Zn~(2+)对植物叶缘体和光系统Ⅱ中钙调素含量的影响

用含不同浓度Zn~(+2)的Hoagland完全液培养白兰瓜幼苗,采用酶联免疫法和磷酸二酯酶法分别测试了白兰瓜幼苗叶绿体和PSⅡ(光系统Ⅱ)颗粒中总钙调素(Calmodulin简称CaM)含量和活性钙调素含量。在PSⅡ颗粒中测得有钙调素的存在,并测得叶绿体和PSⅡ颗粒中总钙调素含量随着Zn~(+2)浓度的增加而下降,开始时活性钙调素含量增加,至Zn~(+2)浓度超过2.0mmol/L以后才逐渐下降。     

钙调素作用机理新探讨

0前言由于人们对钙及其生理作用的深入研究，导致了钙调素（CaM）的发现．CaM是目前研究较多的一类钙调解蛋白，其特点是具有EF手和CD手结构，Ca’”可与其发生可逆性结合，所形成的络合物具有特定的生理活性．本文仅对CaM的作用机理作一探讨．1钙调素的作用机理CaM作用机理的要点是：Ca2＋与CaM结合而激活CaM，活化了的Ca2＋－CaM再与多种酶结合，从而调节酶的活力，最终引起生理生化反应[1]．整个过程可以分为3个连续的步骤：（1）Ca2＋与CaM的钙结合区结合．CaM有4个钙结合区，可能有16种结合方式，这与CaM的多种功能有关．…     

Fn和RGD对人支气管上皮细胞损伤修复的影响

为探讨纤维连接蛋白(Fn)、精-甘-天冬氨酸肽(RGD)对人支气管上皮细胞(BEC)损伤修复的影响,用永生化人BEC进行培养,将培养细胞分为7组:1.对照组;2.臭氧(O3)应激组;3.O3 EGF组;4.O3 Fn组;5.O3 RGD组;6.O3 Fn 钙调素抑制剂W7组;7.O3 Fn 蛋白酪氨酸激酶抑制剂Genestin组,分别测定各组的损伤修复指数(RI),利用计算机图像分析软件对数据进行处理和比较.结果发现O3应激组的损伤修复指数显著低于对照组(P<0.01),O3 EGF组、O3 Fn组和O3 RGD组损伤修复指数则显著高于O3应激组(P<0.01),Fn的促损伤修复效应可被W7和Genestin阻断(P<0.01).该实验表明EGF,Fn和RGD对BEC的损伤后修复有保护作用,Fn的作用机制可能与酪氨酸磷酸化途径和钙调素途径有关.     

330弱碱性树脂固定化漆酶的酶学性质研究

为进一步拓展漆酶在污染物处理领域中的应用,通过330弱碱性树脂作为固定化载体,用戊二醛交联固定化漆酶,并对树脂固定化漆酶的酶学性质进行研究,研究结果表明:固定化漆酶在60℃体现了最佳活性,对温度的承受能力有所提高;固定化漆酶的最适pH在pH=3处,更耐酸碱性;固定化漆酶在放置30 d后,相对于初始酶活仍然保持了50%左右的酶活,循环使用10次后,相对酶活仍能保持初始酶活的45%左右。     

固定化漆酶对染料脱色的研究

对制备的游离漆酶和固定化漆酶进行模拟靛蓝染料废水的处理。结果表明:游离漆酶处理的废水的脱色率达到了90%;经过5批次连续试验,固定化漆酶酶活保留80%,废水脱色率达到60%。由此说明,游离漆酶经过固定化延长了漆酶的使用寿命,扩大了漆酶的使用范围,为今后的实际应用处理染料废水奠定了基础。     

腈水合酶蛋白质纯化的研究进展

从产腈水合酶纯化的意义,腈水合酶的纯化步骤、策略、纯化产量和倍数以及RhodococcusruberCGMCC3090腈水合酶纯化的应用价值等,综述了腈水合酶纯化方面的研究进展.     

60CoΥ——射线对水稻芽中酯酶等同工酶的影响

本试验用聚丙烯酰胺盘状凝胶电永法研究了在~(60)Coγ—射线作用下,水稻芽中酯酶等同工酶的变化情况。通过酶谱技术显示的谱带图样看出:与对照比较,处理的水稻芽中酯酶同工酶,缺少酶带3,增多酶带8′,各酶带活力降低,处理的水稻芽中过氧化物酶同工酶,缺少酶带4,增多酶带4′,各主要酶带活力增高,细胞色素氧化酶同工酶处理与对照相同。结果表明,水稻芽中酯酶,过氧化物酶同工酶的变化与~(60)C0γ—射线作用有密切关系,而此二酶可衡量遗传效应。因此,分析同工酶的变化规律,有可能为预测辐射的遗传效应,探讨辐射的作用机理提供依据。     

调控深层发酵条件提高果胶酶产率的研究

对利用高产果胶酶突变株G5512和500L发酵罐中调控深层发酵条件提高酶产率进行了试验研究,结果表明,通过分批补料对酶产率有提高,以高酯果胶为底物的酶产率提高7.0%,以低酯果胶为底物酶产率提高23.5%,调节发酵液pH在3.5～4.0之间,以高酯果胶为底物酶产率提高9.7%,以低酯果胶为底物酶产率提高40.9%,添加0.1%吐温80对酶产率没有影响。     

番茄过氧化物酶和过氧化物酶同工酶的活性测定

实验表明通过对朱展才报道的过氧化物酶活性测定方法的改进,可用作过氧化物酶同工酶的活性测定,为过氧化物酶同工酶的研究提供一个定量的方法。在酶谱分析中,用酶谱带的染色深浅表示酶活性高低是可行的。     

壳聚糖酶的理化性质初步研究

对壳聚糖酶理化性质进行初步实验研究,通过测定不同条件下酶的活力来研究酶的性质.实验结果表明,所用菌种所产壳聚糖酶最适反应温度和pH值分别为50℃和5.6,NH+对该酶有明显的促进作用,而Na+,K+,Mg2+,Cu2+,Ag+,NH+,Mn2+对该酶有一定的抑制作用.Fe3+,Ca2+对酶的抵制作用最明显.     

