竹节参总皂苷的抗肿瘤作用和毒性研究

为评价竹节参总皂苷对移植性H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和对其免疫系统的毒性,用SPF级雄性小鼠接种肝癌H22瘤株建立移植性肝癌H22小鼠模型,观察不同剂量的竹节参总皂苷对移植性H22荷瘤小鼠给药12d后的抑瘤率、小鼠体重和免疫器官指数.结果表明:40,80,160 mg/kg竹节参总皂苷对移植性H22荷瘤小鼠的抑制率分别为30.7％,38.6％,48％,竹节参总皂苷能增加H22荷瘤小鼠小鼠体重,但对其免疫系统无明显毒性.说明竹节参总皂苷具有较显著的抗肿瘤作用,可成为抗癌新药.     

熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的 探讨熊果酸（UA）对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响.方法 皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4＋、CD8＋T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量.结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4＋T细胞表达及CD4＋/CD8＋T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达.结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关.     

广西藤茶提取物TTF抗肿瘤作用的实验研究

观察广西藤茶提取物（简称TTF）及其含药血清抗肿瘤作用,采MTT法,观察含药血清对肉瘤细胞（S180）、肝癌细胞（H22）、白血病细胞株（L1210）细胞增殖的抑制作用;体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价TTF对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价TTF对H22移植性腹水癌的抑制作用。实验结果表明含药血清在体外对S180细胞、H22细胞和L1210细胞有明显的抑制作用,体内能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间。证明TTF体内及含药血清具有一定抑制S180、H22、L1210肿瘤细胞增殖及S180、H22诱发的移植性肿瘤作用．     

青蒿琥酯配伍丝裂霉素抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨青蒿琥酯配伍丝裂霉素（MMC）抗肿瘤作用,为临床肿瘤化疗提供用药选择。方法：采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价青蒿素配伍丝裂霉素（MMC）对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价青蒿琥酯配伍丝裂霉素（MMC）对H22移植性腹水癌的抑制作用。结果：青蒿琥酯配伍丝裂霉素（MMC）能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间。结论：青蒿琥酯配伍丝裂霉素（MMC）具有一定抑制S180、H22诱发的移植性肿瘤作用。     

化胃舒颗粒体内抗肿瘤作用的实验研究

摘要: 目的探讨化胃舒颗粒对小鼠移植性肿瘤的抑制作用。方法以S180 肉瘤和H22 肝癌作为实验瘤株,观察化胃 舒颗粒对S180 小鼠肉瘤的抑瘤率及对H22 肿瘤小鼠生存期的影响。采用小鼠移植性肿瘤S180 实体瘤模型,观察化胃舒 颗粒与环磷酰胺( CTX) 联用对S180 实体瘤小鼠的白细胞数及抑瘤率的影响。结果化胃舒颗粒能阻止S180 肿瘤生长, 小鼠肿瘤抑制率在30%以上; 化胃舒颗粒能明显延长H22 肿瘤小鼠的生存时间; 化胃舒颗粒能抑制由环磷酰胺( CTX) 引 起的S180 实体瘤小鼠血液中白细胞总数的减少,从而增强环磷酰胺( CTX) 的抑瘤作用。结论化胃舒颗粒对S180 肉瘤 和H22 肝癌荷瘤小鼠有明显的抗肿瘤作用,与环磷酰胺( CTX) 合用有显著的减毒增效作用。     

藏药-唐冲那保抗小鼠移植性肝癌(H22)的研究

目的:对我国青海玉树地区民间藏医治疗肿瘤验方的提供,治疗肿瘤的主味藏药玉树莨菪(译音:唐冲那保)进行了抗小鼠移植性肝癌(H22)研究。方法:建立小鼠肝癌(H22)模型,随机将动物分成样品2个剂量组、蒸馏水阴性对照组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组。每组9-10只动物,高剂量组重复1批实验。接种24h开始给药,样品组、阴性对照组灌胃给予,给药容量为0.2ml/10g体重。阳性组腹腔注射0.1ml/10g体重。所有动物每天给药1次,连续10d。并隔日称体重一次,根据体重调整给药量。结果:玉树莨菪提取物对小鼠移植性肿瘤H22均有明显的抑制作用,抑制率达41.27%,且重复性较好,对小鼠移植性肿瘤H22抑制率为26.39%。结论:根据抗肿瘤药物筛选规程疗效评价,中草药抑制率大于30%,并经统计学处理有显著性差异,重复疗效稳定,则评定此药有一定疗效。表明玉树莨菪提取物有一定的抗肿瘤疗效。     

