不同剂量高强度聚焦超声辐照与HIFU消融VX2兔肝移植瘤量效关系的实验研究

目的探讨不同剂量高强度聚焦超声辐照与消融的量效关系。方法兔肝VX2肿瘤模型按功率不同予以首次辐照，24h后各组再予180W在相同参数下行单条直线扫描。分别于首次、再次辐照后观察靶区的变化，测量再次辐照后消融区域的长、宽、高，计算体积及相应的能效因子（EEF）。结果备纽靶组织均于单条线扫后出现消融，消融纽织的形态随首次辐照功率的增加而不规则；消融后的EEF和首次预辐照功率存在负相关关系（r=-0．941，P〈0．01）。结论研究HIFU预辐照剂量和消融效率间的关系能为HIFU治疗提供新思路和剂量参考。     

循环雌二醇及代谢物与绝经后乳腺癌的相关性

目的探讨循环雌二醇（E2）、4-羟雌二醇（4-OHE2）、2-甲氧雌二醇（2-MOE2）水平及4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇（4-OHE2：2-MOE2）比值与绝经后乳腺癌危险性的相关性。方法采用ELISA法检测绝经后34例乳腺癌、40例乳腺良性（乳腺纤维腺瘤与乳腺囊性增生病）疾病患者和20例正常对照循环雌二醇、4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇水平并计算4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值。结果乳腺癌组及乳腺良性疾病组循环2-甲氧雌二醇水平差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组低（P〈0．05）；乳腺癌组及乳腺良性疾病组4-羟雌二醇：2、甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组升高（P〈0．05）。乳腺癌Ⅰ期～Ⅲ期各期循环雌二醇、4．羟雌二醇、2-甲氧雌二醇、4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05）。4-羟雌二醇、2．甲氧雌二醇、4．羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值在乳腺癌ER（-）组与ER（＋）组间差异无统计学意义（P〉005），但ER（＋）组雌二醇水平较ER（-）组明显升高（P〈0．05）。结论2．甲氧雌二醇与绝经后乳腺疾病负相关；4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值可能预示绝经后乳腺疾病危险。     

聚焦超声辐照豚鼠慢性湿疹模型的超微结构变化

目的探讨聚焦超声辐照豚鼠慢性湿疹模型豚鼠的皮肤超微结构改变。方法豚鼠32只，以2，4-二硝基氯苯（DNCB）为抗原，小剂量多次刺激豚鼠背部皮肤制备慢性湿疹模型。随机分为辐照组3组和对照组，辐照组以频率10MHz、声功率3W的连续波直接辐照模型皮肤真皮层，3组分别于辐照后1、7和14天取材，对照组不辐照立即取材，做透射电镜观察．结果辐照前可见表皮角质层增厚明显，成纤维细胞线粒体肿胀、粗面内质网扩张，细胞间隙加大；辐照后第1天和7天可见血管内皮细胞线粒体肿胀、微吞饮小泡数量多，成纤维细胞线粒体肿胀、粗面内质网扩张，但细胞间隙变小；第14天基本恢复正常。结论聚焦超声可用于治疗湿疹，有利于微血管和胶原纤维的增生与修复，可使患处上皮细胞及真皮组织的超微结构趋于恢复正常。     

脂多糖致感染性脑水肿大鼠星形胶质细胞的活化和凋亡

目的通过观察脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）致大鼠感染性脑水肿后星形胶质细胞的凋亡、活化及iNOS表达情况，探讨在LPS致脑水肿中星形胶质细胞的作用。方法84只雄性SD大鼠，随机分为3组：空白对照纽（C组，n=12）；生理盐水对照纽（S组，n=12）；感染性水肿组（L组，n=60）。感染性脑水肿组又按颈内动脉注射脂多糖后6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组（n=12）。向颈内动脉注射脂多糖LPS150μg（0．15ml）建立大鼠感染性脑水肿模型。采用HE染色、流式细胞检测和免疫纽化染色分别观察脑组织病理改变、星形胶质细胞凋亡、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和iNOS表达情况。结果与C组和S组比较，L组大鼠星形胶质细胞胞体变大、突起增多；细胞内GFAP和iNOS表达增强，12h达高峰，除72h组，其余亚组均有统计学差异（P〈0．05）；各亚组星形胶质细胞凋亡增多（P〈0．05），24h凋亡最显著。C组和S纽比较无统计学意义（P〉0．05）。结论感染性脑水肿后星形胶质细胞凋亡增加，异常活化，分泌iNOS，参与感染性脑水肿的形成，在脑水肿的发生发展中发挥重要作用。     

