结核分枝杆菌不同药物敏感性检测方法的比较

采用比例法和绝对浓度法检测了56株结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的敏感性,探讨了比例法和绝对浓度法检测结核分枝杆菌耐药性的一致性和可比性。检测结果显示:2种方法检出的耐药率差异无显著性;用2种方法进行结核分枝杆菌耐药性测定的一致性较高,采用国际通用的比例法,依然具有与我国传统采用绝对浓度法获得的资料数据的可比性。     

Xpert MTB/RIF检测技术用于肺结核病诊断的价值研究

研究Xpert MTB/RIF检测技术用于肺结核病诊断的价值。选择2019年1月～2020年2月期间于景泰县人民医院就诊的疑似肺结核病患者178例作为本次研究对象,收集痰标本,均应用涂片镜检法、固体培养法、Xpert MTB/RIF检测技术、比例法药敏试验进行检测,以固体培养结果为金标准,比较不同检测方法结合分枝杆菌检出情况;以比例法药敏试验结果为金标准评价Xpert MTB/RIF检测技术检测利福平耐药性情况。(1)178份痰标本均采用不同检测方法实施检测,涂片镜检法:阳性痰标本共48份,阳性率26.97%;固体培养法:阳性痰标本共72份,阳性率40.45%;Xpert MTB/RIF检测技术:阳性痰标本共98份,阳性率55.06%。固体培养法痰标本阳性检出率高于涂片镜检法(χ2=7.241,P=0.007);Xpert MTB/RIF检测技术痰标本阳性检出率高于涂片镜检法(χ2=29.028,P=0.000);Xpert MTB/RIF检测技术痰标本阳性检出率高于固体培养法(χ2=7.611,P=0.006)。(2)以固体培养结果为金标准,Xpert MTB/RIF检测技术检测的灵敏度94.44%(68/72)明显高于涂片镜检55.56%(40/72),比较差异有统计学意义(χ2=29.037,P=0.000);Xpert MTB/RIF检测技术检测的Kappa值明显优于涂片镜检。(3)Xpert MTB/RIF检测技术检测利福平耐药率20.59%(14/68)与比例法药敏试验耐药率22.06%(15/68)比较,差异无统计学意义(χ2=29.037,P=0.000);Xpert MTB/RIF检测技术与比例法药敏试验符合率98.53%(67/68)。Xpert MTB/RIF检测技术适用于肺结核病诊断。     

泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核杆菌耐药性的影响研究

为探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核杆菌耐药性的影响及其机制。采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核杆菌(对照组)与4种基因(Pup基因、Dop基因、PafA基因、Mpa基因)过表达的单耐异烟肼结核杆菌菌株和4种相同基因缺失突变的单耐异烟肼结核杆菌菌株异烟肼最低抑菌浓度(MIC)值的差异;比较在应用外排泵抑制剂后,单耐异烟肼结核杆菌(对照组)与4种基因(Pup基因、Dop基因、PafA基因、Mpa基因)过表达的单耐异烟肼结核杆菌菌株和4种相同基因缺失突变的单耐异烟肼结核杆菌菌株异烟肼MIC差值间的差异。结果显示:(1)与单耐异烟肼结核杆菌相比,过表达PafA基因的该菌株异烟肼的MIC值增加了1.03μg/m L,过表达Dop、Mpa基因的该菌株异烟肼的MIC值分别降低了1.03μg/m L、0.68μg/m L,差异均无统计学意义(P0.05);与单耐异烟肼结核杆菌相比,过表达Pup基因的该菌株异烟肼的MIC值增加了8μg/m L,缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因的该菌株异烟肼的MIC值分别降低了4.82、4.98、4.99、4.9μg/m L,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)与在应用外排泵抑制剂后单耐异烟肼结核杆菌相比,过表达Pup基因的该菌株异烟肼的MIC差值增加了8μg/m L,缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因的该菌株异烟肼的MIC差值分别降低4.65、4.81、4.83、4.75μg/m L,差异均有统计学意义(P0.05);与在应用外排泵抑制剂后单耐异烟肼结核杆菌相比,过表达Dop、PafA、Mpa基因的该菌株异烟肼的MIC差值分别降低了1、0.99、0.65μg/m L,差异均无统计学意义(P0.05)。由此可知,结核杆菌泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核杆菌耐药性的产生有调控作用,其作用机制可能是通过调控单耐异烟肼结核杆菌外排泵的功能来调控其耐药性的产生。     

