三氧化二砷对小鼠实体瘤抑瘤作用的实验研究

建立肝癌实体瘤小鼠模型,观察不同浓度的三氧化二砷(As2 O3)对实体瘤小鼠瘤体重量的影响,检测实体瘤小鼠白细胞(WBC)数量,并进行骨髓涂片检查,了解As2 O3对骨髓造血功能的影响.结果表明低,中浓度As2 O3治疗肝癌实体瘤小鼠的瘤体重量明显减小,抑瘤率分别达39.3%和24.4%,与对照组相比有显著差异(P＜0.01和P＜0.05);高浓度As2 O3治疗肝癌实体瘤小鼠的瘤体重量减小不明显,与对照组相比无显著差异(P＞0.05).低、中浓度As2O3治疗肝癌实体瘤小鼠外周血WBC数量明显增多,骨髓涂片检查发现有核细胞增生活跃,粒红比例正常,巨核细胞多见,说明治疗量的As2O3对骨髓造血功能无抑制作用.     

白鲜皮提取物对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用

目的探讨白鲜皮乙醇提取物(AEDP)对辐射损伤小鼠造血系统的保护作用.方法将60只ICR小鼠随机分为正常对照组(NC)、照射对照组(IC)、AEDP低剂量(300 mg/kg)照射组(LI)、AEDP高剂量(600 mg/kg)照射组(HI)、AEDP低剂量(300 mg/kg)组(LD)、AEDP高剂量(600 mg/kg)组(HD),共6组,测定小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、血清中铁含量.结果与照射对照组比较,AEDP高、低剂量组小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数显著增加(P0.05),血清中铁含量明显降低(P0.05).结论 AEDP可有效缓解辐射对造血系统造成的损伤.     

灵芝黄芪复配物提高环磷酰胺对荷瘤小鼠的疗效

研究灵芝(Ganoderma lucidum)黄芪(Astragalus)复配物对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)治疗的荷瘤小鼠肿瘤和免疫功能的影响.建立小鼠S180肉瘤模型,每日灌胃低、中、高剂量的灵芝黄芪复配物,并配合腹腔注射CTX.连续处理小鼠2周后,分析抑瘤效应,测定小鼠脾指数、胸腺指数、外周血白细胞(white blood cell,WBC)数和红细胞(red blood cell,RBC)数等免疫指标.同单CTX治疗组相比,中、高剂量的灵芝黄芪复配物能显著加强CTX对小鼠S180肉瘤的抑制作用(P<0.01),明显改善CTX引起的小鼠胸腺萎缩(P<0.01)和白细胞减少症状(P<0.05,P<0.01).灵芝黄芪复配物对CTX的抑瘤治疗具有明显的增效减毒作用,其效果堪比于单味中药灵芝提取物辅助CTX的抑瘤疗效,可大大降低单味灵芝提取物的治疗成本,经济价值可观.     

怀牛膝多糖结合游泳训练对肝再生大鼠骨髓增殖的影响

为了探讨牛膝多糖(Achyranthes bidentata polysaccharides,ABPS)结合耐力训练对部分肝切除(Partial hepatectomy,PH)大鼠骨髓增殖的影响,对经过28d游泳训练(Swimming training,ST)、灌胃ABPS的大鼠行2/3部分肝切除手术,观察术后大鼠的运动能力和骨髓细胞的形态和增殖情况.结果表明,游泳训练能够明显延长正常大鼠的游泳运动致力竭时间(P0.01),降低骨髓细胞PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)的表达.ABPS结合游泳训练能够明显延长PH大鼠的游泳致力竭时间(和PH+ST对比,P0.01),使骨髓增生程度更活跃,有核细胞数增多,红细胞数量减少,促进了骨髓细胞PCNA的表达(和PH相比,P0.01),使G2/M期和S期细胞均明显减少,G0/G1期增多(P0.05).提示牛膝多糖结合耐力训练增强了大鼠在肝脏部分切除手术后的运动能力,逆转了耐力训练对骨髓细胞增殖的抑制作用.     

