植物多糖提取液的几种脱蛋白方法的比较分析

多糖对肿瘤、病毒、心血管等方面具有独特的生物活性,且细胞毒性很低,因此多糖的分离及纯化一直是一个很有意义的研究课题.实验以多糖损失率和脱蛋白率(r)为衡量指标,通过对几种脱蛋白方法的比较,优化出植物多糖提取液的脱蛋白方法,为多糖的纯化提供了一定的参考.选用了3种较为常见的方法:三氯乙酸法、盐酸法及沙维积法(Sevag 法)对植物多糖提取液进行脱蛋白处理.三氯乙酸法、盐酸法及Sevag法的脱蛋白率分别为46.1%、72.5%和42.3%,多糖损失率分别为6.1%、15.1%和14.3%.盐酸法脱蛋白率高,但它的多糖损失率较高;三氯乙酸法较温和,但除蛋白效率不高;Sevag法的脱蛋白效果不及前两种方法.     

蕨麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析

本文采用热水提取、乙醇沉淀、a-淀粉酶法脱淀粉、链酶蛋白酶和Sevag法联合除蛋白,得到蕨麻多糖.对提取的蕨麻多糖进行了总糖含量及糖醛酸含量的测定.粗多糖(P1)总糖含量为41.8%,糖醛酸含量为11.1%.脱淀粉脱蛋白多糖(P2)总糖含量为39.4%,糖醛酸含量为35.9%.经纸层析和高效液相色谱分析,表明该多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成,说明蕨麻多糖为酸性杂多糖.     

糖脂康多糖的分离与纯化研究

目的:研究糖脂康多糖的提取、分离与纯化方法,并筛选出糖脂康多糖脱蛋白、脱色的最佳方法。方法:采用水提醇沉法提取分离糖脂康多糖,以提取多糖物质多糖损失率、蛋白质去除率为测定指标,分别考察不同实验方法对糖脂康多糖脱蛋白、脱色的影响。结果:三氯乙酸脱蛋白法为糖脂康多糖脱蛋白的最佳方法,活性炭脱色法对糖脂康多糖的脱色效果优于过氧化氢脱色法。结论:糖脂康粗多糖的纯化,脱蛋白、脱色方法的优化为进一步研究糖脂康多糖的生物活性提供了基础。     

鲍鱼内脏多糖的提取、纯化及其抗氧化和抑菌活性

以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)内脏为实验材料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶6种蛋白酶对其进行酶解提取多糖,结果显示碱性蛋白酶酶解所得多糖得率最高,为6.66%,进而由单因素试验和正交试验确定了碱性蛋白酶提取鲍鱼内脏多糖的最佳工艺条件.将得到的鲍鱼内脏粗多糖进行体外抗氧化活性测定,结果显示:100%清除羟自由基、100%清除2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基以及700 nm处吸光度(A_(700))为0.485时代表的还原能力对应的鲍鱼内脏粗多糖质量浓度分别为9.6,7.5,8.2 mg/mL,表明所得粗多糖具有较好的抗氧化活性.采用双酶解法以提高多糖含量,结果显示胃蛋白酶二次酶解所得的多糖含量最高,且多糖样品在3种抗氧化活性模型中均具有很好的效果.采用Sevage法和反复冻融法去除蛋白,过氧化氢脱除色素,进一步纯化得到高纯度的鲍鱼内脏多糖,并采用双层平板法测定其抑菌活性,结果表明其对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、大肠杆菌(Escherichia coil)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)都具有较好的抑制作用.     

党参多糖精制方法的实验研究

本课题以中药党参中含有的具有调节免疫作用的活性成分多糖类成分为研究的基础和出发点,对多糖的除蛋白方法进行了初步探讨;本实验采用Sevag法和三氯乙酸法去除多糖提取液中的蛋白质,苯酚-硫酸法测定多糖含量,对两种脱蛋白方法的效率进行比较;采用Sevag法脱蛋白的多糖提取液中多糖含量为30.81%,采用三氯乙酸法脱蛋白的多糖提取液中多糖含量为22.83%;党参粗多糖提取液中采用Sevag法脱蛋白较好。     

铁观音茶多糖的酶法提取及脱蛋白工艺研究

采用纤维素酶水解方法提取铁观音茶多糖,并对其脱蛋白工艺进行了研究.酶法提取的正交实验结果表明,铁观音茶多糖的得率随酶用量和水解时间的增加而增大,随pH值和温度的升高先增后降,最佳的酶处理条件为:加酶量15 mg/g,pH=4.0,水解温度45℃以及水解时间90 min.比较了Sevag法、三氯醋酸法以及酶与三氯醋酸结合法对铁观音茶多糖的脱蛋白效果,结果表明,三氯醋酸法可以简单高效地去除蛋白质,而又不会造成多糖过多损失,4 mol/L三氯醋酸溶液的最佳使用量为2%(v/v).     