口腔正畸治疗中RGp检出率变化及对牙龈炎发生的影响

目的探讨口腔正畸治疗中牙龈蛋白酶R(RGp)检出率变化及对牙龈炎发生的影响.方法选取接受正畸治疗的患者72例,分别于矫治器戴入前、后60 d取牙龈沟液为研究样本,采用16S r DNA PCR检测样本中牙龈卟啉单胞菌(P.g),取P.g阳性标本进一步检测RGp;同时用牙周探针检测牙龈指数,分析P.g,RGp的检出率与牙龈指数的相关性.结果矫治器戴入后60 d时,P.g,RGp检出率均明显高于戴入前,差异具有统计学意义(P0.05);RGp与P.g检出率之间呈明显正相关,矫治器戴入后60 d牙龈指数Ⅰ级的P.g检出率明显高于戴入前牙龈指数0级的P.g检出率,差异具有显著统计学意义(P0.01);戴入后牙龈指数Ⅰ级的P.g检出率明显高于0级的P.g检出率,差异具有统计学意义(P0.05).P.g阳性患者中,戴入后60 d牙龈指数Ⅰ级的RGp检出率明显高于戴入前牙龈指数0级的RGp检出率,差异具有显著统计学意义(P0.01);戴入后牙龈指数Ⅰ级的RGp检出率明显高于0级的RGp检出率,差异具有统计学意义(P0.05).RGp,P.g检出率与牙龈指数分级之间呈明显正相关.结论 P.g感染和RGp水平提高会引发口腔正畸治疗中牙龈炎性反应,应在矫治器戴入后给予干预性治疗.     

徐州地区结核分枝杆菌耐多药、广泛耐药情况调查

目的:分析徐州地区结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对一、二线抗结核药物耐药情况,了解本地耐多药结核(MDR-TB)、广泛耐药结核病(XDR-TB)所占比例。方法:对627例涂阳肺结核患者的痰标本采用改良罗氏培养法进行结核分枝杆菌培养,同时对培养出的MTB分别进行异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(S)、乙胺丁醇(E)、丁胺卡那霉素(Amk)、左氧氟沙星(Lfx)药物敏感性试验。结果:比例法检测627株MTB分离株中,单耐63例,多耐28例,耐多药125例,广泛耐药18例。结论:徐州地区耐药情况严重,尤其耐多药、广泛耐药结核病比例较高,为本地区结核病控制增加难度。     

Gene-Xpert法与TB-SAT法对艾滋病合并肺结核的诊断效能对比研究

目的：对比探讨Gene-Xpert MTB/RIF法(Gene-Xpert法)与RNA恒温扩增技术快速检测法(TB-SAT法)对艾滋病合并肺结核的诊断效能。方法：选取甘肃省中医院近一年间所收治的艾滋病合并肺结核患者108例为研究对象,采集其痰标本采用不同检测方法进行检验,对比其检测结果,分析检测一致性。结果：Gene-Xpert法检测阳性率明显高于TB-SAT法,MGIT 960法、Gene-Xpert法检测阳性率比较差异无统计学意义(χ²=0.167,P=0.683>0.05)。以MGIT 960法检测结果为金标准,分别比较Gene-Xpert法、TB-SAT法检测准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值与阴性预测值,检测结果一致性分析显示Gene-Xpert法与MGIT 960法检测结果一致性良好(Kappa值为0.849),TB-SAT法与MGIT 960法检测结果具有较高一致性(Kappa值为0.651)。结论：Gene-Xpert法对艾滋病合并肺结核的诊断效能优于TB-SAT法,且与MGIT 960法检测结果具有良好一致性,可优先选用该检测技术诊断艾滋病...     

NC膜富集法、实时荧光PCR法、培养法检测志贺菌的比较研究

观察、比较硝酸纤维素膜富集法、实时荧光PCR法及传统培养法对志贺菌阳性检出率的不同.对137例临床样本分别采用硝酸纤维素膜富集法、实时荧光PCR法、传统培养法进行检测.3种方法检测结果阳性率分别为13.14%、20.44%、8.03%.硝酸纤维素膜富集法是在培养法基础上进行了一些改进,采用"先分离再培养"的方法,与传统培养法比较,检测结果阳性率明显提高,两者比较,差异有统计学意义(P0.05).另一方面,硝酸纤维素膜富集法耗时较短,特异性高,成本低并且无需特殊设备,特别适宜基层检测单位和健康筛查单位使用.实时荧光PCR法检测结果阳性率最高,但同时假阳性率也最高.传统培养法检测结果阳性率最低,但现今在临床工作中仍以传统培养法作为志贺菌检测的标准方法.研究结果显示,硝酸纤维素膜富集法检测志贺菌,明显提高了检测结果的阳性率,且特异性高、耗时较短,具有很好的临床应用前景.     

