双酚A对SPF雄性SD大鼠生殖器官的病理损伤作用及其对Bcl-2和Bax表达的影响

20只22日龄SPF雄性SD大鼠,随机分为对照组和试验组(双酚A染毒组),每组10只.试验组给按5 mg/kg体重双酚A(BPA)灌胃,对照组按等体积植物油灌胃,1次/d.灌胃28 d后,称量大鼠体重;无痛处死后剖检,取睾丸,称量睾丸湿重并计算睾丸系数;采用石蜡切片技术,观察睾丸、附睾的组织病理学变化;采用免疫组织化学方法检测睾丸和附睾中Bcl-2及Bax蛋白表达量的变化.结果显示:BPA染毒组睾丸重量和睾丸系数明显低于对照组(P＜0.01);组织病理学观察可见,BPA染毒组睾丸曲细精管内生精细胞和支持细胞明显变性坏死,附睾中精细胞退变、液化.免疫组织化学观察发现BPA染毒组睾丸和附睾中Bax蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05),而Bcl-2蛋白表达量却明显低于对照组(P＜0.05),Bcl-2/Bax也显著低于对照组(P＜0.01).上述结果表明BPA可引起SPF雄性sD大鼠生殖器官睾丸和附睾的严重的不可逆损伤,造成损伤的机制一方面是直接引起生精细胞和精细胞的坏死液化,另一方面还可通过促进Bax蛋白的表达,同时抑制Bcl-2蛋白的表达以致引起生殖细胞的大量凋亡,结果导致睾丸和附睾结构的严重损伤.     

DBP暴露对雄性大鼠睾丸结构与功能的影响

目的利用成熟雄性大鼠为动物模型研究邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对哺乳动物生长发育及生殖的毒性作用.方法将40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为500,250,50 mg/(kg.d-1)3个染毒组和1个对照组,灌胃量为5 mL/kg体质量,灌胃法连续给药6周.对体质量、脏器系数等指标进行称量;对附睾中精子密度、精子畸形率等进行检测;对睾丸的组织学形态进行观察.结果与对照组比较,中、高剂量组体质量、睾丸、附睾及睾丸脏器系数指标有统计学意义(P0.05);体质量、右侧睾丸和右侧附睾与染毒剂量呈负性相关(r=-0.771 03,P0.001;r=-0.638 9,P0.001;r=-0.618 5,P0.05).高、中剂量组精子密度、精子活率分别与对照组和低剂量组比较均降低,差异均有统计学意义(P0.05);高、中剂量组总畸形率分别与对照组和低剂量组比较均增高,差异均有统计学意义(P0.05).结论一定剂量的邻苯二甲酸二丁酯对大鼠的生长发育及睾丸功能具有毒性作用.     

Ni2+-Cd2+联合染毒大鼠睾丸支持细胞和生精细胞的体视学分析

目的:应用体视学方法定量分析Ni2+、Cd2+对大鼠睾丸支持细胞和生精细胞的影响.方法:63只雄性SD大鼠随机均分为21组,每组3只,实验试剂CdCl2和NiSO4通过腹腔注射给药,对照组(A1、A2、A3),以等量生理盐水代替,实验组分为急性染毒组、染毒2月组、染毒4月组(B1～G1,B2～G2,B3～G3),每天给...     

纳米TiO_2对雄性小鼠肾脏毒性作用的研究

目的研究纳米TiO_2对雄性小鼠肾脏的影响。方法 60只健康的ICR雄性小鼠随机分为4组,分别以0、10、50、100 mg/kg BW的剂量连续30天灌胃染毒。取小鼠肾脏组织测定SOD、GSH-PX的活性以及MDA的含量;肾功能指标测定Cr、BUN、UA含量;HE染色观察肾脏组织病理变化。结果与对照组相比,各染毒组MDA含量显著增加(P0.05),100 mg/kg BW组SOD活力显著性降低(P0.01);与对照组相比,在50和100 mg/kg BW组Cr含量显著升高(P0.01);病理学检查发现纳米TiO_2染毒组中小鼠肾脏出现不同程度的炎症细胞浸润、纤维素样坏死等病理变化。结论纳米TiO_2对雄性小鼠的肾脏产生氧化损伤并对肾脏功能存在潜在危害。     

