表达人类Bcl-2蛋白的L929细胞模型的建立与应用

将人类ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ以正向克隆于真核表达载体ｐＬＸＳＮ并转染于Ｌ９２９细胞，建立了稳定表达人类Ｂｃｌ－２蛋白的哺乳类细胞模型，利用模型细胞进行研究表明，Ｂｃｌ－２的表达对细胞的正常增殖与存活表型无明显影响，但能增加细胞对肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）和ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＳ）两种致凋亡因素的抵抗能力。此研究丰富了ｂｃｌ－２基因调控细胞凋亡的资料，为深入探讨ｂｃｌ－２的作用机制及其与其     

EPO激活HEL细胞内CREB转录因子

ＣＲＥＢ（ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｌｔｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ）是一种细胞核内转录因子，激活的ＣＲＥＢ能与特异调控元件ＣＲＥ（ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔ）结合研究结果显示，ＥＰＯ（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｎｔｉｎ）诱导ＨＥＬ细胞（ＵＭＡＮＥＲＹＴＨＲＯＬＥＵＫＥＭＩＡＣＥＬＬ）２０ｍｉｎ后分子筛的ＨＥＬ细胞核内ＣＲＥＢ的１３３位丝氨酸残基被磷酸化，并具有转录因子功能，用１３     

木本植物根系及木质部汁液ABA对土壤干旱信息的感应

用ＡＢＡ单克隆放射性免疫测定技术（ＲＩＡ）研究了抗旱树种侧柏（Ｐｌａｔｙｃｌａｄｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）和较不抗旱树种大叶相思（Ａｃａｃｉａ ａｕｒｉｃｕｌｉｆｏｒｍｉｓ）根系和木质部汗液ＡＢＡ对土壤快速和缓慢干旱的反应。结果表明，侧柏和大叶相思根系ＡＢＡ对土壤干旱反应灵敏，两者对土壤干旱信息的感应有判别并与干旱形式有点；土壤快速和缓慢干旱时，侧柏木质产汁液ＡＢＡ浓度随根系ＡＢＡ递增的趋势有明     

人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

通过筛选人胎儿脑ｃＤＮＡ文库，克隆了编码一个新的ＲＮＡ结合蛋白的人ｃＤＮＡ，命名为ＧＲＹ－ＲＢＰ，人ＧＲＹ－ＲＢＰ ｃＤＮＡ的长度为２９３２ｂｐ，编码一个具６２３个氨基酸，分子量为６９．６ｋｕ的ＲＮＡ结合蛋白。ＧＲＹ－ＲＢＰ蛋白含有３个ＲＮＡ识别基序（ＲＮＡ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｍｏｔｉｆｓ，ＲＲＭｓ）和一个富含甘氨酸（Ｇ）、精氨酸（Ｒ）、酷氨酸（Ｙ）的羧基端，经数据库比较发现该蛋白与许多ＲＲ     

含RGD环六肽与整合素蛋白α_(Ⅱb)β_3的结合反应

ＲＧＤ序列普遍存在于细胞外基质蛋白中，并能为许多整合素蛋白所识别．利用 ＥＬＩＳＡ，ＳＰＲ等技术，对表面固定的人工合成生物素－含 ＲＧＤ环六肽［ｃｙｃｌｏ（－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－）］与人血小板整合素蛋白α_（Ⅱｂ）β_３的结合能力进行了检测结果表明，含ＲＧＤ环六肽与生物素基团之间的间臂长度在 １．４８～２．２ ｎｍ时， ＲＧＤ序列才能有效进入α_（Ⅱｂ）β_３以头部的反应中心并发生结合反应；反应的平衡解离常数为 １．１μｍｏｌ／Ｌ．为在固体表面研究整合素蛋白介导的细胞吸附过程提供了一个理想的模型系统．     

低阶系统鲁棒严格正实镇定的充分必要条件

证明对低阶系统（ｎ≤３）,ａ（ｓ）与ｂ（ｓ）的凸组合保持Ｈｕｒｗｉｔｚ性是存在多项式ｃ（ｓ）使ｃ（ｓ）／ａ（ｓ）与ｃ（ｓ）／ｂ（ｓ）同时是严格正实的充分必要条件。     

含RGD环六肽与整合素蛋白αⅢbβ3的结合反应

ＲＧＤ序列普遍存在于细胞外基质蛋白中，并能为许多整合素蛋白所识别。利用ＥＬＩＳＡ，ＳＰＲ等技术，对表面固定的人工合成生物素－含ＲＧＤ环六肽〔ｃｙｃｌｏ－（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－）〕与人血小板整合素蛋白αⅡｂβ３的结合能力进行了检测。结果表明，含ＲＧＤ环六肽与生物素基团之间的间臂长度在１．４８￣２．２ｎｍ时，ＲＧＤ序列才能有效进入αⅡｂβ３头部的反应中心并发生结合反应；     