盐藻多糖提取及初步纯化

对提取β-胡萝卜素后的杜氏盐藻渣中多糖的提取、初步纯化和多糖脱色方法进行了实验研究.实验采用水浸提的方法,考察了提取温度、提取时间、液固比和pH值对盐藻多糖提取率的影响,盐藻多糖的最适提取条件为:提取温度:70℃,提取时间:4 h,液固比:30:1,pH值10,在此条件下,盐藻多糖的提取率为8.63%,多糖含量为65.73%.采用分级醇沉和分步醇沉的方法沉淀多糖,得到醇沉最佳条件为无水乙醇一步醇沉.采用中性蛋白酶水解脱除盐藻多糖提取液中蛋白质,脱除率为61.55%,脱蛋白后多糖含量为70.96%,采用过氧化氢对脱蛋白后多糖提取液脱色,脱色率为78.66%.     

大蓟多糖脱蛋白工艺研究

大蓟具有重要的药用价值,本文研究从大蓟中提取多糖,并进行脱蛋白分离纯化。通过比较Sevag法、三氯乙酸法和盐酸法等3种脱蛋白方法的蛋白脱除率与多糖损失率,确定最好的脱蛋白方法为三氯乙酸法,其蛋白脱除率为84%,多糖损失率为29%。     

牡蛎多糖制备工艺研究及体外抗氧化活性评价

以新鲜牡蛎为原料，通过酶解法制备牡蛎粗多糖，再经Sevage法脱蛋白和Sephadex G-200凝胶柱层析分离，浓缩、冷冻干燥后，制得纯化牡蛎多糖.对牡蛎多糖制备中各个阶段的组分进行体外抗氧化活性检测，最后利用傅里叶红外光谱(FTIR)分析纯化牡蛎多糖的化学键和官能团.结果表明，酶解法提取的牡蛎粗多糖得率达到3.69%,纯化操作并不会显著改变牡蛎多糖的抑制羟自由基能力，但纯化牡蛎多糖具有较好的抗超氧阴离子自由基能力(64.97 U·L^-1),且含有吡喃糖苷3个特征吸收峰(1 154.84、1 080.63、1 021.93 cm^-1),为一种α型吡喃糖，研究结果可为今后牡蛎多糖的制备与应用奠定基础.     

沙葱多糖Sevage法除蛋白工艺的研究

研究了沙葱多糖Sevage法除蛋白的工艺.采用单因素试验确定Sevage试剂添加量、氯仿与正丁醇体积比、蛋白脱除次数及脱蛋白时间对沙葱多糖除蛋白效果的影响.并在单因素试验的基础上,采用正交试验确定了沙葱多糖Sevage法除蛋白的工艺条件.结果表明振摇时间和Sevage试剂添加量对除蛋白效果影响较大.Sevage法去除沙葱多糖蛋白的工艺条件为:Sevage试剂添加量为1/4,氯仿正丁醇体积比为3∶1,除蛋白时间为30 min.     

南海七种海藻的多糖组成分析

采用3种不同的柱前衍生化方法分别对海藻多糖的水解产物进行前处理,并用GC-MS法分析该海藻多糖的单糖组成.比较可知,糖腈乙酸酯衍生化法的效果最佳.应用该前处理方法对海带、亨氏马尾藻、孔石莼、刺松藻、小石花菜、龙须菜和蜈蚣藻等7种海藻多糖的单糖组成及含量进行了分析可知,以上海藻多糖均含有半乳糖,大多数含有木糖,且海带、亨氏马尾藻和蜈蚣藻多糖含有岩藻糖.     

盐城沿海海洋药物与保健品资源及其开发利用现状的调查

调查发现盐城海洋药物与海洋保健品生物资源丰富,其中优势种类近20种,如蛤、海带等。目前,盐城市对海洋药物的开发利用几乎是空白,而海洋保健品的开发利用正处于起步阶段。     

海带中3-吲哚乙酸对海洋微藻生长代谢的影响

利用反向高效液相色谱、UV光谱扫描和质谱方法对海带(Laminaria japonicaAresch.)提取物中的3-吲哚乙酸进行定性和定量分析,结果表明海带提取物中含有3-吲哚乙酸.在此基础上,利用反向高效液相色谱方法对3-吲哚乙酸进行制备,并研究其对小球藻(Chlorellasp.)、盐藻(Dunaliellasalina)、角毛藻(Chaetoceros muelleri)、紫球藻(Porphyridiumcruentum)和球等边金藻(Isocrydid galbana)5种海洋微藻生长代谢的影响.实验表明海带3-吲哚乙酸浓度为0~100μmol/L时,小球藻、盐藻和紫球藻细胞生长均被促进;海带3-吲哚乙酸浓度对小球藻和紫球藻胞内蛋白质含量影响显著,对小球藻叶绿素含量影响极显著.研究为海带生长素类物质活性及海洋中大型藻与微藻生长关系的研究奠定了基础.     