“江边一碗水”总木脂素的抗肿瘤作用及一般毒性的研究

为评价"江边一碗水"总木脂素对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和相关毒性,用SPF级雄性小鼠腋下接种肝癌H22瘤株建立了移植性肝癌H22小鼠模型,观察了不同剂量的"江边一碗水"总木脂素给药10 d后对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率、体重、免疫器官指数及血尿常规、肝肾功等的影响.结果表明:50,100,200 mg/kg"江边一碗水"总木脂素的抑瘤率分别为44.9%,54.8%和62.1%."江边一碗水"总木脂素对H22小鼠体重、免疫器官指数、造血系统、肝肾功能等生理生化指标无明显影响.故"江边一碗水"总木脂素具有较显著的抗肿瘤作用和较低的毒性,是其抗肿瘤的药效物质基础.     

白英抗肿瘤作用的实验研究

探讨白英(solanum lyratum thunb)的抗肿瘤作用,采用MTT法观察白英含药血清对人癌A2780、Hela、SGC-7901细胞的体外抑制作用.采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价白英对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价白英对H22移植性腹水癌的抑制作用.白英含药血清均能明显抑制体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞的生长;白英能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间.说明白英对体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞有明显的抑制作用;具有一定抑制S180、H22诱发的移植性肿瘤作用.     

重组ProTα对肝癌小鼠Treg细胞和NKG2D阳性细胞的影响

为观察不同时期应用重组胸腺素α原(ProTα)药物干预下肝癌荷瘤小鼠的抑瘤率,并研究其对Treg细胞和NKG2D阳性细胞的影响,将36只昆明小鼠随机分成空白组、荷瘤组、药物干预组,H22小鼠肝癌细胞皮下移植建立荷瘤小鼠模型,腹腔注射重组ProTα,观察7和14d后肝癌荷瘤小鼠的抑瘤率,并检测外周单个核细胞中调节性T细胞(Treg细胞)和NKG2D阳性细胞的比例.结果表明:移植瘤7d后,药物干预组和荷瘤组瘤质量对比无显著差异;而移植瘤14d后,药物干预组瘤质量较荷瘤组有显著减小.荷瘤14d后,荷瘤组较空白组Treg细胞比例升高,NKG2D阳性细胞比例下调,差异显著;而不论是早期药物干预组还是进展期(即移植瘤7d后)药物干预组,Treg细胞比例均显著降低,NKG2D阳性细胞显著升高.由此可见,重组ProTα能够抑制肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,且早期、长期用药效果更好,相关作用机制涉及下调Treg细胞数量从而抑制肝癌细胞免疫逃逸,并上调NKG2D阳性细胞数量从而提高其介导的抗肿瘤效应.     

澳洲茄胺盐酸盐对小鼠肝癌H22抑制作用研究

目的 研究观察澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型肿瘤小鼠肝癌H22的瘤重抑制率.方法 本项研究采用肿瘤细胞悬液接种法制备小鼠移植性实体型肿瘤H22动物模型.腹腔注射给药,连续10 d.给药结束后,解剖小鼠,取瘤称质量,进行统计学处理及分析,观察药物作用,连续3次重复实验.结果 经过研究发现:澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型小鼠肝...     

MSP58基因在肝癌中的表达分析

探讨MSP58基因在人类肝癌肿瘤组织及肝癌细胞系中的表达情况,应用半定量RT-PCR和Western blot方法分别检测MSP58在肝癌细胞系及肝癌肿瘤组织中的mRNA水平及蛋白水平的表达.两种肝癌细胞系HHCC、HepG2,22例肝癌癌区组织,13例正常肝组织作为对照.结果在两种肝癌细胞系中MSP58 mRNA水平和蛋白水平都有明显表达;在22例肝癌肿瘤组织中,不同级别的人肝癌肿瘤标本中mRNA及蛋白均有MSP58表达,并且MSP58的表达量随着人肝癌肿瘤恶性病理级别的增高而增高;13例正常肝组织无表达.MSP58在肝癌肿瘤组织和肝癌细胞系中均有表达,说明其可能对肝癌肿瘤的发生或发展有重要作用.     