DEHP对高脂饮食大鼠血脂代谢的影响

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)作为一种内分泌干扰物,与代谢综合征(MS)的发生密切相关。文章建立了DEHP灌胃染毒模型以探讨其对高脂饮食(HFD)大鼠血脂代谢的影响,为进一步研究DEHP对MS的影响提供借鉴。实验将30只Wistar大鼠随机均分为5组,对照组喂以普通饲料,其余4组喂以高脂饲料的同时,每天经灌胃染毒分别给予0,10,100,300mg/kg的DEHP。5周后,测量大鼠相关体质指标,然后采用酶联免疫法等方法测定血清中血脂及相关脂肪调节因子水平。结果显示:(1)10 mg/kg和100 mg/kg DEHP暴露可导致HFD大鼠体重下降,但无统计学差异(P0.05),然而300mg/kg DEHP暴露引起HFD大鼠Lee’s指数、大鼠腰围显著减小(P0.05),并使大鼠肝体比和肾体比显著增大(P0.05);(2)10mg/kg DEHP可使HFD大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著增加(P0.05),300mg/kg DEHP暴露组大鼠TG和TC含量显著下降(P0.05),100mg/kg DEHP则对以上指标无显著影响(P0.05);(3)DEHP暴露对HFD大鼠体内瘦素水平无显著影响(P0.05),而DEHP暴露剂量为300mg/kg时,HFD大鼠体内脂联素含量显著升高(P0.05)。以上结果表明,DEHP暴露可导致HFD大鼠脂质代谢紊乱,而且剂量不同所产生的效应也不同,低剂量DEHP暴露可能会增加MS的发病风险,而高剂量DEHP暴露的效应有待进一步研究。     

姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠SREBP-1c和SCD-1蛋白表达的影响

目的分析姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用及对SREBP-1c和SCD-1表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠(随机数字表)分为空白对照组、2型糖尿病模型组、姬松茸多糖组(150、100、50 mg/kg)及二甲双胍组(150 mg/kg),分别为A、B、C、D、E和F组。除A组外,B-F组均腹腔注射STZ(35 mg/kg)诱导复制糖尿病大鼠模型;A和组注射等体积生理盐水,C-F组按相应的药物及剂量进行灌胃处理干预,4周后取大鼠血清,检测血清FBG、TG、TC、HDL-C、LDL-C;取大鼠肝脏组织进行HE染色观察,采用qRT-PCR和Western blotting检测SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白水平。结果 B组大鼠血糖水平明显高于A组(P0.05),给药后C、D和F组血清FBG、LDL-C、TC、TG水平均显著低于B组(P0.05),而HDL-C水平高于B组(P0.05);与B组相比较,E组的FBG、LDL-C、TC、TG、HDL-C水平有降低的趋势,其差异无统计学意义。HE染色结果:与B组比较,C组和F组小叶结构清晰、肝细胞排列规则、肝脏细胞脂肪变性减少。qRT-PCR和Western blotting结果表明,B组肝脏SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白表达高于A组(P0.05);与B组相比较,C、D和F组肝脏SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.05),E组SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白降低,但差异无统计学意义。结论姬松茸多糖高、中剂量对2型糖尿病大鼠干预后,血糖血脂水平、肝脏SREBP-1c和SCD-1表达降低,肝脏细胞脂肪变性和肝细胞坏死减少,对肝脏有一定的保护作用,在治疗2型糖尿病中具有较高的应用前景。     

镉染毒对大鼠血液红细胞免疫功能的影响

分别选择健康SD雄性成年大鼠60只和36只进行慢性和急性镉染毒实验,均随机分成对照组(C组)、中剂量染毒组(M组)、高剂量染毒组(H组).慢性实验采用每天分别给C组、M组、H组饲喂含镉0、5、10mg/kg饲料的大鼠全价饲料,连续6周;急性实验分别按含镉0、0.5、1.0mg/kg体重腹腔注射染毒,连续7d.研究了镉染毒对大鼠血液红细胞免疫功能的影响.结果显示,经慢性染毒大鼠体重与对照组相比无明显差异,但急性染毒差异显著;慢性实验M和H组大鼠的RBC CR1花环率(%)从第2周起均显著低于C组,RBC-IC花环率(%)在第2～4周高于C组,且在第4周M组显著高于C组,以后M和H组均极显著低于C组;急性实验M和H组大鼠的RBC CR1花环率(%)和RBC IC花环率(%)与对照组比较均显著降低.提示镉染毒引起血液红细胞免疫功能低下.     

