乳酸菌对肠道病原菌的抑菌试验

本试验用四株乳酸菌对五种肠道病原菌进行了抑菌试验。结果证明乳酸菌对病原菌有明显的抑制作用。     

黑米双岐酸奶

黑米是我国的珍稀米种之一,具有较高的营养价值和滋补健身作用。双岐杆菌具有抗感染能力,可合成多种维生素和产生多种微量元素,具有增寿、抗衰老、抗癌作用。乳酸菌能抑制肠道内各种病原菌和腐败菌的增殖,改善肠道内菌丛的作用。因此,用双岐杆菌和乳酸菌混合发酵而制得的黑米双岐酸奶,是较为理想的天然营养保健饮品。     

乳酸菌和双歧杆菌制剂对小鼠肠道菌群失调模型的调节作用

利用抗生素干扰小鼠肠道原籍菌群,建立小鼠肠道菌群失衡模型;并利用乳酸菌和双歧杆菌制剂对肠道菌群失调小鼠模型进行调节治疗。观察乳酸菌和双歧杆菌对肠道菌群失调模型的调节效果。选用不同浓度的头孢曲松钠,对小鼠进行灌胃。取盲肠和结肠内容物培养主要菌群变化。模型制备成功后利用乳酸菌和双歧杆菌进行菌群的治疗性调节,口服6周后,检测被检菌群的数量。结果不同剂量头孢曲松钠灌胃的小鼠盲肠体积均有所增大,模型组的优势菌的数量显著减少。通过口服乳酸菌和双歧杆菌制剂,可以适当的恢复乳酸菌和双歧杆菌的数量。与对照组比较差异显著。说明实验成功地制备了小鼠的肠道菌群失衡模型,模拟长期应用抗生素的机能环境,通过外源性的补充乳酸菌和双歧杆菌,对保持肠道菌群的平衡具有调节和修复作用。     

mRNA差异显示法筛选和克隆东亚飞蝗抗药性相关基因

筛选和克隆东亚飞蝗抗药性相关基因.采用mRNA差异显示法(mRNA diffFerential display PCR,DD-PCR),对比了东亚飞蝗在受到氯氰菊酯杀虫剂的诱导前后,基因表达发生的变化.对差异片段进行了回收,克隆、测序,Northern点杂交验证以及序列分析和同源性比较.东亚飞蝗在受到氯氰菊酯杀虫剂的诱导前后,存在明显的基因表达差异,发现差异表达条带9条,对9条差异表达条带进行克隆、测序,经序列分析和同源性比较和RNA点杂交验证,表明确认其中1条带与东亚飞蝗的抗药性有关.东亚飞蝗的mRNA差异显示证明,该EST序列可能在抗药的发生发展中具有一定的作用.     

乳酸菌胞外多糖生物活性研究进展

乳酸菌胞外多糖(LAB-EPS)是在乳酸菌生长代谢过程中分泌的一类糖类化合物.它能够改善食品的粘稠度、乳化性、保水性以及质构特性,还具有一定的益生活性,是一种理想的天然食品添加剂.文章针对乳酸菌胞外多糖的抗氧化、抗肿瘤活性以及调节肠道菌群等功能作出简要综述,旨在为其在科学研究、生产实践等各个领域开展应用提供参考.     

一种利用微波炉加热快速提取细菌DNA用于PCR扩增的方法

利用微波加热原理,探索一种快速、简单、高效提取细菌DNA用于常规PCR快速检测的方法。在微波炉额定功率800 W条件下分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、副溶血弧菌、沙门氏菌以及志贺氏菌6种常见食源性病原菌进行微波处理,离心取上清,获取细菌DNA,将样本DNA进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行验证。并进一步采用微波加热方法针对6种病原菌最低检出浓度和混合提取6种病原菌DNA的PCR检测进行分析。6种病原菌在微波炉中加热40-130 s的上清DNA样本均能用于常规PCR扩增。针对检出浓度的分析表明,副溶血弧菌的最低检出浓度为103 cfu/ml,金黄色葡萄球菌为104 cfu/ml,肠出血性大肠杆菌为105 cfu/ml,肠炎沙门氏菌和福氏志贺氏菌的最低检出浓度为106 cfu/ml,针对单核细胞增生李斯特氏杆菌的的最低检出浓度为107 cfu/ml。进行6种混合菌微波共提取时,其中5种病原菌的特异性基因都能扩出,并且条带很亮。该微波提取方法具有快速,简单,高效的特点,能满足大部分食源性病原菌的常规PCR检测需求,大大节约了时间和成本,具有广泛的适用性,为细菌快速分子检测提供了简便手段。     

