成人及胚胎组织中FMR1基因的选择剪接表达

选择剪接使单一基因表达产物的功能多样化，是真核基因表达调控的重要途径之一。ＦＭＲ１基因在胚胎和成人不同组织中广泛表达，并在中枢神经系统等组织特异性高表达，转录本呈复杂的选择剪接方式，采用ＲＴ－ＰＣＲ结合毛 电泳分析了成人及２个６月龄胎儿１０个组织中ＦＭＲ１基因的选择剪接表达谱。     

TIMP-1对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制

构建含人组织金属蛋白酶抑制TIMP1基因的表达载体，以磷酸钙沉淀法转染人肝癌细胞系^1BEL－7402，研究过表达TIMP1对肝癌细胞生长的影响，本研究首先从正常流产胎儿组织中提取总RNA，通过RT－PCR扩增获得TIMP1基因，并克隆到pcDNA6表达载体中，经酶切鉴定，序列测定结果正确后，转染入肝癌细胞系BEL－7402，采用MTT（四甲偶氮唑盐微量酶反应比色法）、细胞生长曲线等方法，经数据统计分析发现：TIMP1过表达能够抑制肝癌细胞BEL－7402的增殖。     

神经嵴细胞移植在先天性巨结肠症肠道神经组织重建中的作用

先天性巨结肠症是小儿外科常见的肠道疾病之一,主要由于胚胎期神经嵴细胞(Neural Crest Cell,NCC)在消化道迁移受阻,结肠壁肌间神经节细胞缺失、使结肠痉挛收缩发生病变、内容物难以排出、继而引起近端肠管扩张形成巨结肠。NCC在神经组织重建及修复等方面已彰显其良好的应用潜能,在组织替代及修复、维持受损组织或器官生物学功能等方面具有重要作用。本文就NCC在先天性巨结肠症肠道神经组织重建中的应用及意义做一综述,为神经干细胞移植在该类疾病中的应用提供理论依据。     

低氧训练对神经组织细胞凋亡的影响

低氧训练能引发机体神经组织的适应性变化,如产生大量自由基刺激机体,从而获得抗氧化酶系活性升高的应激反应。相关基因表达的变化等,此种训练在竞技体育中已经得到广泛的应用。细胞凋亡的研究已成为运动科学中较重要的领域,它的出现使我们能从新的角度监测运动性疲劳。而目前,低氧训练与神经组织细胞凋亡的报道尚末见到。本文运用文献综述法探讨低氧训练与细胞凋亡的关系,从全新的角度来认识低氧训练的发展规律,为科学地指导运动员进行低氧训练提供实验依据。     

一种基于光交联明胶-聚丙烯酰胺的神经组织工程构建物

从改善神经组织再生材料的理化性能角度出发，选择生物相容好的光交联明胶(GelMA)和亲水聚合物聚丙烯酰胺(PAM)构建复合水凝胶支架，用于支持雪旺细胞生长。以纯GelMA作为对照，分别测试不同浓度的光交联明胶-聚丙烯酰胺复合水凝胶(GelMA-PAM)的形貌、理化性能和机械性能；观察雪旺细胞在支架上的生物相容性、增长情况以及分化程度。实验结果表明，PAM可以改善GelMA支架的机械性能，当GelMA与PAM的质量分数分别为10%和2.5%时，该支架具有良好的生物相容性，可促进雪旺神经细胞分化。因此，开发基于GelMA-PAM复合水凝胶支架可作为一种理想的神经组织工程构建物。     

自体神经组织浆用于修复周围神经缺损的实验

将自体神经组织浆充填于经戊二醛处理的人羊膜管内，模拟自体神经移植的神经再生微环境，研究其修复大鼠１０ｍｍ坐骨神经缺损的可行性，并与自体神经移植、单纯中空人羊膜管组对比。     

东海带鱼群体结构变动的研究

根据1957－2001年对东海带鱼的生物学测定和调查监测资料，对东海带鱼群体结构、生长等变化进行了研究。结果表明：随着捕捞强度的增大，带鱼群体结构发生了变化。特别从80年代以来，带鱼群体组成出现明显的小型化、低龄化趋势，带鱼年龄组成序列缩短，渔获带鱼最高年龄组由7－8龄缩短为7－8龄缩短为90年代的4－5龄，带鱼个体生殖力进一步提高，带鱼各龄组的平均肛长进一步缩小，而且带鱼有性成熟提早和产卵时间延长的趋势。     