早期母子隔离应激对大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨早期母子隔离应激对幼鼠学习记忆能力的影响。方法30只SD新生大鼠用于实验，实验随机分成3组，正常对照纽、母子隔离15分钟纽、母子隔离3小时纽。在生后40天，三组大鼠进行Morris水迷宫及记录海马脑片长时程增强电位（LTP）实验。结果Morris水迷宫测试，与正常组比较母子隔离3h组大鼠寻找平台需要的潜伏期延长（P〈0．05），而母子隔离15分钟组大鼠寻找平台需要的潜伏期与正常组比较则无明显变化（P〉0．05）；海马脑片长时程增强电位提示：正常对照组条件刺激（CS）前后fEPSP斜率变化率为：64．7±22．9％；母子隔离3h组为：35．3±14．2％，低于正常组（P〈0．01）；母子隔离15min组为：66．3±29．7％，与正常组比较无显著性意义（P〉0．05）。结论幼鼠生后早期过度的应激导致大鼠的学习记忆能力减弱。     

早期营养不良对SD大鼠海马AchE和ChAT表达的影响

目的探讨生命早期营养不良对21天雄性sD大鼠中枢AchE和ChAT的影响。方法从妊娠晚期到哺乳期末给予母鼠半量饲料，造成子鼠营养不良，取哺乳期末雄性子鼠脑海马组织进行测量。结果免疫组化结果示：实验组海马CA3区ChAT光密度低于对照组（P〈0．05），在CA!区无差异（P〉0．05）；而两纽间CAl和CA3区AchE光密度均无差异（P〉0．05）；RT—PCR示：实验组海马ChAT、AchEmRNA少于对照组（P〈0．05）。结论早期营养不良能导致子鼠海马及中枢胆碱能系统发育障碍，可能会影响成年后大鼠学习记忆能力。     

胰岛素信号通路PI3K／Akt对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA水平的影晌

目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）对P13K／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P13K／Akt）信号通路的激活和抑制作用，观察P13K／Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACEl）mRNA水平表达的影响。方法20只sD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组，海马立体定向注射胰岛素和P13K抑制剂渥曼青霉素。逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测P13K／Akt信号传导下游蛋白Akt以及BACEImRNA水平。结果注射胰岛素的海马P13K信号通路下游信号分子：AktmRNA表达上调（分别较空白和阴性对照组P=0．047，P=0．002），而BACElmRNA表达下调（分别较空白和阴性对照组P=0．004，P=0．01）。渥曼青霉素组的P13K下游信号分子AktmRNA表达明显被抑制（分别较空白和阴性对照组P=0．002，P=0．039），同时BACEImRNA的表达较对照组上调（分别较空白和阴性对照组P=0．039，P=0．018）。结论胰岛素信号通路P13K／AM可以调节BACEl的转录水平参与阿尔茨海默病的发病机制。     

三种方法测定碱性磷酸酶对肝疾病的诊断价值

目的研究血清碱性磷酸酶检测临床肝疾病时的方法学，提高临床诊断价值。方法收集临床不同肝疾病病人的血清，分别用3种方法测定其碱性磷酸酶的活性，并与健康对照组比较作诊断性能分析。结果各肝疾病组血清碱性磷酸酶的活性与对照组相比有极显著差异（P〈0．001）；3种方法分别测定各组之闻的血清碱性磷酸酶活性无显著性差异（P〉0．05）。2．乙基氨基乙醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、二乙醇胺3种缓冲液测定试剂盒方法测定的灵敏度分别为55．20％、47．96％、51．13％，特异度分别为100％、100％、93．75％。结论血清碱性磷酸酶可以作为各类肝病的临床诊断指标；对肝疾病血清碱性磷酸酶测定用2，乙基氨基乙醇缓冲液的试剂方法测定效果较好。     

慢性心力衰竭失代偿患者血浆β-内啡肽与脑钠肽变化的意义

目的探讨慢性心力衰竭（CHF）患者血浆β-内啡肽（β-EP）在诊断和预后中的意义。材料和方法CHF患者71例，按NY-HA心功能分级分为3组（Ⅱ一Ⅳ）。应用放射免疫法（RIA）测患者血浆β-EP浓度，采用床旁Triager BNP测定仪测定同期血浆脑钠肽（BNP）量。结果CHF各组血浆β-EP和BNP含量与对照组相比显著性升高，并随心功能分级的增加呈上升趋势（P〈0．01）。CHF组血浆β-EP与BNP呈显著性线性正相关（P〈0．01）；血浆β-EP和BNP水平与EF值及EF呈显著性线性负相关（P〈0．01）。血浆中β-内啡肽含量越高则半年内心血管事件发生率越高（P〈0．01）。结论血浆β-内啡肽和BNP的水平是诊断CHF的重要实验室指标，并可用于心功能及预后的评估。     