一株高产胞外多糖的乳酸芽孢杆菌的筛选及功能鉴定

为丰富可用于功能食品的微生物资源,本研究从四川怀远发酵米糕作坊环境中分离出1株高产胞外多糖和乳酸的芽孢杆菌（XQ）,经分子鉴定为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus.HPLC检测XQ产乳酸含量为8 mg/mL;苯酚 硫酸法检测粗胞外多糖浓度达到7.16 mg/mL.并经滤纸片法测定出XQ产生的粗胞外多糖对常见的食源性病原菌沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有抑菌作用.DEAE分离粗胞外多糖为中性多糖E1和酸性多糖E2.当浓度为10 mg/mL时,E1对羟自由基清除活性为3.24%,而E2羟自由基清除活性高达84.58%;E1和E2对DPPH自由基的清除活性分别为26.07%和47.03%.E2还具有明显的抗肿瘤活性：当浓度为4 mg/mL时,E2对A549细胞的生长抑制率可达到81.30%,在浓度为6 mg/mL时,E2对HepG2细胞的生长抑制率为53.40%.在模拟胃肠道耐受性实验中发现XQ对胰蛋白酶、胃蛋白酶和胆盐均具有良好的耐受性.在安全性方面,没有发现XQ有溶血现象,对革兰氏阳性菌抗生素没有抗药性,具有良好的药物安全性.表明XQ可作为一种潜在的益生菌.     

一种采用微波炉加热快速提取细菌DNA用于PCR扩增的方法

利用微波加热原理,探索一种快速、简单、高效提取细菌DNA用于常规PCR快速检测的方法.在微波炉额定功率800 W条件下分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、副溶血弧菌、沙门氏菌以及志贺氏菌6种常见食源性病原菌进行微波处理,离心取上清,获取细菌DNA,将样本DNA进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行验证.并进一步采用微波加热方法针对6种病原菌最低检出浓度和混合提取6种病原菌DNA的PCR检测进行分析.6种病原菌在微波炉中加热40-130 s的上清DNA样本均能用于常规PCR扩增.针对检出浓度的分析表明,副溶血弧菌的最低检出浓度为103cfu/ml,金黄色葡萄球菌为104cfu/ml,肠出血性大肠杆菌为105cfu/ml,肠炎沙门氏菌和福氏志贺氏菌的最低检出浓度为106cfu/ml,针对单核细胞增生李斯特氏杆菌的的最低检出浓度为107cfu/ml.进行6种混合菌微波共提取时,其中5种病原菌的特异性基因都能扩出,并且条带很亮.该微波提取方法具有快速,简单,高效的特点,能满足大部分食源性病原菌的常规PCR检测需求,大大节约了时间和成本,具有广泛的适用性,为细菌快速分子检测提供了简便手段.     

