外源激素对防风体细胞胚发生和发育的影响

目的探讨生长素和细胞分裂素对防风体细胞胚发生和发育过程的影响。方法组织培养和石蜡切片。结果0．5mg／L2，4-D是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度，0．5mg／LNAA在胚性愈伤组织的长期继代培养中替代0．5mg／L2，4-D可减少畸形胚的发生，NAA浓度降至0．2mg／L时促进体细胞胚的发生和分化；生长素加一定比例的细胞分裂素(6-BA或KT)可有效促进体细胞胚的发生；通过逐步降低生长素和细胞分裂素的浓度，可促进体细胞胚的分化和生长；体细胞胚在无附加激素或附加激素浓度分别低于0．2mg／LNAA和0．5mg／L6-BA的MS培养基上，均能发育成完整的植株。结论一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素，细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起协同作用。     

生长素在天仙子(Hyoscyamus niger)花粉形态发生中的效应

本文讨论了2,4—D、1AA、1BA、NOA、NAA、2,4,5—T 六种生长素对诱导天仙子花粉胚状体及愈伤组织的效应。实验表明:六种生长素对诱导天仙子花粉胚状体均有促进作用,其中以1BA、NAA 效率最高,其顺序为1BA、NAA、1AA、NOA、2,4,5—T、2,4—D。同一种生长素不同浓度诱导效应不同,一般低浓度对诱导胚状体有促进作用,高浓度有抑制作用。生长素诱导花粉愈伤组织的效应随不同种类而异,NOA 效应最显著,2,4—D 次之,而1AA、1BA 大多不形成愈伤组织。生长素不同种类和浓度对花粉分化速度和分化途径亦有明显差异,低浓度NOA易分化胚状体,高浓度多形成愈伤组织。又胚状体出现高峰早于愈伤组织.     

腐胺促进棉花胚性愈伤组织分化的初步研究

为了利用多胺促进棉花体细胞胚胎发生,提高农杆菌介导的棉花遗传转化效率,本研究以4个陆地棉品种新陆早33号(L33)、新陆早36号(L36)、新彩棉7号(C7)、豫早1号(Y1)为试验材料,下胚轴在附加有0.1 mg/L2,4-D和0.1 mg/L KT的MSB培养基中培养4周后,分别继代到附加了1 mmol/L腐胺(Put)、1 mmol/L D-精氨酸(D-Arg)和对照的3种分化培养基中培养4周后,记录愈伤组织的增殖和分化情况。结果表明:D-Arg可以显著抑制愈伤组织增殖,4个品种都表现出严重的褐化,而附加Put则能够一定程度地促进愈伤组织的增殖。在胚性愈伤组织分化方面,D-Arg处理后L33和L36均未见分化,C7和Y1分别为对照处理的49.38%和324%;而经Put处理后,所有品种的胚性愈伤组织分化率均表现为提高,其中Y1和L33的胚性愈伤组织分化率提高了3倍多。此外,内源多胺含量测定发现,施加外源腐胺和D-Arg之后愈伤组织的多胺含量发生明显变化,可能与后期胚性愈伤组织分化有关。因此,多胺在促进棉花胚性愈伤组织分化方面发挥重要作用。     

影响大葱体细胞胚胎发生因子的研究

采用正交试验设计方法研究了MS微量元素,2,4-D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤的浓度对5种基因型大葱未成熟子叶愈伤形成和体细胞胚胎发生的影响.结果表明,MS微量元素的浓度对出愈率和胚胎发生率均有显著的作用;在MS培养基中附加2,4-D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤对愈伤组织的形成有明显的促进作用.微量元素浓度对大葱体细胞发生有明显的影响,各基因型间在胚胎发生时所需激素种类和浓度存在明显差异.     

生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响

对芦笋UC308侧芽增殖和生根诱导中生长素的作用规律进行研究.发现不添加任何外源生长素,芦笋仍有较高的侧芽萌发率;而对于愈伤组织的形成,外源生长素是必不可少的.使用0.05 mg/LNAA进行侧芽诱导,浓度为1.0 mg/LNAA进行愈伤组织的诱导较为适宜.在侧芽诱导过程中,NAA浓度大于2.0 mg/L时,不会对后期的不定根的形成产生影响.比较4种生长素IAA,NAA,IBA和2,4-D对芦笋生根诱导效果,发现IBA最为适宜,2,4-D对芦笋生根无明显促进作用.     