葫芦素E对人外周血单个核细胞体外活化及细胞因子表达的影响

目的:分析葫芦素E(Cuc E)对二丁酸佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激的人外周血单个核细胞(PBMC)活化及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制.方法:利用流式细胞术分析人外周血PBMC活化抗原CD69和CD25表达,用流式微球陈列检测白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)表达的变化.结果:Cuc E能明显抑制PDB和Ion刺激引起的CD3+T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达;同时,Cuc E以剂量依赖方式抑制PDB和Ion诱导的IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达.结论:Cuc E对人外周血CD3+T细胞的活化具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应.     

苄嘧磺隆对稻田土壤微生物及酶活性的影响

土壤微生物及酶活性是描述土壤质量的重要生物学参数.在实验室控制条件下,研究了0、5、20、50 mg/kg苄嘧磺隆对土壤中细菌、放线菌和真菌数量及蔗糖酶、脲酶活性的影响.结果 表明:苄嘧磺隆对细菌、放线菌和真菌的生长均有抑制作用,且和苄嘧磺隆浓度呈显著正相关(P < 0.05).苄嘧磺隆对蔗糖酶表现出先抑制再恢复的效应,抑制效应和苄嘧磺隆的浓度呈极显著正相关(P < 0.01);而对脲酶活性表现出抑制、恢复再抑制的效应,抑制效应和苄嘧磺隆的浓度呈显著正相关(P < 0.05).     

山奈酚抑制人胆囊癌细胞增殖及其对mTORC1通路的影响

目的:探讨山奈酚对人胆囊癌细胞(SGC-996细胞)增殖的影响及其机制.方法:采用浓度为0、25、50、75、100、125、150、175μmol/L的山奈酚干预SGC-996细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测SGC-996细胞的体外增殖能力;干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测P-S6K1及P-S6等哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)途径相关蛋白的表达.结果:干预24 h时,浓度为0～175μmol/L的山奈酚对SGC-996细胞增殖的抑制作用不明显;干预48 h时,浓度为75μmol/L及以上的山奈酚可明显抑制SGC-996细胞的增殖(P0.05);干预72 h时,浓度为50μmol/L的山奈酚也可显著抑制SGC-996细胞的增殖(P0.05).浓度为100μmol/L山奈酚干预48 h,可显著诱导细胞凋亡(P0.05),显著降低P-S6K1和P-S6蛋白的表达水平(P0.05).结论:在一定浓度范围内,山奈酚随浓度的增加和时间的延长而明显抑制SGC-996细胞的增殖,并诱导其凋亡,而对细胞增殖的抑制作用可能是通过影响mTORC1信号通路实现的.     

束缚浸水应激对大鼠白细胞数量的影响

探讨束缚浸水应激对大鼠外周血白细胞数量的影响．采用大鼠束缚浸水应激模型,观察大鼠束缚浸水、切断迷走神经、阿托品和酚妥拉明对白细胞数量的影响．与正常对照组相比,束缚浸水应激组白细胞、中性粒细胞以及淋巴细胞的数目显著减少（P〈0．05）;与不切断迷走神经相比,切断迷走神经组中自细胞和嗜酸性粒细胞的数目显著降低（P〈0．05）,中性粒细胞与单核细胞数目非常显著减少（P〈0．01）;与束缚浸水应激相比,注射阿托品组中,各免疫细胞数目无明显差异;注射酚妥拉明大鼠淋巴细胞显著减少（P〈0．05）,白细胞数量虽然升高,但不明显．束缚浸水应激能显著降低外周血的白细胞、中性粒细胞及淋巴细胞的数目,迷走神经和交感神经参与了束缚浸水应激过程,且可能影响免疫细胞的数目     