常用抗球虫药对人工感染鸡球虫病的药效评价

对秦皇岛市场上常用的8种抗球虫药的药效作了评价。结果表明,地克珠利为中效抗球虫药;马杜拉霉素、盐霉素和拉沙洛菌素为低效抗球虫药;常山酮、球痢灵、克球多和氨丙啉属无效抗球虫药。6种混合艾美耳球虫对地克珠利无抗药性,对马杜拉霉素和盐霉素具有中度抗药性;对拉沙洛菌素、常山酮、球痢灵、克球多和氨丙啉具有完全抗药。     

兰州市褐家鼠对杀鼠灵的抗药性调查

杀鼠灵(第一代抗凝血灭鼠剂)在兰州市广泛使用已经多年。为了及时发现抗药鼠,了解家栖鼠对杀鼠灵的抗药水平,合理使用灭鼠剂,1993年8～10月,笔者对使用该类灭鼠剂已有8年历史的地区进行了抗药性调查。 1 材料和方法 1.1 试验动物:供试褐家鼠(Rattus norvegicus),捕自城关区省果品仓库17只,五里铺村平房7只,东岗镇市场9只,符合试鼠要求的共28只。     

大肠杆菌耐药机制中激活外排泵和减少摄入量的研究进展

概述了大肠杆菌中激活外排泵和减少摄入量这两个重要的耐药机制和克服它们的新策略,主要包括近年来在理解外排泵系统的物理结构、功能和调控子中的进步和有利于开发以外排泵为靶位的药物研究进展。     

牛蛙嗜水气单胞菌病的病原研究

针对厦门市同安区某牛蛙养殖场中出现的后腿肌肉变成淡黄绿色、肝肿大呈深紫红色、肾脏充血呈鲜红色为主要症状的患病牛蛙，进行了细菌分离、培养、人工感染、生理生化、药物敏感等试验研究，结果确认引起该病的病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)，药敏试验结果表明，该病原菌对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素等高度敏感，而对氯霉素、青霉素钠、复方SMZ等不敏感。     

抗生素对微生物的影响

不同抗生素对不同病原菌的作用不同，了解某一抗生素范围的试验，叫抗菌谱试验，实验利用滤纸条法测定青霉素的抗菌谱，即可判断青霉素对不同类型微生物的影响，初步判断其抗菌谱．不同抗生素的抗菌谱是不同的，如青霉素只对革兰氏阳性菌有抗菌作用，故青霉素属窄谱抗生素．     

Plasmids of the same Inc groups in Enterobacteria before and after the medical use of antibiotics

Conjugative plasmids were common in enterobacteria isolated before the medical use of antibiotics. Plasmid F of Escherichia coli K-12 was one example and we identified others in over 20% of a collection of strains isolated between 1917 and 1954, the Murray collection. In the past 25 years, conjugative plasmids encoding antibiotic resistances have become common in bacteria of the same genera as those of the Murray Collection--Salmonella, Shigella, Klebsiella, Proteus, Escherichia. The present study was made to show whether the 'pre-antibiotic' plasmids belonged to the same groups, as defined by incompatibility tests (Inc groups), as modern R plasmids. Of 84 such plasmids established in E. coli K-12, none with antibiotic resistance determinants, 65 belonged to the same groups as present resistance (R) plasmids. Thus the remarkable way in which medically important bacteria have acquired antibiotic resistance in the past 25 years seems to have been by the insertion of new genes into existing plasmids rather than by the spread of previously rare plasmids.     

SOS response promotes horizontal dissemination of antibiotic resistance genes

Mobile genetic elements have a crucial role in spreading antibiotic resistance genes among bacterial populations. Environmental and genetic factors that regulate conjugative transfer of antibiotic resistance genes in bacterial populations are largely unknown. Integrating conjugative elements (ICEs) are a diverse group of mobile elements that are transferred by means of cell-cell contact and integrate into the chromosome of the new host. SXT is a approximately 100-kilobase ICE derived from Vibrio cholerae that encodes genes that confer resistance to chloramphenicol, sulphamethoxazole, trimethoprim and streptomycin. SXT-related elements were not detected in V. cholerae before 1993 but are now present in almost all clinical V. cholerae isolates from Asia. ICEs related to SXT are also present in several other bacterial species and encode a variety of antibiotic and heavy metal resistance genes. Here we show that SetR, an SXT encoded repressor, represses the expression of activators of SXT transfer. The 'SOS response' to DNA damage alleviates this repression, increasing the expression of genes necessary for SXT transfer and hence the frequency of transfer. SOS is induced by a variety of environmental factors and antibiotics, for example ciprofloxacin, and we show that ciprofloxacin induces SXT transfer as well. Thus, we present a mechanism by which therapeutic agents can promote the spread of antibiotic resistance genes.     

