病患者免疫应答敏感性高、特异性强的方法,特别是对于低抗体水平的棘球蚴病患者可能具有更高的应用价值.     

棘球蚴抗原纯化对免疫球蛋白IgG免疫应答的影响

以纯化的棘球蚴抗原和未经纯化的粗抗原用于棘球蚴感染者血清中抗棘球蚴抗原的特异性免疫球蛋白IgG水平的检测试验,结果表明,当血清稀释度为1∶200时,使用纯化抗原可以获得较高的特异性 (98.9%),并可保持在使用粗抗原及血清稀释度为1∶400时获得的较高的敏感性（93.7%）,提示在棘球蚴感染者血清中抗棘球蚴抗原特异性免疫球蛋白IgG水平的检测中,使用纯化棘球蚴抗原和粗抗原均可获得较高的敏感性(93.7%)和较高的特异性 (98.4%,98.9%),使用纯化抗原时的特异性略高,但在统计学上并无显著差异.     

Coat protein gene and 3′ non-coding region of tobacco mosaic virus and tomato mosaic virus are associated with viral pathogenesis in Nicotiana tabacum

The camellia isolate of tomato mosaic virus (ToMV-TL) can induce local necrotic lesions on the inoculated leaves in Nicotiana tabacum, whereas the broad bean isolate of tobacco mosaic virus (TMV-B) produces the mosaic symptom on systemic leaves. To examine viral determinant for differential infection phenotype in N. tabacum, the coat protein gene and the 3′ non-coding region of TMV was replaced with that of ToMV, the chimeric virus induced similar local necrotic lesions to that induced by ToMV. The results indicate that the coat protein gene and the 3′ non-coding region of TMV and ToMV influence the virus-induced pathogenesis in N. tabacum.     

桃蚜可高效率地传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株

研究了桃蚜传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株的规律，结果表明，无毒蚜虫能够获毒的最短取食时间为30s，获毒率随取食时间的延长而提高，取食时间为70s以上时，获毒率达100％；带毒蚜虫传毒的最短取食时间为0.25h，当取食时间超过最短传毒时间时，传毒率随取食时间的增加而升高，取食时间达2h以上时，传毒率达100％；带毒蚜虫能够传毒的最少头数为1头，传毒率随单株植物带毒蚜虫数目的增加而升高，单株虫量达15头以上时，传毒率达100％，说明桃蚜可以高效率地传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株。     

Determination of Cd-MT in <Emphasis Type="Italic">Pteria penguin</Emphasis> with indirect non-competitive ELISA

Cadmium-metallothionein (Cd-MT) of Pteria penguin was used to immunize domestic rabbit in order to obtain polyclonal antibody against Cd-MT. Using the anti-Cd-MT antibody, a method of indirect non-competitive enzyme-linked immunosorbent assay (non-competitive ELISA) was established to detect shellfish Cd-MT. In this case, the minimum detectable concentration of P. penguin Cd-MT was (4.563±0.051) ng/mL. The linear range of detection was 9.75-2.0×104 ng/mL. Intra-assay relative standard deviation (RSD) was less than 11.6%, and inter-assay RSD less than 6.7%. The recovery rates ranged from 83.7% to 119.0%. The polyclonal antibody against Cd-MT of P. penguin can also be used to detect MT of other four types of shellfish. In the crude extracts from different organs of P. penguin, the MT concentrations determined by this method matched well with the concentrations of cadmium detected by the atomic absorption spectroscopy.     

由TMV 54×10~3蛋白基因构建的转基因番茄及其对TMV的抗性

通过土壤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）的介导,将烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的５４×１０３蛋白ｃＤＮＡ转入番茄植物中,得到了转基因植株．这些植株抗卡那霉素,具有胭脂碱合成酶的活性．ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ分析表明,５４×１０３蛋白基因已整合到番茄基因组上．攻毒实验表明,未转基因的对照组接种病毒２周后即出现花叶,并且随着时间的推移,花叶症状更加典型．而转基因的植物接种病毒后一直到开花结果都未见发病,即没有花叶出现．     

香蕉花叶病病原病毒及其卫星RNA的研究

进一步证明,我国华南地区香蕉叶病的病原病毒种类主要是由黄瓜花叶病毒引,在广西部分地区发现有烟草叶病毒的新株系感染香蕉。分离得到ＣＭＶ的卫星ＲＮＡ。     

斜纹夜蛾(Prodenia litura)NPV多角体蛋白的微量免疫测定的研究

用差速离心和庶糖梯度超速离心方法,分离提纯斜纹夜蛾核多角体病毒,碱解后经超速离心提取多角体蛋白,用以免疫家兔,采用对流免疫电泳和ELISA方法检测定量多角体中的多角体蛋白,结果表明:用对流免疫电泳方法检测的最低灵敏度是0.025mg多角体/ml,而用ELISA方法则可以测出10ng多角体/ml,其光吸收值(OD_(490))与多角体的浓度(mg/ml)的负对数值之间呈明显直线关系。回归方程为y=1.5335-0.2342x。