Capture-R法在交叉配血实验中的应用研究

探讨Capture-R法在交叉配血实验中的应用。采用Capture-R技术对609例标本进行交叉配血实验,并与微柱凝胶法进行比对实验。对实验中不一致的标本用经典抗人球蛋白实验确认。609例标本中Capture-R法和微柱凝胶法交叉配血阳性检出率分别为4.43%(27/609)和3.28%(20/609),两种方法灵敏度比较,没有显著性差异(P>0.05);特异性分别为77.78%(21/27)和100.00%(20/20),两种方法特异性比较无显著性差异(P>0.05)。Capture-R法在交叉配血试验中的灵敏度和特异性均达到了微柱凝胶法水平,是一种安全、灵敏、可靠的交叉配血技术,而且处理样本具有高通量的特点,可应用于临床输血相容性检测。     

四川成都郫都地区HBV基因分型及耐药突变分析

目的对四川郫都地区乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者的基因分型、耐药突变位点分布和基因耐药情况进行分析。方法通过聚合酶链反应(PCR)及DNA测序将2018年1月～2019年3月成都市郫都区中医医院门诊和住院收治的169例慢性HBV感染者进行HBV基因分型、耐药突变位点和基因耐药情况检测,并对检测结果进行统计分析。结果 HBV感染者中,B型和C型百分比均高于D型和BC型,差异有统计学意义(P0.001)。不同的HBV基因型在不同性别间、不同年龄间的分布差异无统计学意义(P0.05)。HBV基因型在15种不同耐药模式检出率、基因耐药位点突变率及4种常见抗HBV药物的耐药情况分布差异有统计学意义(P0.05)。结论四川郫都地区HBV感染者以B型和C型为主,核苷酸类似物耐药仍以单一和双重耐药为主,并以拉米夫定和替比夫定最为显著。     

PCR-SSCP法用于结核分枝杆菌耐药基因检测的价值探究

探究聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)法用于结核分枝杆菌(MTB)耐药基因检测的价值。收集2017年7月～2018年6月从肺结核患者痰标本提取而来的89株MTB菌株,采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL耐药基因突变情况,并与药敏试验结果相比较分析。药敏试验结果显示耐药株72株(80.90%),其中耐链霉素(SM)39株(43.82%),耐利福平(RFP)61株(68.54%),耐异烟肼(INH)50株(56.18%),单耐药株11株(15.28%),耐2种药物株25株(34.72%),耐3种药物株36株(50.00%)。PCR-SSCP法检测显示72株耐药株中共检出64株,katG、rpoB和rpsL基因突变率分别为48.31%(43/89)、57.30%(51/89)、34.83%(31/89),单基因突变25株(39.06%),与药敏试验结果比较,符合率为63.64%(7/11),2种基因联合突变17株(26.56%),符合率为56.00%(14/25),3种基因联合突变22株(34.38%),符合率为61.11%(22/36)。PCR-SSCP法用于MTB耐药基因检测价值较高,可与药敏试验结果联合以指导临床用药。     

不同微生物测定方法对阴道内念珠菌感染检验的效果比较分析

探究不同测定方法对阴道内念珠菌感染的检出效果。以阴道炎患者120例作为研究对象,开始时间为2018年6月,结束时间为2019年5月,均在入院后采集阴道分泌物标本,并分别接受凝集法以及培养法2种不同的微生物检验方式,统计阳性检出率,并进行对比分析。凝集法阳性检出率为80.0%(96/120),培养法的阳性检出率为65.0%(78/120);经比较,凝集法的阳性检出率明显高于培养法,P0.05。在对阴道内念珠菌感染的微生物测定方法中,相较于培养法,凝集法具有着更高、更快,更便捷的阳性检出率,因此,在对阴道念珠菌感染的微生物检测方法中,凝集法值得在临床中推广应用。     