抑癌基因WWOX在结直肠癌中的表达

检测WWOX mRNA及其编码蛋白在结直肠癌中的表达,分析其临床病理学意义。用半定量RT—PCR方法定量和免疫组化染色（EliVision plus法）分析45例结直肠癌、45例结直肠腺瘤及20例正常组织中WWOX mRNA及其编码的蛋白质表达量,并比较两者在不同组织中的表达差异。半定量RT-PCR和免疫组化结果显示。45例结直肠癌组织中WWOX mRNA表达水平低于结直肠腺瘤组及正常结直肠组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结果表明,WWOX的低表达与结直肠癌的发展、生物学行为和预后有相关性。     

小鼠H-2D~b-BSP融合基因的构建与表达

目的:构建小鼠H-2Db-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:采用RT-PCR方法从C57BL/6小鼠淋巴细胞中扩增出H-2Db链的胞外段基因,经双酶切置换已构建的HLA-A*0201-BSP重组体中的HLA-A*0201胞外段序列,使H-2Db与BirA酶底物肽(BSP)序列融合,构建H-2Db-BSP融合基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,筛选重组子,并经IPTG诱导融合蛋白表达.结果:构建的H-2Db-BSP融合基因插入正确且序列与GenBank一致;经1mmol/L浓度的IPTG诱导后4h蛋白表达达到高峰,且融合蛋白以包涵体形式存在.结论:成功构建H-2Db-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌得以表达,为进一步构建H-2Db四聚体,研究T细胞应答提供了物质基础.     

仙芦抗癌胶囊抗肿瘤作用及其作用机制研究

通过观察仙芦抗癌胶囊对S180A和H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的影响,观察其体内抗肿瘤作用.采用荧光探针DPH法,观察仙芦抗癌胶囊对S180A和H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性的影响.实验结果发现仙芦抗癌胶囊(1g/kg,0 5g/kg,0 25g/kg)对S180A小鼠的瘤体生长有显著的抑制作用.仙芦抗癌胶囊(1g/kg,0 5g/kg)对H22小鼠的生存时间有显著的延长作用.仙芦抗癌胶囊高、中、低剂量(1g/kg,0 5g/kg,0 25g/kg)均能够升高S180小鼠红细胞膜流动性.仙芦抗癌胶囊高、中剂量(1g/kg,0 5g/kg)均能够降低H22小鼠红细胞膜流动性,而低剂量组无明显作用.因此仙芦抗癌胶囊对S180A和H22都有显著的抑制作用,抗肿瘤作用机制与其恢复荷瘤小鼠红细胞膜流动性有关.     

乙型肝炎病毒蛋白及COX-2在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制

目的探讨乙型肝炎病毒蛋白及环氧合酶-2(COX-2)在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制.方法取42例慢性乙肝患者行穿刺活检时乙型肝炎病毒ccc DNA为阳性乙肝相关性肝细胞癌组织;另取同期手术切除的11例ccc DNA为阴性的非乙型肝炎相关性肝癌组织.免疫组化法检测乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2、CD34的表达水平,Werdner法计算微血管密度;分析上述因子与乙肝相关性肝细胞癌组织微血管生成的相关性.RT-PCR和Western blot检测人肝癌细胞系(HepG2)和稳定转染乙型肝炎病毒X蛋白(HepG2-X)细胞中COX-2mRNA和蛋白表达情况;ELISA法检测细胞上清液中PGE2表达水平和不同浓度COX-2抑制剂塞来昔布作用后PGE2水平.结果乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中COX-2阳性率明显高于乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和非乙型肝炎相关性肝癌组织(P0.01).乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中早期癌症微血管密度明显低于进展期癌症组织,乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织中微血管密度明显低于阳性表达组织(P0.01);COX-2阳性表达组织中微血管密度明显高于COX-2阴性表达组织(P0.01);非乙型肝炎相关性肝癌组织中微血管密度明显低于乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2阳性表达组织(P0.01),与乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和COX-2阴性表达组织之间差异无统计学意义(P0.05);乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙型肝炎相关性人肝细胞癌组织微血管生成呈正相关.HepG2-X细胞中COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显高于空载体对照HepG2细胞,并且细胞培养上清液中PGE2水平明显增加;与HepG2细胞相比,塞来昔布对HepG2-X细胞分泌PGE2具有更强的抑制作用.结论乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙肝相关性肝细胞癌组织中高表达,促进了癌组织微血管生成;乙型肝炎病毒X蛋白可通过COX-2/PEG2信号通路促进了肝癌的发生和发展.     