海带多糖对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

目的：主要研究海带多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用．方法：小鼠随机分为6组,给药4d后,腹腔注射0．3％四氯化碳（CCl4）,16h后取血、肝组织匀浆测定．结果：不同剂量的海带多糖均能阻止血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）的升高;能增加血清中一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活力;增加组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活力．结论：海带多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤有保护作用．其机理可能是海带多糖能清除氧自由基,提高机体的抗氧化能力．     

海带硫酸多糖降解研究进展

海带硫酸多糖是一种高分子量杂多糖，具有多种生物学功能．介绍了降解海带硫酸多糖的有关方法及其功能．根据近几年国内外相关文献以及本实验室的工作，海带硫酸多糖的降解可分为酸解法、碱解法、酶解法、盐解法、氧化降解以及超声波、γ-射线、自由基降解法．自由基降解海带硫酸多糖是一种可行的可用于大量制备低分子量多糖的新技术．降解之后的海带硫酸多糖有广泛的生物学功能，具有巨大的开发前景，这种方法也可用于其它多糖的降解．     

功能性海带低分子量岩藻多糖研究进展

海带是我国最丰富的海藻资源之一,来源于海带的低分子量岩藻多糖有溶解性好、黏度低、易吸收等特点,且具有抗肿瘤、抗氧化、保护肝脏、降低血压等多种生物学功能,被广泛应用于医药、食品等领域.着重介绍了海带低分子量岩藻多糖的生物学功能及其制备技术的研究进展.     

枸杞多糖分离纯化及降血糖效果的研究

本研究将宁夏枸杞经烘干、脱脂、脱小分子糖、水提、浓缩、乙醇沉淀、脱蛋白、脱色和干燥,获得枸杞多糖（Lycium polysaccharide,LBP）,经苯酚-硫酸法检测其糖含量为67.9%,LBP 的得率为0.7284%.将LBP 用于经高脂饮食和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的治疗,治疗分为枸杞多糖高剂量组、枸杞多糖低剂量组、糖尿病对照组和正常对照组.检测了LBP 的急性和慢性降血糖效果,可见LBP 在短时间内可降低糖尿病小鼠餐后血糖水平,并提高糖尿病小鼠的糖耐量,但不能使糖尿病小鼠糖耐量正常化.长期服用LBP 时,能明显降低糖尿病小鼠的血糖水平.枸杞多糖的降血糖作用呈现剂量依赖性,即高剂量的降糖效果优于低剂量组.     

麒麟菜粗多糖中多糖与蛋白质结合方式

从海藻麒麟菜中提取的粗多糖含有一定量的蛋白质，采用Sevag法在除麒麟菜粗多糖蛋白质，则蛋白质与多糖以相同的比例减少，粗多糖酸解液的pH调整为11．0后，经凝胶SephadexG—l00层析，能使蛋白质部分分离，而酸性条件无法使之分离，实验结果表明，粗多糖中蛋白质不是以游离的形式存在，可能以离子键方式与多糖分子中的硫酸根聚阴离子相结合，提取麒麟菜多糖和纯化过程中，控制合适的pH条件有利于分离蛋白质。     

极大螺旋藻多糖提取方法研究

对TCA法和Sevag法两种螺旋藻多糖提取方法进行了比较研究,根据研究结果,指出TCA法在多糖提得率、蛋白去除率、色素去除率方面均优于Sevag法;同时对TCA法提取多糖进行了正交实验,从固液比、pH值、时间、温度4个方面进行优化组合得到了最佳提取条件：当pH值为10、固液比为1∶30、提取时间为6h、温度为90℃时达到TCA法提取多糖的最佳提取条件,多糖提得率为3.935%。     

发酵海带对刺参生长和免疫及消化生理的影响

对枯草芽孢杆菌发酵海带的条件进行优化,并以此发酵海带饲养刺参,结果表明,枯草芽孢杆菌发酵海带的优化条件为发酵温度30 ℃、适宜发酵时间96 h、接种剂量12%,发酵后海带的粗蛋白含量为14.65%,相对提高了15.17%。在36 d饲养时间内,实验组在刺参的配合饲料中添加了30%的发酵海带,刺参特定生长率、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、酸性磷酸酶活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性皆有显著提高（P<0.05）,但是,刺参体腔液细胞数量、纤维素酶活性皆无显著变化（P>0.05）,此外,刺参摄食发酵海带还导致其消化道异养菌总数减少、弧菌相对数量降低、芽孢杆菌相对数量升高。由此可见,投饲枯草芽孢杆菌发酵海带能够促进刺参生长,提高消化酶活性和免疫力,调节肠道菌群结构。