重症急性胰腺炎病人外周血单个核细胞线粒体DNA拷贝数的意义

目的探讨重症急性胰腺炎患者外周血单个核细胞线粒体DNA拷贝数与患者病情严重程度、预后的相关性。方法分离研究对象（重症急性胰腺炎患者34名，健康对照组17名）外周血单个核细胞，采用荧光实时定量PCR检测各组PBMC线粒体DNA相对舍量，其与严重程度、预后的相关性。结果重症急性胰腺炎患者线粒体DNA含量较健康对照组明显降低（P〈0．05）。患者单个核细胞线粒体DNA拷贝教与APACHEⅡ评分呈负相关（r=-0．425）其中并发症组mtDNA拷贝数显著低于无并发症组（P〈0．05）。结论重症急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中线粒体DNA含量显著下降，与患者APACHEⅡ评分呈负相关，且低水平的线粒体DNA拷贝数提示并发症发生率的升高，因此，线粒体DNA拷贝数可作为潜在评估患者病情危重程度及预后的指标，这一发现值得进一步大型，前瞻性的研究。     

检测血浆纤维蛋白原含量对临床诊疗冠心病的指导意义

目的探讨血浆纤维蛋白原含量变化与冠状动脉病变严重程度的关系。方法选择AMI患者20例（AMI组），48小时内劳力型心绞痛加剧和出现自发性心绞痛患者24例（UAP），典型心绞痛发作，其性质在1～3个月内无法改变的SAP患者18例（SAP组）．健康对照20例，采用美国库尔特公司的ACL-9000全自动血凝分析仪，测定其血浆，进行比较分析。结果AMI组和UAP组患者的血浆纤维蛋白原含量均高于SAP组和健康对照组（P〈0.05）。但AMI组与UAP组患者之间血浆纤维蛋白原含量无显著性差异（P〉0．05）。结论血浆纤维蛋白原含量与冠状动脉病变严重程度相关，急性冠状动脉综合征时体内处于高凝状态，抗凝和溶栓治疗有助于降低冠状动脉实践的危险性。     

COX-2与CYPlBl在人乳腺癌中的表达及意义

目的探讨人乳腺癌组织中COX-2和CYPlBl的表达规律及与临床病理特征的关系，对认识其在乳腺癌发生发展中的作用奠定初步病理学基础。方法应用免疫组织化学方法检测42例乳腺癌组织中COX-2和CYPlBl的表达情况，结合临床病理指标进行研究分析。结果在乳腺癌中COX-2和CYPIBl表达阳性率分别为78．6％和73．8％。COX-2的阳性表达与乳腺癌淋巴结转移、组织学分级显著相关（P〈0．05）；CYPlBI的阳性表达与组织学分级、ER表达显著相关（P〈0．05）。乳腺癌COX-2与CYPlBI表达呈正相关（r=0．481，P〈0．01）。结论人乳腺癌组织存在COX-2与CYPlBl的共同阳性表达，COX-2可能促进CYPlBl表达，共同作用参与乳腺癌的发生发展。     

聚焦超声辐照右足三里对痛阈的影响

目的观察聚焦超声辐照正常人右足三里对痛闽的影响。方法40例正常健康人，随机分成聚焦超声辐照组和安慰剂对照组，各20例。聚焦超声辐照右足三里30min，用Electronic Von Frey测定机械痛阈。在聚焦超声辐照前和开始辐照后10、20、30、40、50、60min记录机械痛阈。安慰剂对照组同时进行对比测量。结果超声辐照组，辐照前后左右两侧痛阈值分别有显著性差异（P〈0.01）；对照组，辐照前后左右两侧痛阈值均无统计学意义（左侧P=0．904，右侧P=0．274）。超声辐照组相邻时间水平有显著差异（P〈0．01），对照组相邻时间水平无显著差异；左右两侧不同部位间无显著性差异（P=0．176）；时间与部位无交互效应（P=0．411）。结论聚焦超声辐照单侧足三里后痛阈明显升高，从而具有一定的镇痛作用。     