香烟烟雾提取物对人内皮细胞细胞色素C氧化酶活性及细胞凋亡的影响

目的探讨香烟烟雾提取物（cigarette smoking extract，CSE）对内皮细胞细胞色素C氧化酶（cytochmme Coxidase，COX）活性及凋亡的影响。方法体外培养ECV304，分别给予0％、0．5％、1％、5％CSE刺激12h，及5％CSE刺激0h、6h、12h、24h后，生化法检测COX活性；投射电镜和流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果CSE引起COX活性下降，且随着刺激浓度和时间的增加而下降（P〈0．05）；电镜示CSE干预组细胞出现明显的凋亡形态学改变；流式细胞仪结果示不同浓度CSE分别作用12h后凋亡率依次增高，除O％CSE组和0．5％CSE组间比较无统计学意义（P〉0．05），余各组间比较均有统计学意义（P〈0．05）；5％CSE作用不同时间后，随着干预时间的延长细胞凋亡率逐渐升高（P〈0．05）。结论CSE抑制内皮细胞COX活性，呈浓度和时间依赖性；CSE诱导内皮细胞凋亡，呈浓度和时间依赖性；COX活性的下降可能在CSE所致的内皮细胞凋亡中具有重要作用。     

低剂量超声预辐照对高强度聚焦超声消融兔肝VX2瘤的增效研究

目的探讨低剂量超声预辐照对高强度聚焦超声(High-intensity Focused Ultrasound,HIFU)消融兔肝VX2瘤的增效作用及其对残留肿瘤生长的影响.方法52只荷瘤免于接种后20天按随机数字表法分为低剂量超声预辐照组(A组)22只,单纯HIFU组(B组)20只,对照组(C组)10只.A组首先接受声...     

高强度聚焦超声辐照离体牛肝组织后回声与空化、沸腾的关系

目的 高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)辐照离体组织过程中焦域处空化、沸腾与回声强度的关系.方法 采用不同的声功率(50 W、100W、150 W、200 W、250W)辐照新鲜离体牛肝组织5s,辐照深度30 mm.在辐照过程中,使用热电偶组成的测温系统对焦域处的温升进行实时采集.5 MHz接收换能器和Labview软件组成的被动空化检测(passive cavitation detection,PCD)系统对焦域处空化信号进行采集,在Labview平台上对空化信号进行定性和定量分析,观察空化信号随时间的变化规律,并计算累积空化剂量.对比HIFU辐照前后的B超图像,计算焦域处的灰度差值.结果 声功率为50 W和100 W的HIFU辐照时,空化和沸腾均未发生,B超图像上未出现回声变化；声功率150W的HIFU辐照时,空化发生(1/2分谐波和宽带噪声)但无沸腾,累积空化剂量和靶区灰度差值增大,辐照后即刻出现弱回声；声功率200 W的HIFU辐照时,空化和沸腾均发生,累积空化剂量和靶区灰度差值继续增大,辐照后即刻观察到强回声出现；声功率250W的HIFU辐照时,空化和沸腾均发生,累积空化剂量和靶区灰度差值略有增大,观察到“明亮”的强回声出现.除声功率为50 W的HIFU辐照后未见凝固性坏死产生,其余各声功率组均产生了凝固性坏死.结论 空化在HIFU辐照后即刻回声的出现中有贡献,但强回声的出现来自于沸腾.     

Lumican基因对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响

目的 观察基膜聚糖(Lumican)基因过度表达对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响.方法 以携带人Lumican基因的重组慢病毒感染A549细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选法建立稳定细胞株.分别用Real-time PCR和Western blotting方法检测A549细胞组、空载体组及Lumican感染组目的基因mRNA和蛋白的表达.运用MTT法研究Lumican基因对A549细胞增殖的影响.运用Transwell法检测Lumican基因对A549细胞侵袭的影响.结果 ①各组Lumican mRNA表达差异显著(x2=21.60,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=102.86,P＜0.000 1),Lumican感染组的蛋白表达水平高于其它两组.②Lumican感染组在不同时间(1、2、3、4、5 d)OD(吸光度)值与A549细胞组和空载体组差异不显著(P＞0.05).③各组穿膜细胞数差异显著(x2=23.49,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=73.92,P＜0.001).结论 成功构建了Lumican高表达的人肺腺癌A549稳定细胞株,Lumican基因对人肺腺癌细胞的体外增殖能力无影响,但能增强人肺腺癌细胞的体外侵袭能力.     