姜黄素对ActD/TNF-α协同诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:观察放线菌素D (ActD)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12细胞)的协同损伤作用,探讨中药单体姜黄素对这种损伤的保护作用及机制.方法:采用MTr法确定实验药物的最佳浓度;LDH法检测PC12细胞的损伤;倒置显微镜观察细胞形态变化;caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3的活性.结果:ActD/TNF-t可致PC12细胞的生存力下降(P＜0.05);细胞培养液中LDH的活性升高(P＜0.05);PC12数量减少,体积缩小,突起变短;可致PC12细胞内caspase-3的活化增强(P＜0.05).浓度为5μmol/L姜黄素可阻止ActD/TNF-α所致的细胞的生存力下降(P＜0.05);抑制ActD/TNF-α引起的细胞培养液中LDH的活性升高(P＜0.05);拮抗ActD/TNF-α引起的细胞数量减少,体积变小,突起减少变短;抑制ActD/TNF-α引起的PC12细胞内caspase-3的活化(P＜0.05).结论:姜黄素可以拮抗ActD/TNF-α协同作用引起的PC12细胞损伤,其机制可能与抑制caspase-3的活化有关.     

SDF-1α改善高糖对骨髓间充质干细胞存活及迁移能力的抑制作用与分子机制的研究

目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对高糖环境(25 mmol/L)下大鼠骨髓间充质干细胞(r MSCs)存活及迁移能力的影响及相关分子机制.方法:采用全髓贴壁法纯化培养r MSCs,通过MTT法检测细胞增殖率、Hoechst 33258染色从形态学角度观察细胞凋亡评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs存活的影响,同时通过transwell实验评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs细胞迁移能力的影响.结果:实验结果发现,与低糖培养液(5.6mmol/L)比较,高糖培养液可明显抑制r MSCs增殖、促进细胞凋亡(P0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可减轻高糖培养液对细胞增殖的抑制及诱导细胞凋亡的作用(P0.05),CXCR4受体特异性拮抗剂AMD3100(10μg/m L)虽能进一步抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,但差异无显著性(P0.05).Transwell实验发现高糖培养液可明显抑制r MSCs的迁移作用(P0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可逆转高糖培养液对细胞迁移的抑制作用(P0.05),AMD3100(10μg/m L)可进一步抑制细胞迁移,且差异有显著性(P0.05).结论:SDF-1α可能通过CXCR4受体改善高糖对骨髓间充质干细胞迁移能力的抑制,而其改善高糖对骨髓间充质干细胞存活的抑制则可能通过非CXCR4受体介导,为改善MSCs用于治疗冠心病合并糖代谢异常患者心梗后心力衰竭疗效进一步提供理论依据.     

环磷酰胺对小鼠酯酶同工酶的影响及寿胎丸的拮抗作用

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法研究了雌、雄小鼠（昆明种）7种组织的酯酶（Est）同工酶的变异,环磷酰胺（CTX）对各组织Est同工酶的影响,以及寿胎丸（FPP）的拮抗作用,结果表明：1）各种组织间Est同工酶带型差异明显,并存在一定的性别差异;2）CTX可导致小鼠Est同工酶性显著变化,并且、雄小鼠间舌、脾及肌肉组织受CTX影响的差异显著;3）本研究中CTX造成的Est同工酶变化大都体现在酶的相对量（活性）上,没有发现新酶带的出现;4）FPP对CTX对Est同工酶的影响有十分明显的拮抗作用。     

石油化工污水对小鼠子一代(F_1)及子二代(F_2)遗传毒性研究

本文研究了石油化工污水J、N及厂区自来水S对小鼠子一代(F_1)和子二代(F_2)体细胞和性细胞的遗传毒性。结果表明,亲本自由饮用四周后,F_1及F_2骨髓细胞微核频率与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),表明石化污水及该厂区自来水对F_1及F_2体细胞有明显的遗传毒性。J、N及S干扰了性周期。使F_1在正常饲养条件下性成熟期明显推迟。经过2～4个月的正常饲养F_2性周期有所恢复可见到大量精子。精子畸形串明显高于正常组。结果提示,石化污水对F_1、F_2性细胞的遗传毒性也属显著。     