飞蝗磷酸乙酰氨基葡萄糖变位酶基因表达及功能

几丁质是自然界广泛存在的第二大氨基多糖,在几丁质的合成途径中有许多酶的参与,其中磷酸乙酰氨基葡萄糖变位酶(Phosphoacetylglucosamine mutase,PAGM)是关键酶之一。以飞蝗为研究对象,对磷酸乙酰氨基葡萄糖变位酶基因PAGM的表达及功能进行了研究。对飞蝗转录组数据库进行搜索,得到PAGM基因全长cDNA序列,将其命名为LmPAGM(GenBank登录号:MK568624),其中开放阅读框长度1 491 bp,编码497个氨基酸。通过Real-time PCR分析该基因在五龄若虫不同组织部位和不同天数的表达,结果表明LmPAGM在体壁、前肠、中肠、后肠、胃盲囊、马氏管、脂肪体和翅中均衡表达,并且在五龄若虫第8天表达显著上升。利用RNAi对LmPAGM的生物学功能进行探讨,注射LmPAGM的dsRNA至五龄若虫第2天的飞蝗,注射dsLmPAGM组中LmPAGM的表达较对照组显著下调,并且约30%的飞蝗无法成功羽化为成虫。     

鲤鱼(Cyprinus carpio L.) GH受体的分子克隆及其两种转录子的发现

应用反转录-PCR及RACE技术，从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因，其开放阅读框编码602个氨基酸，其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域，24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域. 序列分析表明：无论在基因水平还是蛋白质水平，鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性. 用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现：肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100bp)，测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97bp的内含子选择性剪切造成的. 而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的，且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致. 鲤鱼GHR两种转录子的出现，系转录时发生拼接变化所致，推测是一种与发育有关的机制. 采用半定量RT-PCR方法分析组织相对表达水平，结果显示：GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼.     

改性锰矿在光催化氧化分散蓝2BLN染液中的作用

以汞灯为紫外光源，在改性锰矿粉末悬浮体系中，研究染液中分散蓝2BLN染料的光催化氧化及各种影响因素。结果表明，在实验条件为MK－10用量20.0g/L，氧化剂投加量2.0g／l，染液的初始PH值为6．0，紫外光照射时间30min时，由于光催化剂MK－10的加入，去除效果及去除速率大大提高。     

乙型肝炎病毒蛋白及COX-2在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制

目的探讨乙型肝炎病毒蛋白及环氧合酶-2(COX-2)在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制.方法取42例慢性乙肝患者行穿刺活检时乙型肝炎病毒ccc DNA为阳性乙肝相关性肝细胞癌组织;另取同期手术切除的11例ccc DNA为阴性的非乙型肝炎相关性肝癌组织.免疫组化法检测乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2、CD34的表达水平,Werdner法计算微血管密度;分析上述因子与乙肝相关性肝细胞癌组织微血管生成的相关性.RT-PCR和Western blot检测人肝癌细胞系(HepG2)和稳定转染乙型肝炎病毒X蛋白(HepG2-X)细胞中COX-2mRNA和蛋白表达情况;ELISA法检测细胞上清液中PGE2表达水平和不同浓度COX-2抑制剂塞来昔布作用后PGE2水平.结果乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中COX-2阳性率明显高于乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和非乙型肝炎相关性肝癌组织(P0.01).乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中早期癌症微血管密度明显低于进展期癌症组织,乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织中微血管密度明显低于阳性表达组织(P0.01);COX-2阳性表达组织中微血管密度明显高于COX-2阴性表达组织(P0.01);非乙型肝炎相关性肝癌组织中微血管密度明显低于乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2阳性表达组织(P0.01),与乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和COX-2阴性表达组织之间差异无统计学意义(P0.05);乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙型肝炎相关性人肝细胞癌组织微血管生成呈正相关.HepG2-X细胞中COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显高于空载体对照HepG2细胞,并且细胞培养上清液中PGE2水平明显增加;与HepG2细胞相比,塞来昔布对HepG2-X细胞分泌PGE2具有更强的抑制作用.结论乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙肝相关性肝细胞癌组织中高表达,促进了癌组织微血管生成;乙型肝炎病毒X蛋白可通过COX-2/PEG2信号通路促进了肝癌的发生和发展.     

非线性方法在储层参数平面分布预测中的应用

根据神经网络、非参数回归等非线性方法的基本原理 ,对储层参数平面分布进行了预测。结果表明 ,神经网络方法能够根据井点储层参数观测数据与井旁道地震属性之间的内在联系 ,通过自学习功能 ,建立起储层参数与地震属性间较为复杂的关系 ,适应性很强。但该方法对井点储层参数及地震属性的质量要求较高 ;而非参数回归方法不必事先知道储层参数和地震属性之间的关系 ,可以避免由于模型假设与实际情况的偏差而产生的错误预测。该模型包罗广 ,适用面宽 ,能够有效地反映地震属性与储层参数间较为复杂的关系 ,在油气预测以及油藏描述中将会有广阔的应用前景。     