新疆海岛棉新海15体细胞胚胎的发生及植株再生

为了扩展可再生棉花的基因型,选取新疆自育海岛棉品种新海15的胚珠为外植体,利用组织培养的方法进行再生体系的建立。结果表明:含0.5mg/L KT和0.5mg/L 2,4-D的MSB培养基,在暗培养条件下可诱导胚珠,产生初始愈伤;愈伤分化则以含0.05/0.1mg/L KT和0.1mg/L 2,4-D的MSB培养基效果较佳;选取浅黄色、结构疏松的愈伤组织在含较高浓度IBA和较低浓度KT、2,4-D的3种调控培养基上依次继代,以此实现胚性愈伤组织的增殖及细胞状态调控;液体悬浮培养和干燥胁迫处理均有利于胚性愈伤的体细胞胚胎诱导;子叶胚的萌发及植株再生则以含谷氨酰胺和天冬酰胺的1/2 MSB培养基效果较佳。     

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

以银杏胚的不同部位子叶、胚芽、胚轴、胚根为外植体,比较不同外源激素和培养条件对银杏愈伤组织诱导和继代培养的影响,结果表明子叶最易诱导愈伤组织,且在暗条件下诱导效果最好,2,4-D和队影响子叶的愈伤诱导能力;以茎段为外植体,发现生长素为茎段愈伤组织诱导所必需,且NAA诱导效果好于2,4-D;以叶片为外植体,发现生长素中的NAA诱导愈伤效果最好,雌雄叶的诱导能力相同.在愈伤组织生长过程中,NAA是子叶和茎段愈伤组织继代培养必需的,BA对茎段愈伤组织生长速.度无显著影响,但可使愈伤组织敛密,并有利于分化.MS 1 mg/LNAA 0.005 mg/LKT(或BA)的培养基对叶片愈伤组织生长最理想,雄叶愈伤生长较快,光照培养促进愈伤组织生长.     

枸杞体细胞胚高频发生体系的建立

实验以枸杞种子为材料,培育成无菌苗后,取叶片和下胚轴进行诱导愈伤组织,在含有2,4-D的MS培养基上继代培养并诱导体细胞胚发生.通过从不同时期的胚性愈伤组织中剥离不同时期的体细胞胚,对它们进行形态学观察和发生频率统计,进而研究不同枸杞品种、2,4-D质量浓度、继代培养次数、不同部位和温度对枸杞体细胞胚发生的影响.结果表明:在含有0.2 mg/L2,4-D的MS培养基上,继代3次的愈伤组织经诱导分化体细胞胚可达496个/g;同时还探讨了枸杞体细胞胚高频发生再生体系建立的关键影响因素,为体细胞胚发生机理的研究和应用提供依据.     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

甘蔗离体快速繁殖的研究

用甘蔗幼叶作外植体进行离体培养,比较不同外源激素对愈伤组织的诱导和再生植株分化的影响.结果表明:同一浓度的2,4-D较NAA的诱导率高,6-BA的浓度为1.0mg.L-1有利于再生植株的分化,所形成试管苗移栽成活率较高.     

生长素和细胞分裂素在光、暗调控气孔运动中的作用及其机制

借助表皮条实验和激光扫描共聚焦显微镜技术,研究了天然和合成生长素IAA、NAA、2,4-D、细胞分裂素ZT、KT、6-BA在光、暗调控气孔运动中的作用及其机制.结果表明,暗中所试生长素、细胞分裂素、NO清除剂cPTIO、Hb、NO合酶抑制剂L-NAME、H2O2清除剂AsA、CAT、H2O2产生酶NADPH氧化酶抑制剂DPI对气孔开放的效应显著大于光下,暗示内源生长素、细胞分裂素、NO、H2O2均参与光/暗调控气孔运动,光下内源生长素、细胞分裂素浓度大于暗中,但暗中内源NO、H2O2水平高于光下.另外,所试生长素、细胞分裂素和NO、H2O2清除剂及合成抑制剂对光、暗条件下气孔运动效应的一致性还表明,生长素、细胞分裂素可能通过降低保卫细胞内源NO、H2O2促进气孔开放,内源NO、H2O2检测的结果正好证明了这一推论.     

A novel sensor to map auxin response and distribution at high spatio-temporal resolution

Auxin is a key plant morphogenetic signal but tools to analyse dynamically its distribution and signalling during development are still limited. Auxin perception directly triggers the degradation of Aux/IAA repressor proteins. Here we describe a novel Aux/IAA-based auxin signalling sensor termed DII-VENUS that was engineered in the model plant Arabidopsis thaliana. The VENUS fast maturing form of yellow fluorescent protein was fused in-frame to the Aux/IAA auxin-interaction domain (termed domain II; DII) and expressed under a constitutive promoter. We initially show that DII-VENUS abundance is dependent on auxin, its TIR1/AFBs co-receptors and proteasome activities. Next, we demonstrate that DII-VENUS provides a map of relative auxin distribution at cellular resolution in different tissues. DII-VENUS is also rapidly degraded in response to auxin and we used it to visualize dynamic changes in cellular auxin distribution successfully during two developmental responses, the root gravitropic response and lateral organ production at the shoot apex. Our results illustrate the value of developing response input sensors such as DII-VENUS to provide high-resolution spatio-temporal information about hormone distribution and response during plant growth and development.     