金丝桃素抑制慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达

目的观察金丝桃素对慢性病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达的影响。方法Balb／C小鼠多次接种心肌柯萨奇段病毒复制慢性VMC模型，首次感染病毒45天后将存活小鼠分为模型组、金丝桃素组及氯沙坦组，同时设正常对照组．分别给予相应药物干预30天，采用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡及免疫组化方法检测Fas／FasL蛋白表达。结果模型组心肌细胞凋亡率较正常组显著增加（P〈0．05），金丝桃素组和氯沙坦组凋亡率较模型组显著降低（P〈0．05）。模型组Fas／FasL蛋白表达较正常组显著增多（P〈0．01），金丝桃素组和氯沙坦组较模型组显著降低（P〈0．01）。结论金丝桃素保护心肌细胞与抑制VMC心肌细胞的凋亡．下调Fas／FasL蛋白表达有关。     

早期母子隔离应激对大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨早期母子隔离应激对幼鼠学习记忆能力的影响。方法30只SD新生大鼠用于实验，实验随机分成3组，正常对照纽、母子隔离15分钟纽、母子隔离3小时纽。在生后40天，三组大鼠进行Morris水迷宫及记录海马脑片长时程增强电位（LTP）实验。结果Morris水迷宫测试，与正常组比较母子隔离3h组大鼠寻找平台需要的潜伏期延长（P〈0．05），而母子隔离15分钟组大鼠寻找平台需要的潜伏期与正常组比较则无明显变化（P〉0．05）；海马脑片长时程增强电位提示：正常对照组条件刺激（CS）前后fEPSP斜率变化率为：64．7±22．9％；母子隔离3h组为：35．3±14．2％，低于正常组（P〈0．01）；母子隔离15min组为：66．3±29．7％，与正常组比较无显著性意义（P〉0．05）。结论幼鼠生后早期过度的应激导致大鼠的学习记忆能力减弱。     

难治性癫痫患者脑组织中SCG10的表达及其意义

目的了解难治性癫痫患者脑组织中SCG10和MAPK的表达，探讨其在难治性癫痫发生、发展中的作用。方法按随机化原则，在我们建立的难治性癫痫患者术后脑组织库中抽取36例患者的脑组织，用免疫组织化学分别检测SCG10和MAPK的表迭，与16例对照组进行比较。并采用免疫荧光双标的方法，检测SCG10和MAPK在病例组中的表达情况。结果免疫组化检测到SCG10在实验组表达（0．4674±0．0258），高于对照（0．3405±0．0207），两组比较有显著性差异（P〈0．05）；MAPK在实验组表达（0．4217±0．0141），同样也高于对照组（0．3189±0．1422，P〈0．05）。免疫荧光双标法，显示SCG10和MAPK表达在同一细胞上。讨论SCG10与MAPK在难治性癫痫患者的脑组织中表达增加，以及它们的共同表达，提示两者的相互作用可能是难治性癫痫发生发展中的一个重要因素。     

胰岛素信号通路PI3K／Akt对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA水平的影晌

目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）对P13K／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P13K／Akt）信号通路的激活和抑制作用，观察P13K／Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACEl）mRNA水平表达的影响。方法20只sD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组，海马立体定向注射胰岛素和P13K抑制剂渥曼青霉素。逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测P13K／Akt信号传导下游蛋白Akt以及BACEImRNA水平。结果注射胰岛素的海马P13K信号通路下游信号分子：AktmRNA表达上调（分别较空白和阴性对照组P=0．047，P=0．002），而BACElmRNA表达下调（分别较空白和阴性对照组P=0．004，P=0．01）。渥曼青霉素组的P13K下游信号分子AktmRNA表达明显被抑制（分别较空白和阴性对照组P=0．002，P=0．039），同时BACEImRNA的表达较对照组上调（分别较空白和阴性对照组P=0．039，P=0．018）。结论胰岛素信号通路P13K／AM可以调节BACEl的转录水平参与阿尔茨海默病的发病机制。     