黑龙江省常见葡萄种和品种的过氧化物酶同工酶分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对黑龙江省常见的葡萄种和栽培品种进行过氧化物酶同工酶分析揭示:不同葡萄种中的九个品种,在三个生育期叶片中共显示23条酶谱带,按其电泳相对迁移率的集中程度由快至慢可分为A、B、C、D四区。不同生育时期酶谱有较大变化,不同种的葡萄品种酶谱差异显著,B区和C区酶谱带的数目和表达先后与不同种有明显的相关性。杂交种反映双亲所在种的酶谱带的特点,并有新酶带产生。     

高产超氧化物歧化梅芽孢杆菌C328菌株产酶培养基的研究

研究了芽孢杆菌(Bacillus cereus)C328 SOD(Superoxide dismutase)生产菌株在发酵培养过程中培养基种类、碳氮比以及补充碳氮源对产酶的影响.结果表明,C328菌株发酵产酶率与培养基种类、复配碳氮比有密切关系.培养基浓度为10%时,对菌株生长及产酶有明显的促进作用,超过13%则抑制SOD酶产生.筛选出最佳产酶发酵农副产品培养基和优化配比组合产酶培养基.     

鹰嘴豆β—半乳糖苷酶的提取及其氨基酸组成研究

从鹰嘴豆种子中分离到３种β－半乳糖苷酶（酶Ｉ，酶Ⅱ和酶Ⅲ）。将酶Ｉ和酶Ⅱ纯化后，其比活力分别提高了１９倍和４８倍，测得它们的表现分子量分别为２４０００和５８０００，酶Ⅰ含１８种氨基酸，１７１个氨基酸残基；酶Ⅱ含１６种氨基酸，３０５个氨基酸残基；后者的组氨酸（Ｈｉｓ）和脯氨酸（Ｐｒｏ）含量为０。     

几丁质酶基因在转基因烟草中表达效率的检测

采用氨基葡萄糖法检测转基因烟草植株叶片几丁质酶活力，结果表明几丁质酶基因在转基因植株中酶活力增强，与β—1,3-葡聚糖酶基因的协同作用下酶活性最强，几丁质酶活力的测定对外源基因表达效率的检测是可行的．     

花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明：该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

米曲氨基酰化酶的纯化及固定化酶法拆分D,L—丙氨酸

利用硫酸铵分级与双水相萃取结合的方法从米曲霉中提取米曲氨基酰化酶,并将其固定在ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５上,用于拆分Ｄ,Ｌ－丙氨酸,并对该酶及固定化酶的酶学性质进行研究。     

肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶，我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181，经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌，正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181)．该菌适宜的培养温度为28℃；增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶；肌酐的存在对产酶至关重要，推测为酶基因开放的诱导剂；蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源；在有肌酐和蛋白胨存在时，添加葡萄糖能促进细菌细胞生长，但产酶量降低；镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需．优化产酶条件后，肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145．00U／g湿菌、75．77U／g湿菌和21．30U／g湿菌．该菌不仅具有用于发酵生产的潜力，也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础。     

番茄不同生育期及不同部位的酯酶、谷草转氨酶同工酶分析

本文分析了番茄芽期至采收末期的酯酶及谷草转氨酶酶谱。结果表明:这二种同工酶不同生育期及不同部位各自显示的酶谱不同。整个生育期16次取材分析。酯酶同工酶可显示26条酶带。谷草转氨酶同工酶可显示7条酶带。不同品种同一生育期酶谱也存在差异。在植株生长发育转化阶段、酶谱变化更大。同一植株幼嫩部位比衰老部位酶带多,活性强。用同工酶探讨杂种优势,酯酶取材以芽期为好。谷草转氨酶同工酶与番茄杂种优势未见到规律性联系。     

高效制备双元细菌人工染色体(BIBAC)载体DNA的研究

高质量的BIBAC载体DNA的制备受到酶切、脱磷等许多因素的影响,是构建BIBAC文库的关键步骤之一.以BIBAC2载体为材料,对其进行了BamHI限制性酶切和CIAP脱磷,制备了可用于进一步构建文库的线性载体.在此基础上确定了适宜的酶量、酶切时间、脱磷酶的用量及失活等步骤的反应条件.     

高产超氧化物歧化酶芽孢杆菌C328菌株产酶培养基的研究

研究了芽孢杆菌(Bacillus cereus)C328 SOD(Superoxide dismutase)生产菌株在发酵培养过程中培养基种类、碳氮比以及补充碳氮源对产酶的影响．结果表明，C328菌株发酵产酶率与培养基种类、复配碳氮比有密切关系,培养基浓度为10％时，对菌株生长及产酶有明显的促进作用，超过13％则抑制SOD酶产生．筛选出最佳产酶发酵农副产品培养基和优化配比组合产酶培养基。