尿毒症患者血清对内皮细胞小凹蛋白-1的影响及意义

目的体外观察尿毒症患者血液透析前后血清和健康人血清对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell, HUVECs)小凹蛋白 1(caveolin 1)表达的影响.方法取对数生长的 HUVECs,分为健康组(DMEM+健康人血清,n=8)、透前组(DMEM+尿毒症患者透前血清,n=18)、透后组(DMEM+尿毒症患者透后血清,n=18).采用 MTT法检测细胞活力,免疫组化SABC法和 Westernblot检测各组细胞内 caveolin 1蛋白的分布和含量.结果 MTT法筛选血清最佳干预时间和浓度分别为12小时、10%的血清干预浓度.与健康组比较,透前组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平明显下调(p<0.05),透后组改变不明显(p>0.05);而透后组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平较透前组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平上调(p<0.05).结论血液透析不能降低尿毒症患者动脉粥样硬化的形成的发生率,caveolin 1的变化可能是尿毒症血透患者动脉粥样硬化加速的原因之一     

Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾脏非对称性二甲基精氨酸代谢的影响

目的研究Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾脏非对称性二甲基精氨酸(ADMA)代谢的影响。方法 40只SD大鼠,随机分为正常对照组(NC组,n=8)和糖尿病模型组(32只)。糖尿病模型组成模30只,随机分为糖尿病对照组(DC组,n=8)、糖尿病假手术组(DSO组,n=8)及糖尿病手术组(DO,n=14),DO组行胃旁路术,DSO组行胃窦十二指肠离断原位吻合。检测术前、术后1、2、4、8周血胰高血糖素样肽(GLP-1)水平,测定术前、术后8周空腹血糖(FBG),肾脏ADMA、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、一氧化氮(NO)水平,一氧化氮合酶(NOS)活性;检测蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)mRNA及二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)mRNA,PRMT1蛋白表达水平,PAS染色观察肾脏组织学变化。结果随着手术时间延长,D0组GLP-1水平增加,其余各组无明显变化(P0.05),术后8周,DC和DSO组较DO组和NC组FBG、BUN、Cr、ADMA水平,PRMT1mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.05),NO、NOS、水平、DDAH1的mRNA表达明显降低(P0.05);PAS染色示DC组和DSO组肾小球基质沉积,阳性染色物增多,余无明显变化。结论 2型糖尿病肾脏组织中的ADMA升高;胃旁路术促进ADMA代谢,改善了肾功能。     

不同时点给予帕瑞昔布对妇科手术术后镇痛的影响

目的观察围术期不同时点应用帕瑞昔布对子宫切除术患者术后镇痛的不同效果。方法选择年龄25～50岁,体重45～80kg的ASA Ⅰ-Ⅱ级择期行经腹子宫切除术患者60例,分为帕瑞昔布术前组(PR组)、帕瑞昔布术后组(PO组)、对照组(CO组),每组20例。PR组在麻醉诱导前给予帕瑞昔布40 mg;PO组在关腹前30 min给予帕瑞昔布40 mg;CO组在麻醉诱导前和关腹前30min分别给予相同容积的生理盐水。分别在术后2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h进行痛觉评分,并记录各个时点曲马多的使用量、PCIA按压次数,以及出现的不良反应。结果与CO组相比,PR组和PO组术后8 h、12 h、24 h、48 h的VAS评分降低,相应时间点的曲马多用量减少(P0.05)。PR组术后24 h、48 h PCIA按压次数减少(P0.01),术后24 h镇痛满意度提高(P0.05)。PR组、PO组两组间在术后曲马多用量、PCIA按压次数、VAS评分及24 h镇痛满意度比较,差异无统计学意义。三组患者术后不良反应主要是恶心呕吐,未发现严重不良反应,三组间差异无统计学意义。结论术前或术毕时单次静脉注射帕瑞昔布40 mg,均可以减轻术后疼痛,减少曲马多的使用量,提高病人满意度,但不能减少恶心呕吐发生率。术前静脉给予帕瑞昔布未发现超前镇痛效果。     

皮质发育障碍模型鼠与正常鼠致痫的性别特点

目的 探讨X射线诱导的皮质发育障碍(DCDs)模型鼠与正常对照鼠致痫的性别特点.方法 将8只SD孕鼠完全随机分为正常对照组和实验组,实验组于X线直线加速器照射制作皮质发育障碍模型,正常对照组不做任何处理,仔鼠成年后按性别分成4组.分别给正常对照组雄雌性及实验组雄雌性仔鼠腹腔注射氯化锂-匹洛卡品,观察产生癫痫的潜伏期、注射总剂量、癫痫发生率.结果 腹腔注射氯化锂-匹洛卡品后DCDs雄鼠较雌鼠发生癫痫潜伏期明显缩短(P＜0.01),注射总剂量显著减少(P＜0.01),癫痫发生率高(P＜0.05).正常组雄鼠较雌鼠发生癫痫潜伏期缩短(P＜0.05)、注射总剂量减少(P＜0.05),癫痫发生率未见明显差异.结论 DCDs及正常鼠中雄性鼠较雌性鼠易感性高,更适于造模.