中华芦荟愈伤组织的诱导

以中华芦荟幼苗茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的生长素、细胞分裂素或两者组合,以及添加Vc或活性炭(共350种组合),研究中华芦荟愈伤组织的诱导及生长情况.结果表明, 在单独使用不同种类的生长素时,不同浓度的生长素诱导的愈伤组织频率差异明显,且愈伤组织的生长状态也各异;单独使用细胞分裂素时,愈伤组织的诱导率极低.当组合不同浓度和种类的生长素和细胞分裂素时,愈伤组织诱导频率差异显著;同时发现在减轻愈伤组织褐化的效果上,Vc较活性炭好.通过对愈伤组织诱导结果的比较,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 10 mg/L Vc为中华芦荟愈伤组织诱导的较好培养基,愈伤组织诱导率达到91.4%,且愈伤组织生长较旺盛.     

A novel putative auxin carrier family regulates intracellular auxin homeostasis in plants

The phytohormone auxin acts as a prominent signal, providing, by its local accumulation or depletion in selected cells, a spatial and temporal reference for changes in the developmental program. The distribution of auxin depends on both auxin metabolism (biosynthesis, conjugation and degradation) and cellular auxin transport. We identified in silico a novel putative auxin transport facilitator family, called PIN-LIKES (PILS). Here we illustrate that PILS proteins are required for auxin-dependent regulation of plant growth by determining the cellular sensitivity to auxin. PILS proteins regulate intracellular auxin accumulation at the endoplasmic reticulum and thus auxin availability for nuclear auxin signalling. PILS activity affects the level of endogenous auxin indole-3-acetic acid (IAA), presumably via intracellular accumulation and metabolism. Our findings reveal that the transport machinery to compartmentalize auxin within the cell is of an unexpected molecular complexity and demonstrate this compartmentalization to be functionally important for a number of developmental processes.     

杜仲离体培养与快速繁殖

杜仲无菌苗顶芽在ＭＳ＋细胞分裂素１．５～３．０（ｍｇ／Ｌ，下同）＋ＩＡＡ０．１＋ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．１培养基中分化效果最佳，在ＭＳ＋细胞分裂素０．１～１．０培养基中扩增效果最好，在２／３ＭＳ＋生长素０．１～１．０培养基中生根效果最好。     

生长素及其运输抑制剂对粗梗水蕨孢子萌发的影响

研究了生长素IAA及其运输抑制剂NPA，TIBA，BFA对粗梗水蕨孢子萌发率的影响.抑制剂NPA，TIBA，BFA均抑制孢子萌发，但IAA减弱NPA和TIBA的抑制作用，NPA的抑制及IAA对其的拮抗在不同萌发时期均有体现；生长素及其运输抑制剂在粗梗水蕨中通过影响细胞骨架甚至囊泡运输，损害了孢子萌发中重力感应和细胞核迁移等关键事件.     

花生果针向地性弯曲过程中内源激素变化分析

花生果针离体培养试验表明:不论果针以什么角度插入无激素的MS培养基,离体培养6h后,其尖端均发生弯曲(垂直向下除外)呈向地生长趋势.采用HPLC的方法,比较正置和倒置果针离体培养6h和12h果针主要内源激素的变化,结果显示:正置果针在离体生长过程中GA3,IAA和CTK的质量分数逐渐下降,而倒置果针在离体生长过程中IAA质量分数变化不大,但GA3和CTK质量分数显著增加;与此相反,ABA的含量在正置培养果针离体生长过程中是逐渐增加,而倒置培养是逐渐减少.说明这些植物内源激素在果针的向地性弯曲过程中起到了重要作用.     

模糊综合评判优选长春花细胞分化条件

研究不级其浓度配比对长春花细胞分化的影响；利用综合评判方法优选不同培养目的培养条件。为开发利用该过程提供理论准备。     

不同生长调节剂对新疆秋黑葡萄枝条生长的影响

在葡萄（秋黑）新梢迅速生长期,运用ETH,CCC,PP333及IAA4种调节剂,对营养枝,结果枝进行浸蘸试验,方法采用2种：1）处理全部肖及新梢生长点;2）处理部分梢,不处理新梢生长点,结果表明：除IAA外,其它生长调节剂均能抑制枝条的生长,使用浓度为200mg/L的ETH,CCC,PP33,可在不影响座果率的条件下明显抑制葡萄新梢的生长。