棉花黄萎病生防细菌NCD-2抑菌物质提取研究

应用微生物控制植物病害是非常有效的方法。枯草芽孢杆菌是最著名的产生抗生作用的拮抗细菌。本文所使用的防治棉花黄萎病生防细菌NCD-2是枯草芽孢杆菌菌株,对16种植物病原真菌具有抑制作用,并且对棉花黄萎病具有较高的田间防病效果。通过发酵培养、有机溶剂萃取和盐析和透析提取了该菌株的胞外分泌产物,经抑菌作用测定证明该菌株分泌的有效抑菌成分为耐热蛋白。     

基于抗体的小麦赤霉病抗性研究进展

 由镰刀菌引起的小麦赤霉病,不仅降低产量和品质,所形成的真菌毒素还会影响食品安全。植物缺乏高抗小麦赤霉病的资源,因此从动物中筛选、分离抗病抗体及其基因,可为培育植物抗病品种提供新种质,也拓展了开发研究新抗源的渠道。抗病抗体能特异靶向真菌蛋白、抑制抗原的功能;抗体与抗菌肽和顺式表达调控元件结合,使病菌能诱导抗体融合蛋白在镰刀菌侵染小麦的颖壳高效表达,从而有效抑制病菌侵入、扩展及毒素积累。本文综述抗病抗体的抗原类型、抗病抗体及其融合蛋白在体外和植物中的表达以功能、抗原基因结构与功能、抗体抗病机理的研究进展。     

产广谱细菌素乳酸菌的筛选

利用牛津杯双层平板法从70株乳酸菌中筛选得到2株具有较高抑菌活性的乳酸菌LAB30、LAB211。研究这2株乳酸菌的抑菌物质发现：排除酸性产物乳酸、乙酸以及过氧化氢的干扰,LAB211和LAB30仍具有较高的抑菌活性;对其发酵液进行蛋白酶处理,LAB30的发酵液经胰蛋白酶和蛋白酶K处理后抑菌活性均有降低;而LAB211的发酵液经蛋白酶K处理后有所降低,胰蛋白酶处理没有变化,因此可以判定这两株乳酸菌产生的抑菌物质为细菌素。利用特异性引物PCR分析可知,LAB211和LAB30产生的细菌素并非nisin。抑菌谱实验表明,LAB30和LAB211的发酵液不仅抑制革兰氏阳性菌,而且对部分革兰氏阴性菌也有抑制作用。因此LAB211和LAB30产生的是一类广谱细菌素。     

蓝藻的抗药性及其诱导与质粒关系

考察5个种9株水生蓝藻对8 种抗菌素和Hg~(2+)、Ca~(2+)离子的抗性及其诱导与质粒遗传的关系,结果表明,蓝藻种间及株系间对药物的抗性有显著差异。某些藻株对几种抗菌素的抗性可因诱导而显著增强。经三次连续药物诱导培养后抗药性可提高5～20倍。诱导获得的抗药性是可以传递的。对7株蓝藻进行质粒DNA检测,发现其中4 株分别含有1、2或3个质粒。对比分析表明这些株系的抗药性与其内含质粒不存在对应关系,表明蓝藻抗药性遗传不是质粒编码的。讨论了蓝藻抗药性诱导的实质及其用于除污染的意义。     

抗生素与肠道菌群关系研究进展

 从抗生素与肠道菌群的关系出发,在抗生素角度,概述了抗生素对肠道菌群构成、肠道定植抗力、菌群类别及代谢活动的影响,综述了抗生素通过调节肠道菌群恢复肠-脑轴、肠-肝轴稳态,延缓非感染性疾病的研究进展。在肠道菌群角度,简述了肠道菌群在抗生素耐药基因储存传播、新型抗生素发现过程中的特别作用。