PTS预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护效果及机制研究

目的探讨人参三醇皂苷(PTS)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用机制。方法选用Wistar大鼠作为研究对象,随机分组:假手术组(生理盐水2 m L/kg体质量)、模型组(生理盐水2 m L/kg体质量)、PTS低剂量组(25 mg/kg)、PTS中剂量组(45 mg/kg)、PTS高剂量组(90 mg/kg)、阳性药组(生脉注射液450 mg/kg)。连续7 d腹腔注射给药,于末次给药1 h后进行MIRI造模手术,再灌注24 h后取材料测定各项指标。监测大鼠心电图ST段变化;检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用PCR检测心肌组织Bcl-2和Bax mRNA表达水平;光镜和电镜观察心肌组织病理和心肌细胞超微结构的改变。结果与模型组比较,PTS中剂量组和高剂量组能显著降低MIRI模型大鼠ST段和血清CK-MB、IL-6、TNF-α水平,改善心肌结构的损伤程度,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制前凋亡蛋白Bax的表达。结论 PTS对MIRI大鼠心肌具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制炎症因子表达和调节凋亡关键酶来实现。     

纳米二氧化钛对雌性小鼠肾脏的影响

为研究在亚急性毒性的情况下,纳米二氧化钛(TiO_2)对雌性小鼠肾脏的影响。采用将60只ICR雌性小鼠随机分为对照组和三个剂量组(10、50、100 mg/kg BW)的方法,连续30 d灌胃染毒。小鼠脱颈处死,称量并计算肾脏系数,观察肾组织病理学变化和氧化损伤,并检测肾功能。结果显示,纳米TiO_2染毒导致小鼠肾脏组织出现不同程度炎细胞浸润,间质充血、纤维素样坏死等损伤,且剂量越大,损伤越明显;各剂量组小鼠肾脏系数和肾组织BUN含量与对照组无显著性差异(P0.05),而肾组织Cr含量明显升高(P0.05),UA含量随剂量升高逐渐下降,当剂量达到100 mg/kg时与对照组相比差异显著(P0.05);小鼠肾组织SOD活性随染毒剂量增加呈先升后降的趋势,且50 mg/kg剂量组SOD活性显著性高于对照组(P0.05);与对照组相比,10 mg/kg剂量组和50 mg/kg剂量组小鼠肾组织GSH-PX活性显著性升高(P0.05),各剂量组小鼠肾组织MDA含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.01)。由此可知,纳米TiO_2染毒使雌性小鼠肾组织产生病理学变化,造成肾功能损伤,并引起肾组织的氧化应激反应。     

铬胁迫对拟穴青蟹体内磷酸酶活性的影响

采用生态毒理学方法,研究了水体中Cr6+(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/L)胁迫1,3,5,7,9 d后对拟穴青蟹鳃、肌肉和肝胰腺中磷酸酶活性的影响,以未添加Cr6+的自然海水组为对照组.结果表明,Cr6+胁迫1 d后拟穴青蟹鳃中酸性磷酸酶(ACP)活性显著升高(p0.05),肝胰腺、肌肉中ACP活性升高不显著(p0.05),Cr6+胁迫9 d后,2.0,4.0,8.0mg/L Cr6+浓度组拟穴青蟹肝胰腺中ACP活性显著降低(p0.05).5 d后不同Cr6+浓度组拟穴青蟹鳃中碱性磷酸酶(AKP)活性一直显著升高(p0.05),胁迫9 d后,0.5,1.0,2.0 mg/L Cr6+浓度组与对照组差异不显著(p0.05),4.0,8.0 mg/L Cr6+浓度组鳃中AKP活性仍显著高于对照组(p0.05).2.0,4.0,8.0 mg/L Cr6+浓度组肝胰腺、肌肉中AKP活性在Cr6+胁迫1 d后显著升高(p0.05).Cr6+胁迫显著影响拟穴青蟹生理生化效应.     