循环雌二醇及代谢物与绝经后乳腺癌的相关性

目的探讨循环雌二醇（E2）、4-羟雌二醇（4-OHE2）、2-甲氧雌二醇（2-MOE2）水平及4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇（4-OHE2：2-MOE2）比值与绝经后乳腺癌危险性的相关性。方法采用ELISA法检测绝经后34例乳腺癌、40例乳腺良性（乳腺纤维腺瘤与乳腺囊性增生病）疾病患者和20例正常对照循环雌二醇、4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇水平并计算4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值。结果乳腺癌组及乳腺良性疾病组循环2-甲氧雌二醇水平差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组低（P〈0．05）；乳腺癌组及乳腺良性疾病组4-羟雌二醇：2、甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组升高（P〈0．05）。乳腺癌Ⅰ期～Ⅲ期各期循环雌二醇、4．羟雌二醇、2-甲氧雌二醇、4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05）。4-羟雌二醇、2．甲氧雌二醇、4．羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值在乳腺癌ER（-）组与ER（＋）组间差异无统计学意义（P〉005），但ER（＋）组雌二醇水平较ER（-）组明显升高（P〈0．05）。结论2．甲氧雌二醇与绝经后乳腺疾病负相关；4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值可能预示绝经后乳腺疾病危险。     

外源性H2S通过调节β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达对PC12细胞APP／Aβ代谢的影响

目的观察外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）的调节作用，进而探讨其对淀粉样前体蛋白／β-位淀粉样蛋白代谢途径的影响。方法用硫氢化钠作外源性H2s供体，实验设空白对照组、NaHs50μmol／L组、NaHS100μmol／L组和NariS200μmol／L组，按分组浓度处理PC12细胞24h后，RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1 mRNA及蛋白表达，并用Western blot法继而检测APP代谢过程中关键蛋白APP、C99、C83表达变化，EusA法检测细胞培养液中AB40和AB42水平。结果NaHS在实验浓度范围内从基因与蛋白两个水平上呈剂量依赖性下调BACE1表达，并下调C99、Ap40和Ap42蛋白表达，上调C83蛋白，各NaHS组分别与对照组比较，差别均有统计学意义（P〈0．05），而对APP蛋白表达没有影响，各组间比较差别无显著性（P〉0．05）。结论外源性H2s具有通过调节PC12细胞BACE1表达下调APP／Aβ代谢的作用。     

冠心病患者无症状性心肌缺血的动态心电图探讨

目的 探讨冠心病（CHD）患者无症状性心肌缺血（SMI）的动态心电图（DCG）的临床特点. 方法 对216例CHD患者应用12导联DCG进行24 h监测. 结果 192例有1930阵次心肌缺血发作,其中SMI占1650阵次（85.4%）.SMI压低次数及持续时间与有症状性心肌缺血差异有显著性（P＜0.01）.白天（6：00～18：00）发作频率是夜间（18：00～24：00）的2.40倍,发作高峰为6：00～12：00,0：00～6：00最少,SMI ST压低过程中伴有明显的心率上升,发作前和发作时心率比较有显著差异（P＜0.01）. 结论 SMI检出率远高于有症状心肌缺血,24小时动态心电图对无症状性心肌缺血的预测具有重要价值.     

FGFR1、FGFR3和Pokemon在膀胱癌中的表达及相关性研究

目的通过观察FGFR1、FGFR3和Pokemon在膀胱癌组织的表达情况,探讨它们在膀胱癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化检测296例膀胱癌和48例正常膀胱组织中FGFR1、FGFR3和Pokemon蛋白的表达情况。结果 1)FGFR1在膀胱癌不同病理分期、分级及初发复发的表达率为:Ta-T1期7.5%,T2-T4期18.1%(p0.01);低级别2.8%,低-高级别11.9%(p0.05),高级别14.3%的(p0.01);初发表达6.8%,复发表达率17.1%(p0.01)。2)FGFR3在膀胱癌不同病理分期、分级的表达率为:Ta-T1期68.1%,T2-T4期35.0%(p0.01));低级别75.0%,低-高级别60.3%(p0.05),高级别44.9%(p0.01)。3)Pokemon在膀胱癌不同病理分级及初发复发的表达率为:低级别47.2%,低-高级别66.7%(p0.01),高级别80.6%(p0.01);初发59.2%,复发80.0%(p0.01)。结论 FGFR1在膀胱癌中的表达与病理分级、分期成正相关,复发表达明显高于初发;Pokemon在膀胱尿路上皮癌中的表达与病理分级成正相关,复发表达也明显高于初发,表明它们可能主要参与膀胱癌发展及转移等过程。FGFR3在膀胱癌中的表达与病理分级、分期成负相关,表明它可能在膀胱癌发展早期及低级别肿瘤发展中发挥着重要作用。     