偏最小二乘法用于近红外漫反射光谱测定异福片

应用近红外漫反射光谱结合偏最小二乘法(NIR PLS)对异福片中利福平和异烟肼的含量进行定量分析， 所建立的定量分析模型对校正集样品中利福平和异烟肼的含量预测回归系数分别为0.992　77，0.989　01，交互验证均方根误差(RMSECV)分别 为0.006　65，0.004　23.对预测集样品利福平、 异烟肼的含量预测均方根误差(RMSEP)分别为0.005　73，0.003　79；加样平均回收率分别为99.376%和98.243%；重现性实验相对标准偏差(RSD)分别为0.679　3%和0.639　8%.结果表明， 该方法预测精度高， 且具有方便快捷、 非破坏、 无污染、 可在线检测、 重现性好等优点， 可作为异福片原位质量检测和在线质量监控的方法予 以推广.     

肠球菌临床耐药性分析及耐药基因vanM在屎肠球菌中的检测

目的了解肠球菌临床分离株耐药性及vanM基因在屎肠球菌的分布情况,为临床合理用药及探讨耐药机制提供依据.方法采用VITEK60全自动微生物分析仪对肠球菌进行鉴定及药敏试验,按NCCLS/CLSI标准判断并统计分析结果;PCR法检测耐万古霉素、替考拉宁菌株中的耐药基因vanM,并对阳性基因进行测序,分析耐药基因与耐药性的关系.结果临床分离肠球菌共506株,其中屎肠球菌277株,粪肠球菌229株.尿液标本来源比例最高,为167株（33%）;粪便标本114株（22.5%）;痰液标本78株（15.4%）;胆汁标本57株（11.3%）;脓液标本54株（10.7%）;其他来源36株（7.1%）.药敏结果显示：肠球菌对大部分临床抗菌药高度耐药,屎肠球菌对β-内酰胺类抗菌药物（氨苄西林）、喹诺酮类（左氧氟沙星）、糖肽类（万古霉素、替考拉宁）的耐药率明显高于粪肠球菌（P〈0.05）.vanM基因在耐万古霉素菌株中的检出率为100%,耐替考拉宁菌株检出率为90%.结论屎肠球菌可引起临床各类感染,屎肠球菌对大多数抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌,且呈多重耐药趋势.vanM基因可能在糖肽类药物万古霉素、替考拉宁耐药机制中发挥重要作用.     

3种检验方法在阴道细菌检验中的应用对比分析

探讨3种检验方法在阴道细菌检验中的应用对比分析。收集甘肃省庄浪县人民医院2014年3月至2015年8月妇产科收治的阴道细菌疾病120例住院患者的分泌物进行研究,分别应用细菌培养法、革兰染色法、聚合酶链反应(PCR)法给予检验,并以多次检验结果作为标准,记录3种检验方法对阴道细菌疾病的总检出率。3种方法对分泌物总检出率分别为细菌培养法91.67%、革兰染色法70.83%、PCR法87.50%,细菌培养法与PCR法总检出率对比差异不明显(P0.05),细菌培养法、PCR法的总检出率与革兰染色法总检出率对比差异明显(P0.05)。从3种检验方法的总检出率可以得出:细菌培养法和PCR法对阴道细菌疾病的检验结果具有较高的特异性及灵敏度,而且操作过程方便及迅速。     

Krackow及Kessler缝合法联合抗菌薇乔缝线治疗闭合性跟腱断裂疗效研究

目的选取采用Krackow及Kessler两种缝合法并联合抗菌薇乔缝线治疗闭合性跟腱断裂,比较和评判两种缝合方法的临床疗效.方法选取新鲜闭合性跟腱断裂患者32例,根据手术缝合方法将患者分为两组,即Krackow缝合法组(18例)及Kessler缝合法组(14例),分别进行手术治疗,术后采用相同方法进行功能锻炼,根据Arner-Lindholm标准对随访患者进行临床疗效评定.结果 1)两种缝合法术后并发症发生率比较差异无统计学意义(P0.05).2)Krackow缝合法患者疗效优秀率和总体优良率分别为72.2%和100%,Kessler缝合法分别为57.1%和92.8%,两组疗效优秀率差异具有显著统计学意义(P0.05).3)Krackow缝合法和Kessler缝合法患者总体满意率分别为94.4%和71.4%,二者比较差异具有显著统计学意义(P0.05).结论 Krackow缝合法联合抗菌薇乔缝线对于手术治疗闭合性跟腱断裂疗效更加确切,其术后患者满意度、临床疗效优秀率等方面明显优于Kessler缝合法.     