小鼠睾丸TERT表达的增龄变化

应用免疫组织化学和图像分析方法研究了10,20,30,60,90天龄的小鼠睾丸不同分化类型生殖细胞中端粒酶催化亚基TERT的表达.结果发现在精子发生过程中精原细胞及成熟精子中均未见TERT阳性表达,而初级精母细胞尤其是粗线期精母细胞和精子细胞是高表达TERT的细胞类群,附睾管上皮细胞也呈TERT阳性表达;同时TERT在小鼠个体发育过程中的表达存在着从弱到强再到弱的动态变化趋势.结果表明TERT在小鼠睾丸中的表达特点与精子发生过程密切相关,可能对维持生殖细胞遗传物质的完整性和减数分裂的正常进行发挥着重要作用.     

Sperm from neonatal mammalian testes grafted in mice

Spermatogenesis is a productive and highly organized process that generates virtually unlimited numbers of sperm during adulthood. Continuous proliferation and differentiation of germ cells occur in a delicate balance with other testicular compartments, especially the supporting Sertoli cells. Many complex aspects of testis function in humans and large animals have remained elusive because of a lack of suitable in vitro or in vivo models. Germ cell transplantation has produced complete donor-derived spermatogenesis in rodents but not in other mammalian species. Production of sperm in grafted tissue from immature mammalian testes and across species has not yet been accomplished. Here we report the establishment of complete spermatogenesis by grafting testis tissue from newborn mice, pigs or goats into mouse hosts. This approach maintains structural integrity and provides the accessibility that is essential for studying and manipulating the function of testes and for preserving the male germ line. Our results indicate that this approach is applicable to diverse mammalian species.     

In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes

Spermatogenesis is one of the most complex and longest processes of sequential cell proliferation and differentiation in the body, taking more than a month from spermatogonial stem cells, through meiosis, to sperm formation. The whole process, therefore, has never been reproduced in vitro in mammals, nor in any other species with a very few exceptions in some particular types of fish. Here we show that neonatal mouse testes which contain only gonocytes or primitive spermatogonia as germ cells can produce spermatids and sperm in vitro with serum-free culture media. Spermatogenesis was maintained over 2?months in tissue fragments positioned at the gas-liquid interphase. The obtained spermatids and sperm resulted in healthy and reproductively competent offspring through microinsemination. In addition, neonatal testis tissues were cryopreserved and, after thawing, showed complete spermatogenesis in vitro. Our organ culture method could be applicable through further refinements to a variety of mammalian species, which will serve as a platform for future clinical application as well as mechanistic understanding of spermatogenesis.     

C++中运算符++的机器实现

从Ｃ＋＋中＋＋运算符中的机器实现层面探讨＋＋的确切含义，从而提出进一步规范＋＋运算符的使用建议；同时指出，从机器实现的角度揭示高级语言中某些疑难点具有的普遍意义。     

牦牛和犏牛睾丸SAMD12基因的克隆测序及其mRNA水平比较

SAMD12是新近发现的SAM结构域家族成员.为进一步探究犏牛雄性不育的分子机制,实验从健康成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸组织中提取总RNA,利用常规基因克隆技术,对牦牛SAMD12基因进行克隆测序,并采用实时荧光定量PCR技术,比较牦牛和犏牛睾丸中SAMD12基因mRNA水平.结果本实验克隆获得了牦牛SAMD12基因的3种变异体,分别命名为v715、v779和v852.v715与普通牛5号变异体完全对应;v779含SAM结构域但与普通牛序列存在一些差异,可能是SAMD12基因的新变异体类型;v852无结构域部分可能不表现活性.定量PCR结果显示:SAMD12基因在牦牛和犏牛睾丸中均有表达,但表达量差异不显著,推测其表达水平与犏牛雄性不育无直接关系.