儿茶素对晚期糖基化终末产物诱导的内皮细胞凋亡的干预作用

目的探讨儿茶素对晚期糖基化终末产物（AGEs）诱导内皮细胞凋亡的干预作用。方法糖孵育法制备晚期糖基化终末产物，分离肾血管内皮细胞，将内皮细胞分成空白对照组、AGE组、浓度分别为10、15、20μg／ml的儿茶素组共五组。实验末，采用AlamarBlue还原法测定同内皮细胞增生活力，TUNEL法测定细胞凋亡率，生化法测定培养上清中·OH、MDA浓度，RT-PCR测定Bcl-2mRNA表达，Western-Blotting测定Bcl-2蛋白活性。结果与对照组相比，AGE组内皮细胞增生活性、Bcl-2基因与蛋白活性显著降低（P均〈0．01）；凋亡率、·OH与MDA浓度显著增加（P均〈0．01）；与AGE组相比，儿茶素各浓度组内皮细胞增生活力与Bcl-2基因与蛋白活性表达增高，凋亡率、·OH与MDA浓度降低；儿茶素各剂量组之间呈浓度梯度效应。结论儿茶素可降低AGEs引起的血管内皮细胞凋亡，其机制可能是通过有效清除活性氧自由基、上调Bcl-2mRNA与活性蛋白表达，阻断内皮细胞内过氧化物的堆积二种途径实现的。     

尿毒症患者血清对内皮细胞小凹蛋白-1的影响及意义

目的体外观察尿毒症患者血液透析前后血清和健康人血清对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell, HUVECs)小凹蛋白 1(caveolin 1)表达的影响.方法取对数生长的 HUVECs,分为健康组(DMEM+健康人血清,n=8)、透前组(DMEM+尿毒症患者透前血清,n=18)、透后组(DMEM+尿毒症患者透后血清,n=18).采用 MTT法检测细胞活力,免疫组化SABC法和 Westernblot检测各组细胞内 caveolin 1蛋白的分布和含量.结果 MTT法筛选血清最佳干预时间和浓度分别为12小时、10%的血清干预浓度.与健康组比较,透前组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平明显下调(p<0.05),透后组改变不明显(p>0.05);而透后组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平较透前组细胞内 caveolin 1的蛋白表达水平上调(p<0.05).结论血液透析不能降低尿毒症患者动脉粥样硬化的形成的发生率,caveolin 1的变化可能是尿毒症血透患者动脉粥样硬化加速的原因之一     

依那普利对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及分泌TGF-1β、LN的影响

目的 观察依那普利（Ena）对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖及分泌转化生长因子-β1（TGF-β1）和层粘连蛋白（LN）的影响.方法 大鼠GMCs分别培养于正常浓度葡萄糖（NG,5.5mmol/L）、高浓度葡萄糖（HG,20mmol/L）及高糖和不同浓度（10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L）的Ena中,同时设空白对照.分别采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫法（RIA）检测不同时间（24 h、48 h、72 h）GMCs增殖情况和细胞培养上清液中TGF-β1、LN的含量.结果 与空白对照组比较,正常糖组和高糖组GMCs增殖增加,TGF-β1、LN分泌增多（P〈0.001）,高糖组更明显（P〈0.001）.与高糖组比较,高、中、低浓度的Ena干预均可逆转上述变化.且在一定浓度范围内,Ena无明显细胞毒性.结论 高糖可致GMCs增殖和TGF-β1、LN分泌增多,Ena可抑制高糖诱导的GMCs增殖与分泌TGF-β1、LN,这可能是其减少细胞外基质（ECM）积聚的机理之一,并有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化（GS）的进展.     