Ras /MAPK / ERK 通过协同 NF- KB 促进肝癌细胞中 cyclinD1 的表达

摘要: 目的 探讨 Ras 癌基因在体内诱导肝肿瘤发生过程中促进 cyclin D1 表达的分子机制。方法 利用 H-ras12V 转基因雄鼠肝肿瘤组织、肿瘤周围组织以及非转基因雄鼠肝组织进行病理分析和总 RNA 及蛋白质的提取。应用 qRT-PCR 和 Western blot 方法检测 cyclin D1 的表达以及调控 cyclin D1 表达的相关信号通路激活状态。采用 miRNA 测序、生物信息学分析和 qRT-PCR 验证方法检测 miR-5102 基因的表达水平。结果 与非转基因雄鼠肝组 织和肿瘤周围组织相比,肿瘤组织中 cyclin D1 基因的 mRNA 和蛋白表达水平显著升高。与非转基因雄鼠肝组织 和肿瘤周围组织相比,在肿瘤组织中 MAPK 信号转导通路中的 ERK 信号分子的蛋白表达水平和磷酸化水平都显 著升高,在肿瘤组织中成高激活状态,NF-KB 信号通路中的抑制因子 IKB 蛋白水平显著降低。miR-5102 的表达水 平没有显著变化。结论 在 Ras 癌基因诱导的肝肿瘤发生过程中,主要通过激活 MAPK/ERK 和 NF-KB 信号通路促进 cyclin D1 的表达。     

H13诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡及其机制的研究

探讨新型Topo I抑制剂H13对人卵巢癌A2780的杀伤和诱导凋亡的作用机制.MTT法对人卵巢癌A2780的杀伤作用;流式细胞仪研究H13对A2780细胞的凋亡诱导作用;Western Blot法检测H13对A2780细胞内caspase-3和p53蛋白表达的影响.H13对人卵巢癌A2780有明显细胞毒性作用,并且有剂量依赖性;A2780细胞在H13作用后出现特征性凋亡形态特征,且凋亡率由5.7%上升为20.6%;H13明显增加p53蛋白的表达和caspase-3蛋白的表达.H13对人卵巢癌A2780有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能依赖于细胞内p53蛋白和caspase-3蛋白表达增高.     

人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞B16的增殖抑制的研究及对Bcl-2/Bax表达的影响

摘 要 目的：研究人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2/Bax表达的的影响。方法：1.MTT法测定人参水溶性总蛋白对黑色素瘤B16细胞株的增殖抑制率。2. RT-PCR（Real-time PCR）法检测Bcl-2、Bax基因的mRNA表达情况。3.Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果：1.人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞株有明显的增殖抑制作用,其抑制率随着加药浓度的增加而升高,并与加药浓度呈现一定的量效关系。2.随着人参水溶性总蛋白浓度的增高（0,100,500,1000ug/mL）,RT-PCR检测的Bcl-2 mRNA相对表达量逐渐降低,Bax mRNA相对表达量逐渐升高,当加药浓度为1000ug/ml时,Bcl-2的相对表达量最低,为0.20±0.05,Bax的相对表达量最高,为16.83±0.07;与对照组相比,Bcl-2和Bax基因的相对表达量差异均有统计学意义（P＜0.05）。3.经Western blot测定,各组Bcl-2蛋白的表达均低于对照组,各组Bax蛋白表达均高于对照组,且随着加药浓度的增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,Bax蛋白表达量逐渐升高。结论：人参水溶性总蛋白可以抑制小鼠黑色素瘤B16细胞株增殖,其分子机制可能与调控Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达有关。     

Exon shuffling: mapping polymorphic determinants on hybrid mouse transplantation antigens

The mouse major transplantation antigens H-2K, H-2D and H-2L are highly polymorphic cell-surface glycoproteins which may serve as recognition elements in cell-cell interactions. Each antigen possesses a number of alloantigenic determinants defined by antisera of various specificities. Recently, monoclonal antibodies have been produced which redefine and extend our knowledge of these determinants2,3, but structural information has not yet been correlated with the serological definition of the antigens. We have previously reported the molecular cloning of genes for H-2Ld and H-2Dd transplantation antigens from the BALB/c mouse and the expression of these genes in mouse L cells4,5. To localize the serological determinants to discrete regions of the H-2 protein, we have now constructed new H-2 antigen genes by joining together fragments of the H-2Ld and H-2Dd genes. In L cells, these genes direct the synthesis of hybrid H-2 proteins and by using monoclonal antibodies of defined specificities, we have mapped classically defined serological specificities to structurally defined domains of the transplantation antigen protein. We conclude that polymorphic determinants recognized by monoclonal antibodies are located in functionally distinct portions of the protein.