流域算法对血及骨髓涂片的彩色图像分割

为了开发血及骨髓涂片中血细胞自动分类及计算机辅助诊断系统,提出 了一个彩色流域算法,以完成对有核血细胞（胞核和胞浆）的分割和识别。通过彩色空间变换,有效地利用了图像中血细胞的颜色信息及先验知识,并且为了抑制过度分割,合理地对背景、成熟红细胞及有核细胞进行了标记,在彩色梯度图像上完成了基于淹没的流域算法,其中淹没过程通过多级循环队列数据结构完成,胞核和胞浆的分割正确率分别为91.9%和88.4%,研究结果表明,该算法对彩色血细胞图像的分割是有效的,它必将提高血细胞自动分类系统的性能。     

Ex vivo expansions and transplantations of mouse bone marrow－derived hematopoietic stem／progenitor cells

To examine the effects of co-culture with bone marrow mesenchymal stem cells on expansion of hematopoietic tem/progenitor cells and the capacities of rapid neutrophil engraftment and hematopoietic reconstitution of the expanded ells, we expanded mononuclear cells (MNCs) and CD34^ /c-kit^ cells from mouse bone marrow and transplanted the expanded cells into the irradiated mice. MNCs were isolated from mouse bone marrow and CD34^ /c-kit^ cells were selected from MNCs by using MoFlo Cell Sorter. MNCs and CD34^ /c-kit^ cells were co-cultured with mouse bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) under a two-step expansion. The expanded cells were then transplanted into sublethally irradiated BDF 1 mice. Results showed that the co-culture with MSCs resulted in expansions of median total nucleated cells, CD34^ cells, GM-CFC and HPP-CFC respectively by 10.8-, 4.8-, 65.9- and 38.8-fold for the mononuclear cell culture, and respectively by 76.1-, 2.9-, 71.7- and 51.8-fold for the CD34^ /c-kit^ cell culture. The expanded cells could rapidly engraft in the sublethally irradiated mice and reconstitute their hematopoiesis. Co-cultures with MSCs in conjunction with two-step expansion increased expansions of total nucleated cells, GM-CFC and HPP-CFC, which led us to conclude MSCs may create favorable environment for expansions of hematopoietic stem/progenitor cells. The availability of increased numbers of expanded ceils by the co-culture with MSCs may result in more rapid engraftment ofneutrophils following infusion to transplant recipients.     

微囊化基质细胞对脐带血造血干/祖细胞扩增支持

将脐带血单个核细胞与包埋有兔骨髓间充质干细胞的海藻酸钙微胶珠在3种不同的培养液中进行了7d的体外静态共培养.每24h进行总有核细胞计数,在0、72和168h进行流式CD34+细胞分析以及甲基纤维素集落检验.实验结果表明:经过7d的静态共培养,在添加常规剂量造血生长因子的培养液中,总有核细胞扩增了(15±2.85)倍,CD34+细胞扩增了(5.33±0.32)倍,CFU-Cs扩增了(5.6±1.21)倍.微胶囊可以作为一种新的共培养隔离手段,微囊化兔骨髓间充质干细胞在添加适量血清或者造血生长因子组合的条件下对于脐带血造血干/祖细胞在静态下的扩增有明显的促进作用.     

三甲胺(TMA)的毒性研究

用大鼠和小鼠以霍恩法测定了三甲胺的急性经口LD50,并以蓄积系数法测定其对小鼠的K值。观察并记录了急性中毒的症状。最后,以小鼠骨髓细胞染色体畸变分析法检测了单独摄入三甲胺和同时摄入亚硝酸钠的致突性。结果是大鼠经口LD50.1236mg/kg(雌),797mg/kg雄);小鼠经口LD50.908mg/kg(雌),704mg/kg(雄)。蓄积系数K>5(指标为小鼠死亡率)。小鼠骨髓细胞染色体畸变分析阴性。     

人脐带间充质干细胞对小鼠衰老进程中骨髓细胞集落生成的影响

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对小鼠衰老进程中骨髓造血干祖细胞增殖能力的影响.方法:由足月新生儿脐带分离间充质细胞(MSC)作供体,6月龄Balb/c小鼠为受体,将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组输注MSC(5×10~5/只),每月1次,共4次;对照组输注生理盐水.干预开始后第3个月和第6个月分别比较两组的单侧股骨骨髓有核细胞计数(BMNC)、造血祖细胞集落培养(CFU-GM、CFU-E、CFU-MK)和外源性脾集落形成单位计数(CFU-S).结果:干预后第3个月时,实验组BMNC、CFU-GM和CFU-MK高于对照组,而CFU-E和CFU-S无明显差别;干预后第6个月时,实验组的上述指标均明显高于对照组,且随着衰老出现下降的速度明显慢于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论:定期输注hUC-MSC可以相对增加宿主自身造血干祖细胞的生物学活性,从而延缓小鼠造血组织的自然衰老进程.     