口腔鳞状细胞癌组织特征长链非编码RNA(lncRNA)中CCAT2的表达及作用分析

目的 分析口腔鳞癌组织特征长链非编码RNA(lncRNA)表达谱,探讨结肠癌相关转录子2(CCAT2)的表达及作用.方法 使用高通量lncRNA芯片检测5例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁正常口腔黏膜组织lncRNA表达水平,分析特征性lncRNA表达谱;应用RT-qPCR检测74例口腔鳞癌组织及癌旁组织中CCAT2表达水平,分析其与临床病理特征的关系;CCK8法检测CCAT2干预细胞增殖的能力,检测CCAT2-siRNA感染序列靶向转染人舌鳞状细胞癌cal27细胞株.结果 5例癌组织和对应的癌旁组织的差异表达谱共检出1 572个差异具有统计学意义的lncRNA,其中882个lncRNA表达上调,690个表达下调;19个lncRNA差异表达倍数≥10,其中11个表达上调,8个表达下调;CCAT2上调最明显.进一步对74例口腔鳞状细胞癌组织行RT-qPCR检测,癌组织中CCAT2的相对表达量高于正常组织,差异具有显著统计学意义(P<0.01).Ⅲ+Ⅳ期患者CCAT2相对表达量高于Ⅰ+Ⅱ期患者,肿瘤低分化组CCAT2相对表达量高于中高分化组,差异均具有统计学意义(P<0.05).cal27细胞转染CCAT2 siRNA1,siRNA2,siRNA3后,CCAT2的相对表达量均低于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).其中以siRNA2下降幅度最明显,因此,选用CCAT2-siRNA2进行细胞增殖实验.CCK8检测显示:转染48h后细胞增殖水平低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 lncRNA在口腔鳞状细胞癌组织中存在异常表达,其中CCAT2表达上调与口腔鳞状细胞癌的发生、发展有关.     

人类逆转录病毒的长末段重复序列（VRTVLTR）的表达与肺癌转移的关系

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一。肿瘤癌很容易发生转移。实验以17例肺癌（5例肺腺癌、1例腺鳞癌、7例肺鳞癌及4例小细胞末分化癌）的原发灶、癌旁正常组织及转移淋巴结为材料,采用PCR及非放射性标记的RNA斑点杂交分析LTR在基因组的存在及其表达情况。研究结果发现：LTR序列在17例肺癌病人的正常组织及肿瘤组织的基因组中普遍存在,LTR致肺癌转移与其插入基因组中无关;LTR致肺癌转移与其表达增高有关,而且其高表达与小细胞肺癌的转移无关,而与非小细胞肺癌的转移密切相关。提示LTR参与了非小细胞肺癌的转移过程。实验结果为从细胞系获得的结论提供了进一步的证据。     

4种培养基对红曲霉M1莫纳可林K产量影响及基因差异表达分析

莫纳可林K是红曲霉重要的次级代谢产物之一。研究了4种培养基质对红曲霉M1莫纳可林K产量的影响,并利用RT-qPCR的方法,对莫纳可林K相关基因簇mRNA水平的差异表达进行测定分析。结果表明,荞麦培养基中莫纳可林K的产量最高(8.49mg/L),其次为糙米(莫纳可林K产量7.12mg/L)、燕麦(莫纳可林K产量4.77mg/L)、大米(莫纳可林K产量2.11mg/L)。荞麦培养基利于红曲霉莫纳可林K产生。基因差异表达研究发现,除MKB与MKC基因外,其他基因的表达量均与莫纳可林K产量呈正相关;不同培养基通过刺激红曲霉基因表达从而影响其次级代谢产物产生。     

活性污泥过程MISO神经网络模型

用误差反向传递 ( BP)神经网络模拟了活性污泥过程 ,发现使用多输入多输出 ( MIMO)神经网络来模拟活性污泥过程变量间关系时 ,线性部分误差较小 ,非线性部分误差较大 ;但若用数个多输入单输出 ( MISO)神经网络的组合来模拟时 ,则对活性污泥过程的线性或非线性关系均能很好模拟     

偏高岭土和硅灰对三元胶凝材料的改性

为了提高水泥基材料中辅助性胶凝材料用量,对比研究偏高岭土(MK)和硅灰(SF)对高粉煤灰(FA)掺量的三元胶凝材料体系抗压强度和微观结构的影响.结果表明:适量MK和SF均能提高FA掺量的三元胶凝材料不同龄期的强度,两者对强度的提高幅度随掺量和浆体龄期的改变而稍有改变;MK和SF均能显著降低三元胶凝材料浆体中Ca(OH)2(CH)的含量、优化浆体孔结构,但两者反应形成的产物有明显不同.MK和SF的物理填充、火山灰效应可优化三元胶凝体系浆体的微观结构、改善不同相界面结合.高品质MK可代替SF用于制备高FA含量三元胶凝材料体系.     

汽车牌照自动识别技术的现状与发展

在介绍国内外汽车牌照自动识别技术的现状 ,与讨论我国汽车牌照识别的特殊性的基础上 ,分析了汽车牌照自动识别技术的发展趋势 ,认为基于计算机视觉技术、人工神经网络技术和图象处理技术的无源型汽车牌照智能识别系统具有广泛的应用前景 .