脂联素对1型糖尿病小鼠视网膜节细胞和血管的影响

目的:研究脂联素对1型糖尿病小鼠视网膜节细胞和血管的影响.方法:使用玻璃体腔内注射脂联素,腹腔内注射链脲佐菌素(STZ),免疫荧光,非侵入性眼压测量等实验方法,对1型糖尿病的视网膜节细胞数量的改变和血管形态的变化做研究.结果:1型糖尿病鼠脂联素组的眼压比1型糖尿病鼠对照组明显低(p＜0.01),而与正常鼠脂联素组相比明显升高(p＜0.01).与1型糖尿病鼠对照组相比,1型糖尿病鼠脂联素组的视网膜血管管径更粗一点.Brn3a+视网膜神经节细胞在1型糖尿病鼠脂联素组明显比1型糖尿病鼠对照组要多(p＜0.05),而与正常鼠脂联素组比较明显低一些(p＜0.01).结论:脂联素可明显改善1型糖尿病小鼠视网膜神经节细胞数量的下降,并可延缓视网膜血管形态的变化.APN有成为一种治疗糖尿病性视网膜病变的潜在可能性.     

胃癌组织中EGFL7的表达及其临床病理特征的关系研究

目的：探讨胃癌组织中表皮生长因子样结构域（EGFL7）的表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学SP法分别检测45例胃癌组织中EGFL7的表达水平及微血管密度（MVD，CD34标记），分析EGFL7的表达与MVD及胃癌临床病理特征之间的关系。结果：EGFL7的表达在有淋巴结转移组中的阳性率（84．6％）高于无淋巴结转移组（57．9％），在浸润浆膜层组中的阳性率（84．4％）高于未浸润浆膜层组（46．2％）。胃癌组织中EGFL7的表达与淋巴结转移和浸润程度呈正相关（P〈0．05），但与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度无关（P〉0．05）。胃腺癌低分化纽MVD（37．62±10．42）高于高分化组（27．91±9．93）和中分化组（28．40±9．18）；浸润至浆膜层组MVD（34．25±10．43）高于未至浆膜层组（26．69±8．66）；有淋巴结转移组MVD（33．00±9．99）高于无淋巴结转移组（25．94±9．34）。癌组织中MVD值与分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），但与年龄、性别无关（P〉0．05）。在EGFL7表达阳性的肿瘤纽织中MVD均值为33．80±10．56，高于EGFL7表达阴性的肿瘤组织中MVD均值26．004-7．21（P〈0．05），采用Pearson积差相关系数进行分析，发现MVD值与EGFL7的表达成正相关（r=0．313，P〈0．05）。结论：EGFL7的高表达可能促进了胃癌的浸润和转移，其机制可能与促进胃癌组织中的血管新生有关。     

Lumican基因对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响

目的 观察基膜聚糖(Lumican)基因过度表达对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响.方法 以携带人Lumican基因的重组慢病毒感染A549细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选法建立稳定细胞株.分别用Real-time PCR和Western blotting方法检测A549细胞组、空载体组及Lumican感染组目的基因mRNA和蛋白的表达.运用MTT法研究Lumican基因对A549细胞增殖的影响.运用Transwell法检测Lumican基因对A549细胞侵袭的影响.结果 ①各组Lumican mRNA表达差异显著(x2=21.60,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=102.86,P＜0.000 1),Lumican感染组的蛋白表达水平高于其它两组.②Lumican感染组在不同时间(1、2、3、4、5 d)OD(吸光度)值与A549细胞组和空载体组差异不显著(P＞0.05).③各组穿膜细胞数差异显著(x2=23.49,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=73.92,P＜0.001).结论 成功构建了Lumican高表达的人肺腺癌A549稳定细胞株,Lumican基因对人肺腺癌细胞的体外增殖能力无影响,但能增强人肺腺癌细胞的体外侵袭能力.