IgE myeloma with elevated level of serum CA125

Objective: To explore clinical and laboratory features and significance of detecting serum carbohydrate antigen 125 (CA125) in immunoglobulin E (IgE) multiple myeloma. Methods: We reported the clinical findings of a male patient with IgE myeloma and elevated level of serum CA125 and reviewed the literature. Results: Laboratory tests of this patient on admission showed extremely high serum IgE and CA125, a bone marrow aspirate revealed abnormal plasma cells (38.4% of nucleated cells: 16.4% mature and 22% atypical), and in bone marrow biopsy, immunoperoxidase staining showed positive cytoplasmic staining for IgE and κ light chain within the vast majority of plasma cells. Computed tomography (CT) bone scans indicated wedge shape change and compressive fracture of thoracic vertebrae, and emission computed tomography (ECT) discovered multiple punctiform aggregation of radiation in both cervical ribs and spine. The serum IgE and CA125 gradually decreased to normal limits after eight cycles of chemotherapy. This patient is alive well with an 18-month complete remission. Conclusion: We reported the first case of IgE myeloma with elevated level of serum CA125. To further evaluate clinical characteristics and significance of CA125 in IgE myeloma, more cases are needed.     

小鼠非清髓性单倍体相合骨髓移植模型的建立

目的建立小鼠非清髓性单倍体相合骨髓移植模型,为研究移植前诱导免疫耐受或移植后输注供者细胞促进植入提供研究平台。方法以CB6F1雌性小鼠为受鼠,移植前1 d予450 cGy全身照射（TBI）后,随机分为2组,实验组移植0 d输注C57BL/6雄性小鼠骨髓有核细胞5×107/只,对照组不予移植。然后监测受鼠造血恢复、检测供鼠性别决定基因（SRY）判断植入情况,以及外周血供者细胞尤其CD3＋细胞嵌合状态,同时观察小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生情况。结果对照组小鼠均存活,仅表现轻度aGVHD,血象移植后30 d内基本恢复正常水平。实验组小鼠SRY基因在移植后＋14 d、＋30 d、＋60 d时检测PCR结果均阳性,供鼠外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞嵌合率在移植后14 d分别为23.8%、36.9%%、19.4%;30 d分别为49.9%、53.2%、54.4%;60 d分别为67.6%、51.6%、56.9%,其中CD3＋细胞嵌合率分别为4.4%、21.2%、54.4%。结论 450 cGyTBI的非清髓性预处理方案,可以诱导受鼠免疫耐受、供者骨髓细胞植入,嵌合率处于中低水平混合嵌合状态。     

Ovulated oocytes in adult mice derive from non-circulating germ cells

Decades of research in reproductive biology have led to the generally accepted belief that in female mammals, all surviving germ cells enter meiosis at the end of fetal development and as a result, the postnatal ovary harbours a limited supply of oocytes that cannot be replenished or regenerated if lost to injury or disease. However, recent reports have challenged this view, suggesting instead that oocyte production is maintained through continual seeding of the ovary by circulating, bone-marrow-derived germ cells. To test directly the physiological relevance of circulating cells for female fertility, we established transplantation and parabiotic mouse models to assess the capacity of circulating bone marrow cells to generate ovulated oocytes, both in the steady state and after induced damage. Our studies showed no evidence that bone marrow cells, or any other normally circulating cells, contribute to the formation of mature, ovulated oocytes. Instead, cells that travelled to the ovary through the bloodstream exhibited properties characteristic of committed blood leukocytes.