hB1F与HNF1协同调控HBV增强子Ⅱ的功能

人Ｂ１结合因子（ｈｕｍａｎ Ｂ１ ｂｉｎｄｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ，ｈＢ１Ｆ）是本实验室克隆到的一个新的转录因子，它能够结合于ＨＢＶ增强子Ⅱ（ＥＮⅡ）的Ｂ１区并反式激活其功能，对ｈＢ１Ｆ和其他反式激活ＥＮⅡ的肝细胞核因子间在功能上的相互关系进行了研究。氯霉素乙酰转移酶（ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＣＡＴ）报告基因分析发现，ｈＢ１Ｆ与ＨＮＦ３β，ＨＮＦ４间在激活Ｅ     

genistein抑制人TNF-α诱导的猪内皮细胞对人单核细胞和自然杀伤细胞的黏附

研究了蛋白质酷氨酸磷酸化在ｈＴＮＦ－α诱导猪主动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）黏附分子Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）和血管细胞黏附分子－１（ＶＣＡＭ－１）表达以及在增强人外周血单核细胞（ＰＢＭｏ）和自然杀伤细胞（ＰＢＮＫ）黏附中的作用，以选择性的蛋白质酷氨酸激酶（ＰＴＫｓ）抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ预处理ＰＡＥＣ，剂量依赖性也抑制了ｈＴＮＦ－α增强的ＰＡＥＣ对ＰＢＭｏ和ＰＢＮＫ的黏附。这种抑制作用发生在     

龙虾D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶与辅酶类似物结合的晶体学

与辅酶不同，辅酶类似物ＡＤＰ－ｒｉｂｏｓｅ和ＳＮＡＤ与Ｄ－甘油醛－３－磷酸脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）的结合不表现协同性．用共晶方法和座滴汽相扩散技术培养出中国南海龙虾（Ｐａｌｉｎｕｒｕｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）ＧＡＰＤＨ与ＡＤＰ－ｒｉｂｏｓｅ和ＳＮＡＤ复合物的晶体．Ｘ射线衍射数据分析表明它们的空间群均为Ｃ２，并具有类似晶胞参数，分别为 α＝ １５．２８０ ｎｍ， ｂ＝ １０．０３５ ｎｍ， ｃ＝ １２．８３１ ｎｍ， β＝１１０．２８°和α＝１５．３４１ ｎｍ，ｂ＝１０．０５１ ｎｍ，ｃ＝１２．８４４ｎｍ，β＝１１０．４８°．估算不对称单位合１个分子即４个亚基．与ＧＡＰＤＨ全酶和酶蛋白晶体比较，属于不同晶型．这个结果提示着辅酶类似物的结合产生了比较大的酶构象变化，而且这个构象变化不同于辅酶结合引起的构象变化．旋转函数计算结果表明，这两种辅酶类似物复合物的四聚体也具有明显的２２２分子对称性．它们的结构分析并与全酶和酶蛋白比较将为了解酶的协同性机理提供一些有益的线索．     

高粱psbA基因启动子“-35”元件的突变效应

应用化学合成的２０ｎｔ寡核苷酸引物，诱导高粱ｐｓｂＡ基因启动子“－３５”元件（ＴＩＧＡＣＡ）中的第１位Ｔ碱基和第３位Ｇ碱基发生突变，获得３个突变体ＡＴＴＡＣＡ，ＧＴＧＡＣＡ和ＡＴＧＡＣＡ，在菠菜叶绿体蛋白质提取物系统中，检测突变的及野生型的高粱ｐｓｂＡ基因启动子与蛋白质的结合能力。凝胶阻滞实验结果表明，野生型的具有很强的蛋白质结合条带，单碱基突变的ＡＴＧＡＣＡ和ＧＴＧＡＣＡ的蛋白质条带的强度明显下     

应用抑制性消减杂交技术克隆鉴定肾癌特异表达基因

应用抑制性消减杂交技术（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），成功地构建了高消减效率的人肾癌细胞与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库，从中随机挑取２００个克隆进行酶切分析，结果显示其中１９０个均得到５０～４００ｂｐ插入片段，１０个无插入片段。对其中１０个插入的ｃＤＮＡ片段进行测序后经ＧｅｎＢａｎｋ检索表明１０个片段均为未知新序列，其中ＲＣＣ１８为     

N-Cadherin/Catenins/Actin骨架在人正常肺细胞和肺癌细胞表达的研究

比较了人正常肺细胞与肺癌细胞Ｃａｄｈｅｒｉｎ／Ｃａｔｅｎｉｎｓ／Ａｃｔｉｎ蛋白质表达水平和定位的特点。结果显示正常肺细胞的Ｎ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ和Ｃａｔｅｎｉｎｓ（α,β）有高表达,分布在细胞膜的ＡＪ连接及其膜内面粘着斑与胞质内组装完好的Ａｃｔｉｎ微丝应力纤维末端相连,表明膜ＡＪ连接Ｎ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ／Ｃａｔｅｎｉｎｓ／Ａｃｔｉｎ分子复合体存在。     

TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理

ＴＲＡＩＬ（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ－ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｌｉｇａｎｄ）是 １９９５年发现的一个新的 ＴＮＦ（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ，肿瘤坏死因子）家族成员［１］．它能特异性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性，因此具有被开发成治疗肿瘤的蛋白药物的可能性［２～４］．本文将评述ＴＲＡＩＬ诱导肿瘤细胞凋亡的信号传导机理并讨论这一领域在将来应解决的一些问题．１ＴＲＡＩＬ及其受体 通过从ＥＳＴ数据库中搜寻与ＴＮＦ同源的蛋白，Ｗｉｌｅｙ等人［１…     

恶性疟原虫DNA疫苗的初步研究

采用遗传工程技术克隆了编码含有恶性疟原虫子孢子期及红内期表位的基因片段，与霍乱毒素Ｂ（ＣＴＢ）亚基基因或白介素２（ＩＬ２）基因融合基因的重组质粒。将纯化的质粒免疫Ｂａｌ ｂ／ｃ纯系小鼠，３次免疫后诱导机体产生了体液免疫和细胞免疫，抗ＣＴＢ抗体滴度平均为１：１２８０，抗ＮＡＮＰ及抗ＡＷＴＥ抗体平均滴定为１：１０００，免疫的小鼠进行疟原虫子孢子攻击实验，保护率在５０％左右。     

甲基丙烯酸-四氢呋喃两亲性嵌段共聚物的合成与表征

在特定条件下四氢呋喃（ＴＨＦ）和甲基丙烯酸特丁酯（ｔＢＭＡ）均可进行活性聚合．通过阳离子型ＰＴＨＦ~＋活性物种（反离子为ＳｂＦ_６）和阴离子型ＰｔＢＭＡ~－活性物种（反离子为Ｌｉ~＋）的偶合反应，成功合成了甲基丙烯酸特丁酯与四氢呋喃的两嵌段共聚物（ＰｔＢＭＡ－ｂ－ＰＴＨＦ）．在（甲基）丙烯酸酯阴离子活性聚合中对制备窄分布聚合物有利的ＬｉＣｌ对偶合反应有阻碍作用，不可使用．通过酸性水解反应将上述共聚物转换成甲基丙烯酸一四氢呋喃两亲性嵌段共聚物（ＰＭＡＡ－ｂ－ＰＴＨＦ）．用凝胶渗透色谱、红外光谱等方法表征了它们的结构。     

双偶氮苯掺杂液晶在光场下的Freedericksz转变

合成表征了双偶氮苯酚（ＤＡＰ），研究了掺杂有少量ＤＡＰ的５ＣＢ液晶体系在光场下发生Ｆｒｅｅｄｅｒｉｃｋｓｚ转变的情况，发现掺入染料后激励光场强度显著降低，对于１２．５μｍ厚沿面排列掺杂液晶发生Ｆｒｅｅｄｅｒｉｃｋｓｚ转变的光强为０．３ｍＷ／ｍｍ＾２，比纯５ＣＢ液晶下降３个数量级。这一新现象主要是由于光场作用下染料分子的顺反异构导致液晶分子重新取向，并且产生较强的非线性效应，对于研究光场下的非线性光     

玉米愈伤组织的遗传转化及抗除草剂植株再生

以玉米胚性愈伤组织为受体，采用基因枪轰击法将来自拟南芥菜（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）的突变抗除草剂基因ａｌｓ导入玉米愈伤组织细胞；转化后的细胞经除草剂ｃｈｌｏｒｓｕｌｆｕｒｏｎ筛选，产生了抗性愈伤组织并再生植株，经ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法鉴定，部分再生植株转入了ａｌｓ基因，喷施除草剂试验表明，转基因植株具有良好的抗除草剂特性．研究的目的是获得抗除草剂ｃｈｌｏｒｓｕｌｆｕｒ     

组蛋白和核小体在基因转录中的作用

有证据表明，染色质和核小体构型的改变在转录的起始中起着重要的调节作用。根据这方面的最新研究进展，结合部分实验结果，初步探讨了以相关问题：（１）转录起始与核小体改构（ｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）。评述了两类起不同作用的核小体改构复合体（ｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ），一类是具有ＤＮＡ激活的ＡＴＰ酶活性的复合体，它们通过重构核小体的组蛋白核或改变ＤＮＡ     

甲基丙烯酸-四氢呋喃两亲性嵌段共聚物的合成与表征

在特定条件下四氢呋喃（ＴＨＦ）和甲基丙烯酸特丁酯（ｔＢＭＡ）均可进行活性聚合，通过阳离子型ＰＴＨＦ＾＋活性物种（反离为ＳｂＦ６＾－）和阴离子型ＰｔＢＭＡ＾－活性物种（反离子为Ｌｉ＾＋）的偶合反应，成功合成了甲基丙烯酸特丁酯与四氢呋喃的两嵌段共聚物（ＰｔＢＭＡ－ｂ－ＰＴＨＦ）。在（甲基）丙烯酸酯阴离子活性聚合中对制备窄分布聚合物有利的ＬｉＣ１对偶合反应有阻碍作用，不可使用，通过酸性水解子活性聚合中对