结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株间细胞壁蛋白质组双向电泳图谱比较

利用双向电泳技术可以对体外培养的结核分枝杆菌非耐药型菌株和耐药型菌株进行细胞壁蛋白质组学比较,寻找与耐药相关的蛋白质．结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株在Middlebrook 7H9 Broth培养基中37℃摇床培养1个月后,从培养物中提取结核分枝杆菌细胞壁蛋白．以pH4～7的IPG预制胶条为第一向等电聚焦,以SDS-PAGE为双向电泳第二向,经过银氨染色,图像扫描后,利用软件分析处理图像．在结核分枝杆菌H37Rv株和耐异烟肼菌株的细胞壁蛋白质凝胶图谱中分别检测出499和582个蛋白质斑点．它们的蛋白质分子质量分布基本相似,其中有102个斑点差异显著．这为研究耐异烟肼菌株的耐药机制提供了蛋白质组学方面的信息．     

ELISA法替代RIA法测定重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效价

分别用ELISA法和RIA法测定重组乙肝疫苗(CHO细胞)效价,将血清抗-HBs阳转率及ED50值(稀释度)进行统计学分析,对全部样本的阳转率进行X2检验,P0.05,按α=0.05水准分析,说明两种方法的阳转率差异不显著;对检测结果进行t检验,0.05P0.1,按α=0.05水准,说明两种方法检测结果差异不显著。因此,可用ELISA法替代RIA法测定乙肝疫苗效价。     

结核性脑膜炎患者采用异烟肼联合地塞米松鞘内注射的临床效果观察

观察结核性脑膜炎患者采用异烟肼联合地塞米松鞘内注射的临床效果。选取天祝县人民医院收治的结核性脑膜炎患者84例,采用随机字母表法分为观察组与对照组,对照组采用异烟肼治疗,观察组采用异烟肼联合地塞米松鞘内注射治疗,观察两组患者治疗效果以及脑脊液生化指标。观察组患者治疗总有效率为97.62%显著高于对照组80.95%且差异有统计学意义(P0.05);观察组患者细胞计数,蛋白定量以及葡萄糖显著低于对照组,氯化物显著高于对照组且差异有统计学意义(P0.05)。:异烟肼联合地塞米松鞘内注射治疗结核性脑膜炎患者具有显著临床疗效,促进脑脊液生化指标逐步趋于正常,是一种可靠安全的治疗方式。     

肺炎克雷伯菌铁载体对喹诺酮类抗生素耐药性的影响

为载体与喹诺酮类抗生素耐药性之间的关系,采用K-B纸片法及微孔稀释法确定细菌对抗生素的药物敏感性,使用CAS琼脂法和紫外可见分光光度法分别对肺炎克雷伯菌铁载体进行定性和定量检测,使用统计学软件SPSS分析细菌铁载体与其耐药性的关系.CAS琼脂法分析表明,临床分离的70株肺炎克雷伯菌均产铁载体（100%）,紫外分光光度法分析表明肺炎克雷伯菌中铁载体产量不同.根据统计学取中位数的方法能够将细菌分为铁载体高产组和低产组两组,喹诺酮类耐药株中铁载体产量高于敏感株（P〈0.01）;铁载体高产组对环丙沙星（CIP）和左氧氟沙星（LEV）的耐药率高于低产组（P〈0.01）;肺炎克雷伯菌铁载体与细菌对喹诺酮类抗生素的耐药性呈正相关性（P〈0.01）.研究表明细菌铁载体参与了细菌耐药,干预了抗生素的杀菌过程.     

中山市儿童社区获得性肺炎病原菌分布及耐药性分析

目的 探讨中山市儿童社区获得性肺炎(CAP)的常见病原菌分布及耐药性情况,为临床合理用药提供依据.方法 对2008年1月至2010年10月在中山市博爱医院住院的1538例CAP患儿,采集痰标本进行细菌培养及药敏检测,并对结果进行统计学分析.结果 送检痰培养6152例,检出细菌3624株(58.9%),其中革兰阴性(Gˉ)杆菌2281株(63.0%),以G杆菌最多,主要为肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌和流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌,对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南敏感性高,革兰阳性(G+)球菌1247例(34.4%),主要为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌,对万古霉素最敏感,真菌96例(2.6%).结论 近两年本地区CAP患儿细菌检出率较高,且以Gˉ杆菌最多,主要耐药菌情况存在一定变迁.